全 文 ：　　结果表明 ,与对照组比较 , 在致炎 0.5h 、1h 时 ,穿山甲 、猪蹄
甲有不同程度的抑制作用。 与穿山甲组比较 , 猪蹄甲 1h 、2h、
4h 、6h均无显著性差异 ,表明穿山甲和猪蹄甲对急性炎症有抑
制作用。
2.3　对大鼠纸片肉芽肿的影响　150±20gWistar雌性大鼠 50
只随机分 5 组 ,分别为猪蹄甲高 、中 、低剂量组 , 穿山甲剂量组 、
模型对照组。实验前禁食 12h , 自由饮水 , 用盐酸氯胺酮注射液
(0.2ml/ 100g)腹腔注射麻醉 , 将纸片(市售测抗菌活性的滤纸片
直径 8mm , 厚 1.5mm ,重 0.02g ,干燥灭菌 30min)植入大鼠左右
肩部皮下各 1 片 ,缝合 , 在室温 20 ～ 24℃环境下饲养 , 于纸片植
入 24h后开始给药 ,连续 7d , 1 次/d ,末次给药后 40min 处死动
物 ,剥出周围裹着肉芽组织的纸片 , 与 60℃烘箱干燥 24h 后 , 称
重 ,减去纸片重即肉芽干重 , 见表 3。
　　表 3　猪蹄甲 、穿山甲对大鼠纸片肉芽肿的影响( x ±s)
组　别 鼠数(只) 剂量(/ kg) 肉芽组织干重(g)
对照　 10 20ml 15.64±1.65
穿山甲 10 3.33g 10.75±2.05＊
猪蹄甲 10 6.67g 11.48±3.25＊
猪蹄甲 10 3.33g 13.66±3.72＊■
猪蹄甲 10 1.67g 13.56±3.45＊■
　　结果表明 ,与模型对照组比较 , 用药各组肉芽干重均有不
同程度的减轻 ,说明穿山甲与猪蹄甲具有相似的抑制慢性炎症
的作用。
3　讨论
　　穿山甲具有活血逐瘀 、消痈排脓的作用 , 为治疮痈肿毒的
要药;古文献记载猪蹄甲治肠痈内蚀 、恶疮肿毒等 , 而疮疡痈肿
与炎症关系密切。根据炎症过程发展的不同时相 , 我们比较了
猪蹄甲 、穿山甲对以血浆蛋白渗出 、肿胀度为指标的急性炎症
模型及以肉芽组织增生为特征的慢性炎症模型的影响。结果
表明 ,猪蹄甲 、穿山甲对急 、慢性炎症均有较明显的对抗作用。
猪蹄甲高剂量组和穿山甲剂量组比较 , 其抗炎作用强度无显著
性差异 ,提示猪蹄甲高剂量对穿山甲似有可替代性。
参考文献
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4　侯士良.中药八百种详解.郑州:河南科学技术出版社 , 1998∶622
草血竭提取物抗炎作用和机理研究
李文广　张小郁1　吴勇杰　田　暄2
(兰州医学院药理学教研室 , 　1生理学教研室 , 　2兰州大学应用有机化学国家重点实验室　兰州　730000)
　　提　要　目的:研究草血竭提取物的抗炎作用及其机理。方法:采用巴豆油诱发的小鼠耳肿模型 、角叉菜胶诱导的大鼠后爪
肿胀模型研究药物的抗炎作用。大鼠炎足炎症渗出液中 MDA 用 TBA 荧光法测定 , NOS 活性用 NADPH 黄递酶染色法 , NO 用
Griess 重氮化反应法 ,β-NAG 用对硝基酚比色法 , IL-1β 和 TNFα含量用放射免疫法测定。结果:草血竭提取物 10 ～ 40mg/kg ip 对小
鼠耳肿 、大鼠足爪肿胀有显著的抑制作用 , 20mg/kg 使大鼠炎足炎症渗出液中 MDA 、NO 、IL-1β 和 TNFα含量显著减少 ,β-NAG、
NOS 活性降低。结论:草血竭提取物有明显的抗炎作用 , 其抗炎机理与清除氧自由基 、抗脂质过氧化 、稳定溶酶体膜和减少炎性细
胞因子如 IL-1β 和 TNFα的生成有关。
　　关键词　草血竭提取物;炎症;白介素-1;肿瘤坏死因子;一氧化氮;一氧化氮合成酶
　　草血竭提取物体外有抗脂质过氧化作用[ 1] , 对二甲苯致小
鼠耳肿和角叉菜胶致小鼠足肿均有一定的抑制作用 , 并有一定
的镇痛作用[ 2] 。本文研究草血竭提取物的抗炎作用及其机理 。
1　材料和方法
1.1　试验药物　草血竭采自云南省丽江县 , 经醇提干燥后得
红色结晶 , 由兰州大学化学系提供。地塞米松注射液(dexam-
ethasone), 为兰州制药厂产品 ,批号 990903。
1.2　试剂　角叉菜胶为辽宁药物研究所产品 , 用生理盐水制
成10g/ L 的悬液。 巴豆油致炎合剂按巴豆油 2%、无水乙醇
20%、蒸馏水 5%、乙醚 73%的比例配制。 硫代巴比妥酸
(TBA),用 25mmol/ L NaOH 助溶。 四乙氧基丙烷(Fuka产品)
用甲醇稀释。β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(β-NAG)、一氧化氮
(NO)和一氧化氮合酶(NOS)试剂盒由南京建成生物工程研究
所提供。 IL-1β 购自北京北方生物技术公司。 TNFα放免试剂
盒购自北京邦定生物技术公司。
1.3　动物　Wistar大鼠 、昆明种小鼠均购自兰州医学院实验动
物中心 ,合格证号:医动字第 14-006、14-005。
1.4　对巴豆油诱发的小鼠耳肿的影响　小鼠体重 23 ～ 25g , ♂
♀各半 ,随机分组 , ip 药物 30min 后在右侧耳壳正 、反两面均匀
涂以 0.1ml巴豆油致炎合剂诱发小鼠耳肿。致炎 4h 后处死动
物 ,沿耳廓基线剪下双耳 , 在两耳对称部位用打孔器(内径
6.5mm)打下耳片 , 以两耳片重量之差为肿胀度 , 求出肿胀抑制
率。
1.4　对角叉菜胶诱发的大鼠足爪肿胀的影响　体重 170 ～
200g 大鼠♂♀各半 , 随机分组 , ip 给药后 30min 在右后足跖 sc
1%角叉菜胶 100μl致炎。致炎前 、致炎后 1 、2、3、4、6 、18h 分别
用千分尺测量炎足厚度 , 以致炎前 、后鼠足厚度之差为鼠足肿
胀度。另批致炎 4 小时处死大鼠 , 将炎足剪开皮肤后浸入 1ml
50mmol/ L冷 PBS(pH 7.4)中 , 反复挤压 、洗出炎症渗出液 , -
18 中药药理与临床 2002;18(2)
DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2002.02.011
20℃保存待测。
1.5　大鼠炎足中丙二醛(MDA)生成量测定　取大鼠炎足 , 剥
皮剪开后在 2ml 15%三氯醋酸溶液中浸泡 3h(4℃), 弃炎足 , 取
上清 1.5ml , 加 2.0ml TBA 试剂 , 沸水浴中温孵 25min , 用正丁
醇抽提 2 次(每次 2ml , 共 4ml)。 合并提取液 , 3000rpm 离心
10min , 取正丁醇相在 960 型荧光分光度计上读相对荧光值(λex
=520nm ,λem=550nm)。 标准品四乙氧基丙烷用甲醇稀释为
2.35、4.7 、9.4、18.8 和 36.6μmo l/ L , 取 20μl 加 15%TCA 溶液
和 2ml TBA试剂同法处理 , 制作标准曲线 , 由标准曲线 y=17.
304Ln(X)+37.307(R2=0.9964)求 MDA 含量。
1.6　炎症渗出液中细胞因子含量测定　IL-1β 、TNFα按说明书
用放射免疫法测定。 NOS 活性用 NADPH 黄递酶染色法 , NO
用 Griess 重氮化反应法 ,β-NAG用对硝基酚比色法。
2　结果
2.1　草血竭提取物对巴豆油诱发的小鼠耳肿的影响　致炎后
4h 草血竭 10 ～ 40mg/ kg ip 明显抑制巴豆油诱发的小鼠耳肿 , 作
用呈明显的剂量依赖性。 草血竭 40mg/ kg 的抗炎强度接近地
塞米松 2mg/ kg(表 1)。
　　表 1　草血竭对巴豆油致小鼠耳肿胀的影响( x ±s , n=10)
组　别 剂量(mg/ kg) 肿胀度(mg)　 抑制率(%)
对照组 9.4±3.1
草血竭 10 7.3±2.1 22.3
　　　 20 5.2±1.3＊＊ 44.7
　　　 40 4.6±1.3＊＊ 51.1
Dex 2 4.1±1.7＊＊ 56.4
　　与对照组比较 ＊＊P<0.01
2.2　草血竭提取物对角叉菜胶诱发大鼠足肿胀的影响　表 2
结果表明 , 角叉菜胶诱发的大鼠足肿 6h 达高峰 , 肿胀度为
91.9%,可持续 18h。草血竭提取物 10 ～ 40mg/ kg ip 剂量依赖
性地抑制角叉菜胶诱导的炎足肿胀 , 以致炎后 2 ～ 4h 作用最明
显 ,药效可持续 6h。 40mg/ kg的作用强于地塞米松 2mg/ kg 。
　　表 2　 草血竭提取物 ip对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响( x ±s , n=10)
组　别 剂量(mg/ kg)
足肿胀度(mm)
1h　　　 2h　　　 3h　　　 4h　　　 6h　　　 18h　　　
对照组 1.61±0.38 2.76±0.93 3.08±0.69 3.84±0.67 4.22±0.48 4.18±0.64
草血竭 10 1.41±0.73 2.24±0.84 2.36±0.65＊ 3.02±0.96 3.85±1.29 4.14±0.90
20 1.17±0.77 1.49±0.56＊＊ 1.68±0.54＊＊ 2.34±0.92＊＊ 3.28±0.87＊＊ 4.15±0.87
40 1.06±0.29＊＊ 1.04±0.40＊＊ 1.12±0.41＊＊ 1.80±0.89＊＊ 2.84±0.46＊＊ 3.88±0.86
Dex 2 1.23±0.49 1.45±1.04＊＊ 2.08±0.88＊ 2.66±0.96＊＊ 3.46±0.58＊＊ 4.28±0.67
　　与模型对照组比较 ＊P<0.05 , ＊＊ P<0.01(下同)
2.3　对角叉菜胶致炎大鼠炎足中 MDA生成和 β-NAG 含量的
影响　表3 结果 , 与空白对照组比较 ,模型组大鼠炎足浸出液中
M DA 含量升高 , 草血竭 20mg/ kg 明显降低 MDA 的生成和 β-
NAG含量 , 抑制率分别为 47.2%和 28.6%, 均较地塞米松
2mg/ kg 的 23.6%和 23.1%为高。
2.4　对角叉菜胶致炎大鼠炎足中 NO 和 NOS 含量的影响　与
空白组比 ,模型组渗出液中 NO 浓度和 NOS 活性增加 , 草血竭
20mg/ kg明显降低 NO浓度和NOS 活性 , 抑制率分别为 48.3%
和85.8%, 均较地塞米松 2mg/kg 的 37.1%和 26.3%为高 , 见
表 3。
　　表 3　草血竭 20mg/ kg 对角叉菜胶致炎大鼠炎足中 MDA 生成及炎
症浸出液中 β-NAG和 NOS 含量的影响( x ±s , n=10)
组　别 剂量(mg/kg)
MDA
(μmol/L)
β-NAG
(U/L)
NO
(μmol/L)
NOS
(U/L)
空白对照 0.33±0.07 8.5±3.0＊＊ 12.9±8.9＊＊ 1001±530＊＊
模型对照 0.72±0.16 14.7±3.5 53.6±11.0 5815±804
地塞米松 2 0.55±0.12 11.3±2.7＊ 33.7±15.9 4286±1502＊＊
草血竭　 20 0.38±0.16＊＊ 10.5±4.3＊ 27.7±9.1＊＊ 826±387＊＊
2.5　草血竭提取物对角叉菜胶诱发的大鼠关节炎浸出液中细
胞因子水平的影响　和空白对照组比较 , 模型对照组大鼠炎足
炎症渗透出液中 IL-1β 和 TNFα含量升高 , 草血竭 20mg/ kg ip
使炎症渗出液中 IL-1β 和 TNFα含量明显降低(表 4),且明显强
于地塞米松(P<0.01)。
3　讨论
　　我们前文[ 2]证实草血竭提取物灌胃给药对二甲苯诱导的
小鼠耳肿和角叉菜胶引起的小鼠足肿有明显的抑制作用 , 但
最低有效剂量为0.4g/ kg。而ip给药10mg/ kg即有效 , 且随剂量
　　表 4　草血竭 20mg/ kg 对大鼠炎足炎症渗出液中细胞因子 IL-8和
TNFα含量的影响( x ±s , n=10)
组　　别 剂量(mg/ kg) IL-1β(pg/ml)　 TNFα(pg/ml)　
空白对照 0.05±0.03＊＊ 10.4±7.2＊＊
模型对照 33.8±7.8 351.7±194.4
草血竭　 2 1.48±0.65＊＊ 49.6±19.7＊＊
地塞米松 20 20.0±7.4＊＊ 132.6±94.4＊
　　与模型组比较 ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01
增大而作用增强和持续时间延长 ,说明草血竭注射给药更为合
理。机体在致炎因子的作用下 , 可引起多种细胞产生和释放细
胞因子如 IL-1 , IL-8 , TNFα等 ,引起溶酶体释放 β-NAG 等 , 诱导
iNOS 生成 ,促进 NO合成和释放 ,这些因子相互影响 ,促进炎症
发展[ 3 ～ 5] 。草血竭提取物能够明显抑制上述因子 , 这可能是其
最主要的抗炎机理。在炎症组织 ,由致炎因子引起的中性粒细
胞呼吸爆发和炎症介质释放过程中均可产生氧自由基 , 氧自由
基可引发脂质过氧化 ,损伤细胞 , 参与炎症反应 , 产生 MDA。草
血竭提取物能明显降低炎症渗出液中 MDA , 在体外有抗脂质过
氧化作用 ,能清除羟基自由基[ 1] , 说明草血竭的抗炎作用与其
抗脂质过氧化作用和清除羟基自由基有关。
参考文献
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Anti-inflammatory effects and mechanism of Polygonum paleaceumWall extracts
Li Wenguang , Zhang Xiaoyu1 , Wu Yong jie , Tian Xuan2
(Department of Pharmacology , Lanzhou Medical College , Lanzhou　730000)
　　Objective:To investig ate the anti-inflammatory effects and mechanism of Polygonum paleaceum Wall ex tracts(PPE).Methods:Cro-
ton oil-induced ear sw elling in mice and carrageenan-induced hind paw edema in ra ts were prepared.The nitric oxide synthase(NOS)activ-
ity was measured by NADPH-diaphoras stain assay , nitric oxide(NO)content by Griess diazo tization assay , L-acety1-β-D-g lucosaminidase
(β-NAG)activity by spectropho tog raphy , alondialdehyde(MDA)content by thiobarbituric acid (TBA)fluo rescence technique and IL-1β ,
TNFαcontent by radioimmunoassay(RIA).Results:PPE 10 ～ 40mg/kg ip significantly inhibited carrageenan-induced paw edema in rats
and croton oil-induced ear swelling in mice respectively.In the rat arthritis induced by car rag eenan , 20mg/ kg reduced MDA content in in-
flamed paws , inhibited NOS and β-NAG activity and lowered the content of NO , IL-1β and TNFαin exudate significantly.Conclusion:
PPE has anti-inflammato ry effect on inflammatory model of rats and mice , and its mechanisms are relev ant to oxygen free radical scaveng ing
and anti-lipid pero xidation , stabilizing ly sosome membrane and inhibition the formation of inflammatory cy tokines.
Key words　Poly gonum paleaceum Wall;antiinflammation;IL-1β ;TNFα;nitric ox ide;nitric ox ide synthase
玫瑰花水煎剂对兔离体主动脉平滑肌张力的影响
李红芳　庞锦江　丁永辉1　卫玉玲1
(兰州医学院生理教研室　兰州　730000 , 　1甘肃省药品检验所　兰州　730000)
　　提　要　目的:探讨玫瑰花水煎剂对去甲肾上腺素预收缩离体兔主动脉平滑肌张力的影响及其机制。方法:制备离体兔胸主
动脉平滑肌条 ,固定于灌流肌槽中 , 记录肌条张力变化。结果:酸性和中性玫瑰花水煎剂均可明显扩张去甲肾上腺素预收缩主动脉
平滑肌条 ,此作用与 10-5mo l/ L Ach相似。去除内皮细胞 、10-4mol/ L L-NNA或 10-5mol/ L 亚甲兰可完全消除玫瑰花舒张血管作用 ,
但 10-5mol/ L吲哚美辛和普萘洛尔无明显影响。结论:玫瑰花水煎剂可使血管平滑肌扩张 ,此作用有内皮依赖性 , 与 NO 有关。
　　关键词　玫瑰花;主动脉平滑肌;内皮细胞;一氧化氮
　　玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰(Rosa rugosa Thunb)初放的花 ,
能保肝 、利胆 、降血脂[ 1] 。《纲目拾遗》玫瑰花可“和血 、行血 、理
气” 。李宇晶[ 2]和张秀兰[ 3]等研究发现玫瑰花可减少心肌缺血
的程度 ,缩小心肌梗塞范围。我们用离体灌流实验方法 , 观察
玫瑰花水煎剂对去甲肾上腺素预收缩离体兔主动脉平滑肌张
力的影响 ,并对其作用机理进行初步探讨。
1　材料和方法
1.1　试验药物　净选玫瑰花 , 粉碎成粗粉 , 水煎提取 , 制成
100%浓度(相当于 1ml含 1g 生药)的水煎液备用(由甘肃省药
检所鉴定提取)。 玫瑰花水煎液 , pH 为 5.8 , 可将其滴定至
pH7.4。
1.2　试剂　N-L-硝基精氨酸(N-L-nitro-arginine , L-NNA;Sig-
ma);亚甲兰(Methylene blue , MB;Merck);吲哚美辛(I n-
domethacin ,江苏太仓制药厂);普萘洛尔(Propranolol ,北京第二
制药厂);去甲肾上腺素(Noradrenaline, NA;大同市惠达制药
厂);乙酰胆碱(Acetylcholine , Ach;军事医学科学院药材供应
站)。
1.3　肌条制备及张力测定　青紫兰家兔 ,体重 2.5～ 3kg , 猛击
其头部致昏 ,迅速取出胸主动脉 , 剥去周围的脂肪和结缔组织
后 ,用滚动法将血管剪成 10mm 长 、3mm 宽的螺旋条 , 置于含
Krebs 液[ 成分(mmol/ L)∶NaCl 120.6 , KCl 5.9 , NaH2PO4 1.2 ,
MgCl2 1.2 , NaHCO3 15.4 , CaCl2 2.5 ,葡萄糖 11.5 , pH 7.4] 5m L
的浴槽中 , 37℃, 持续通以 95% O2 和 5% CO2 的混合气体 , 平
衡 1.5h , 血管张力用肌张力换能器和 BL-310 生物机能实验系
统(成都泰盟电子有限公司研制)通过 IBM 兼容机进行扫描记
录。
肌条张力稳定后 ,加入去甲肾上腺素 10-6M 至收缩达坪值 ,
以此为 100%效应 , 再分别加入 Ach 10-5M 、酸性或中性玫瑰花
20g/L ,计算 5min 时肌条舒张百分比 , 以加入等量的生理盐水
(NS)作为空白对照。在浴槽中分别加入 L-NNA 10-4mol/ L、MB
10-5mol/ L、吲哚美辛 10-5mol/ L、普萘洛尔 10-5mol/ L 温育 15min
或用棉签擦除内皮细胞后(内皮去除情况可用Ach 10-5mol/ L 检
查), 观察玫瑰花对去甲肾上腺素预收缩血管舒张作用的影响。
20 中药药理与临床 2002;18(2)
基金项目:甘肃省科委中青年基金资助项目(WS991-A23-011)