全 文 ：· 43·(总 )广西中医药 2001年 6月第 24卷第 3期
粪箕笃利尿 、镇静及镇痛作用研究
林启云 谢金鲜 广西中医学院 530001 南宁市明秀东路 21号
摘 要 目的:观察粪箕笃乙醇 、氨水 、水煎剂等不同提取物对动物尿量 、镇痛 、自主活动和抑菌作用的影
响 。方法:以不同提取物给动物 ig后 ,观察动物尿量 ,在 10min的自主活动次数 ,对化学致痛的镇痛率 。结果:非
生物碱(水煎剂)部分对动物尿量明显增加有利尿作用 , 并有明显的抑制细菌生长作用 ,其生物碱(氨水提取部
分)无利尿作用 ,亦无明显的抑菌作用 ,但有较好的镇静作用和镇痛作用。其醇提物有利尿作用 ,而无明显的镇
静和镇痛作用 。结论:粪箕笃有利尿 、抗菌作用 。
关键词 粪箕笃;利尿;镇静;镇痛;药理
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1003-0719(2001)03-043-03
·实验研究·
粪 箕 笃 (Stephania longa
Lour.)为防己科植物 , 主产广东 、
广西(特别是桂西北大量出产)等
地 , 粪箕笃味辛 , 性平 , 具有清热
解毒 、 利湿通便 、 消疮肿等功效
[ 1] ,民间常用其煎剂作利尿消肿 。
对其化学成分及含量已有报道
[ 2 、3] , 尚未见对其利尿及其它药理
作用的报道 。为了证实其利尿作
用及其它药理作用 , 我们以粪箕
笃的茎叶用多种提取方法提取的
提取物进行动物试验 , 观察其利
尿以及体外抗菌 、镇静 、镇痛等作
用 。现将结果报道如下 。
1 实验材料
1.1 药物制备
粪箕笃醇提取物提取:取一定
量的粪箕笃茎叶 (采自南宁市郊 ,
经药用植物专业刘寿养副教授鉴
定), 用 95%乙醇按 1∶10的比例
浸泡 1h后 , 加热回流 2次 , 过滤后
合并 2次滤液 , 回收乙醇浓缩 。浓
缩液加蒸馏水至 100%(1ml相当于
1g生药),备用。
生物碱提取:取一定量的粪箕
笃生药用 5%稀氨水润透后 , 用一
定量氯仿浸泡 48h , 其间振摇数次 ,
过滤后用 5%盐酸溶液分 3次萃
取 ,分离酸溶液 ,过滤 ,浓缩。浓缩
液加蒸馏水至 100% (1ml相当于
1g生药),备用。
非生物碱提取:提取生物碱后
的药渣加蒸馏水过药面 , 煎煮 2
次 ,过滤去渣 ,滤液浓缩 ,最后加蒸
馏水使成 100%(1ml相当于 1g生
药),备用。
1.2 药品及试剂 速尿 (广东石
歧制药厂 , 批号 961202), 氨仿
(A.R , 广东台山化工厂 , 批号
970801),氯化钠(A.R ,广东台山化
工厂 , 批号 910820), 冰醋酸
(A.R , 南宁第二化工厂 , 批号
960508), 罗通定(广西壮族自治区
南宁制药集团 ,批号 8909101)。
1.3 仪器 XZC 型小动物自主
活动测定仪(黑龙江省牡丹江市中
华仪器厂)。
1.4 动物 普通级健康Wistar大
白鼠(桂医动示 1105),昆明种小白
鼠(桂医动示 1104),体重与性别均
按实验要求 , 由广西中医学院动物
室供应 。
2 实验方法及结果
2.1 粪箕笃各提取液对大白鼠的
利尿实验 (代谢笼法)[5] 取健康
Wistar大白鼠 , 体重 200～ 300g , 雌
雄兼用 , 按体重随机分组 , 分组及
剂量见表 1。
动物禁食不禁水 18h后水负
荷 2次 (生理盐水), 容量为 2ml/
100g , 每次间隔 1h , 给完水负荷后
1h灌胃(i.g)给药 , 生理盐水组给
予蒸馏水。各组动物灌胃 , 容量均
为 2ml/100g.观察 2h内尿量 ,每隔
30min记录 1次 。比较各组各时间
段尿量 。以用药组各时间段的尿量
均值与对照组比较作组间 t检验 ,
结果见表 1。
167
组 别 剂量 给药后各时间段尿量(ml/只)(g生药/kg) 30 60 90 120
醇提液 10 0.15±0.32 1.18±1.11 0.33±0.52 0.47±0.57
5 0.72±0.98 0.92±0.61 0.92±0.61 0.05±0.12
非生物碱 10 2.28±1.32
② 1.12±0.46② 0.90±0.63② 0.48±0.52
5 3.46±11.08③ 1.40±0.82① 0.85±0.801 0.60±0.44
生物碱 4 0.03±0.04 0.48±0.74 0.23±0.57 0.10±0.24
2 0.02±0.03 0.35±0.59 0.25±0.52 0.30±0.25
速尿 0.02 3.39±0.89③ 2.30±0.87② 1.28±0.49③ 0.77±0.58
生理盐水 — 0.09±0.57 0.46±0.97 0.21±0.21 0.24±0.48
表 1 粪箕笃茎叶不同提取物对大鼠尿量的影响 (n=8 ,-x±s)
注:表中①表示 P<0.05;②表示 P<0.01;③表示 P<0.001 ,下同
·44·(总 ) 广西中医药 2001年 6月第 24卷第 3期
表 1结果表明 , 粪箕笃非生物
碱有明显增加尿量的效果 , 醇提液
对尿量亦有增加 , 但都不如速尿作
用强。
2.2 体外抗菌实验(二倍释法)[ 8]
2.2.1 试验用药物 粪箕笃醇提
液 (100%), 粪箕笃非生物碱提取
液 (100%), 粪箕笃生物碱提取液
(100%)。
2.2.2 方法 在一系列试管中
用培养基将试验药物作连续对倍
稀释 , 使药物的浓度按试管顺序
依次成倍递减;再于各试管中加
入等量的实验菌 , 恒温培养 24h
后 ,观察有无细菌生长 。以细菌不
生长的最高药物稀释度作为该药
的最低抑菌浓度(MIC), 结果见表
2.
表 2结果表明 , 非生物碱具有
明显抗菌作用 , 而醇提液对金黄色
葡萄球菌(耐菌株 、敏感株)、白色
葡萄球菌及奈氏球菌的 MIC较高
外 , 其余均与生物碱相似 , 提示无
明显抑菌作用。
2.3 镇静实验(活动计算法)[ 5]
取昆明种小白鼠 ,雌 、雄不拘 ,按体
重随机分组 ,分组及剂量见表 3。每
只小鼠按 0.2ml/10g i.g给药 ,药后
1h , 将小鼠逐个放入小动物自主活
动测定仪内适应 3min , 然后测定
2min内活动次数 。用小鼠活动次数
平均值-x±s与对照组比较作组间
t检验 ,结果见表 3。
表 3结果表明 ,粪箕笃生物碱部
分高 、低剂量均有镇静作用 , 与生理
盐水比较差异极显著 (P<0.001),
醇提液及非生物碱组无明显镇静作
用。
2.4 镇痛实验(扭体法)[ 5] 取昆
明种小白鼠 , 雌 、雄不拘 ,按体重随
机分组 ,分组及剂量见表 4。每只小
鼠 i.g 0.2ml/10g , 药后 1h i.p.,
0.6%HAC 0.4ml/只 , 观察并记录
10min内小鼠的扭体次数 , 用各组
的小鼠扭体次数均值与生理盐水
组比较作组间 t检验 。并计算各组
镇痛率 [(对照组扭体次数-用药
组扭体次数/对照组扭体次数)× 100%] ,结果见表 4。
表 4结果表明 , 生物碱 、非生
物碱部分对 HAC所致小鼠扭体反
应均有明显抑制作用 , 生物碱作用
最强(P <0.001)。醇提液无明显镇
痛作用。
药物菌种 醇提液 非生物碱 生物碱 对照组
金黄色葡萄球菌(敏感株) 1∶8 1∶16 1∶2 均
有
细
菌
生
长
金黄色葡萄球菌(耐菌株) 1∶4 1∶8 1∶2
白色葡萄球菌 1∶32 1∶16 1∶2
奈氏球菌 1∶32 1∶8 1∶4
大肠杆菌 1∶2 1∶8 1∶2
伤寒杆菌 1∶2 1∶16 1∶2
福氏痢疾杆菌 1∶2 1∶16 1∶2
绿脓杆菌 1∶2 1∶16 1∶2
表 2 粪箕笃茎叶不同提取物的体外抗菌实验 (MIC)
168
组 别 (g生药/kg) 活动次数(2min内)
醇提物 10.0 120.75±55.30
5.0 131.38±68.34
罗通定组 0.3 20.63±13.07③
非生物碱 10.0 150.63±69.91
5.0 147.50±61.50
生物碱 5.0 90.25±65.63
③
2.5 117.38±54.81③
生理盐水 - 166.5±46.15
表 3 粪箕笃茎叶不同提取物对小白鼠自主活动的影响 (n=10 , -x±s)
表 4 粪箕笃茎叶不同提取物的镇痛实验 (n=10 , -x±s)
组 别 剂量(g生药/kg) 扭体次数 镇痛率(%)
醇提物 10.0 24.38±5.48 28.00
5.0 23.75±8.36 29.86
非生物碱 10.0 11.07±9.60
①
55.00
5.0 11.29±8.99① 56.58
生物碱 5.0 5.75±5.95
③ 77.88
5.86±5.46③ 77.46
罗通定组 0.3 6.71±4.27③ 74.19
生理盐水 - 26.00±10.11 -
· 45·(总 )广西中医药 2001年 6月第 24卷第 3期
3 讨 论
本实验通过观察粪箕笃茎叶
各提取物的利尿实验 , 结果发现醇
提物有利尿效果 , 非生物碱有明显
利尿作用 , 生物碱部分不但没有利
尿效果 , 反而有抑制排尿作用 。提
示非生物碱是粪箕笃利尿的有效
成分之一。利水渗湿药 , 特别是利
水通淋药都有不同程度的抗菌作
用 , 我们做了各提取物的体外抗菌
实验 , 结果表明该品非生物碱部分
抑菌作用较好 。在利尿实验中发现
动物给药后有安定 、活动减少等趋
势 , 且粪箕笃为防己科植物 , 该科
植物大多有镇静 、镇痛的功效 , 由
此我们用该药各提取物探索性地
作了镇静 、镇痛实验 , 结果发现生
物碱有明显镇静 、镇痛作用;非生
物碱亦有镇痛作用;醇提物镇静 、
镇痛效果不明显。本试验证明了粪
箕笃有利尿 、抗菌的功效 , 为临床
用药提供了科学依据。
参考文献
1 江苏新医院编.中药大辞典.下册.
上海:上海人民出版社 , 1977.2421.
2 劳爱娜 ,高耀良.防己科植物粪箕笃
化学成分研究.药学学报 , 1980 , 15
(11):696.
3 邓京振 ,赵守训.粪箕笃地上部分非
碱性成分的分离和鉴定.中国药科
大学学报 , 1993 , 24(2):73.
4 中国科学院上海药物研究所编著.中
草药有效成分提取与分离.上海:上
海科学技术出版社 , 1983.263 ～ 266.
5 徐淑云主编.药理实验方法学.第 2
版 .北 京 :人民 卫生出版 社 ,
1994.651 , 700 , 1052.
6 章元沛主编.药理学实验.第 2版.
北京:人民卫生出版社 , 1985.80.
7 陈奇主编 .中药药理研究方法学 .
北京:人民卫生出版社 , 1993.118.
8 章育正主编.微生物学.上海:上海
科学院技术出版社 ,1986.128.
(2001-02-21收稿/编辑 王健华)
169
茶碱对原代培养大鼠小脑颗粒神经
元酒精性损害的保护作用
许小林 右江民族医学院 533000 广西百色市城乡路 98号
林穗珍 颜光美 黎明涛 中山医科大学 510079
摘 要 目的:研究茶碱对神经元酒精性损害的保护作用。方法:原
代培养的新生大鼠小脑颗粒神经元经酒精或酒精和茶碱处理 , 细胞损害
由镜检和四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析确定。结果:酒精降低神经元的
存活数及 MTT比色分析的吸收度 ,茶碱能减弱这一效应。结论:茶碱对原
代培养大鼠小脑颗粒神经元酒精性损害有保护作用 。
关键词 茶碱;茶叶;酒精;神经损害;保护
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1003-0719(2001)03-045-02
酗酒给现代社会造成了不少
的社会问题和医疗问题 。其中酒精
中毒造成的神经系统疾病已越来
越受到人们的关注 。广西百色地区
民间有“饮茶解酒”的习俗。为寻找
“茶叶解酒”的药理学依据 , 我们进
行了酒精对原代培养大鼠小脑颗
粒神经元损害及茶碱对其保护的
研究 。
1 实验材料
1.1 主要试剂 无水乙醇 (广东
汕头新宁化工厂 , 分析纯), 神经细
胞基础培养液 (BME , 美国 GIBCO
公司), 茶碱 、 四甲基偶氮唑蓝
(MTT)和二甲亚砜(DMSO)等药物
(美国 Sigma公司)。
1.2 动物 出生 8天的 SD大鼠 ,
体重 16～ 19g ,雌雄不限 ,由中山医
科大学实验动物中心提供。
1.2.1 大鼠小脑颗粒神经元培养
参照 Yan-GM等介绍的方法制
备小脑颗粒神经元[ 1] 。取出生后 8
天的 SD大鼠的小脑 , 经胰酶和
DNA酶消化并辅以机械吹打分散
细胞 , 加入胰酶抑制剂以终止消
化 。离心(5min ,1500r/min),弃上清
液 ,将细胞转移至含有 10%胎牛血
清和 25mmol/L氯化钾的 BME培养
液中 , 以 1.5×106/ml的细胞密度
接种在预先用多聚赖氨酸 (5μg/
ml)包备的 24孔细胞培养板中
(400μl/孔), 置 CO2培养箱(Napco
Model 6100)中培养 (37℃, 5%
CO2)。24h后加 Ara-C(终浓度为
10μmol/L)以抑制非神经元的生
长 。第 7天加葡萄糖 (终浓度为
20mmol/L)。第 8天细胞基本分化
成熟 ,可用于实验 。
2 实验方法
2.1 分组实验 将小脑颗粒神经