全 文 ：文章编号:1001 － 4829(2014)01 － 0311 － 06
收稿日期:2012 － 11 － 05
基金项目:云南省科学技术厅社会发展科技计划(2010CG023)
作者简介:王 馨(1979 －) ，女，副研究员，从事药用植物栽培
与育种研究，E-mail:wangx913@ 126． com，* 为通讯作者，kmlshp
@ 126． com。
粗茎秦艽种子检验方法
王 馨1，严世武1，杜智红2，杨 斌1，杨丽英1，李林玉1，董志渊1，李绍平1*
(1．云南省农业科学院药用植物研究所，云南 昆明 650231;2．云南农业大学，云南 昆明 650201)
摘 要:参照农作物种子检验规程(GB /T 3543)的方法，对云南维西产粗茎秦艽种子的真实性、净度、水分、重量和发芽率等品质指
标进行了检验。结果表明，粗茎秦艽送检种子批次的最大重量应为 5000 g，送检样品最小重量为 25 g，净度分析试样最小重量为 5
g;种子真实性鉴定采用感官加显微观测法，重量测定采用千粒法，水分测定采用高温烘干法(130 ～ 133 ℃，1 h)。发芽试验采用纸
床法，可采用 20 ℃温汤浸种 24 h或赤霉素(GA3)50 × 10 －6溶液浸种 8h进行种子处理，其发芽记数时间分别为 10 ～ 28 d 和 10 ～
32 d。本研究初步建立了粗茎秦艽种子检验方法，为制定粗茎秦艽种子检验规程提供了依据。
关键词:粗茎秦艽;种子;检验
中图分类号:S567． 1 + 9 文献标识码:A
Testing Methods for Seed Quality of Gentiana Crassicaulis Duthie ex Burk．
WANG Xin1，YAN Shi-wu1，DU Zhi-hong2，YANG Bin1，YANG Li-ying1，LI Lin-yu1，DONG Zhi-yuan1，LI Shao-ping1*
(1． Medicinal Plant Institute，Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Yunnan Kunming 650231，China;2． Yunnan Agricultural Univer-
sity，Yunnan Kunming 650201，China)
Abstract:Ｒeferring to the rule of agricultural seed testing (GB /T 3543) ，seed of Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk． from Weixi county
in northwest of Yunnan were tested including seed genuineness，purity，weight，moisture content and germination rate． The results showed
that the maximum weight for one seed lot was 5000 g，the minimum weight for the submitted sample was 25 g，and the minimum weight for
seed purity analysis was 5 g． Seed genuineness was verified by both sensory evaluation and microscopic examination． Seed weight was meas-
ured at a thousand seed base． Moisture content of seed was determined by a drying and heating method during 130 － 133 ℃ for 1 hour． Ger-
mination were tested by a culture dish with one-sheet filter paper，and it was suggested that seeds of G． crassicaulis should be immersed in
a water bath kettle at 20 ℃ for 24 hours or by GA3 solution with the concentration of 50 × 10 －6 for 8 hours before germination test． Number
of germinated seeds was counted from the 10th to 28th day under the water treatment or from the 10th to 32nd day under the GA3 treatment．
The testing methods of G． crassicaulis seed quality was developed initially based on this research．
Key words:Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk．;Seed;Testing
粗 茎 秦 艽 (Gentiana crassicaulis Duthie ex
Burk．)是龙胆科多年生草本植物［1］，始载于《神农
本草经》，以根入药，是常用、大宗中药材秦艽的四
种原植物之一，主要用于治疗风湿痹痛等症。粗茎
秦艽为中国特有的药用植物资源，多分布于海拔
2100 ～ 4300 m的高山草地、高山灌丛、撂荒地、林下
及林缘地带，主产于中国云南、西藏、青海、四川、甘
肃等省。由于野生资源逐年减少，粗茎秦艽被列为
国家三级重点保护药用植物［2 ～ 3］。栽培秦艽以种子
育苗为主，但秦艽种子细小、寿命短［4］，加之药用植
物种子普遍存在质量较差［5］、缺乏技术规范与质量
标准［6］等问题，极大影响了粗茎秦艽规范化种植的
发展。开展粗茎秦艽种子检验方法研究，为制定相
关标准、提高种子种苗质量奠定基础，对促进秦艽种
植产业发展和秦艽资源的合理开发有重要意义。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
试验用粗茎秦艽种子 2010 年秋季采自云南省
迪庆州维西县永春乡拖枝村(99°2218″E，27°77″N，
海拔 2507 m)，常规室温保存，2011 年春季进行试
113
2014 年 27 卷 1 期
Vol. 27 No. 1
西 南 农 业 学 报
Southwest China Journal of Agricultural Sciences
DOI:10.16213/j.cnki.scjas.2014.01.052
验。植物样本经中国科学院昆明植物研究所标本馆
鉴定为粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis Duthie ex
Burk．)。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 种子筛选 用 20、40、60……140 目国产标
准筛网，将各目次筛选的物质进行分类，测定各目样
筛中种子的净度、千粒重、水分(低温烘干法)和自
然发芽率(无预处理)。
1． 2． 2 扦样 参照《农作物种子检验规程 扦样》
(GB /T 3543． 2-1995)确定送检样品和试验样品的
重量要求。从装袋种子中，从上至下分 5 层取样，每
层 3 份样品，每份样品 5 ～ 10 g。测定每层样品的净
度和千粒重，以确定扦样具体方法。
1． 2． 3 真实性鉴定 选择饱满、干燥的种子，超声
清洗后，除去种子表面灰尘、杂物，采用感官和显微
镜观察相结合的方法，观察种子的形态特征(形状、
附属物、颜色、大小等)。
1． 2． 4 净度分析 随机取 10 份样品，重量为 2 ～
10 g不等，分开种子和杂质，用感量为 0． 1 mg 的电
子秤称取。结果计算及判定参照《农作物种子检验
规程 净度分析》(GB /T 3543． 3-1995)。
1． 2． 5 重量测定 取 10 份样品，每份样品分 3 次
重复，每个重复随机数出 1000 粒种子，用感量为 0．
1 mg的电子秤称取其重量。结果判定参照《农作物
种子检验规程 其他项目检验》(GB /T 3543． 7-
1995)。
1． 2． 6 水分测定 将种子分别过孔径 20 目和 80
目的标准筛网，初步筛去杂质后备用。取 10 份样
品，每份样品约 5． 0 g。分别采用低温烘干法和高温
烘干法测定。将样品盒烘干、冷却，称重(精确至 0．
001 g，下同)，并记下盒号;将试样放入预先烘干和
称重过的样品盒内，称重。低温烘干法为将样品盒
放入预热至 110 ～ 115 ℃的烘箱，(113 ± 2)℃时开
始计时，每隔 1h取出称重，直至样品盒重量无明显
变化。高温烘干法为将烘箱预热至 140 ～ 145 ℃，待
温度下降并保持在 130 ～ 133 ℃开始计时，烘干 1 h
后取出样品盒称重。样品盒从烘箱取出后，放入干
燥器内冷却至室温(约 15 min)后再称重。结果计
算参照《农作物种子检验规程 水分测定》(GB /T
3543． 6-1995)。
1． 2． 7 发芽率测定 采用单层湿润滤纸做发芽床，
种子置于纸上。每个培养皿 100 粒种子，设置 3 次
重复，进行不同种子处理后，置于光照培养箱中进行
发芽试验，发芽温度设定为 20 ℃。以每日萌发的正
常种子记数，结果计算参照《农作物种子检验规程
发芽试验》(GB /T 3543． 4-1995)。分别采用以下 2
种方式作种子预处理。①不同温度浸种处理。分别
用 20、25、30、35、40、50、60 ℃的温水(水浴锅加热)
浸种 24 h，每个处理取 3 份样品，每份样品 100 粒种
子，放入光照培养箱内中每天记录种子发芽数。②
不同浓度赤霉素溶液浸种处理。分别用浓度为 50
× 10 －6、200 × 10 －6、500 × 10 －6的赤霉素(GA3)溶液
进行浸种处理，每个浓度分别浸种 2、4、6、8、10、24
h，每个处理 4 份样品，每份样品 100 粒种子，放入光
照培养箱内中每天记录种子发芽数。
2 结果与分析
2． 1 种子筛选
用标准筛网筛选种子，结果表明(表 1) ，肉眼可
辨识的种子基本留在了 40、60、80 和 100 目的筛网
中，其余均为杂质和不饱满种子;40 目和 60 目的种
子占过筛种子总重的 95． 76 %，这部分种子的净度、
表 1 粗茎秦艽种子筛选结果
Table 1 Seed quality of G． crassicaulis of different size by sieving through a set of standard sieve
样筛目数
Mesh
number
过筛情况 Sieving
重量比例(%)
Weight
percentage
组成
Constituent
净度(%)
Clarity
千粒重(g)
Thousand
seed weight
水分(%)
Moisture
content
自然发芽率(%)
Percentage
germination
发芽持续时间(d)
Germinating
duration
20 0． 01 杂质 － － － － －
40 62． 19 种子与杂质 99． 11 0． 3691 10． 20 46 ± 3 8
60 33． 57 种子与杂质 94． 89 0． 2813 10． 08 40 ± 3 8
80 1． 30 种子与杂质 9． 18 0． 0489 6． 56 5 ± 3 6
100 1． 11 种子与杂质 6． 57 0． 0229 5． 25 － －
120 0． 95 未见饱满种子 － － 4． 07 － －
140 0． 19 未见饱满种子 － － 4． 00 － －
＞ 140 0． 68 未见饱满种子 － － － － －
213 西 南 农 业 学 报 27 卷
表 2 种子袋中不同取样位置种子的净度和千粒重
Table 2 The clarity and thousand seed weight of seed in different sampling position of one seed bag
取样位置
Sampling position
净度(%)Clarity 千粒重(g)Thousand seed weight
均值 Average 标准差 s 均值 Average 标准差 s
第 1 层 93． 42 0． 008 0． 3318 0． 0041
第 2 层 93． 77 0． 003 0． 3310 0． 0105
第 3 层 94． 96 0． 001 0． 3403 0． 0045
第 4 层 92． 74 0． 007 0． 3277 0． 0105
第 5 层 94． 25 0． 009 0． 3360 0． 0021
注:从上至下进行取样分层。
Note:Sampling seed from top to bottom．
千粒重、水分和自然发芽率均远远高于供试种子的
平均水平。种子收获后至装袋、送检前，建议用 20
和 80 目的标准筛网进行筛种，初步筛除大小明显异
于种子的杂质，可满足生产用种或送检种子的基本
要求，以提高种子净度和净度分析的效率。
2． 2 扦样
以粗茎秦艽种子大小和市场流通情况为依据，
确定种子批的最大重量为 5000 g，送检样品不少于
25 g。如表 2 所示，种子袋中不同位置种子的净度
与千粒重不同，中部样品的净度和千粒重最高，最下
层样品次之，中下部样品最低。因此，种子检验时，
应从种子袋中从上部至底部的不同位置中扦取 5 份
初次样品混合后作为送检样品。
2． 3 真实性鉴定
感官及显微观测表明，粗茎秦艽种子为矩圆形，
宽度约 0． 5 mm，长度约 1． 5 mm;颜色为深红褐色，
有光泽;表皮布满条形网状纹，网纹清晰、凸出成脊;
种脐位于种子基部的尖端，中央微凹，下陷为近似圆
形。
2． 4 净度分析
粗茎秦艽净度分析样品的重量影响净度分析结
果。如图 1 所示，同一批次粗茎秦艽种子样品，随着
试样取样重量的增加，样品重量增失(分析后，样品
各种成分重量之和与原始重量的增加值或差值)比
14
12
10
8
6
4
2
0
重
量
增
失
比
例
（ %
）
Pe
rc
en
ta
ge
of
we
ig
ht
va
ria
tio
n
2 3 4 5 6 7
净度分析样品重量（g）
Sample weight in seed clarity analysis
94
92
90
88
86
84
82
80
净
度
（ %
）
Cl
ar
ity
of
se
ed
重量增失比例
净度
图 1 粗茎秦艽种子净度分析
Fig． 1 Trends of seed clarity of G． crassicaulis as increasing of sam-
ples weight
表 3 粗茎秦艽种子千粒重测定结果
Table 3 Thousand seed weight of G． crassicaulis
试样
Samples
均值(g)
Average
标准差(g)
s
差值与均值之比的最大值(%)
Maximal ratio of the
differences between every two
measurements to the average
1 0． 3332 0． 0039 2． 79
2 0． 3305 0． 0102 2． 54
3 0． 3282 0． 0138 1． 12
4 0． 3338 0． 0051 2． 76
5 0． 3392 0． 0042 2． 98
6 0． 3413 0． 0054 3． 25
7 0． 3330 0． 0035 2． 55
8 0． 3225 0． 0099 3． 18
9 0． 3361 0． 0020 1． 43
10 0． 3359 0． 0019 1． 34
例逐渐下降，净度值则随试样重量的增加而增加。
当样品重量大于 5 g 时，重量增失比例符合 GB /T
3543． 3 中 5 %的要求，可将 5 g 作为净度分析试样
的最小重量。以 5 g 为试样的最小重量，本批次种
子的净度为 92． 11 %，不同测定之间的差距最大为
1． 82 %，符合 GB /T 3543． 3 中不同测定之间容许差
距的规定。
2． 5 重量测定
粗茎秦艽种子微小，不适于采用全量法和百粒
10.8
10.7
10.6
10.5
10.4
10.3
10.2
10.1
10.0
种
子
水
分
（ %
）
Se
ed
m
oi
stu
re
co
nt
en
t
0 1 2 3 4 5 6 7 8
低温烘干时间（h）
Time of heating under 110-115 ℃
图 2 粗茎秦艽种子水分低温烘干测定结果
Fig． 2 Seed moisture content of G． crassicaulis determined by 110 －
115 ℃ heating
3131 期 王 馨等:粗茎秦艽种子检验方法
表 4 不同方法种子水分测定结果对比
Table 4 Seed moisture content of G． crassicaulis determined by two heating methods
测定方法
Methods
种子水分(%)Moisture content
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 均值Average
标准差
s
低温 Low temperature 10． 84 10． 92 10． 94 10． 99 10． 84 10． 88 11． 00 10． 88 11． 22 10． 90 10． 94 0． 12
高温 High temperature 11． 14 11． 15 11． 18 11． 04 11． 16 11． 08 11． 30 11． 24 10． 97 10． 82 11． 11 0． 16
法。如表 3 所示，每份试样的 3 次重复测定中，每两
次重复之间的差值与均值之比的最大值均小于 5
%，说明采用千粒法测定种子重量较为可行。测定
结果表明，供试种子千粒重为(0． 3340 ± 0． 0070)g。
2． 6 种子水分测定
低温烘干法测定中，随着烘干时间的增加，供试
种子被烘出的水分逐渐增加(图 2)。有 90 %的水
分在 0 ～ 2 h烘出，失水增幅较大;从 3 h 开始，供试
种子被烘出的水分增幅逐渐减小;从 6 h 开始，供试
种子的含水量趋于平稳。因此，建议低温烘干时至
少烘干 6 ～ 8 h以上。
依据以上实验结果，采用低温烘干法，将供试种
子烘干 6h 后测定其含水量，结果为(10． 94 ± 0． 12)
%(表 4)。高温烘干法测定中，供试种子的含水量
为(11． 11 ± 0． 16)%，略高于低温烘干法测定的结
果(表 4)。方差分析表明，2 种方法的测定结果不
存在显著差异(P = 0． 008 ＜ 0． 05)，但高温去水分更
彻底，更省时，建议选择高温烘干法测定粗茎秦艽种
子水分。
2． 7 发芽试验
粗茎秦艽种子在不经预处理的情况下，第 16 天
首次发芽，第 24 天结束，发芽持续 8 d，第 16 ～ 20 天
为发芽高峰期，自然发芽率仅为 40 %左右(表 1)。
分别进行温汤浸种和赤霉素浸种的试验，结果如下。
2． 7． 1 温汤浸种 在温汤浸种处理下，供试粗茎秦
艽种子从第 10 天开始发芽，第 28 天发芽结束，发芽
持续 19 d，第 12 ～ 16 天为种子发芽高峰期，发芽率
30
25
20
15
10
5
0
每
日
发
芽
数
目
Nu
m
be
ro
fg
er
m
in
at
ed
se
ed
0 4 8 12 16 20 24 28
发芽时间（d）Time
20 ℃
25 ℃
30 ℃
35 ℃
40 ℃
50 ℃
60 ℃
图 3 不同浸种温度下粗茎秦艽种子发芽情况
Fig． 3 Germination of G． crassicaulis under seed-soaking treatments
at different temperature
为 36 % ～73 %。不同浸种温度处理下的种子发芽
曲线均为单峰型(图 3)。发芽率随温度变化没有明
显规律(图 4)，20 ℃温水浸种发芽率最高，35 ℃温
水浸种次之，60 ℃温水浸种发芽率最低。发芽持续
天数随浸种温度的升高呈“V”型变化趋势(图 4) ，
35 ℃处理发芽持续天数最短，60 ℃处理发芽持续
时间最长。
可将不同浸种温度下的种子萌发动态变化分为
3 种类型:发芽持续时间长;每天发芽数目多;最终
表现为发芽率高。如 20 ℃浸种处理，发芽持续时间
短、每天发芽数目多，表现为发芽集中，发芽率较高;
35 ℃浸种处理，发芽持续时间长，每天发芽数目少，
表现为发芽不集中、发芽率低。
2． 7． 2 赤霉素溶液浸种 在不同浓度赤霉素
(GA3)溶液浸种处理下，供试粗茎秦艽种子从第 10
天开始发芽，第 32 天发芽结束，发芽持续时间 22 d，
第 12 ～ 16 天为发芽高发期，发芽率为 73 % ～ 94
%。如图 5 所示，同一浓度不同浸种时间处理中，50
×10 －6和 200 × 10 －6均为处理 8 h 发芽率最高，500
× 10 －6为处理 2 h发芽率最高。从发芽持续时间来
看，200 × 10 －6赤霉素浸种处理下的种子发芽持续时
间总体较其他 2 种浓度略短;赤霉素浸种 8 h 发芽
持续时间最长，浸种 2 和 24 h发芽持续时间较短。
供试粗茎秦艽种子的发芽动态均为单峰型曲线
(图 5)。其中，50 × 10 －6赤霉素处理下，平均发芽率
为(88． 0 ± 5． 1)%，除浸种 24 h 发芽率明显降低
外，不同浸种时间处理差异不大;200 × 10 －6赤霉素
处理下，平均发芽率为(83． 3 ± 6． 3)%，不同浸种时
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
发
芽
率
（ %
）
Pe
rc
en
ta
ge
ge
rm
in
at
io
n
发芽率
发芽天数
20 25 30 35 40 50 60
图 4 种子发芽率与持续时间随浸种温度的变化情况
Fig． 4 Trends of percentage germination and its duration under dif-
ferent temperature treatments
413 西 南 农 业 学 报 27 卷
40
35
30
25
20
15
10
5
0
每
日
发
芽
数
目
Nu
m
be
ro
fg
er
m
in
at
ed
se
ed
s
0 4 8 12 16 20 24
发芽时间（d）
0 4 8 12 16 20 24 28
发芽时间（d）
0 4 8 12 16 20 24 28
发芽时间（d）
40
35
30
25
20
15
10
5
0
40
35
30
25
20
15
10
5
0
2 h
4 h
6 h
8 h
10 h
24 h
2 h
4 h
6 h
8 h
10 h
24 h
2 h
4 h
6 h
8 h
10 h
24 h
500 ppm200 ppm50 ppm
图 5 不同浓度赤霉素浸种下粗茎秦艽种子发芽动态
Fig． 5 Germination dynamic of G． crassicaulis under three treatments of different GA3 density
表 5 粗茎秦艽种子检验方法
Table 5 Testing methods for seed quality of G． crassicaulis Duthie ex Burk．
项目 Items 方法 Methods
送检 1 年以内的粗茎秦艽种子，分别用 20、80 目筛网筛种后送检;一个送检批次种子的最大重量为 5000 g
扦样 在种子袋中垂直方向不同位置扦取后混合，送检样品不少于 25 g，净度分析试样不少于 5 g
真实性鉴定 感官评定法结合显微观测法
净度分析 参照 GB /T 3543． 3-1995
重量测定 千粒重法
水分测定 高温烘干法(130 ～ 133 ℃，1h)
发芽试验
纸床法，20 ℃。需进行种子处理。20 ℃温汤浸种 24 h，发芽记数时间为 10 ～ 28 d
或 50 × 10 －6赤霉素(GA3)溶液浸种 8 h，发芽记数时间 10 ～ 32 d
间处理的发芽曲线不重合;500 μl /L 赤霉素处理
下，平均发芽率为(82． 6 ± 6． 0)%，浸种 2 和 4 h 处
理的发芽高峰期明显比浸种 6 ～ 24 h 处理的滞后 4
d左右。
3 讨 论
中国栽培药用植物 200 余种，其种子种苗的繁
育、生产和管理远远滞后于农作物，基本为药农自繁
自育，既缺乏相关质量标准，也缺乏专业检验机构
(中国第一个省级药用植物种子质量检验站直至
2007 年才批准成立) ，使得药用植物种子种苗几乎
不参与正规的市场流通，严重制约着产业的发展。
粗茎秦艽与其他 3 种秦艽原植物相比，具有产量及
有效成分含量上的优势，开发价值极高［7］。近年来
粗茎秦艽人工栽培稳定发展，仅云南省的种植面积
就保持在 2000 hm2 左右，支持这些面积的种子基本
处于农户自产自用、无监管流通的状态，种子检验规
程或标准的缺乏已极大影响了种子育苗和种子流
通。
采用初步建立的粗茎秦艽种子检验方法(表
5)，测得供试粗茎秦艽种子的大小较均匀，净度为
92． 11 %，千粒重为 0． 334 g，种子水分为 11． 11 %，
发芽率 88． 0 %。需说明的问题如下:筛种可以便捷
有效地提高粗茎秦艽种子的净度和质量，建议在种
子生产和种子检验中应用;感官判定是真实性鉴定
的重要方法之一，且至今仍是药农及基层农技人员
在生产实践中采用最多的方法之一。有研究表明粗
茎秦艽种子的颜色、形状与大小与秦艽组其他药用
植物有较明显的差异［8］，可以通过感官法进行初步
判定;两种水分测定方法中，高温烘干法快速、去除
水分彻底、误差小，建议在种子检验中使用。同时，
在进行种子分级时，标定水分数值的同时宜注明该
数值相对应的测定方法;秦艽种子的萌发条件研究
较多［9 ～ 10］，多认为适合秦艽种子的发芽温度为 20
℃。不同浸种温度下粗茎秦艽种子的萌发动态可能
与温度对种子抗氧化酶活性的影响有关［11］，尚需进
一步试验加以探讨;本研究给出的种子萌发条件仅
适于云南产粗茎秦艽种子，处理的效果依次为“赤
霉素浸种 ＞温汤浸种 ＞不处理”，即采用 20 ℃温汤
浸种 6 ～ 8 h，或用 50 × 10 －6赤霉素溶液浸种 8 h 的
种子预处理方法，经济高效且便于实施;由于粗茎秦
艽种子细小，生活力测定中染色观察有一定困
难［3］，故本研究未进行生活力测定。
在初步建立粗茎秦艽种子检验方法之后，计划
大量采集有代表性的粗茎秦艽种子样品进行检验，
为粗茎秦艽种子分级提供科学依据，以期制定出科
学完善的粗茎秦艽种子标准。
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(责任编辑 王家银)
613 西 南 农 业 学 报 27 卷