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藏药湿生扁蕾提取物的止泻作用及其急性毒性研究
景 明, 罗永皎, 刘喜平, 蔺兴遥
(甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000)
收稿日期:2010-09-26
基金项目:甘肃省中医药管理局科研课题(07-CZK-50);甘肃省科技支撑计划项目(0804NKCA119-08)
作者简介:景 明(1963—),男,教授,主要从事中药新药的研究开发。Tel:(0931)8765459,E-mail:jm@ gszy. edu. cn
摘要:目的 研究湿生扁蕾提取物(GTP)的止泻作用及其急性毒性,为湿生扁蕾的开发利用提供理论依据。方法 采用
番泻叶诱导的小鼠腹泻模型,以腹泻潜伏期和湿便总数为指标评价 GTP的止泻作用;用 Bliss法测定小鼠灌胃 GTP的半
数致死量(LD50)。结果 GTP各剂量均有止泻作用;GTP 的半数致死量为 127. 4 g /kg。结论 GTP 对番泻叶所致的小
鼠腹泻有明显的对抗作用,表现在腹泻潜伏期延长和在相同时间内累积腹泻次数减少,且具有剂量依赖性;小鼠灌胃
GTP的 LD50 95%可信限为(116. 6 ~ 139. 4)g /kg,其急性毒性较低。
关键词:湿生扁蕾;止泻;急性毒性
中图分类号:R285. 5;R285. 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)06-1049-02
湿生扁蕾为龙胆科扁蕾属植物 Gentianopsis paludosa
(Munro)Ma.的干燥全草,多生长于甘肃、青海、四川、西藏
等藏区林缘草地和高山草地,藏名机合滴,藏医习用。具有
清热解毒、健脾止泻等功能,藏医用全草治疗肝炎、胆囊炎、
热病发斑、目赤肿痛、消化不良、肠胃炎等,用湿生扁蕾制成
的颗粒剂对小儿腹泻有显著的疗效[1]。对湿生扁蕾提取物
的止泻作用及其急性毒性的研究目前尚未见报道。本实验
采用番泻叶诱导的小鼠腹泻模型,以腹泻潜伏期和湿便总数
为指标评价湿生扁蕾提取物的止泻作用,同时测定灌胃给药
的半数致死量(LD50),评价湿生扁蕾的急性毒性,为湿生扁
蕾的临床用药提供实验依据。
1 材料
1. 1 仪器 HWZ10-B 微波干燥机(天水华园制药设备有
限公司);AR-140 电子天平(上海奥豪斯公司);CXT-64-01
电动离心机(北京医疗仪器厂);R-200 旋转蒸发仪(瑞士布
奇)。
1. 2 试药 湿生扁蕾药材采自甘肃省甘南藏族自治州临
潭县冶力关镇,经甘肃省药品检验所宋平顺主任中药师鉴定
为龙胆科植物湿生扁蕾 Gentianopsis paludosa(Munro)Ma.的
干燥全草。
1. 2. 1 湿生扁蕾提取物(GTP)的制备 取湿生扁蕾干燥全
草,粉碎,过三号筛,称取 286 g,加 10 倍量水煎煮 2 次,每次
1. 5 h,滤过,滤液放冷,以 3 000 r /min离心分离 10 min,上清
液备用;药渣加 10 倍量 95%乙醇回流提取 2 次,每次 1. 5 h,
滤过,滤液放冷,以 3 000 r /min 离心分离 10 min,上清液减
压回收乙醇后与水提液合并,微波干燥,粉碎,用 HPLC法[2]
测定提取物中含主要成分木犀草素和 1,7-二羟基-3,8-二甲
氧基酮分别为 2. 93 mg /g和 5. 59 mg /g。在给药前将浸膏
粉用 0. 5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)配成不同浓度的混悬
液作为样品溶液。
1. 2. 2 番泻叶煎剂的制备 取番泻叶 20 g,剪碎,加入 200
mL蒸馏水,加热保持微沸 5 min,滤过,滤液 60 ℃以下减压
浓缩至 20 mL,质量浓度为 1. 0 g /mL。
1. 2. 3 思密达混悬液的制备 取思密达(博福-益普生天津
制药有限公司,批号 s0468)2 g,加入 10 mL 蒸馏水,搅拌使
其混合均匀,质量浓度为 0. 2 g /mL。冰箱冷藏,用时恢复至
室温。
1. 3 动物 SPF 级昆明种小鼠,体质量 18 ~ 22 g,雌雄各
半,由甘肃中医学院科研实验中心提供,实验动物质量合格
证 SCXK(甘)2004 ~ 0006。动物颗粒饲料由北京科奥协力
饲料有限公司提供。
2 方法[3-5]与结果
2. 1 对番泻叶所致小鼠腹泻的影响 昆明种小鼠 50 只,
雌雄各半,按性别、体质量随机分为模型组,阳性对照组,
9401
2011 年 6 月
第 33 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2011
Vol. 33 No. 6
GTP大、中、小剂量组,每组 10 只。模型组灌胃等容量生理
盐水,阳性对照组灌胃给予思密达混悬液(5 g /kg),GTP大、
中、小剂量组分别灌胃 1. 8 g /kg、0. 90 g /kg、0. 45 g /kg。给药
体积均为 0. 2 mL /10 g 体质量。30 min 后分别灌胃给予番
泻叶煎剂(1 g /mL,0. 2 mL /10 g体质量)。将小鼠单个罩于
钢丝网上,网下垫上滤纸,每隔 1 h换垫纸,记录小鼠腹泻潜
伏期以及 6 h 内的湿粪总数。GTP 各剂量组对番泻叶所致
的小鼠腹泻有明显的对抗作用,表现在使腹泻潜伏期延长和
在相同时间内累积腹泻次数减少,而且有一定的量效关系。
结果见表 1。
表 1 GTP对番泻叶所致小鼠腹泻的影响 (x ± s,n =10)
组 别 剂量 /(g /kg) 腹泻潜伏期 /min 湿便总数 /个
模型对照 — 116. 00 ± 18. 88 6. 66 ± 1. 22
GTP低剂量 0. 45 123. 56 ± 19. 88 5. 78 ± 1. 27
GTP中剂量 0. 90 150. 78 ± 24. 19﹡ 4. 22 ± 1. 32﹡
GTP高剂量 1. 80 154. 44 ± 49. 37﹡﹡ 1. 66 ± 1. 45﹡
阳性对照 5. 0 190. 67 ± 21. 05﹡﹡ 0. 88 ± 0. 73﹡﹡
注:与模型组比较,﹡ P < 0. 05,﹡﹡P < 0. 01。
2. 2 半数致死量(LD50)测定 取小鼠 50 只,随机分成 5
组,雌雄各半,给药前禁食,不禁水,各组小鼠灌胃给予不同
质量分数的 GTP 2 次,间隔时间为 6 h,给药后自由饮水,连
续观察 14 d。给药后的第 2 天,各组小鼠均表现为萎靡、竖
毛、拱背、懒动、厌食,第 4、5 组小鼠均出现不同程度的腹泻、
便血、呼吸困难等症状,第 5 组有一只小鼠死亡;第 3 天,第
1、2、3 组小鼠均出现不同程度的腹泻、便血、呼吸困难等症
状,第 3、4 组各有一只小鼠死亡;第 4 天,第 2 组有一只小鼠
死亡。用 Bliss法计算 LD50及 95%的可信限,GTP 小鼠灌胃
给药的 LD50为 127. 4 g /kg,其 95% 的可信限为(116. 6 ~
139. 4)g /kg。结果见表 2。
表 2 小鼠灌胃 GTP的死亡率
组别 鼠数 /只 剂量 /(g /kg) 死亡数 /只 死亡率 /%
1 10 92. 5 0 0
2 10 108. 5 2 20
3 10 127. 4 5 50
4 10 150. 0 7 70
5 10 176. 5 9 90
3 讨论
本实验结果表明,湿生扁蕾提取物对番泻叶所致的小鼠
腹泻有明显的对抗作用。表现在腹泻潜伏期延长和在相同
时间内累积腹泻次数减少。LD50为 127. 4 g /kg,其 95%的可
信限为(116. 6 ~ 139. 4)g /kg。湿生扁蕾提取物有一定毒
性,但毒性较低,表明浸膏口服安全可靠,为湿生扁蕾的开发
提供了一定的理论依据。
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2008:176.
香丹注射液配伍组对小鼠缺氧模型的保护作用
杨超燕, 唐春萍* , 沈志滨, 丘俊文, 陈燕思
(广东药学院 中药学院,广东 广州 510006)
收稿日期:2010-05-18
基金项目:国家科技支撑计划项目(2006BAI08B03-06)
作者简介:杨超燕(1980—),女,实验师,硕士,从事新药开发与研究。Tel:(020)39352181,E-mail:y1c2y@ 163. com
* 通信作者:唐春萍,女,教授,硕士生导师,从事中药新药药理和毒理学研究。Tel:(020)39352180,E-mail :tchp@ tom. com
摘要:目的 观察香丹注射液配伍组对小鼠缺氧模型的保护作用。方法 分别采用常压缺氧、亚硝酸钠中毒和异丙肾上
腺素性心肌缺氧 3 个缺氧模型,观察香丹注射液 ADE配伍组对缺氧小鼠存活时间的影响。结果 香丹注射液 ADE配伍
高、中、低剂量组(32、16、8 g生药 /kg)能明显延长小鼠常压缺氧存活时间,对亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间无影响,香丹
注射液 ADE配伍高剂量组对异丙肾上腺素所致心肌缺氧小鼠的存活时间具有延长作用。结论 香丹注射液 ADE配伍
组有增强小鼠耐缺氧能力的作用。
关键词:香丹注射液;耐缺氧;存活时间
中图分类号:R285. 5 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)06-1050-03
0501
2011 年 6 月
第 33 卷 第 6 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
June 2011
Vol. 33 No. 6