全 文 ：2011年 1月第 1卷第 1期
肾茶提取物防治大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究 *
王立强 孟萍萍 智 利 韩 静 郭 晶
（华侨大学分子药物学研究所,福建泉州 362021）
[摘要] 目的研究肾茶提取物对慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠肾功能的影响。方法 采用腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭动物模
型，将 SD大鼠随机分成 5组：1组为正常组、2组为模型组、3组为肾茶提取物高剂量组、4组为肾茶提取物低剂量组、5组为
尿毒清对照组。将 2～5组实验动物腺嘌呤灌胃,18d后收集 1组、2组 24h尿液，并眼底采血测 24h尿蛋白定量（UTP）、血清
尿素氮（BUN）、血肌酐（Cr）、尿酸（UA）、血红蛋白（Hb）、尿微量白蛋白（UMA）及肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）,验证造模成功。
19d后 3、4组给予肾茶提取物，5组给予尿毒清,1、2组给予生理盐水。49d后收集全部大鼠 24h尿液,然后处死大鼠,采血及
取肾、称肾重、体重。检测 UTP、BUN、Cr、Hb、UMA、UA、TNF-α、Ca、P等指标。HE染色观察肾脏病理结构。结果 实验前后
肾茶高、低剂量组大鼠的肾功能指标与模型组相比较,均具有显著性,与对照组相比，效果亦显著；明显降低 CRF大鼠体内
TNF-α，明显抑制肾小球系膜细胞及基质增生, 减轻肾小管 - 间质损害。结论 肾茶提取物能够降低 CRF大鼠 UTP、Cr、
BUN、UA、P、UMA、TNF-α水平、升高血中 Hb、Ca等水平，从而有效改善 CRF大鼠的肾功能及免疫功能。
[关键词]肾茶提取物；慢性肾功能衰竭；动物模型；实验研究
[中图分类号]R965.1；R285.5；R692.5 [文献标识码]A [文章编号]2095- 0616（2011）01- 33- 03
Pr event ing and Cur ing Chronic Renal Failur e in Rat wit h Or t hosiphon
Ext r act : An Exper iment a l St udy
WANG Liqiang MENG Pingping ZHI Li HAN Jing GUO Jing
Institute of Molecular Medicine，Huaqiao University，Quanzhou 362021，China
[Abst r act ] Object ive To study the effects of orthosiphon extract on the kidney of chronic renal failure（CRF） in rat. Met hods The
study was carry our by using animal modol of rat kidney of chronic renal failure induced by adenine,there are five groups:Control group,
CRF group,CRF plus high orthosiphon extract group，CRF plus low orthosiphon extract group,control plus Niaoduqing group.The experi-
mental animals of 2- 5 group were perfused with adenine for 18 days，then the serum BUN，Cr，UA，Hb，UMA，TNF-αlevel and the UTP
of 24h urine were measured，which confirmed that Rat model of chronic renal failure was achieved. The 3rd and 4th group were treated
with orthosiphon extract，the 5th group with Niaoduqing，the 1st and 2nd group with normal saline solution for 30 days. Then 24h urine
of all rats was collected，besides，all rats were executed following a blood collecting and a kidney extraction. The weight of kidney and
body were measured. The serum BUN，Cr，Hb，UMA，UA，TNF-α，Ca，P level and UTP of 24h urine were also measured. The morpholog-
ical structure of kidney were observed by HE staining. Result s Compared with the CRF group and control plus Niaoduqing group，the
functional parameters of kidney were significantly different in the treated groups. TNF-α of treated groups decreased significantly in
chronic renal failure（CRF） rat，significantly inhibiting the proliferation of renal intercapillary cells and matrix and attenuating the injury of
the renal tubule and interstitium. Conclusion Orthosiphon extract can decrease the level of UTP，Cr，BUN，UA，UMA，TNF-α，P and in-
crease the level of Hb，Ca in CRF rat. It can improve effectively the renal function and immunological function.
[Key words] Orthosiphon extract；Chronic renal failure；Animal model；Experimental study
肾茶（C. Spicatus（Thunb）C. Y. Wu）为唇形科肾茶属草本植
物，方茎对叶，花丝伸出唇形花冠 4～6cm，状如猫之胡须，又称猫
须草。傣医书“档哈雅”记载傣医用于治疗泌尿系统疾病已有 2000
年历史，疗效确切。傣家村寨将肾茶植于房前屋后作为观赏与药
用，家人如患上呼吸道或泌尿系统疾病，随手采摘茎叶用开水冲泡
即可饮用，既当茶喝又可治病作为利尿药，长期饮服对肾脏无害，
近年来研究发现，肾茶富含黄酮、酚酸（迷迭香酸、熊果酸）等化合
物，具有利尿、排石、抗炎、抗过敏及抗慢性肾衰竭等功效。本课题
组以肾茶的茎、叶为原料，分别以水、乙醇、乙酸乙酯为溶剂，分三
步提取出水溶性成分、醇溶性成分、脂溶性成分，将三种提取物混
合；以大鼠为受试对象，研究考察其防治慢性肾功能衰竭的效果。
1 材料与方法
1.1 实验动物
健康清洁级雄性 SD大鼠 70只，7周龄，体重 180～250g，许
·药物研究·
*福建省自然科学基金奖励项目 编号：2010J01208
CHINA MEDICINE AND PHARMACY 33
2011年 1月第 1卷第 1期
可证号 SYXK（闽）2004- 0007。由福建医科大学实验动物中心提
供。
1.2 药物与仪器
1.2.1 肾茶提取物的制备 肾茶茎、叶首先进行干燥处理，干燥
后将其粉碎至 20～100目后使用，用 10～20倍的水溶液煮沸
2～5次，每次进行 60～240min，将每次所得的滤液合并，减压浓
缩至膏状，浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到提取物
质量；再将得到的提取物溶解配制成 0.1g/mL的溶液作为肾茶的
上柱液。将大孔树脂在 95%的医用乙醇中浸泡过夜，然后用 95%
的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液蒸干至无残渣，再用去离子水洗脱
至流出液无醇味、无混浊。将上述制备好的上柱液直接上柱。首
先用水对大孔吸附树脂柱进行洗脱至无色，然后采用 20%～
40%、40%～70%的乙醇水溶液洗脱，洗脱体积为树脂体积的 4～
10倍，收集两次洗脱液，减压浓缩至膏状，浓缩至相对密度为 1.20
（50℃），浓缩液转移至已知重量的容器内，冻干，得到洗脱物质量，
检验。以上提取物，加入少量微晶纤维素，干燥并研细，混合均匀，
实验实施前以 1%的 CMC- Na溶液混悬成不同浓度供药理筛选。
1.2.2 药品与试剂 尿毒清颗粒剂：广州市国盈新药特药批发
部提供，5g/袋。腺嘌呤：厦门星达化学试剂有限公司，批号：
081122。SOD试剂盒：南京建成生物工程研究所，批号：080419。
TNF-α试剂盒：晶美生物工程有限公司，批号：090327。
1.2.3 仪器 GMP标准净化室，HFsafe1200超净工作台 （上海
力申科学仪器有限公司），倒置显微镜（德国 LEICA），普通光学
显微镜（Nikon），META5 激光共聚焦显微镜（德国 ZEISS），
MCO- 17AICO2 培养箱（日本 SANYO），PVC100CAD see JEPG
成像系统（PIXER公司），DHP- 420电热恒温培养箱（重庆四达实
验仪器有限公司顺达仪器厂），酶联免疫检测仪 （美国
Bio- TekELX800），SE- 9000 全自动血细胞分析仪（日本）AERD
SET全自动生化分析仪（美国），C- 500尿液分析（德国）。
1.3 实验方法
1.3.1 分组 实验动物适应 1周，自由饮水进食，测体重，随机
分为 5组：正常组、模型组、肾茶提取物低剂量组（0.2g/只）、肾茶
提取物高剂量组（0.8g/只）、尿毒清阳性对照组。每组 14只。
1.3.2 造模及验证[1] 正常组灌胃给予 2mL生理盐水，同时将腺
嘌呤 2mL（浓度 25%）灌胃，其余 4组，造模用药 18d，第 19天正
常组和模型组用代谢笼收集 24h尿，测尿蛋白含量，并从眼底静
脉丛取血 1～2mL，测 BUN、Cr、Hb、UMA、UTP、UA，验证造模成
功，见表 1。造模成功 12只。
1.3.3 实施方法[2] 造模成功后第 2天，即第 19天开始实施给
药，将肾茶提取物用蒸馏水配置成 10%（g/mL）的混悬液，低剂量
组 0.1g/（只·d），相当于生药 0.4g/（只·d） [2mL/（只·d）]，高剂量
0.4g/（只·d）[浓缩成 2mL/（只·d）]。尿毒清颗粒研细后用生理盐水
配成 20%溶液，按 0.4g/（只·d）[2mL/（只·d）]。分别灌胃给予受试
大鼠。正常组和模型组给予 2mL生理盐水灌胃，共治疗 30d，治
疗过程中大鼠自由进食、水。第 31天从眼底静脉取血 1～2mL，
然后处死动物，处理血液样品，检测 BUN、Cr、Hb、Ca、P、UMA、
UA、UTP、TNF-α（酶联免疫法）等生化指标，同时测量体重、肾
重、肾重 /体重。
1.4 统计学处理
所有资料以（χ±s）表示，以 SPSS17.0数据统计程序进行处
理，显著性分析采用 t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 造模后大鼠体征观察
正常组大鼠体形丰满，体重日增，动作迅速，被毛浓密有光
泽，进食、饮水正常，排便正常。模型组大鼠消瘦，体重下降，怕冷
聚集，活动减少，被毛粗糙无光，进食量和排便量减少，饮水和尿
量增加。
2.2 造模后大鼠BUN、Cr、Hb、UMA、UTP、体重检测
两组经统计学处理，有显著性差异（P＜0.01），说明造模成
功。见表 1。
2.3 治疗后各组大鼠肾功能检测
见表 2。
2.4 治疗后各组大鼠血液样品中TNF-α的检测
见表 3。
2.5 治疗后各组大鼠24h尿蛋白量（UTP）、 A、体重、肾重/体
重的检测
见表 4。
·药物研究·
正常组（n=14） 模型组（n=12a）
体重（g） 349.20±51.40 208.10±23 5
BUN（mmol/L） 5.28±0.93 26.74±3 66
Cr（μmol/L） 19.88±1.63 88.34±27.51
Hb（g/L） 12.17±5 40 119.32±10.09
UMA（mg/L） 2.37±1 14 16.55±4 38
UTP（mg/L） 71.49±22 33 29.61±10.92
UA（mmol/L） 36.48±8.93 102.26±19.74
注：与正常组比较，具有统计学意义（P均＜0.05）；a造模未成功2例
表1 造模后大鼠BUN、Cr、Hb、UMA、UTP、UA及体重的变化（χ±s）
项目
表2 治疗后各组大鼠肾功能检测（χ±s）
正常组（n=14） 模型组（n=10a） 低剂量组（n=14） 高剂量组（n=14） 尿毒清组（n=12b）
BUN（mmol/L）5.37±0.82* 14.29±0.91△ 6.8±0.58* 6.15±0 47*△ 9.63±1.51*
Cr（μmol/L） 30.76±9.71* 48.82±6.33 29.35±4 46*△ 27.18±3.82*△ 46.06±7.15
Hb（g/L） 13.13±2 6* 97.26±18.70 73.42±15.91 52.66±10.84*△ 88.27±16.48
UMA（mg/L） 2.16±0 52 2.47±0.36 2.56±0.48 2.56±0.48 2.19±0.27
UTP（mg/L） 2.44±0.31* 3.66±0 45 2.84±0.39* 2.84±0 39* 3.09±0 52
UA（mmol/L） 1.59±0.64* 5.38±0 72 1.69±0.28* 1.69±0 28* 1.98±0 44
注：与模型组比较，具有统计学意义（*P＜0.01）；与尿毒清组比较，具有统计学意义（△P＜0.01）；a造模未成功4例；b实验中意外死亡2例
项目
34 CHINA MEDICINE AND PHARMACY
2011年 1月第 1卷第 1期
读和渗透融合是必不可少的基本方法，也是中西医学深度结合
的必然趋势。在基本具备中西医学两套知识的中西医结合队伍
中，容易进行两种语言的沟通和创新，状态医学模式将是这种探
索的较好形式和理论指导。辨病论治加辨证论治是目前中西医
结合的基本治疗模式。在大量临床实践中取得了显著的疗效，仅
从临床医学角度也足以证明中西医学的互补性和中西医结合取
长补短的重要性和必要性。在中西医结合过程中，面对临床困惑
和中西医结合过程中的盲目性，越来越需要认识上的深入和理
论上的结合，将中西医学纳入统一框架之中，以形成新的医学体
系模式。在这个过程中，状态医学首先是一种思路，其次是一种
方法，未来是一种模式，由辨病论治、辨证论治走向辨态论治，是
我国医学的特色、优势和方向，中医、西医、中西医或将殊途同归。
（收稿日期：2010- 12- 27）
组别 n TNF-α（pg/mL）
正常组 14 39.85±2.93*△
模型组 10a 56.37±5.36
低剂量组 14 41.69±7.28*△
高剂量组 14 41.45±8.35*△
尿毒清组 12b 52.72±10.66
注：与模型组比较，具有统计学意义（*P＜0.01）；与尿毒清组比较，具
有统计学意义（△P＜0.01）；a造模未成功4例；b实验中意外死亡2例
表3 治疗后各组大鼠TNF-α检测结果（χ±s）
3 讨论
慢性肾衰竭（CRF）是指发生在各种慢性肾脏疾病后期的一
种临床综合征。近期研究表明，CRF不但是机体针对肾功能进行
性衰竭所产生的一系列复杂的细胞生化反应，而且还是一个以
细胞因子驱动的、以促氧化过程为特征的全身性的慢性炎症状态[3]。
临床上往往没有明显症状 ，有学者称其为慢性肾衰竭的“微炎
症反应”。本文通过对肾茶提取物的实验研究，以期证实肾茶具
有改善 CRF患者肾功能及微炎症状态、减少并发症的良效，为进
一步确定肾茶中的有效部位或有效成分奠定基础。目前已从肾
茶的地上部分分出 14个黄酮类化合物：12个为黄酮甙元、2个
为黄酮醇甙；8个酚酸类成分：咖啡酸、咖啡酸的二聚体迷迭香
酸、咖啡酸与酒石酸的缩合物、4个咖啡酸四聚物、泽南黄素、琥
珀酸、苯甲酸和乳酸、β谷甾醇、胡萝卜甙及熊果酸；此外还有果
糖、葡萄糖、戊糖、油脂、酒石酸、柠檬烯、龙脑、麝香草酚、消旋肌
醇和 1个香豆素。肾茶中所含的主要活性成分有迷迭香酸、熊果
酸、黄酮类及肌醇等。目前研究认为肾茶抗炎作用主要与迷迭香
酸及熊果酸成分有关；迷迭香酸及黄酮还具有免疫调节、抗氧
化、抗系膜细胞增殖、抗血小板聚集及抗血栓作用。肾茶水提取
物中离析得到的肌醇，被证实为利尿的主要成分[4]。
异常高浓度腺嘌呤在黄嘌呤氧化酶的作用下转变成极难溶
于水的 2，8- 二羟基腺嘌呤。后者沉积于肾小管，造成肾小管细
胞结构和功能的破坏，影响氮质化合物的排泄。同时，由于腺嘌
呤代谢产物的毒性作用，使肾组织中与糖、脂肪、蛋白质代谢有
关的多种酶的活性受到抑制，影响肾组织能量代谢引起肾功能
损害，大鼠血清 BUN、Cr水平进行性升高，逐渐出现氮质血症、贫
血及肾功能衰竭[5]。给予肾茶，可使大鼠血 BUN、Cr增值降低，减
少蛋白尿，降低 TNF- a水平，调节电解质、酸碱平衡，表明肾茶提
取物对 CRF早期的毒性代谢产物的排出有促进作用，增加肾小
球滤过率和肾循环血量[6]。由此证实肾茶提取物的药理作用与前
期研究及文献报道的肾茶药材的药理作用一致；但提取后，给药
剂量大大降低，给药方式更多样，更便于质量均一和控制，有助
于深入探明其药效的物质成分，这对于肾茶药材的开发研究很
有价值，是进一步研究其有效部位或有效部位群的开始。
[参考文献]
[1] 潘晓勤，王晓燕，姜新猷. 肾小球系膜细胞培养及鉴定[J]. 南京医科
大学学报，1995，15（1）:222-223.
[2] 李晓玫，戴振华，王海燕. 肾小球系膜细胞增殖抑制因子[J]. 国外医
学:泌尿系统分册，1997，17（1）:31-34.
[3] 李智恩，张全斌，牛锡珍，等. 褐藻多糖硫酸酯[J]. 精细与专用化学
品，2003，11（2）:16-17.
[4] Martins L，Rocha G，Rodrigues A，et al. Lupus nephritis：a retrospec-
tive review of 78 cases from a single center[J]. Clin Nephrol，
2002，57（2）:114.
[5] 喻陆，吴凡. 欣肾胶囊延缓大鼠慢性肾功能衰竭实验研究[J]. 中国中
药杂志，2006，31（24）:2058-2060.
[6] 汪锡标，黄成惠，严士海. 抗肾衰方对慢性肾功能衰竭大鼠的干预作
用[J]. 内蒙古中医药，2008，37（2）:37-38.
（收稿日期：2010- 11- 25）
（上接第 22页）
·药物研究·
正常组（n＝14） 模型组（n＝10a） 低剂量组（n＝14） 高剂量组（n＝14） 尿毒清组（n＝12b）
UTP（mg/L） 52.89±9.36*△ 98.76±18.45 57.83±6.27*△ 51.87±9.45*△ 76.43±12.29*
UA（mmol/L） 38.66±8.91* 76.29±11.45 44.68±7.54* 45.36±7.88* 54.92±12.56*
体重（g） 328.6±3 .7* 215.4±33.9 256.7±41 * 268.9±38.4* 229.1±42.5*
双肾重（g） 2.86±0.31*△ 3.77±0.42 3.26±0.45 2.91±0.29*△ 3.49±0.47
肾重/体重（×102）0.87±0.25*△ 1.75±0.43 1.27±0.34 1.08±0.37*△ 1.52±0.48
注：与模型组比较，具有统计学意义（*P＜0.01）；与尿毒清组比较，具有统计学意义（△P＜0.01）；a造模未成功4例；b实验中意外死亡2例
表4 治疗后各组大鼠24小时尿蛋白（UTP）、UA、体重、双肾重、肾重/体重的检测（χ±s）
项目
CHINA MEDICINE AND PHARMACY 35