全 文 ：正交设计法研究湿生扁蕾药效成份的优化提取工艺
屠兰英1 ,曹长年1 ,赵启英2
(1.青海大学化工学院应用化学系 ,青海 西宁　810016;2.青海省海南州医院 ,青海 共和　813000)
摘　要:运用正交设计法研究了湿生扁蕾中齐墩果酸的提取工艺 ,通过实验确定出了最佳的提取工艺条件.
关键词:正交设计法;湿生扁蕾;齐墩果酸
中图分类号:R282.71　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1001-7542(2005)01-0069-02
湿生扁蕾为龙胆科扁蕾属植物(Gentianopsispacedosa(manro)Ma),也叫沼生扁蕾产于西藏 、青海 、四
川等地 ,一年生草本 ,生于海拔 1180-4600米的河滩 、沼泽地 、山坡草地[ 1] .湿生扁蕾全草入药 ,具有镇
咳 、止痛 、清热解毒 、理湿消黄 、健脾止泻等功能.是民间藏医用于治疗肝炎 、胆囊炎 ,热病发斑 ,目赤肿
痛 ,消化不良 ,胃肠炎等单方草药 ,疗效显著[ 2] .为了制定出最佳的提取工艺 ,特作如下实验.
1　原料与仪器
湿生扁蕾全草 ,采自青海省大通县老爷山 ,阴干粉碎;齐墩果酸对照品(青海省药品检验所提供);
722型分光光度计 ,上海第三分析仪器厂.
2　实验
2.1　正交实验设计
经查阅各种资料[ 3～ 6]研究决定 ,拟订三种因素 ,每种因素选择三个水平 ,见(表1),按 L9(34)正交实
验设计(表 2),对湿生扁蕾进行回流提取实验.
表 1　因素水平表
A乙醇浓度(%) B回流时间(h) C溶济量(倍)
1 65 1(3次) 10
2 75 2(3次) 8
3 85 3(3次) 6
C溶剂量(倍)———药材重的倍数
2.2　实验
取湿生扁蕾全草 ,切成大致 1cm 左右的小段 ,分别称取 150g ,按表 1选择的因素和水平 ,用乙醇回
流提取3次 ,回收乙醇提取液 ,再用水沉法除去叶绿素等杂质 ,加蒸馏水 ,使体积为 300ml ,即每 1ml水
浸提取液相当于原药材 0.5g .最后 ,测定齐墩果酸的含量.
2.3　实验结果
根据实验所得数据 ,进行了数据处理及分析 ,见表 2所示。根据 R 值可判断出各因素对湿生扁蕾
中齐墩果酸含量的影响由A 、B 、C顺序递减 ,同时 ,根据方差分析理论 ,得到方差分析结果见表 3.结果
表明 ,因素 A对提取工艺影响非常显著(P <0.01);因素 B 对提取工艺影响显著(P <0.05).由于因素
水平数≥3时 , F 检验显著 ,并不一定所有的水平之间差异都显著 ,因此 ,必须进行多重比较 ,作 T 检验.
结果见表 4 、表 5.由表 4 、表 5可见 ,回流提取 2小时与 3小时之间无显著差异 ,但回流提取 2小时 、3小
基金项目:教育部 2001年度科学技术研究重点项目《藏药湿生扁蕾研究与开发》(01131),项目号:教育部 01131.
收稿日期:2004-09-01
作者简介:屠兰英(1969-),女(汉族),天津人 ,青海大学讲师.
2005年
第 1期 　　　 　　　　　
青海师范大学学报(自然科学版)
Journal of Qinghai Normal University(Natural Science)　　 　　　　　　
2005
No.1
DOI :10.16229/j.cnki.issn1001-7542.2005.01.019
时显著优于提取 1小时;75%和 85%乙醇之间无显著差异但 75%和 85%乙醇极显著于 65%的乙醇 ,因
此 ,湿生扁蕾提取有效成分齐墩果酸的最佳工艺条件为 A2B2C1.
表 2　L9(34)正交实验及实验结果(n=2)
1
A(%)
2
B(h)
3
C(倍) 4 齐墩果酸含量 X1(f/ L)
1 1 1 1 1 1.5801
2 1 2 2 2 1.7765
3 1 3 3 3 1.6821
4 2 1 2 3 1.9947
5 2 2 3 1 2.3781
6 2 3 1 2 2.2361
7 3 1 3 2 2.0371
8 3 2 1 3 2.3161
9 3 3 2 1 2.1389
K 1 5.0387 5.6119 6.1323 6.0971
K 2 6.6089 6.4707 5.9101 6.0497
K 3 6.4921 6.0573 6.0971 5.9929
K 21 25.3885 31.4934 37.6051 37.1746
K 22 43.6776 41.8710 34.9293 36.5989 G=∑ X1=18.1397
K 23 42.1474 36.6885 37.1771 35.9149 CT=G2/ 9=36.5610
R 111.2135 110.0529 109.7115 109.6884
Q 37.0712 36.6843 36.5705 36.5628
S 0.5102 0.1233 0.0095 0.0018
R=K 21+K 22+K 23;S=Q-CT;Q=R/ 3
表 3　方差分析表
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F 值 显著性
A 0.5102 2 0.2551 283.44 ▲▲
B 0.1233 2 0.0617 68.56 ▲
C 0.0095 2 0.0048 5.33
e(误差) 0.0018 2 0.0009
总和 0.6448 8
　　F-0.01(2.2)=99.0;　　F-0.05(2.2)=19.0
T 检验:查得 q0.05(3.2)=8.33 , q0.01(3.2)=19.02 ,所以 T0.05=0.1441 , T0.01=0.3290用 T 值与各水平因
素差值的平均数进行比较 ,结果如下:
表 4　A因素T 检验表
K 2 K 3 K 1
K 2
K 3 0.0389
K 1 0.5234▲▲ 0.4845▲▲
表 5　B因素 T检验表
K 2 K 3 K 1
K 2
K 3 0.1379
K 1 0.2863▲ 0.1484▲
3　结论
3.1　从表 2 、表 3 、表 4 、表 5可见 ,湿生扁蕾提取有效成分齐墩果酸的最佳工艺条件为 A2B2C1.即用
75%乙醇 ,每次回流提取 2小时 ,共提 3次 ,乙醇用量为药材重量的 10倍.
3.2　提取工艺中各因素对湿生扁蕾中齐墩果酸含量的影响由 A 、B 、C顺序递减 ,即按乙醇浓度 、回流
时间 、溶剂用量顺序递减.其中 ,因素 A对提取工艺影响非常显著(P <0.01);因素 B 对提取工艺影响显
著(P<0.05).
(下转第 87页)
70　　　　　　　　　　　　　　青海师范大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　　2005年
监护 ,来保证训练的顺利进行.
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Bionchemistry guide of the middle distance
race sportoman in the plateall
DINGLi
(Physial Education Department , Qinghai Normal University ,Xining 810008 , China)
Abstract:This text , through to the blood of fifteen middel-distance race sportmen in the high level of normal
university of Qinghai change before and after training during training intermittently , Observe plateau-plateau train
and pigeonhole accumulate , influence of leucocyte to red blood corpuscles , hemoglobin , red blood corpuscles inter-
mittently.
Key words:train intermittently in the plateau-the plateau ;occupy the plateau generation;RBC;WBC;Hct;
Hb
(上接第 70页)
3.3　湿生扁蕾是作为优良的藏医药材 ,具有疗效好 、副作用小 、绿色无污染等特点.本实验在工艺技术
上为它的开发和生产提供了理论依据.
参考文献:
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Reseach the best extactive technology of the medicinal effect
chemistry about gpaludosa(Munrog)using orthogonal design
TU Lan-ying1 , CAO Chang-nian1 , ZHAO Qi-ying2
(1.Department of Applied Chemistry ,Qinghai University ,Xining 810016 ,China;
2.The Hospital of Hainan administrative division of Qinghai province ,Gonghe 813000 ,China)
Abstract:To study the extraclive technology of extra oleanolic acid f rom paludosa(Munro)using orthogonal de-
sign and the best condition of extraclive technology is delermined by experiments.
Key words:orthogonal design;paludosa(Munro);oleanolic acid
87第 1期　　　　　　　　丁莉:高原断续训练对中长跑运动员生化指标的影响