全 文 ：第 2 8卷 第 5期 玉林师范学院学报 ( 自然科学 )
20 ( )7 年 JO U R N L AO F U L I N YN O R ML U AN I VE R SIT Y
Vo l
.
2 8
( N a tu r a l
N o s
S ei e n e e )
肾茶提取物对蛙肠系膜微循环的影响
口李家洲 ’ , 卢海啸 2 , 韦清海 3
(1
. 玉林 师范学院 化学与 生物 系 副教授 , 广西 玉林 5 3 7() () )
( 2
. 玉林师范学院 化学与 生物 系 讲师 , 广西 玉林 5 37() 阴 )
(3
. 玉林师范学院 化 学与 生物 系 本科生 , 广西 玉 林 5 3 7() () )
【摘 要」使 用不 同浓度的肾茶提取物作用 于虎纹蛙 的肠 系膜 , 观察其对蛙 肠 系膜
微循环的影响 .结 果表明 , ’肾茶提取物 具有扩 张微血管和改 变其血流速度及流态的作用 .
当浓度为 ( ) . 3叹一 3叹.时 , 微血管的扩张程度随着浓度的增加而逐渐增大 , 血液 流速则逐渐
减慢 ; 当浓度为 4叹,一 5努,时 , 微 血管与未滴加 肾茶提取物时的对照值相比 , 仍是扩张的 , 但
其扩张的程度逐渐降低 , 而其血流速度与浓度为 3洲.时相比 , 则是逐渐加快 的 .
【关键词 】’片茶提取物 ; 蛙肠 系月戴 微循环
[ 中图分类号 」Q 4 6 3 [ 文献标识码 」A [ 文章编号 ] 1` ,` ,4一 4 6 7 1 ( 2 ( )` )7 )` ,弓一 `,` ,6 7一`’三
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Y u l`n N o rn i a l U n i、
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YL s卫l万 67
DOI : 10. 13792 /j . cnki . cn45 -1300 /z. 2007. 05. 022
00 27年 玉林师范学院学报 第 5期
圈 茶 【l C ero d e nr da, : rh u s .甲 i c a r u s ( rh u ,: b )e . y .w u] 又名猫须草 ,为唇形科肾茶属多年生草本植物 ` ,’ . 肾茶不仅花形美丽 , 而 且民
间药用全草 , 有清热去湿 、排石利尿之功 效 , 用于治
疗急 、 慢性肾炎 、 膀脆炎 、 尿路结石 、 风 湿性关节炎
等疾病 .2 } .
在国内 , 目前对肾茶的药理研 究主要集中于泌
尿 系统 炎症方面 ls1 , 关于肾茶对微循环 影响的研究
以及 肾茶药理机制 的研究未见有报道 . 本研究使用
不 同浓度的 肾茶提取物作用于蛙的肠 系膜 , 借助
B x 51 奥林巴 斯生物显微镜和 BI 一 2() ()( 医学图象分
析系统观察其对蛙肠 系膜微循环的影响 , 为进一步
研究肾茶的活性成分及其对机体作用的生理 生化
机制提供相关的 实验依据 .
1 材料与方法
1
.
1 材料与仪器
动 物 : 虎纹蛙 , 体重 6() g 一 9() g ,雌雄兼用
药品及试剂 : 肾茶粗提物 , 用生理盐水 配制浓
度分别为 0 . 5% 、 1% 、 2% 、 3% 、 4% 、 5%的 肾茶提取物
溶液 ;任氏液 (成分如 下 : N a CI : 6 . 5;9 K CI : 0 . 149 ; C 。 -
e lZ J )
.
1 2 9 ; N o H e o 3 : ()
.
2 () g : N a H ZP o 4 : ()
.
() 19 ; 葡 萄
糖 : 2 .飞 ,加蒸馏水至 1() o inl ) .
器材 : 蛙类手术器械 、 B x 51 奥林巴斯 生物显微
镜 、 BI 一 2() ()( 医学图象分析系统 (成都泰盟科技有
限公 司研制 ) .
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 肾茶提取物的制备
采集肾茶样品 , 切碎 , 晾干 , 用 ()5 % 乙醉浸 泡 1
周 , 然后使用旋转蒸发仪回 收溶剂 , 即可获得 肾茶
粗提取物 .
1
.
2
.
2 蛙肠 系膜标本的制作
( l) 取蛙 一只 ,破坏脑和脊髓 , 将其腹部朝上 固
定于蛙板上 .
( 2 )用镊子轻轻提起蛙右侧腹壁 , 用小剪刀在
腹壁上剪开 1 . sc m 左 右纵 向切 口 . 轻 轻拉 出小肠
绊 , 然后将整个青蛙转移到实验平台 (蛙板 )上 , 使
其身体右侧 紧靠蛙板上 的小孔 .将 已拉 出的小 肠绊
展开覆盖蛙板上的 小孔 , 并用 大头针固定 . 用适量
任氏液润湿肠 系膜 , 以免干燥 ,影响血液循环 l’ .
1
.
2
.
3 实验观察
( 1) 将实验平 台固定于生物显微镜的载物 台
上 , 观察正常情况下蛙肠 系膜微血管的血流情况 .
如没有发现血流过慢或血管破裂等情况 , 即选定作
为观察 目标的血管 , 在低倍镜下观察和识别各血管
的特征 .
( 2) 转到 高倍镜 , 物镜倍数为 10 x , 登 陆
BI 一 20 0() 医学图象分析系统进入肠 系膜的动态视频
系统 界 面 . 进 行 系统参数设 置 : 坐 标 参数 为
40 。卜 m , 实验 内容参数为 “ 肠 系膜微循环的观察 ” .
( 3) 于蛙肠 系膜上滴加任氏液 ,作为对照 , 观察
此时血管和血流情况 , 进行录象记 录和 冻结 画 面
( 即照相 )操作 .
( 4 )用吸 水纸小 心吸干任氏液后 , 滴加等量的
()
.
5%的肾茶提取物溶液 , 然后进行观察 , 并立即进
行录象 、 照相和保存 .观察并完成采样后 , 用吸水纸
小心吸干药液 , 并用任氏液反复冲洗 、 吸干 , 直至血
流恢复原态 .
( 5 )方 法同 ( 4 ) , 采集浓度分 另,l为 z% 、 2% 、 3% 、
4%
、
5%的 肾茶提取物 溶液 滴注后微血管的 口 径和
血流情况 . 将采集到的各浓度的录象进行分析 , 收
集血流形 态 、 血管口 径大小 以及血流速度等 3 个指
标的数据 .
( 6 ) 选取 7 只 不 同的 实验虎纹蛙重复上述实
验 , 取各浓度作用结果的平均值 .
2 结果
2
.
1不 同浓度的肾茶提取物对青蛙肠 系膜微动
脉管径的影响
不 同浓度的 肾茶提取物对青蛙肠 系膜微动脉
管径的影响见表 1 和图 1 .
2
.
2 不同浓度的肾茶提取物对蛙肠 系膜微动脉
血流形态和速度的影响
不 同浓度的 肾茶提取物对蛙肠 系膜微动脉血
流形态和速度的影响结果见表 2 和图 2 一 图 9 .
3 结论与讨论
实验结果表明 , 肾茶提取物具有扩张微血管 ,
使血流速度减慢的作用 .在浓度为 0 . 5% 一 3% 时 , 微
动脉 口 径随浓度的增加 而逐渐增大 ,血流速度则逐
渐减慢 , 在 3%浓度时 , 血液流速最慢 , 流 态呈现 出
泥沙滞流状 在浓度为 4% 一 5%时 ,微动脉的 口径 则
随浓度的增加而逐渐减小 , 血流速度则是逐渐加快
的 (与 浓度为 3%时 比较 ) .但与 未滴加 药液时 的对
照值相比 , 其 口径仍 处于扩 张状态 , 流速仍较慢 . 由
此可见 , ’肾茶提取物对微循 环的影响与其浓度呈一
月万卫工召 68
李家洲 , 卢海啸 , 韦清海 肾茶提取物对蛙肠系膜微循环的影响
表 1 各浓度的药液作用于 7 只 不 同青蛙时微动脉的 口径 (单位 : 林 m )
T a b l e l
.
1 t h e d i a m e t e r e h a n g e o f 而 e r o a r t e r i e s w h e n d i玉 r e n t
o f m e d ic i n e il q u id a e t o n 7 fr o gs (U
n i t :林m)
C o n C e n tr a t l o n
青 蛙 序 号
浓度
对照
1 2 3 4 5 6 7
()
.
5%
29
.
6 78 3
30
.
16 37
3 ()
.
4 97 8
3 1
.
6 9 39
7 9 8 9
9 8 73
3 4
.
7 35 2
3 6
.
3 ( )57
35
.
9 4 ()
3 6
.
16 34
3 7
.
1 5 2 7
3 6
.
36 5 6
3 6
.
1 18 ( )
3 ()
.
2 553
3 1
.
34〔)2
3 1
.
7 ( ) 4 9
3 2
.
4 712
3 3
.
3 6 7
3 2
.
7 28 2
3 ( )
.
6 8 8 4
25
.
2 ()77
26
.
34 7 8
26 49 8
27
.
2 6 4 1
2 8
.
56 3 1
2 7
.
2 7 ( )
2 6
.
4 6 1 9
26
.
26 54
27
.
( )()5 7
2 8
.
5 1 36
29
.
( )() 89
2 9
.
1 1 35
2 9
.
1 ( ) 23
2 8
.
7 1 7
平均值
28
.
9 52 8
2 9
.
6 6 7 5
3 ( )
.
14 9 1
3 1
. 《)7 1 8
3 1
.
7 6 4
3 1
.
1 1 4 9
3 ( )
.
3 1 79
,1
J
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2 8
.
56 35
29
.
11 5
2 9
.
2 ( )77
3 ( )
.
8 7 15
3 1
.
2 3 ( )
3 ( )
.
9 9 4 7
2 9
.
4 333
27
.
() 64 6
27
.
26 4 1
28
.
5 63 1
3 ( )
.
( )29
3 ( )
.
12 3
3( )
.
6 4 6
29
.
6 256 3 ( )
.
( ) ( )2
%1,
一,j J41乃
注 : “ 对照 ” 值取滴加等量的任氏液时的测量值
3 5今血管口 径`吧
3 ( ,牛一 - -:: !
:: {
.() 5% 1% 2% 3% 4% 5% 药液浓度
图 1 微动脉的 口径 变化曲线图
表 2 不 同浓度肾茶提取物作用下的微动脉血流形态与速度
T a b ]e 2
.
2 B lo o d一 fl o w m o pr h o l o gy a l l d v e l o e i t y o f n五c r o a r te r i e s o n d i fe r e n t
e o n e e r t r a ti o n o f m e d i e i n e l i q u id
浓度 对照 ( ) . 5% 1% 2% 3% 4% 5%
流态 线流 线粒流 线粒流 摆流 滞流 线粒流 线流
流速 ( 卜 , 1价 ) 8 3 5 . 6 8 3 6 5 9 . ( )4 5 8 5 7 3 . 7 2 17 4 4 2 . 7 7 ( ) 16 4 . ( )3 4 4 8 7 . ( ) 8 3 5 9 1 . 82 () 8
注 : 流速 已取平均值
血流速度 (协m ,s)
门ù0()八曰01乃门ō二Jln j,一/26月,八jz
0 .() 5% 1% 2% 3% 4% 5%
一 药液浓度
图 2 微动脉的血流速度变化曲线图
里乙` 里逻万 69
2 00 7年 玉 林师范学院学报 第 5 期
图 3 滴加任氏液时微动脉的血流形态 图 40 .5 %浓度时微动脉的血流形态
图 5 1%浓度时微动脉的血流形态 图 6 2 %浓度时微动脉的血流形态
洲超洲份一 劣分峨 粗粥班例 穿蛇 分叹娘必份父欠 娜令带翠令令娜众下溉 筛瑙 5阴即 廖限长夕班 阳改份聚由M聆时姗努邢狡括次决扮侧男浓及印男 双播践招尹图 3 7 %浓度时微动脉的血流形 态 图 8 4%浓度时微动脉的血流形态
图 9 5 %浓度时微动脉的血流形 态
月万卫工召 70
李家洲 , 卢海啸 , 韦清海 肾茶提取物对蛙肠系膜微循环的影响
定的剂量关 系 , 在浓度为 3% 时其影响效果最明显 .
此外 , 在实验研究过程中 , 不管使用哪种浓度
的 肾茶溶液作用于肠 系膜 , 不管微血管处于何种流
态 , 经过任氏液反复冲洗后 , 血液都可以 恢复为原
来的正常流 态和速度 .说明 肾茶提取物对蛙肠 系膜
微血管的管壁结 构影响不 大 , 没有明显 的破坏作
用 . 这也从另 一角度反映 了 肾茶对机体无毒害作
用 , 黄荣桂等在研究肾茶治疗尿路结石的疗效 时的
结果显 示 , 肾茶是一种治疗尿路结石 并且 无毒副作
用的药物 同 .蔡华芳等对肾茶进行毒性研究也表明 ,
肾茶无毒副作用网 .
血管的扩 张与 血管平滑肌的舒缩调节有关 . 近
年来相关研究表明 , 血管平滑肌 细胞 的舒缩功能除
与 c 扩+ 一 钙调 节蛋 白 (C a M )经典途径 密切相关外 ,
还与肌肉收 缩 蛋白对钙的敏感性— 即钙敏感性调 节有关 ’ 7 , . 血管平滑肌细胞钙敏感性调 节是血管
平滑肌舒缩调 节的重要途 径 . 通常认 为 , 阻力血管
VS M (C 血管平滑肌细胞 )内! C 。 ’ +] 是 决定血管平滑
肌张力的一个重要因素 .
胡 志 等 的 研 究 已 经 证 实 , v SM C 内
N 。
`一
+K
一A T aP 、 活性降低 , 可导致 细胞 内 N 。 + 一 c +az
交换 活性增 强 , 使 细胞 内处 于高的 IC +a 」状 态 , 从
而使血管收 缩 张力增 大 , 舒张速度减慢 囚 . 我们 推
测 , ’肾茶提取物 的作用机制可能是其有效成分作用
于血管平滑肌细胞 , 使细胞膜 上的 +K 通道和 aC Z十
通道正常运行 , 从 而 增强钙 的敏感性调 节 , 提 高
v s M c 内 N a 十一 K + 一 A T P二 e 的活性 , 抑制细胞 内 N犷
浓度的升高 ,使 N +a 一 C沪 交换活性减弱 , 细胞 内处
于低 C[ 门 状 态 , 最后使血管平滑肌舒张 , 血管呈
现出扩张状态 . 至于肾茶对微血管作用的有效成分
到底是什 么 ? 其对机体作用的生理 生化机制如何 ?
有待进一步研究 .
根据泊 肃叶定理 , 血 管 口 径 变小 , 流速迅速增
加 , 血流 变性 劣化 , 不仅导致血液私度性增高 , 而且
可能导致血 细胞聚集 , 血栓形成 , 毛细血管临界半
径增 大 ,这 些都将使血流 阻力增大 , 导致血 流不畅 ,
血液 淤滞 , 微循 环 障碍 10] . 机体一 旦发 生微循环 障
碍 , 导致微循环水平上的血管和 血流的形态与功能
发生紊乱 , 进而 引起机体一 系列缺血 , 缺氧性细胞
病变 !10 ,还 可引起其他诸多疾病 : 如突发性耳聋 、 视
网膜静脉阻塞 、 小儿哮喘性 支气管炎 、 中风等 , 严重
者将导致休克 . 本实验研究结果为进一步研究肾茶
的有效成分对循 环 系统 的影响提供 了有用的实验
素材 , 也为研究肾茶提取物在临床上治疗各种微循
环 障碍疾病提供 了实验参考 . 根据 实验结果 , 我们
认为 , 肾茶提取物 中存在扩 张血管的有效成分 , 它
能维持和改善微循环的的正常结构和功能 , 具有较
高的开发研究价值二【参考文献 ]「1」赵新先 ,李泽贤 .原色中草药图集 : 全草②〔M」.广州 :广东世界图书出版 , 2() ()3 一 ()4 .回江苏新医学院编 . 中药大辞典 (上 )脚〕. 上海 : 上海科技 出版社 , 19 8 6 : 2 2() 7 .因赵爱华 ,赵勤实等.肾茶的化学成分〔J〕.云南植物研究刀 )( 4 2 6(5 ) : 5 () 3一 5 () 8 .
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医技 , 2 ( ) )` 1 , 8 ( 1 ( ) ) : 8 27一 8 28 .
【收稿日期 20 0 7一 0 6一 1 7」
【责任编辑 谢文海 】
儿丁卫工口 71