全 文 ：二脉的正常生理功能 ,全方的组合以甘苦辛为主 ,寒
温并用 ,甘则能补益 ,辛则能散 ,苦则能燥湿 ,寒则能
清利 ,温则能行通 ,共奏清热利湿 、解毒消炎 、活血化
瘀之功[ 4] 。处方中之主药黄柏 ,其中所含甾醇 、小檗
碱 、黄芩甙 、掌叶防已碱等有效成分 ,对多种病原微
生物 如大肠杆菌 、变形菌 、真菌 、淋菌以及原虫 、滴
虫等都有较强抑制作用 ,特别是对渗出性炎症疗效
可靠 ,它能促使宫颈糜烂局部的正常磷状上皮再生 ,
加快其自然修复。因此 ,妇科止带片对中医辨证为
湿热下注型等多种妇科急性炎症有较好的疗效 ,但
对虚寒型及久病体质较弱者不宜使用。
盐酸小檗碱中黄柏主要有效成分 ,多项实验通
过采用高效液相色谱法对其含量测定及采用薄层色
谱(TLC)进行质量标准测定[ 5] ,均取得满意效果 。
本研究采用高效液相色谱法测定该产品中盐酸小檗
碱的含量 ,结果显示妇科止带片样品平均含量为
2.3470 mg/片 ,考虑到生产的损耗及药材的含量不
一致 ,故按平均含量的 70%计 ,本品每片含盐酸小
檗碱不低于 2 mg 。这不仅提高了标准的质量 ,同时
对控制本品的质量起到了良好的作用。参照 2005
年版《中国药典(一部)》[ 6] ,此方法简便 、准确 ,灵敏
度高 ,回收率好 ,盐酸小檗碱峰与其它杂质峰分离良
好 ,可有效控制妇科止带片质量 。
妇科止带片制备工艺简单 ,配制方便 ,质控容
易 ,药源充足 ,价格低廉 ,不污染及损坏织物 ,适宜各
级医院制备 。
参考文献
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国社区医师 , 2003 , 18(2):13.
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正交实验法优选杠板归的提取工艺研究
　　遵义县中医院药剂科(563100)　罗　扬
　　中图分类号:R927.2　　文献标识码:B　　文章编号:1000-744X(2009)05-0468-02
　　杠板归又名贯叶蓼 、蛇牙草等 ,为蓼科植物杠板
归 Polygonum perfo liatum(L .)的干燥地上部分 。
本品为少数民族用药 ,具有清热解毒 ,利湿消肿 ,散
瘀止血的功效。目前对杠板归的研究很少。本文旨
在对杠板归的提取工艺进行初步研究 ,为杠板归药
材及其制剂的制备提供参考依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Wate r 600 高效液相色谱仪 , 600泵 ,
Water 2487紫外检测器 ,威马龙色谱工作站。电子
天平(上海精密科学仪器有限公司),ODS Dikma-
C18色谱柱(4.6 mm×150 mm ,5μm)。
1.2　材料　杠板归购自同济堂公司经鉴定为杠板
归 ,药材 60℃干燥 30 min ,粉碎 ,过 40 目筛 。槲皮
素对照品(批号:100081-200406)购自中国药品生
物制品检定所;水为超纯水;甲醇为色谱纯;其它试
剂为分析纯 。
2　方法与结果
2.1　正交试验设计　以杠板归中槲皮素的含量为
指标 ,提取次数为一次 ,考察因素为:盐酸乙醇的浓
度 ,溶剂用量 ,回流提取的时间。应用 L9(34)正交
设计表进行试验 ,因素水平安排见表 1。
表 1　L9(34)正交实验因素水平表
水平
因　　　　素
A 盐酸乙醇的浓度
(%)
B溶剂用量
(mL)
C回流时间
(h) D 空白
1 10 50 1
2 20 100 2
3 30 150 3
·468· Guizhou Medical Journal , 2009 , Vol.33 , No.5
2.2　色谱条件[ 1] 　流动相:甲醇-0.1%磷酸(55∶
45), 流速:1.0 mL/min;检测波长 360 nm , 柱温
30℃,进样量为 10μL ,理论塔板数按槲皮素峰计算
大于 6 000。在此条件下 ,槲皮素峰与相邻峰分离良
好(R>1.5)。
2.3　对照品溶液的制备 　精密称取经 120℃干燥
至恒重后槲皮素对照品 4.12 mg ,置于 10 mL 量瓶
内 ,加甲醇适量 ,超声溶解 ,冷却至室温后 ,甲醇定容
至刻度 , 摇匀 , 即得槲皮素对照品储备液(0.412
mg/mL)。精密吸取储备液 2 mL ,置 10 mL 容量瓶
中 ,加入甲醇至刻度 , 摇匀 , 得槲皮素对照品溶液
(82.4μg/mL)。
2.4　供试品溶液的制备　精密称取杠板归药材粗
粉 1.0 g ,置平底烧瓶中 ,按 L 9(34)正交试验表所列
进行水浴回流提取 、抽滤。各实验组提取液浓缩适
量后分别转移至 50 mL 容量瓶中 ,加甲醇定容 ,作
为供试品溶液。
2.5　线性范围关系考察　精密吸取储备液 0.2 、
0.4 、0.6 、0.8 、1.0 mL分别置于 2 mL 量瓶中 ,加甲
醇至刻度 ,混匀 ,按上述色谱条件分别进样 ,测定峰
面积 。以槲皮素对照品溶液浓度为横坐标 Y ,峰面
积积分值为坐标 X ,绘制标准曲线 ,计算回归方程
为:Y=34484X-35765 , r=0.9999(n=5)。表明槲
皮素在 41.2 ～ 198 μg/mL 的浓度范围内呈良好的
线性(见图 1 、图 2)。
图 1　槲皮素标准品色谱图
图 2　杠板归供试品色谱图
2.6　正交实验结果　吸取供试品溶液 10 μL ,注入
高效液相色谱仪 ,计算含量。结果见表 2。
表 2　L9(34)正交实验方案及结果
编号 因　　　　素
A B C D 槲皮素(mg/ g)
1 1 1 1 1 2.465
2 1 2 2 2 3.654
3 1 3 3 3 3.789
4 2 1 2 3 4.713
5 2 2 3 1 4.724
6 2 3 1 2 3.984
7 3 1 3 2 3.654
8 3 2 1 3 3.002
9 3 3 2 1 3.544
K1 9.908 10.832 9.451 10.733
K2 13.421 11.380 11.911 11.292
K3 10.200 11.317 12.167 11.504
R 3 , 513 0.548 2.716 0.771
　　根据表 3中极差 R ,直观分析可以看出影响槲
皮素含量的因素主次顺序为 A>C>B;根据 K 值可
以看出 ,最佳工艺为 A 2B2C3D1 ;从正交表中的数据
可以看出 ,4号与 5号实验数据相差不大 。
2.7　方差分析　结果见表 3。
表 3　正交试验方差分析表
因素 SS f F F0.05 显著性
A 2.533 2 23.896 19.00 ＊＊
B 0.060 2 0.566 19.00
C 1.499 2 14 , 142 19.00
D(误差) 0.106 2 1.00 19.00
　　F0.05(2.2)=19.0 F0.01(2.2)=99.0
　　根据方差分析 ,A 因素即盐酸乙醇的浓度对含
量有显著性影响 。根据直观分析 ,方差分析的结果
确定最优方案为 A 2B2C3D1 。
2.8　验证试验　根据最佳工艺条件重复三次实验 ,
同时以 A 2B1C2D1 的条件重复两次实验 ,以验证该
工艺的合理性和稳定性 ,结果两种方案的结果无显
著性差异 , RSD 值为 1.21%,测得槲皮素的平均含
量为 4.692 mg/g ,因此选择 50倍 20%的盐酸乙醇
溶液 ,回流提取一次 2 h作为最佳工艺 。
3　结　论
杠板归药材因特有的疗效被广泛应用于临床 ,
但是关于其提取方法的报道较少。本实验采用 L9
(34)正交试验表 ,以盐酸乙醇的浓度 、溶剂用量 、回
流提取的时间为考察因素 ,为杠板归药材及其制剂
的制备提供了一定的参考依据。
本实验对提取次数进行了单因素分析 ,发现提
取三次已经将槲皮素提取完全 ,第二次的提取率为
总提取率的 5%,第三次为 0.2%,因此选择确定提
取次数为一次。
参考文献
[ 1] 　仲英 ,孙立立.高效液相色谱法测定侧柏叶中槲皮素
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·469·贵州医药 2009 年 5 月第 33卷第 5期