全 文 ：　　　　 　　天然产物研究与开发　 　　　　　
　　　　　　　　　　 NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT 2005　Vol.17　No.5
　
　
　
　
　　收稿日期:2004-09-13　　　接受日期:2004-12-06
　＊通讯作者 Tel:86-411-84379061
藏药湿生扁蕾有效成分抑菌作用初探
王焕弟 ,谭成玉 ,白雪芳 ,杜昱光＊ ,林炳承
(中国科学院大连化学物理研究所 ,大连 116023)
摘　要:利用 K-B纸片扩散法和生长速率法分别研究了从湿生扁蕾中得到的 6个化合物对细菌和真菌的抑制作
用。结果表明:6个化合物对供试菌有一定的抑制作用。其中 1 , 7-二羟基-3 , 8-二甲氧基口山酮对毛霉 , 辣椒疫
霉 ,瓜类枯萎病菌的抑制率分别达到 58.3%, 51.4%, 50.7%。
关键词:湿生扁蕾;抑菌
中图分类号:O621.29;Q946.91
Antimicrobial Activity of Constituents from the Herb of
Gentianopsis paludosa
WANG Huan-di ,TAN Cheng-yu ,BAI Xue-fang ,DU Yu-guang＊ , LIN Bing-cheng
(Dalian Institute of Chemical Physics , Chinese Academy of Sciences , Dalian 116023 , China)
Abstract:To study the antimicrobial activity of the constituents isolated from the herb of Gentianopsis paludosa , K-B paper dif-
fusion and mycelial growth rate methods were used to determine antibacterial activity and antifungal activity , respectively.The
constituents showed inhibitory effects on the tested microbe.The inhibitory rates of 1 , 7-dihydroxy-3 , 8-dimethoxyxanthone on
Mucoraceae , Phytophthora capsici , Fusarium oxysporum were 58.3%, 51.4%, 50.7%, respectively.
Key words:Gentianopsis paludosa;antimicrobial activity.
　　湿生扁蕾(Gentianopsis paludosa Ma)为龙胆科扁
蕾属植物 ,具有清热解毒的功效 ,主治急性黄疸性肝
炎 ,结膜炎 ,高血压 ,急性肾盂肾炎 ,痔疮肿毒 ,藏医
用全草治疗流行性感冒及胆病引起的发烧。由湿生
扁蕾制成的冲剂对小儿腹泻有显著的疗效。在抗癌
药物筛选中发现 ,湿生扁蕾有比较稳定的抑制动物
体内 S180肉瘤及其它瘤株生长的作用[ 1] 。
我们对湿生扁蕾全草进行了系统的研究 ,分离
得到了化合物 F1-F6[ 2] 。这 6个化合物中 ,人们对化
合物F4 ,F5的抑菌作用研究的比较多 ,但主要集中
在对人类致病菌的研究上 ,对植物致病菌的研究则
很少;其余化合物抑菌方面研究更为少见。本文主
要对这 6个化合物抑制植物致病菌(除金黄色葡萄
球菌外)的作用进行初步探讨 。
1　实验材料
1.1　菌种(本实验室保存)
1.1.1　细菌　枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),白菜
软腐病菌(E.carotovora), 柑桔溃疡(Xanthomonas
campestris Pv.citri), 金黄色葡萄球菌(Staphlococcus
aureaus)。
1.1.2　真菌　毛霉(Mucoraceae),辣椒疫霉(Phytoph-
thora capsici),玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum),瓜
类枯萎病菌(Fusarium oxysporum),番茄早疫病菌(Al-
ternaria solani),烟草炭疽(Tobacco anthracnose)。
1.2　药物
1 ,7-二羟基-3 , 8-二甲氧基口山酮(F1),1-羟基-3 ,
7 ,8-三甲氧基口山酮(F2),1 , 8-二羟基-3 , 7-二甲氧基
口山酮(F3),齐墩果酸(F4),熊果酸(F5),木犀草素-7-
O-β-D-葡萄糖苷(F6)均为本实验室从湿生扁蕾中分
离得到 。
1.3　培养基
琼脂粉:北京奥博星生物技术责任有限公司 。
598
DOI :10.16333/j.1001-6880.2005.05.018
2　实验方法
2.1　实验药液的制备
2.1.1　抑制细菌的药液
分别取各化合物溶于 DMSO中配成5 mg/mL的
药液备用 。
2.1.2　抑制真菌的药液
分别取化合物 F1 ,F2 ,F4与等量的阿拉伯明胶
粉混合研磨后 ,加到灭菌后的 PDA 固体培养基中 ,
配成 1 mg/mL的悬浊液。
2.2　K-B纸片扩散法
制备 LB 培养基[ 2] ,将细菌菌种在 LB 液体培养
基中活化后 ,以无菌操作用移液枪移取致密平铺到
平板表面 ,将在药液中浸泡过的滤纸片(直径 6 mm)
贴到培养基上 ,用 DMSO 浸泡过的滤纸片作对照 。
在温箱中培养 24 h(金黄色葡萄球菌在 37 ℃下培
养 ,其余菌株 28 ℃培养),观察并测量抑菌圈直径 。
2.3　生长速率法
制备PDA培养基[ 3] ,将不含药物的 ,含药物的和
阿拉伯明胶粉的培养基分别平铺在平板上 ,上述真菌
菌种活化后 ,在无菌条件下 ,将供试菌种用直径 6 mm
的打孔器打出一定数量的菌饼。将菌饼移至培养基
上 ,菌丝面朝下 ,每皿中央放一块菌饼 ,置 28 ℃温箱中
培养。将不含药物的培养基作为对照。待对照皿中菌
落长满皿时 ,测量其余处理的菌落直径 ,求出抑菌率。
　抑菌率=对照皿中菌落直径-处理皿中菌落直径对照皿中菌落直径-打孔器直径 ×100%
3　结果
　　1)阿拉伯明胶粉对供试细菌和真菌都无影响 。
2)在此实验的浓度下 ,除 F2 ,F3外 ,各成分对供
试的细菌都有比较明显的抑制作用 。其中 F1对各
细菌的抑制作用最为显著。F2只对枯草芽孢杆菌
有微弱的作用 ,而 F3则只对枯草芽孢杆菌和金黄色
葡萄球菌有抑制作用(表 1)。
3)在对真菌的作用中 , F1 的抑制作用最为显
著 ,对毛霉 ,辣椒疫霉 ,瓜类枯萎病菌的抑制作用都
达到50%以上 。F2 ,F4对辣椒疫霉 ,番茄早疫病菌
没有作用 ,同时 ,F4对烟草炭疽无抑制作用(表 2)。
表 1　湿生扁蕾有效成分抑制细菌的作用(直径mma)
Table 1　Antibacterial activity of the constituents from Gentianopsis
paludosa(Diameter mma)
Bacillus
subtilis
E.carotovora Xanthomonas
campestris Pv.citri
Staphlococcus
aureaus
F1 2.5±0.5 2.3±1.0 1.8±0.8 5.8±0.3
F2 0.5±0.1 - - -
F3 0.4±0.1 - - 1.0±0.2
F4 1.5±0.5 0.6±0.2 1.1±0.5 0.5±0.2
F5 0.9±0.1 0.7±0.2 0.7±0.4 0.3±0.1
F6 1.5±0.3 1.7±0.6 2.1±0.7 1.4±0.6
　　注:a三次平均值;“ -”无作用
　　Note:a The average of three experiments;“ -”no inhibition
表 2　湿生扁蕾有效成分抑制真菌的作用(抑制率% a)
Table 2　Antifungi activity of the constituents from Gentianopsis paludosa (The inhibitory rate %a)
Mucoraceae
Phytophthora
capsici
Exserohilum
turcicum
Fusarium
oxysporum
Alternaria
solani
Tobacco
anthracnose
F1 58.3±0.4 51.4±0.9 36.5±0.3 50.7±1.0 37.2±2.6 38.2±1.3
F2 6.9±1.9 - 13.5±1.6 8.3±1.1 - 18.2±2.7
F4 16.4±0.9 - 12.2±1.4 21.9±2.1 - -
　　注:a三次平均值;“ -”无作用　Note:a The average of three experiments;“ -”no inhibition
4　讨论
　　从表1 和 2可以看出 , 6个化合物对供试菌有
一定的抑制作用 ,其中 1 ,7-二羟基-3 ,8-二甲氧基口山
酮的作用最明显 。供试菌中除金黄色葡萄球菌外都
为植物致病菌 ,这就提示了湿生扁蕾对一些植物致
病菌有一定的抑制作用。
参考文献
1　 Zhang BC(张宝琛), Zhen RD(甄润德),Hu BL(胡柏林),
et al.Study on the chemical constituents from Gentianopsis
paludosa.Chin Tradit Herb Drugs(中草药), 1980 , 11:149-
151
2 　Wang HD(王焕弟), Tan CY(谭成玉), Du YG(杜昱光), et
al.Study on the chemical constituents from the herb of Gen-
tianopsis paludosaⅠ .China J Chin Mater Med(中国中药杂
志), 2004 , 11:1055-1056
3　 Fang ZD(方中达).Research Methods of Plant Pathology(植
病研究方法).Beijing:China Agricultural Press , 1996.46-48
5992005　Vol.17　No.5 王焕弟等:藏药湿生扁蕾有效成分抑菌作用初探