免费文献传递   相关文献

草血竭镇痛抗炎作用的研究



全 文 :参考文献
1 刘尚玉.藏药志.第一卷.青海人民出版社 , 1997∶54
2 郭本兆.青海经济植物志.青海人民出版社 , 1987∶54
3 杜佐华 ,刘汉官 ,蔡从泳 ,等.蝙蝠葛碱的抗炎镇痛作用.中国药理
学报 , 1986;7(5)∶419
4 祁 红.大黄素的抗炎作用.中草药 , 1999;30(7)∶523
5 徐克意 ,谭建全 ,邱成之 ,等.盐酸木防己碱的抗炎作用.中国药理
学报 , 1986;7(5)∶423~ 424
草血竭镇痛抗炎作用的研究
张小郁
(兰州医学院生理学教研室 兰州 730000)
  提 要 草血竭乙醇提取物对二甲苯致小鼠耳肿和角叉菜胶致小鼠足肿均有抑制作用 , 热板法试验并有镇痛作用 ,体外还能
刺激中性白细胞释放 O2·, 但能清除·OH , 提示草血竭的抗炎镇痛作用可能与其影响自由基有关。
  关键词 草血竭;抗炎;镇痛;自由基
  草血竭(Poly gonum paleaceum Wall)为蓼科植物草血竭的根
茎 ,有散血止血 , 下气止痛 , 收敛止泻之功效 , 民间用于治疗菌
痢 、慢性胃炎 、胃十二指肠溃疡等[ 1] ,但其药理作用研究未见报
道 ,本实验初步研究了其抗炎镇痛作用。
1 材料
1.1 试验药物 草血竭采自云南省丽江县 , 经醇提干燥后得
红色粉末 , 由兰州大学化学系提供。香莲丸为兰州佛慈制药厂
产品 , 批号:940705。 地塞米松磷酸钠注射液为鄂北制药厂产
品 ,批号:990311。
1.2 动物 小白鼠 , 雌雄各半 , 18 ~ 22g;Wistar 大鼠 , 200 ~
250g , 均由兰州医学院动物房供应。
2 方法和结果
2.1 对二甲苯致小鼠耳肿的影响 小鼠 50 只 ,随机分 5 组 , 灌
胃给药 ,每日一次 , 连续 3 日 , 于末次给药后半小时 , 用二甲苯
50μl在小鼠右耳正反面致炎 , 左耳涂等量 NS 对照 , 1 小时后处
死小鼠 , 将小鼠两耳齐根剪下 , 用 6mm 打孔器在两耳相同部位
打孔 ,将取下的耳片在扭力天平上称重 , 以左右两耳片之差为
肿胀程度。结果草血竭剂量依赖性地抑制二甲苯引起的小鼠
耳肿 ,见表 1。
  表 1 草血竭对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响( x ±s , n=10)
组 别 剂量(g/ kg) 肿胀度 抑制率(%)
NS 4.0±1.1
地塞米松 0.002 1.7±1.5** 57.5
草血竭 0.2 3.7±1.5 7.5
0.4 2.2±0.7** 45.0
0.8 1.8±0.8** 55.0
  与对照组比较 *P<0.05 , ** P<0.01(下同)
2.2 对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响 小鼠 50 只 ,分组同上 ,
连续给药 3 天 ,于末次给药后 1h 时每鼠右后足皮下注射 1%角
叉菜胶 40μl致炎 , 1h 后处死小鼠 , 从踝关节处对称剪下鼠足称
重 ,以左右足重量差作为鼠足肿胀度。表 2 结果表明草血竭具
有较明显的抑制角叉菜胶致小鼠足肿胀的作用。
2.3 对热板法引起疼痛的影响 雌性小鼠 50 只 , 分组同上。
将小鼠置于56℃热板上 , 以舔后足为指标测量动物正常痛阈
  表 2 草血竭对角叉菜胶致小鼠足肿胀的影响( x ±s , n=10)
组 别 剂量(g/ kg) 肿胀度 抑制率%
NS   49.1±13.3
地塞米松 0.002 35.6±9.2** 27.4
草血竭 0.2 46.4±12.4 5.5
0.4 40.8±8.8* 16.8
0.8 37.2±7.4** 24.1
值 ,然后灌胃给药一次 , 并于给药后 1h 、3h、5h 测小鼠痛阈值 , 表
3结果草血竭有明显镇痛作用 ,且有剂量依赖性。
  表 3 草血竭对小鼠痛阈的影响( x±s , n=10)
剂量
(g/ kg)
痛阈值(s)
给药前 给药 1h 3h  5h 
NS   12.5±6.8 11.2±4.7 12.3±3.4 13.8±5.8
草血竭 0.2 12.9±3.0 12.3±5.7 9.3±5.0 17.1±6.1*
0.4 11.9±4.6 16.1±5.2* 14.2±6.6 20.9±9.1*
0.8 11.6±2.8 18.3±5.0** 17.3±6.4* 24.1±8.8**
2.4 对大鼠中性白细胞释放 O 2·的影响 大鼠 ip 液体石腊
10ml , 18h 时断头处死 , 用 100ml冰浴中预冷的 Hanks 液分两次
洗出腹腔渗出液 , 500rpm , 4℃离心 10min , 取沉淀细胞再用
Hanks 洗一次后制成细胞悬液 ,冰浴中保存备用。实验分对照
组(加溶媒)和给药组 , 测定系统含 0.01mol/ L KCN 0.1ml、
0.1% NBT 0.4ml 、细胞悬液(1×107/ ml)0.4ml、不同浓度药液
各 50μl(对照管加 5% DMSO 50μl/ml)。 37℃温育 35min 后按
NBT 法[ 2]测定。结果草血竭体外对中性白细胞释放 O 2·有明显
促进作用 , 25μg/ml即可使中性白细胞释放 O 2·的量增加 1 倍。
  表 4 草血竭对大鼠中性白细胞释放 O2·的影响( x ±s , n=5)
药物剂量
(μg/ml)
还原型 NBT  
(OD515)  
变化率
(%)
0 0.212±0.020 -
25 0.447±0.009** 110.85
50 0.532±0.036** 150.94
100 0.620±0.018** 192.45
2.5 自旋捕集 ESR技术测定·OH 参照文献用 ER200D 型顺
磁波谱仪(Bruker 产品)测定 , 微波功率 29mW , 调制频率
100kHz ,调制幅度 4G , 扫描速度 25G/分 , 时间常数 200sec。测
定体系为 1.25%H2O 2、0.1mol/ L DMPO、2.0×10-4mol/ L 硫酸
亚铁铵 、0.125mol/ L PBS (pH7.4), 各浓度药液 50μl , 混匀后
19中药药理与临床 2001;17(2)
DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2001.02.011
5min 测 ES R谱 ,以 DMPD-OH 谱的第二个峰的高度计算·OH
的生成量和药物的抑制率。结果草血竭醇提物体外对·OH 的
生成有明显抑制作用 , 100μg/ ml的抑制率为 30%。
3 讨论
  本研究结果表明 ,草血竭对二甲苯致小鼠耳肿和角叉菜胶
致小鼠足肿均有一定的抑制作用 , 说明其对急性炎症有一定的
对抗作用;对热板法引起的疼痛有镇痛作用 , 且持续时间较长 ,
这也有利于炎症治疗。研究认为 , 活性氧自由基与炎症和疼痛
均有密切关系[ 2 , 3] , 活性氧主要参与吞噬细胞需氧杀菌过程 , 我
们的研究结果提示草血竭能刺激中性白细胞释放 O2·, ESR检测
也能清除·OH ,说明草血竭的抗炎镇痛作用可能与其影响活性
氧有关 ,其详细的作用机理和应用前景有待进一步研究。
参考文献
1 江苏新医学院.中药大辞典.下册.上海科学技术出版社 , 1984∶
1581
2 毕 涉 ,高骥援.炎症与抗炎症药.北京:人民卫生出版社 , 1993∶
165~ 172
3 王 洁 ,宋必卫 ,马传庚 ,等.氧自由基与疼痛.中国药理学通报 ,
1998;14(2)∶107~ 109
Studies on anti-inflammation effect of Polygonum paleaceumWall
Zhang Xiaoyu
(Department of Phy siolog y , Lanzhou Medical College ,  Lanzhou 730000)
  Alchol ex tract of Poly gonum paleaceum Wall.inhibited ears swelling induced by bimethylbenzene and fee t swelling induced by car-
rageenan in mice , and had analgesia action.I t significantly enhanced the O2·releae from neutrophil , but eliminated ·OH generation.It is
suggested the anti-inflammation and analgesia effects o f Polygonum paleaceum Wall maybe have relation to active oxygen free radicals.
Key words Poly gonum paleaceum Wall;anti-inflammation;analgesia;free radicals
调心方对 Aβ和 TNFα诱导的 SK-N-SH细胞株毒性的保护作用
陈沙维 郁志华 徐品初 赵德敏 薛人华 林水淼  赵伟康**
(上海中医药大学老年医学研究所 上海 200032)
  提 要 目的:观察调心方对由 TNFα加 Aβ(25 ~ 35)诱导的 SK-N-SH(神经源性细胞株)细胞毒性的保护作用。方法:用
TNFα50ng/ml和 Aβ(25~ 35)0.1μM 处理 SK-N-SH 细胞造成细胞损伤模型。以 MTT 和 DNA ladder 为指标。结果:TNFα和 Aβ
(25 ~ 35)处理 SK-N-SH 细胞 24 小时细胞生存率减少约 50%, 而调心方含药血清能提高细胞模型的生存率 , 减少细胞 DNA 的降
解。结论:一定剂量的 TNFα加小剂量的 Aβ(25~ 35)能造成接近体内病理生理机制的细胞损伤模型 , 调心方对 TNFα加 Aβ(25 ~
35)造成的细胞毒性具有一定的保护作用。
  关键词 β-淀粉样肽;神经母细胞瘤细胞株;TNFα;M TT 测定;DNA断片
  Alzheimer s病(AD)是以认知功能进行性减退为特征的神
经退行性疾病。AD的主要病理特征是神经细胞外的老年斑形
成和神经纤维缠结以及神经元的大量丧失[ 1] 。老年斑主要成
分是 β 淀粉样肽(Aβ)。有关 Aβ 的细胞毒性有广泛的研究 。已
经发现 Aβ 的毒性还依赖于它的聚合能力[ 2] , 活性部位是 25 ~
35 片断[ 2 , 3] 。 Aβ 的细胞毒性与自由基产生[ 4] 、钙稳态失衡[ 3] 、
神经兴奋激动剂的毒性[ 5]和 c-fos 的激活等有关。在原代神经
细胞或其他细胞株培养中加入 Aβ 片断能引起细胞死亡[ 1] 。
但问题是通常在细胞培养内加入 Aβ 的量远大于活体内病
理状态下可能达到的量。故除 Aβ 刺激以外可能还有其他损伤
因子的协同作用。已有报告在 AD 的发病机制中 , 慢性炎症机
制可能起相当重要的作用[ 6] 。 Aβ 可刺激星状细胞和小胶质细
胞分泌许多细胞因子 , 如 TNF-α、TGFβ 、INFγ等[ 7 , 8] 。因此我
们设想用非常小剂量的 Aβ 加上一定剂量的 TNFα, 观察其对细
胞是否有相加或协同的毒性作用。
近年已有一些试用中药治疗 AD 的临床和实验的研
究[ 9 ~ 11] 。本文研究了调心方[ 13]含药血清对 Aβ 和 TNFα引起
的细胞毒性作用和致凋亡作用的影响。
1 材料与方法
1.1 含药血清制备 调心方由党参 、桂枝 、茯苓 、远志等组成 ,
含生药 2.75g/ ml ,由上海中医药大学老年医学研究所制剂室提
供。清洁级Wistar大鼠体重 300±10g ,按人与动物体表面积等
效剂量比值表换算喂药 3 天共 7 次 , 末次药后 1 小时于腹主动
脉无菌采血 , 分离血清 , 同组血清合并 , -20℃保存备用 , 用前
56℃、30 分钟灭活补体。
20 中药药理与临床 2001;17(2)

指导
国家自然科学基金重点项目(39830450),上海市教委项目(99C09)