全 文 :198 《求医问药》下半月刊Seek Medical And Ask The Medicine 2012 年第 10 卷 第 3 期
蒙药材珍珠杆为蔷薇科植物库页悬钩子木(Rubus Sachalinensis
Leveile)的干燥茎枝,蒙古名为“博格日乐吉根”和“杆达嘎日”,其来源较为
混乱,目前所用品种有报道为5科22种,也有报道为5科14种。该药具有止咳、
发汗、解除表证和调理元气等功效,临床上常用于治疗感冒、气喘、肺热咳
嗽、瘟疫、未熟热、讧热和赫依热烦躁等疾病。目前有很多关于该药的性状
鉴别、理化鉴别以及紫外光谱鉴别等方面的研究,然而在抗菌活性的研究
却鲜有报道。因此,加强对该药材的抗菌生物活性的研究,可有助于确定蒙
药材悬钩子木的生物活性,对药材及其制剂质量标准的制定和制剂工艺的
研究具有指导意义,并有助于从现代生物医学的角度阐释其主治和功效。
1 实验材料、试剂和仪器
1.1 实验材料
试验所用材料库叶悬钩子木于2010年8月采自内蒙古通辽地区,原植
物由内蒙古民族大学包保全教授鉴定为蔷薇科植物库页悬钩子木
(RubusSachalinensisLeveile)的干燥茎枝。
1.2 仪器和试剂
实验所用仪器有电子天平e=10d(赛多利斯科学仪器有限公司)、酒精
计(国营武强仪表厂)、回流提取装置、旋转蒸发仪(日本东京理化公司
EYELA)、琼脂平板等,所用试剂有甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正
丁醇等。
2 方法与结果[4-10]
2.1 提取与分离
2.1.1 取适量库页悬钩子木干燥茎枝,将其研磨粉碎成粉末状,用电
子天平准确称取药材粉末5.0g。
2.1.2 用95%乙醇回流提取1次。
2.1.3 用75%乙醇回流提取3次。
2.1.4 浓缩醇溶液,得到粗体物浸膏。
2.1.5 在粗体物浸膏中加水使之悬浮,依次用相等体积的石油醚、氯
仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次。
2.1.6 减压回收溶剂,将所剩水层进行浓缩后,上聚酰胺色谱柱。
2.1.7 依次用水、甲醇-水(1:1)、甲醇洗脱。
2.1.8 减压回收溶剂,得到不同极性的提取物。
2.2 筛选抗菌活性
用无菌接种环取测试菌液,菌液中包含的菌种有金黄色葡萄球菌、大
肠杆菌、乙型破伤寒菌、变形杆菌、绿脓杆菌、乙群链球菌、新隐球菌、白念
球菌等,将所取菌液均匀涂布于整个琼脂平板上,然后取一定量的药材提
取物加到滤纸片上,待琼脂平板上菌液稍干后,用灭菌镊子夹取干燥的药
物滤纸片,并将其放置于琼脂平板上,再将琼脂平板放置于温度为37℃的
恒温培养箱中,在24h之后,观察在滤纸片周围留下的抑菌圈的大小,若抑
菌圈愈大,则提示该提取物对测试菌的最低抑制浓度MIC愈小。最后对其进
行青霉素和链霉素的阳性对照试验,被测组分是石油醚层组、氯仿层组、乙
酸乙酯层组、正丁醇层组、90%乙醇层组、50%乙醇层组以及水层组。
2.3 抗菌实验结果
抗菌实验结果详见表1,从表1可以看出乙酸乙酯层对金黄色葡萄球
菌、乙型破伤寒菌、新隐球菌、白念球菌等具有明显的抗菌作用,50%乙醇层
对金黄色葡萄球菌、新隐球菌、白念球菌等具有明显的抗菌作用,此外正丁
醇层和90%乙醇层对新隐球菌和白念球菌也具有一定的抗菌作用。
3 结束语
本实验针对国内对蒙药材库页悬钩子木在抗菌活性方面研究的缺乏,
选择常用的悬钩子木,对其进行了提取和分离,并进行了抗菌活性的筛选,
确定了库页悬钩子木在抗菌方面的作用,为医学临床实践提供了较为客观
真实的参考依据,并对药材及其制剂质量标准的制定和制剂工艺的研究提
供指导。
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蒙药材库页悬钩子木抗菌活性的研究
格根塔娜(硕士研究生) 张 屏(副教授) 包保全(教授)通讯作者
(内蒙古民族大学 028000)
【摘要】 目的 探究蒙药材库页悬钩子木在抗菌方面的活性。方法 选取适量的干燥库页悬钩子木茎枝,将其粉碎后,称取5.0g药材粉末,再
对其进行提取和分离,以得到不同极性的提取物,最后在37℃的恒温培养箱中进行抗菌活性的筛选。结果 乙酸乙酯层、50%乙醇层、90%乙醇层和正丁醇层
均具有不同程度的抗菌作用。结论 蒙药材库页悬钩子木具有一定的抗菌作用,本实验为临床用药提供了较为客观真实的参考依据。
【关键词】 库页悬钩子木;抗菌活性;提取物
【中图分类号】R282.7+5 【文献标识码】A 【文章编号】1672-2523( 012)03-0198-01
菌种
样品
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 乙型破伤寒 变形杆菌 绿脓杆菌 乙群链球菌 新隐球菌 白念球菌 样品浓度
(mg/ml)
空白 — — — — — — — — 0
石油醚层 — — — — — — — — 57
氯仿层 — — — — — — — — 60
乙酸乙酯层 ++ — ++ — — — ++ ++ 37
正丁醇层 — — — — — — + + 19
90%乙醇层 — — — — — — + + 18
50%乙醇层 ++ — — — — — ++ ++ 41
水层 — — — — — — — — 68
青霉素 ++ ++ ++ ++ — — — — 5.12
链霉素 — ++ ++ ++ ++ ++ — — 5.12
表1 抗菌实验结果