全 文 : 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2017, 52 (2): 279−282 · 279 ·
大托叶云实中一个新的卡山烷二萜
涂文超 1, 2, 丁林芬 1, 杨 惠 1, 2, 宋流东 1*, 吴兴德 2*
(1. 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室, 云南 昆明 650500;
2. 中国科学院昆明植物研究所, 植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室, 云南 昆明 650201)
摘要: 采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI 和半制备 HPLC 等色谱技术, 对豆科云实属植物大托叶云实种子
的 95% 乙醇提取物进行分离纯化。从中分离得到了 5 个卡山烷型二萜化合物, 根据理化性质和波谱数据鉴定
为 3β-乙酰氧基-卡山烷-12,14(17),15-三烯-7β-醇 (1)、caesalmin C (2)、caesall E (3)、caesalpinin MJ (4) 和
1-deacetylcaesalmin C (5), 其中化合物 1为新化合物, 2、4、5首次从该植物中分离得到。
关键词: 豆科; 大托叶云实; 卡山烷二萜; 3β-乙酰氧基-卡山烷-12,14(17),15-三烯-7β-醇
中图分类号: R284 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (2017) 02-0279-04
A new cassane diterpene from Caesalpinia bonduc
TU Wen-chao1, 2, DING Lin-fen1, YANG Hui1, 2, SONG Liu-dong1*, WU Xing-de2*
(1. School of Pharmaceutical Science and Yunnan Key Laboratory of Pharmacology for Natural Products, Kunming Medical
University, Kunming 650500, China; 2. State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources in West China,
Kunming Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650201, China)
Abstract: Five cassane diterpenes were isolated from the 95% ethanol extract of the seeds of Caesalpinia
bonduc (Leguminosea) by a combination of various chromatographic methods, including silica gel, Sephadex
LH-20, and semi-preparative HPLC. On the basis of spectroscopic techniques, their structures were identified
as 3β-acetoxy-cassa-12,14(17),15-trien-7β-ol (1), caesalmin C (2), caesall E (3), caesalpinin MJ (4), and
1-deacetylcaesalmin C (5). Among them, compound 1 is a new compound and 2, 4, 5 were isolated from the
plant for the first time.
Key words: Leguminosea; Caesalpinia bonduc; cassane-type diterpene; 3β-acetoxy-cassa-12,14(17),15-
trien-7β-ol
大托叶云实 (Caesa lp in ia bonuc ) 是豆科
(Leguminosea) 云实属 (Caesalpinia) 植物, 又名刺
果苏木, 有刺藤本, 刺直或者弯曲, 各部位均有黄色
柔毛。在世界热带地区均有分布, 我国主要产于云
南、广东、广西、台湾等地[1]。《中华本草》中记载
其种子具有活血止痛、解毒消肿等功效, 主要用于治
收稿日期: 2016-11-22; 修回日期: 2016-12-20.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (21662023, 21402212); 云南
省教育厅基金研究生项目 (2015J049).
*通讯作者 Tel: 86-871-65922778, E-mail: ynsld@126.com;
Tel: 86-871-65223013, E-mail: wuxingde@mail.kib.ac.cn
DOI: 10.16438/j.0513-4870.2016-1121
疗胃脘痛、腹痛、目赤肿痛、疮疡; 叶具有清热解毒、
去淤止痛、驱虫、通便等功效, 用于治疗间歇性发
热、急慢性胃炎、胃溃疡、痢疾、消化不良、肠道虫
积、便秘、疖肿等[2]。目前, 已从大托叶云实中发现
二萜[3−5]、黄酮[6]和甾体[7]类化合物。卡山烷二萜类成
分 caesalpinolide A和 caesalpinolide B具有抑制乳腺
癌、宫内膜癌和宫颈癌细胞增殖作用[5]; 黄酮类化合
物 4,4-dihydroxy-2-methoxy-chalcone 具有抗疟原虫
活性[8]。为进一步寻找活性成分, 作者对购自河北安
国药材的大托叶云实种子进行研究, 从中分离得到
5 个化合物并鉴定为 3β-乙酰氧基-卡山烷-12,14(17),
· 280 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2017, 52 (2): 279−282
15-三烯-7β-醇 (1)、caesalmin C (2)[9]、caesall E (3)[10]、
caesalpinin MJ (4)[11]和 1-deacetylcaesalmin C (5)[11],
其中化合物 1为新化合物, 结构见图 1。
Figure 1 Structures of compounds 1−5
化合物 1 无色油状物 (氯仿) HR-ESI-MS m/z:
367.224 3 [M+Na]+ (计算值: 367.224 4), 确定分子式
为 C22H32O3, 不饱和度为 7。红外光谱显示其结构中存
在羟基 (3 427 cm−1)、羰基 (1 730 cm−1)、双键 (1 631
cm−1) 等特征信号峰。1H NMR谱 (表 1) 显示 1个乙
酰基上甲基信号 δH 2.05 (s), 3个与季碳相连的甲基信
号 δH 0.95 (s)、0.93 (s)、0.90 (s), 2个连氧次甲基信号
δH 4.49 (dd, J = 11.8, 4.1 Hz)、3.91 (m), 1个三取代双
键质子信号 δH 5.86 (br s), 2个环外末端双键质子信
号 δH 5.30 (br s)、5.19 (br s), 3个末端双键质子信号 δH
6.33 (dd, J = 17.3, 10.8 Hz)、5.36 (dd, J = 17.3, 1.2 Hz)、
5.06 (dd, J = 10.8, 1.2 Hz)。13C NMR谱 (表 1) 显示
22 个碳信号,包括 4 个甲基、6 个亚甲基 (包括 2 个
不饱和亚甲基)、7个次甲基 (包括 2个不饱和及 2个
氧取代次甲基) 及 5个季碳 (包括 1个乙酰基上的羰
基和 1 个不饱和季碳)。据以上波谱数据及云实属植
物中特征卡山烷二萜类成分[11−13], 推测该化合物为
一个羟基和一个乙酰氧基取代的卡山烷二萜结构 ,
并存在一个三取代双键、一个环外双键及一个末端
双键。
通过 HMBC 谱中 H-11a、H-11b 与 C-12、C-13
(图 2) 的相关, 以及 1H-1H COSY谱中 H-9/H2-11/H-12
相关, 表明三取代双键位于 C-12 和 C-13; H-17a 和
H-17b与 C-8、C-14、C-13的 HMBC相关, 说明环外
双键位于 C-14和 C-17; H-15与 C-12、C-13、C-14 (图
2) 的 HMBC相关, 提示末端双键与 C-13位相连。此
Table 1 1H (600 MHz) and 13C (150 MHz) NMR data in CDCl3
for compound 1
Position δH (multi, J in Hz) δC
1
1.67, overlap
1.10, td (14.5, 4.6)
36.9
2
1.68, overlap
1.59, m
23.7
3 4.49, dd (11.8, 4.1) 80.7
4 37.6
5 1.02, dd (12.7, 1.2) 50.7
6
1.99, ddd (12.7, 4.0, 1.2)
1.52, m
30.0
7 3.91, m 71.6
8 2.05, overlap 45.8
9 1.24, m 50.0
10 36.7
11
2.17, m
2.11, m
25.9
12 5.86, br s 126.9
13 137.4
14 145.6
15 6.33, dd (17.3, 10.8) 136.5
16
5.36, dd (17.3, 1.2)
5.06, dd (10.8, 1.2)
114.9
17
5.30, br s
5.19, br s
109.6
18 0.95, s 28.4
19 0.90, s 17.0
20 0.93, s 14.6
3-OAc
2.05, s
21.4
171.1
Figure 2 Key 1H-1H COSY ( ), HMBC ( ), and ROESY
( ) correlations of compound 1
外, HMBC谱中 H2-2、H3-19与 C-3, H-3与乙酰基上
的酯羰基, H-8、H2-6、H-5与 C-7, 以及 1H-1H COSY
谱中 H2-1/H2-2/H-3, H-5/H2-6/H-7/H-8/H-9 相关 (图
2), 表明乙酰氧基和羟基分别连在 C-3和 C-7位。
化合物 1的相对构型通过ROESY谱确定 (图2)。
ROESY谱中, H-5与 H-7、H-7与 H-9、H-5与 H3-18、
H-8与 H3-20、H3-19与 H3-20存在相关, 以及 H-5与
H3-20 不存在相关, 表明 7 位羟基为 β 朝向。H-3 的
耦合常数为 11.8和 4.1 Hz, 提示 3位乙酰氧基同样为
β朝向, 该推论进一步通过 H-3与 H-5、H-3与 H3-18
的 ROESY相关得到确认。据上述分析, 化合物 1鉴
定为新的卡山烷二萜, 命名为 3β-乙酰氧基-卡山烷-
12, 14(17),15-三烯-7β-醇。
涂文超等: 大托叶云实中一个新的卡山烷二萜 · 281 ·
实验部分
核磁共振仪 (Brucker, AV 600 MHz, Avance III
500 MHz, 德国) (TMS为内标); 液质联用仪 (Agilent
1290 UPLC/6540 Q-TOF, 美国); 红外光谱仪 (Brucker,
Tensor-27, 德国); 紫外可见分光光度仪 (Shimadzu,
Shimadzu UV2401PC, 日本 ); 全自动数字旋光仪
(Jasco, Jasco P-1020, 日本); 分析和半制备型 HPLC
(Agilent, Agilent 1260, 美国); 半制备色谱柱 Zorbax
SB-C18 (Agilent, 4.6 mm × 250 mm, 美国); MPLC (上
海利穗有限公司); 柱色谱 100~200目、200~300目
硅胶 (临沂市海祥化工厂); 薄层色谱硅胶板 GF-254
(临沂市海祥化工厂); Sephadex LH-20 (Pharmacia公
司 , 瑞典); MCI-gel CHP-20P (Mitsubishi Chemical
Corporation, 75~150 μm, 日本); 80~100目聚酰胺粉
(国药集团化学试剂有限公司); 色谱甲醇 (北京百灵
威科技有限公司); 分析纯甲醇 (天津市风船化学试
剂科技有限公司); 石油醚 (沸程 60~90 ℃)、氯仿、
乙酸乙酯、甲醇、95% 乙醇等均为工业纯有机试剂
(重蒸使用); 显色剂 (10% H2SO4 乙醇溶液, 喷洒后
适当加热)。
实验药材大托叶云实 2016 年 3 月购买于河北
安国药材市场 , 并由中国科学院昆明植物研究所
成晓副研究员鉴定为豆科 (Leguminosae) 云实属
(Caesalpinia) 植物大托叶云实 (Caesalpinia bonduc)
的种子, 标本 (20160303a) 保存于中国科学院昆明
植物所标本馆。
1 提取分离
大托叶云实种子 10 kg粉碎后, 用 95% 乙醇冷浸
提取 3 次, 每次两天, 合并提取液, 减压蒸馏浓缩回
收有机溶剂后, 提取物分散到水中用乙酸乙酯萃取 3
次, 得乙酸乙酯萃取物 165.0 g。该萃取物 (150.0 g)
经MPLC分离 (MCI), 利用甲醇−水 (70∶30、75∶25、
80∶20、85∶15、90∶10、95∶5) 梯度洗脱, 根据 TLC
检测合并为 5个部分 Fr1~Fr5。Fr4 (33.0 g) 经正相
硅胶柱色谱 (石油醚−乙酸乙酯 100∶1→2∶1) 梯度
洗脱, 分为 8个部分 Fr4.1~Fr4.8。Fr4.1 (4.3 g) 利用
丙酮重结晶得化合物 2 (2.0 g)。Fr4.2 (202.0 mg)经正
相硅胶柱色谱 (氯仿−丙酮 100∶1→9∶1), 得化合物
3 (30.0 mg)。Fr4.3 (82.0 mg) 用半制备 HPLC分离
(甲醇−水, 75∶25, 3 mL·min−1, tR = 8.1 min), 得到化
合物 4 (12.0 mg)。Fr4.4 (93.0 mg) 用半制备 HPLC分
离 (甲醇−水, 75∶25, 3 mL·min−1, tR = 10.4 min), 得
到化合物 1 (3.0 mg)。Fr3 (12.4 g) 经正相硅胶柱色谱
(石油醚−乙酸乙酯, 9∶1→1∶1) 梯度洗脱, 分为 4个
组分 Fr3.1~Fr3.4, Fr3.1 (104.0 mg) 经 Sephadex
LH-20 (氯仿−甲醇, 1∶1) 柱色谱后, 利用甲醇重结
晶得化合物 5 (50.0 mg)。
2 结构鉴定
化合物1 无色油状物 (氯仿), [α] 20D +24.2 (c 0.20,
MeOH); UV末端吸收峰 λmax (log ε): 204.6 (3.51)。IR:
3 427, 2 930, 2 856, 1 730, 1 631, 1 614, 1 461, 1 383,
1 251, 1 029 cm−1。
化合物 2 无色方晶 (丙酮), ESI-MS m/z 497
[M+Na]+, C26H34O8。1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δH:
7.23 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-16), 6.40 (1H, d, J = 1.9 Hz,
H-15), 5.58 (1H, br s, H-6, H-7), 5.09 (1H, br s, H-17b),
4.94 (1H, br s, H-17a), 4.89 (1H, br s, H-1), 2.10 (3H,
s, 7-OCOCH3), 2.07 (3H, s, 1-OCOCH3), 1.97 (3H, s,
6-OCOCH3), 1.30 (3H, s, H-20), 1.17 (3H, s, H-19),
1.16 (3H, s, H-18); 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δC:
75.0 (d, C-1), 22.0 (t, C-2), 32.3 (t, C-3), 38.5 (s, C-4),
79.3 (s, C-5), 75.2 (d, C-6), 75.6 (d, C-7), 41.6 (d, C-8),
38.0 (d, C-9), 44.5 (s, C-10), 23.2 (t, C-11), 150.5 (s,
C-12), 119.8 (s, C-13), 138.5 (s, C-14), 106.5 (d, C-15),
142.0 (d, C-16), 105.6 (q, C-17), 30.7 (q, C-18), 25.1
(q, C-19), 17.1 (q, C-20), 21.4/169.1 (1-OCOCH3), 21.3/
170.8 (6-OCOCH3), 21.7/170.8 (7-OCOCH3)。以上数
据与文献[9]报道数据基本一致, 故鉴定化合物 2 为
caesalmin C。
化合物 3 白色粉末 (氯仿), ESI-MS m/z 555
[M+Na]+, C28H36O10。1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δH:
7.22 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-16), 6.40 (1H, d, J = 2.0 Hz,
H-15), 5.64 (1H, br s, H-7), 5.54 (1H, br s, H-6), 5.09
(1H, br s, H-17b), 5.03 (1H, dd, J = 12.5, 4.3 Hz, H-3),
4.94 (1H, br s, H-17a), 4.92 (1H, s, H-1), 2.10 (3H, s,
7-OCOCH3), 2.09 (3H, s, 6-OCOCH3), 2.03 (3H, s,
3-OCOCH3), 1.96 (3H, s, 1-OCOCH3), 1.15 (3H, s,
H-18), 1.14 (3H, s, H-19), 1.33 (3H, s, H-20); 13C NMR
(CDCl3, 125 MHz) δC: 75.0 (d, C-1), 27.4 (t, C-2), 72.0
(d, C-3), 43.2 (s, C-4), 80.7 (s, C-5), 75.5 (d, C-6), 75.2
(d, C-7), 41.5 (d, C-8), 37.9 (d, C-9), 44.5 (s, C-10),
23.1 (t, C-11), 150.2 (s, C-12), 119.8 (s, C-13), 138.2 (s,
C-14), 106.5 (d, C-15), 142.1 (d, C-16), 105.7 (q, C-17),
24.7 (q, C-18), 19.5 (q, C-19), 17.2 (q, C-20), 21.3/
170.5 (1-OCOCH3), 21.1/169.3 (3-OCOCH3), 21.7/170.6
(6-OCOCH3), 21.2/170.8 (7-OCOCH3)。以上数据与文
献[10]报道数据基本一致, 故鉴定化合物 3为 caesall E。
化合物 4 白色粉末 (氯仿), ESI-MS m/z 439
[M+Na]+, C24H32O6。1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δH:
7.22 (1H, d, J = 1.9 Hz, H-16), 6.42 (1H, d, J = 2.0 Hz,
· 282 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2017, 52 (2): 279−282
H-15), 5.52 (1H, td, J = 10.0, 3.7 Hz, H-7), 5.10 (1H,
J = 1.9 Hz, H-17a), 4.93 (1H, br s, H-1), 4.76 (1H, J =
2.0 Hz, H-17b), 2.06 (3H, s, 1-OCOCH3), 2.05 (3H, s,
7-OCOCH3), 1.22 (3H, s, H-20), 1.11 (3H, s, H-19),
1.06 (3H, s, H-18); 13C NMR (CDCl3, 125 MHz) δC:
75.5(d, C-1), 22.4 (t, C-2), 29.9 (t, C-3), 38.3 (s, C-4),
77.7 (s, C-5), 31.3 (t, C-6), 71.9 (d, C-7), 41.0 (d, C-8),
38.5 (d, C-9), 43.0 (s, C-10), 22.9 (t, C-11), 150.7 (s,
C-12), 119.6 (s, C-13), 139.4 (s, C-14), 106.5 (d, C-15),
141.7 (d, C-16), 105.6 (q, C-17), 28.2 (q, C-18), 25.4 (q,
C-19), 17.7 (q, C-20), 21.4/169.1 (1-OCOCH3), 21.5/
170.4 (7-OCOCH3)。以上数据与文献[11]报道数据基本
一致, 故鉴定化合物 4为 caesalpinin MJ。
化合物 5 无色针晶 (甲醇), ESI-MS m/z 455
[M+Na]+, C24H32O7。1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δH:
7.36 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-16), 6.53 (1H, d, J = 2.0 Hz,
H-15), 5.50 (1H, m, H-7), 5.49 (1H, m, H-6), 5.09
(1H, d, J = 2.0 Hz, H-17b), 4.89 (1H, br s, H-17a), 3.87
(1H, br s, H-1), 2.07 (3H, s, 7-OCOCH3), 1.89 (3H, s,
6-OCOCH3), 1.21 (3H, s, H-20), 1.12 (3H, s, H-19),
1.11 (3H, s, H-18); 13C NMR (CD3OD, 125 MHz) δC:
72.8 (d, C-1), 25.8 (t, C-2), 32.8 (t, C-3), 39.2 (s, C-4),
80.4 (s, C-5), 76.0 (d, C-6), 76.1 (d, C-7), 42.5 (d, C-8),
39.1 (d, C-9), 44.9 (s, C-10), 23.8 (t, C-11), 152.5 (s,
C-12), 120.4 (s, C-13), 140.7 (s, C-14), 107.5 (d, C-15),
142.7 (d, C-16), 105.1 (q, C-17), 31.3 (q, C-18), 25.3
(q, C-19), 17.1 (q, C-20), 21.4/170.9 (6-OCOCH3), 21.8/
170.9 (7-OCOCH3)。以上数据与文献[11]报道数据基本
一致, 故鉴定化合物 5为 1-deacetylcaesalmin C。
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