全 文 ：华西药学杂志WCJ· PS　2008, 23(6)：704 ～ 705 　　
作者简介:卢敬光 ,男 ,正攻读生药学专业的硕士学位。
＊通讯作者(Correspondentauthor)
HPLC测定藏边大黄中的藏黄苷 A
卢敬光 1 ,王　曙 1＊ ,严晓梁2 ,马　静 1 ,何　俊1 ,刘傲镭 1 ,吴启秀1
(1.四川大学华西药学院 , 四川 成都 610041;2.四川省人民医院 ,四川 成都 610072)
摘要:目的　测定不同来源藏边大黄中的藏黄苷 A。方法　采用 HPLC法 ,色谱柱为 KromasilC18 、Shim-packC18(250 mm×
4.6mm, 5 μm), 检测波长为 320 nm, 流动相为乙腈 -水(15：85), 流速为 1.0 ml·min-1 , 柱温为 30℃。结果　 藏黄苷
A0.17 ～ 17.00 μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999, n=6),平均加样回收率为 100.30%, RSD=1.0%(n=6);5份藏
边大黄中藏黄苷 A的含量均大于 7.5%。结论　所建方法简单 、稳定 , 藏黄苷 A的含量可作为藏边大黄的品质评价依据。
关键词:HPLC;藏边大黄;藏黄苷 A;茋类化合物
中图分类号:R917　 文献标识码:A　 　文章编号:1006-0103(2008)06-0704-02
Contentdeterminationofpiceatannol-4′-O-β -D-glucopyranosideinRheumemodii
LUJing-guang1 , WANGShu1＊ , YANXiao-liang2 , MAJing1 , HEJun1 , LIUAo-lei1 , WUQi-xiu1
(1.WestChinaSchoolofPharmacy, SichuanUniversity, Chengdu610041 , China;2.ThePeople sHospitalofSichuanProvince,
Chengdu610072, China)
Abstract:OBJECTIVE　Todetectpiceatannol-4′-O-β -D-glucopyranoside(PGP)inR.emodifromdiferentorigins.METH-
ODS　AnHPLCmethodwasused.ThecolumnwasKromasilC18 orShim-packC18(250 mm×4.6mm, 5μm).TheUVdetectionwave-
lengthwas320 nm.Themobilephaseconsistedofacetonitrile-water(15：85)andtheflowratewas1.0ml·min-1 withcolumntempera-
tureof30℃.RESULTS　ThecalibrationcurveofPGPwaslinearovertherangesof0.17-17 μg(r=0.9999, n=6).Theaverage
recoveryratewas100.30% withRSDof1.0%(n=6).PGPinR.emodiwasmorethan7.5% fromfivediferentorigins.CONCLU-
SION　Thismethodissimpleandstable.ThecontentofPGPcanoferscientificassuranceforqualityvaluationforR.emodi.
Keywords:HPLC;RheumemodiWall.;Piceatannol-4′-O-β -D-glucopyranoside;Stilbenoids
CLCnumber:R917　　　 Documentcode:A　 　ArticleID:1006-0103(2008)06-0704-02
　　藏边大黄系蓼科大黄属波叶组植物 Rheum
emodiWal.的根与根茎 ,味酸 、苦 ,性寒;主要分布在
西藏 、青海 、四川及云南等省 ,多为野生 ,西藏部分地
区有种植。其根及根茎的藏名叫曲扎 ,藏医 、蒙医用
于治疗胃肠炎 、肾炎 ,外用止血 、治疮 、消炎 、愈伤口
等;大黄供应紧张时 ,也曾调往各省区作大黄使用 。
文献[ 1]在对藏边大黄根茎 R.emodi的化学成分研
究中 ,分出了 trans-3, 5, 3, 4-四羟基茋(piceatan-
nol)、piceatannol-4-O-β -D-吡喃葡萄糖苷
(暂命名为藏黄苷 A)和 piceatannol-4-O-β -
D-(6″-O-没食子酰)-吡喃葡萄糖苷二苯乙烯
类等茋类化合物 。藏黄苷 A是藏边大黄中的主要
成分 , piceatannol是 3个化合物中的二苯乙烯母核 。
茋类化合物具有广泛的生物活性 ,除抗菌外 ,还具有
降血脂 、降血糖 、保肝 、扩张毛细血管 、改善微循环 、
扩张冠状血管及降压等作用[ 2 ～ 5] 。因此 ,推测此类
化合物可能是藏边大黄的有效主成分 。现采用
HPLC法测定 5份不同来源藏边大黄中的主成分藏
黄苷 A。
1　实验部分
1.1　仪器及试药
LC-10ATHPLC仪系统(日本岛津);SS420X
色谱工作站(美国奥泰);KromasilC18柱(250 mm×
4.6 mm, 5μm);WelchromC18柱(250mm×4.6mm, 5
μm)。藏黄苷 A对照品 (自制)经熔点 、1HNMR、
13CNMR确证 , HPLC峰面积归一化法测定其含量达
98%以上[ 1] ;藏边大黄样品Ⅰ、Ⅱ为 2006年 7月采自西
藏拉萨拉曲新城藏药种植基地(海拔 3.6 km);样品
Ⅲ、Ⅳ(西藏药检所);样品Ⅴ于 2007年 6月采自西藏
拉萨拉曲新城;样品均鉴定为 RheumemodiWal.;乙
腈为色谱纯;水为蒸馏水;其他试剂为分析纯。
1.2　方法和结果
1.2.1　色谱条件 [ 6, 7] 　色谱柱为 KromasilC18(250
mm×4.6mm, 5 μm)和 WelchromC18(250mm×4.6
mm, 5 μm),检测波长为 320 nm,流动相为乙腈 -水
(15：85),流速为 1.0ml·min-1 ,柱温为 30℃,进样
体积 10μl。
1.2.2　溶液的制备　取 10mg藏黄苷 A对照品 ,精
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2008.06.024
密称定 ,置 25 ml量瓶中 ,用甲醇定容 ,即得对照品
溶液。取 0.15 g药材粉末(50℃烘 4 h,过 4号筛),
精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入 25 ml甲醇 ,
称定重量 ,超声处理(150 W, 40 kHz)40 min,放冷 ,
再称定重量 ,用甲醇补足减失的重量 ,摇匀 ,过滤 ,即
得供试品溶液。
1.2.3　线性关系的考察　精密称取 42.76 mg藏黄
苷 A对照品 ,置 25 ml量瓶中 ,用甲醇溶解并定容 ,
得 1.7104 mg·ml-1对照品贮备液;分别精密吸取
0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 ml此贮备液置 50 ml量瓶
中 , 甲醇定容得 17.104、 34.21、 68.42、 171.04、
342.08 μg·ml-1的系列对照液。按 “ 1.2.1”项条件
测定上述 5个浓度的对照液 。以绝对进样量对峰面
积进行线性回归 , 得回归方程为:A=2.059 ×
10
7 W-1.639×105 (r=0.9999 , n=5), 藏黄苷 A
0.17 ～ 17.00 μg与峰面积呈良好的线性关系 。
1.2.4　精密度试验　精密吸取 10 μl“1.2.3”项的
342.08μg·ml-1对照品溶液 ,重复进样 6次。测得藏
黄苷 A峰面积的 RSD﹤ 2%,表明系统精密度良好。
1.2.5　稳定性试验　按 “1.2.2”项的方法制备供
试品溶液 1份 ,再按 “1.2.1”项条件分别于制备后
0、2、 4、 6、 12 h进样 , 计算。其峰面积的 RSD=
1.2%,表明供试品溶液 12h内稳定 。
1.2.6　重复性试验　取同批样品 ,按 “ 1.2.2”项制
备供试品溶液 6份 ,平行测定两次。分别计算每份
样品的平均含量 ,得 6份样品含量的 RSD=1.6%,
表明方法的重复性良好。
1.2.7　色谱的耐用性试验　取同一供试品溶液 ,在
“ 1.2.1”项的两种不同型号色谱柱条件下 ,平行测
定含量 。其含量的 RSD=1.1%,说明此方法的色谱
耐用性良好 。
1.2.8　加样回收试验　取 75 mg已知藏黄苷 A含
量的藏边大黄药材粉末(75.04 mg·g-1), 共 6份 ,
精密称定 , 按高 、中 、低水平分别加入 6.68、6.74、
5.65、 5.58、 4.56、 4.49 mg藏黄苷 A对照品 , 按
“ 1.2.2”项制备供试品溶液。取各供试品溶液 ,按
“ 1.2.1”项条件测定藏黄苷 A,平均加样回收率为
100.30%, RSD=1.0%,表明方法回收率良好。
1.2.9　样品的测定　精密称取 “ 1.1”项不同来源的
5批药材 ,按 “1.2.2”项的方法制备供试品溶液 ,再按
“1.2.1”的项色谱条件测定其含量 ,结果见表 1、图 1。
表 1　采自不同时间的藏边大黄药材中藏黄苷 A的含量(n=3)
Table1　ContentsofthecolectedsamplesinLaqufromdiferent
timesperiods(n=3)
No. Time Piceatannol-4′-O-β -D-glu/% RSD/%
Ⅰ 2006-07 11.68 1.2
Ⅱ 2006-07 12.03 1.0
Ⅲ 2005-06 7.23 1.6
Ⅳ 2007-04 8.36 0.8
Ⅴ 2007-06 7.50 1.4
图 1　样品Ⅰ ～ Ⅴ溶液的色谱图
Fig1　HPLCchromatogramsofthesamplessolutionⅠ -Ⅴ
表 1中样品的 Ⅰ 、Ⅱ采自种植基地 ,样品 Ⅱ、Ⅳ为野
生药材。
2　讨论
取对照品适量 ,用流动相稀释 ,于 200 ～ 400 nm
进行紫外扫描 ,藏黄苷 A在 320 nm处有最大吸收 ,
故含量测定波长定为 320 nm。同一批样品分别超
声 30、40、50、60 min,发现超声 30 min时的含量偏
低 ,而后 3份样品测定的含量大致相当 ,故采取超声
40min。比较了柱温为 30℃时不同比例的乙腈 -水
(10：90、15：85、20：80、25：75)流动相系统 , 15：
85时 ,藏黄苷 A主峰保留时间适宜 ,且与杂质峰完
全分离 ,色谱峰形对称而尖锐。由表 1可见 , 5份不
同时间采集的藏边大黄药材中藏黄苷 A的含量均
大于 7.5%,含量较高。栽培种植的藏边大黄样品
中 ,藏黄苷 A的含量均高于野生采集的样品 ,因此 ,
通过栽培可为藏边大黄的资源提供保障 。
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收稿日期:2007-12
705第 6期 卢敬光 ,等。 HPLC测定藏边大黄中的藏黄苷 A