全 文 ：基金项目：农业部中央级公益性科研院所基本科研专项资助。
第一作者简介：于旭东，男，1973年出生，四川三台人，在读植物学博士，讲师。通信地址：571737海南省儋州市，海南大学农学院。Tel：0898-23307258，
E-mail：doeast@163.com。
通讯作者：时涛，男，博士，从事植物病理学研究。通信地址：571737海南省儋州市，中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。。
收稿日期：2009-02-19，修回日期：2009-03-22。
海南肾茶病原根结线虫的鉴定
及对其寄主生长的影响
于旭东 1，裴佐蒂 1，吴繁花 1，刘先宝 2，时 涛 2
（1海南大学农学院热带植物资源保护利用实验室，海南儋州 571737；
2中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，海南省热带农业有害生物检测监
控重点实验室，海南儋州 571737）
摘 要：了解海南肾茶根结线虫的种类、特征及其对肾茶生长的影响。从感染线虫的肾茶根系中分离线
虫的雌虫、雄虫与幼虫，用显微镜观察描述线虫特征并对照线虫特征图样进行鉴别。通过致病性实验
研究线虫对肾茶生长的影响，并通过肾茶的长势、叶绿素、蛋白质含量等指标来评价。分离得到了海南
肾茶的根结线虫，并成功进行了致病性实验。实验所用海南肾茶感染的线虫为南方根结线虫
（Meloidyne incognita.）。线虫严重影响肾茶的生长发育，使肾茶植株长势不良甚至死亡，重要代谢物质
如蛋白质、叶绿素a含量明显下降。
关键词：根结线虫；海南肾茶；种类鉴定；生长发育
中图分类号：S4 文献标识码：A
Appraisal on the Pathogenic Root-Knot Nematode in Clerodendranthus Spicatus. (Thunb.) C.Y.Wu
and the Influence Which Grows to Clerodendranthus Spicatus. (Thunb.) C.Y.Wu .
Yu Xudong1, Pei Zuodi1, Wu Fanhua1, Liu Xianbao2, Shi Tao2
(1The Laboratory of Tropical Rare Plants Resources Development and Utilization,
College of Agronomy, Hainan University, Danzhou Hainan 571737;
2Hainan Province Key Laboratory for Tropical Agricultural Pest Detection and Monitoring,
Environment and Plant Protection Institute, CATAS, Danzhou Hainan 571737)
Abstract: Understand the type and characteristic of the Root-Knot Nematode in C. spicatus. (Thunb.) C.Y.Wu
and the influence which grows to C. spicatus. Separates the Root-Knot Nematode’s female and male and larva
from root system which C. spicatus. were infected with the Root-Knot Nematode, view and describe the
Root-Knot Nematode’s characteristic under a microscope and discern the type through compares the
Root-Knot Nematode’s characteristic pattern. Study the influence of growth which C. spicatus. Infected the
pathogenic experiment and marked an objective appraisal through viewing C. spicatus.’s growing trend and
setting-out content of the chlorophyll and protein. Separated and get C. spicatus. (Thunb.) C.Y.Wu.’s
Root-Knot Nematode, and had succeeded in doing the pathogenic experiment. The Root-Knot Nematode in C.
spicatus. (Thunb.) C.Y.Wu was the Meloidyne incognita.. It was serious interfere with C. spicatus.’s growth. C.
spicatus. was doing bad even died, the important metabolism material like protein and chlorophyll’s content
was obvious drops.
Key words: Root-Knot Nematodes, Clerodendranthus Spicatus, survey type, growth
中国农学通报 2009,25(10):197-201
Chinese Agricultural Science Bulletin
中国农学通报 http://www.casb.org.cn
0引言
海南肾茶[Clerodendranthus spicatus. (Thunb.) C.Y.
Wu]属唇形科、肾茶属多年生草本植物。因其雄蕊细长，
酷似猫的胡须，又名猫须草。肾茶原产于印度尼西亚、
缅甸、马来西亚、菲律宾等热带地区。中国有两个种，其
中一种在海南[1]。民间用肾茶作为药物的历史十分悠
久，现代研究表明：肾茶具有利尿、排石、抗菌、消炎、健
肾、改善慢性肾功能衰竭和提高机体免疫力等7项医疗
保健作用[2]。因此肾茶的开发利用前景十分广阔。
近年来，笔者一直从事海南肾茶的繁育和栽培驯
化研究，在栽培过程中发现线虫对肾茶的危害相当严
重，这将制约肾茶的产业化发展。经文献检索，在国内
外未见相关肾茶根结线虫的报道，因此笔者于2006—
2008年在海南大学农学院和中国热带农业科学院植
物资源与保护研究所进行了海南肾茶根结线虫研究。
1 材料与方法
1.1 线虫的分离鉴定
1.1.1 样本的采集 感染线虫的肾茶采自于海南大学儋
州校区农学院苗圃和海南大学儋州校区南区；样本采
集时间为早晨9:00—10:00；采集部位为感染线虫的肾
茶的根部及其根际土壤。
1.1.2 分离方法
雌虫：在解剖镜下直接用解剖针挑取。
雄虫：方法一，取感病植株，除去茎叶，将根洗净，
直接浸泡于大烧杯中，2~3天后将浸泡液离心即可。
方法二，将洗去表面土粒的病根，直接放在盛有适量水
的培养皿内，置于解剖镜下，用粗解剖针细心撕破发病
组织，可以见雄虫离开病组织进入水中，用毛细吸管吸
取雄虫。
二龄幼虫：分离二龄幼虫可使用浅盘法或漏斗
法。浅盘法：洗净染病根部组织，剪取有根结的部位切
成小段置于培养皿，放水浸没24 h即可。漏斗法：取一
根橡皮管，一头用夹子夹住，另一端连接漏斗，漏斗底
部垫上纱布。洗净根部组织，剪取有根结的部位切成
小段置于漏斗，放水浸没，用烧杯收集。
虫卵：雄虫分离方法二和分离二龄幼虫的浅盘法皆可。
1.1.3 制作会阴花纹 在显微镜下，用解剖刀在虫体背
部后半部切下大约 1/4，用解剖针将虫体转移至乳酸
中，并用解剖针清除虫体内的物质，再将虫体转移至另
一洁净的乳酸中，重复清洗，将处理好的虫体放在纯甘
油中，切口向下，盖上盖玻片即可[3]。
1.1.4 种类鉴定 主要利用线虫的结构特征来鉴定线虫
的种类。主要参考结构特征为：
雌虫：体长、体宽、颈长、颈宽、口针长、口针基部球
高、口针基部球宽、阴门裂长、背食道腺开口至口针基
部球的距离。
雄虫：体长、最大体宽、头区高、头区宽、口针长、背
食道腺开口至口针基部球的距离、交合刺长。二龄幼
虫：体长、最大体宽、口针长、尾长、尾端透明区长。
1.2 根结线虫对肾茶的致病性实验
1.2.1 样本采集 所用肾茶采自于海南大学儋州校区农
学院苗圃和海南大学儋州校区南区。取枝条用于扦插
繁殖得到实验苗。
1.2.2 实验方法 以V(粘土)∶V(粗砂)∶V(牛粪)∶V(木灰)=
5∶3∶1∶1配制营养土，置于灭菌锅（120℃，5 min）中杀死
土中线虫。再将培养土放置于特制木箱中，肾茶枝条
剪成 12~15 cm长茎段并以合适的密度种植于木箱。
14天后，在半数的木箱中撒播含有线虫的土壤和剪碎
的根结。75天后测量各生长指标。游离蛋白质含量
的测定采用考马斯亮蓝法[4]。叶绿素含量采用分光光
度法测定[4]。
2 结果
2.1 鉴定结果
根据所测得的数据推断出感染海南大学儋州校区
肾 茶 的 根 结 线 虫 为 南 方 根 结 线 虫（Meloidyne
incognita.）。
2.1.1 数据测量结果 通过测量得到雌虫（♀♀，n=
20）、雄虫(♂ ♂ ，n=5)、二龄幼虫(J2，n=20)的相关数
据如表1，并与文献记载的南方根结线虫数据相比较，
得出此根结线虫为南方根结线虫。
表1 实验数据与文献数据比较
特征
体长
体宽
头区高
头区宽
颈长
颈宽
雌虫
实验数据/μm
774.5
470.6
284.7
140.2
文献数据/μm
581~655
376.4~426.0
223.5~168.2
131.5~110.8
雄虫
实验数据/μm
1433.6
38.6
4.2
12.3
文献数据/μm
1366~1939
33.6~38.7
5.6~7.0
11.2~12.8
二龄幼虫
实验数据/μm
438.5
21.8
文献数据/μm
392~449.5
14.4~15.6
·· 198
2.1.2 形态描述 显微观察肾茶根结线虫的雌虫、雄虫、
二龄幼虫的形态特征如表 2，并与文献记载的南方根
结线虫形态特征相比较[5]，进一步证实了上述鉴定结
果。参见图1~图3。
特征
口针长
口针基部球高
口针基部球宽
背食道腺开口至口
针基部球的距离
阴门裂长
交合刺长
尾长
尾端透明区长
雌虫
实验数据/μm
15.7
2.4
4.8
3.8
21.6
文献数据/μm
13.7~15.8
1.6~1.9
3.6~4.7
3.2~4.4
19.1~24.0
雄虫
实验数据/μm
20.0
3.4
32.7
文献数据/μm
24.5~22.1
1.8~3.7
32.4~36.6
二龄幼虫
实验数据/μm
14.3
48.5
13.2
文献数据/μm
11.0~12.6
47.0~54.4
11.6~14.9
注：文献数据来源于刘志维主编的植物线虫志（中国农业出版社，2004）[5]。
表2 实际观察描述与文献描述比较
虫态
实 验
观察
文 献
描绘
雌虫
虫体膨大为梨形或球形，颈部与虫体分界明显，虫体为梨形则颈
部长，虫体为球形则颈部短。唇区稍凸起。口针较长，为15.7
(11.3~18.0) μm，口针锥体尖端细尖，向后逐渐变粗。口针基球
纵向短，横向长，横向长度是纵向长度的2倍。不同个体之间会阴
花纹变化较大，会阴花纹背弓高。外围线纹细密规则，肛门与阴
门周围的文线则呈波浪状，在侧区上的纹线有分叉。
虫体膨大呈球形，头区窄，口针短，为14.6（13.3~15.3）μm，口针
锥体尖端钝尖，向后逐渐变粗。口针基部球横向很宽，纵向窄，横
向长度是纵向长度的2.5（2.1~3.5）倍。会阴花纹有明显高而方
的背弓，由平滑到波浪形的线文组成。一些线文在侧面分叉，但
无明显的侧沟，经常有些弯向阴门的线纹
雄虫
虫体长，头端较细，后部较粗。头冠与
头区分界明显，头冠区有凹陷，头区常
有2~3条不完全的环纹。口针锥体部
尖端钝圆，基杆部位圆柱形，基部球
圆。背食道腺口距口针基本球的距离
相对较短，为3.2 μm。虫体尾部圆，
交合刺一对。
唇盘大而圆，中部平或凹陷，头区常有
2~3条不完全的环纹，有的个体环纹不
明显。被食道腺开口距口针基本球的
距离较短（2~4 μm）
二龄幼虫
虫体细短，头区较窄，头冠不明
显。多数虫体直肠膨大明显。
尾较长，尾透明末端界限明显，
长度变化较大。尾端有缢缩，
尾尖尖圆或钝圆。
虫体中前部宽，向两端变细，尾
端最短。头冠明显，头区与虫
体界限不明显。口针纤细，口
针基球小。直肠膨大明显或不
明显。尾透明末端界限明显或
不明显，尾端有缢缩，尾尖尖圆
或钝圆
图1 实验拍得线虫会阴花纹 图2 摘于刘维志主编的植物线虫志
于旭东等：海南肾茶病原根结线虫的鉴定及对其寄主生长的影响
(续表1)
·· 199
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2.2 根结线虫对肾茶的影响
根结线虫能改变植物的初级代谢和次级代谢，影
响植株体内氨基酸、蛋白质、细胞素的合成与分解，甚
至还能影响植物细胞核的形态及核酸的含量[6]。
2.2.1 根结线虫对肾茶长势的影响 从表 3可以看出，
肾茶受南方根结线虫侵染发病后，叶片的长宽比减小，
同时表现为叶面积减小，光合作用减弱，蒸腾作用加
强，植株失水。感病植株的茎粗小于健康植株。单株
产量明显减少，减少比率达30%。参见图4。
2.2.2 根结线虫对肾茶中游离蛋白质含量的影响 从表4
的数据可以看出，受感染的肾茶在不同时期所含蛋白质
的量随着侵害程度的加重而逐渐减少，经SSR测验，不同
侵害程度的蛋白质含量相互之间差异达极显著水平。另
外，从图5看出，肾茶受南方根结线虫侵染后植物体内蛋
白质含量持续下降，没有出现回升的过程，这与绝大多数
植物受线虫感染后蛋白质含量的变化不同，许多植物受
线虫侵染初期蛋白质的含量会有一定程度的升高，之后
随着侵害程度加重，蛋白质含量才逐渐下降[7-11]。
图3 雄虫头区 图4 感染线虫的肾茶
表4 南方根结线虫侵染肾茶不同时期游离蛋白质的含量
表3 南方根结线虫对海南肾茶生长的影响
植株
健康植株
感病植株
茎粗/cm
0.44
0.38
叶片长宽比
3.34
2.60
单株产量/kg
0.39
0.26
危害程度
正常
轻度
中度
重度
检测结果/(mg/g)
1
3.814
3.057
2.228
1.078
2
4.004
3.297
2.746
1.063
3
4.291
2.989
2.200
1.008
4
4.111
3.079
2.475
0.918
平均值/(mg/g)
4.055
3.106
2.412
1.017
SSR测验
a A
b B
c C
d D
2.2.3 根结线虫对肾茶中叶绿素含量的影响 从表5和
图 6可以看出，肾茶感染线虫后总叶绿素的含量逐渐
降低，且主要减少的是叶绿素 a的含量，叶绿素b的含
量变化不大。光合作用中的光反应阶段只有叶绿素 a
才能直接参与光化学反应，叶绿素 b只能参与光能的
传递，当叶绿素 a减少后，植物的光合作用必定受到极
大的影响。因此，肾茶感染线虫后，叶片变黄，光合作
用减弱，其物质代谢受到非常大的影响。
注：表中小写字母表示0.05水平差异显著，大写字母表示0.01水平极差异显著。
程度
正常
轻度
中度
重度
检测结果/(mg/g)
1
叶绿素
a
1.45
1.31
1.86
1.54
叶绿素
b
0.58
0.54
0.73
0.65
总叶绿
素
2.03
1.85
2.59
2.19
2
叶绿素
a
1.95
1.79
1.53
1.23
叶绿素
b
0.77
0.78
0.7
0.74
总叶绿
素
2.72
2.57
2.23
1.97
3
叶绿素
a
1.85
1.64
1.71
1.09
叶绿素
b
0.75
0.65
0.62
0.69
总叶绿
素
2.6
2.28
2.33
1.77
4
叶绿素
a
2.09
1.69
1.23
1.23
叶绿素
b
0.83
0.69
0.66
0.73
总叶绿
素
2.92
2.38
1.89
1.96
平均值/(mg/g)
叶绿素
a
1.84
1.61
1.58
1.27
叶绿素
b
0.73
0.66
0.68
0.7
总叶绿
素
2.57
2.27
2.26
1.97
表5 南方根结线虫对肾茶中叶绿素含量的影响
·· 200
3 结论与讨论
3.1 线虫的分离鉴定
雌虫易得到，在解剖镜下，甚至用肉眼都可以用解剖
针从根瘿中挑出虫体。根内二龄幼虫数量极多，容易分
离。雄虫不易分离得到。雄虫对雌虫的受精不是必须
的，成熟后离开根部，进入土壤，所以根部线虫数量相对较
少，但是分离土中的线虫时却分离不到雄虫，其原因不明。
根结线虫形态学的鉴定主要依据雌虫会阴花纹的
特征，但南方根结线虫雌虫的会阴花纹种间变异大，因
此会阴花纹在鉴定中只能起到辅助作用。对于南方根
结线虫，最重要的鉴定特征是雄虫的头部形态和背食
道腺开口到口针基部球的距离。南方根结线虫头部的
典型特征为头冠凹陷，头区有2~4条环纹，背食道腺开
口到口针基部球的距离较短，一般为 2~4 μm，也可以
小于1 μm，但很少超过4 μm。二龄幼虫的形态在鉴定
中的作用非常有限[12]。表 1和表 2，以及图 3和图 4是
实验所测值和文献记录的比较。通过比较，可以很清
楚的看出海南肾茶所感染的南方根结线虫与文献记录
的南方根结线虫的数据与描述十分相似。
3.2 线虫对肾茶的影响
根结线虫对肾茶的生长发育影响非常严重。感染
线虫的植株与健康植株相比，其植株矮小，叶片变黄，
叶柄变短，叶片长宽比减小；根部瘤状产生虫瘿，根的
功能退化，抗逆性减弱；随着感染时间的延长，肾茶的
根会变黑腐烂，导致植株死亡。
实验过程中发现，南方根结线虫从肾茶扦插苗的机
械损伤根部侵染植株后，会在伤口附近形成一团白色的
类似愈伤组织的不规则虫瘿，推测线虫周围的植物根系
受线虫分泌物的刺激，加快了细胞分裂素的合成，导致
细胞快速分裂，并伴随一定程度的细胞脱分化。
3.3 肾茶根结线虫的防治
肾茶作为泌尿系统和呼吸系统最好的保健饮料的
原材料，在栽培过程中必须遵循绿色食品生产要求，严
禁使用化学农药。在防治南方根结线虫过程中，必要
时只能使用生物农药。自然中存在线虫的天敌，如某
些真菌、细菌和类立克次体，这些微生物都能在不危害
环境和作物的同时很好的起到防治线虫的作用。但有
些微生物在实验室中能很好的杀死线虫，而在大田实
际应用时效果却不大，其主要原因在于不能和植物共
生。因此选择能与植物自然共生的内生菌是非常有前
景的。除此之外，选育抗线虫的植株也是一个非常有
效的途径，这方面的研究还有待于进一步进行。
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accumulation of nutrients in vetch. Soil Science,1966,101(1):46-49.
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
1 2 3 4
危害程度
叶
绿
素
含
量
/
(
m
g
/
g
)
叶绿素a 叶绿素b 总叶绿素
图6 南方根结线虫对肾茶叶绿素含量的影响
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
1 2 3 4
危害程度
游
离
蛋
白
含
量
/
(
m
g
/
g
)
图5 南方根结线虫对肾茶游离蛋白含量的影响
于旭东等：海南肾茶病原根结线虫的鉴定及对其寄主生长的影响 ·· 201