全 文 ：取不同批号的胃舒散 , 按 3.2 项下方法制备供试品溶
液 ,测定。结果见表 2。
表 1　 橙皮苷回收率结果
NO
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得总量
(mg)
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 1.843 3.588 5.371 98.3
2 1.843 3.588 5.421 99.7
3 1.843 3.588 5.364 98.1
4 1.839 4.784 6.509 97.6
5 1.839 4.784 6.517 97.8 98.0 0.9
6 1.839 4.784 6.563 98.7
7 1.842 5.980 7.687 97.7
8 1.842 5.980 7.638 96.9
9 1.842 5.980 7.635 96.9
表 2　 样品中橙皮苷的含量测定结果
批号 橙皮苷平均含量(μg·g -1)
(d/ x)%
(n=3)
011001 12.56 1.36
990907 10.23 0.23
991209 13.13 0.25
00105 12.80 0.42
010316 11.78 0.95
010626 11.15 0.52
3.10　重复性试验
取批号为(01001)的本品 , 按 3.2 项下操作 , 连续进样 6
次 ,用外标法计算橙皮苷含量(μg·g-1)分别为 12.48 ,
12.40 , 12.79 , 12.60 , 12.42 , 12.48;RSD(%)为 1.2。
4　讨论
为消除胃舒散中共存药物对测定的干扰 , 供试品应先进
行提取分离 , 提取条件的选择如下:
4.1　提取溶剂　分别采用流动相 、70%的甲醇 、甲醇为提取
溶剂 , 按照供试品溶液制备项下制备后进样分析 , 结果发现 ,
用流动相提取的样品 , 用滤纸和微孔滤膜过滤后 ,滤液仍显
浑浊;70%甲醇提取所得结果明显低于甲醇。故选择甲醇为
提取溶剂。
4.2　提取方法　供试品加甲醇后 ,分别于水浴回流提取0.5
h 、及加甲醇后 , 浸泡 1h , 再超声振荡提取 15min , 2 种提取方
法分析结果表明 , 回流提取结果明显高于超声振荡提取 , 故
采用回流提取方法。
4.3　回流提取时间　供试品加甲醇 , 分别在水浴上回流提
取 0.5h 和 1h ,结果表明 , 回流 0.5h 的结果高于 1h , 由于橙
皮苷加热时间过长 , 会发生水解而使测定结果偏低 , 故提取
时间选择 0.5h。
4.4　经试验 , 橙皮苷对照品溶液放置 1d 后 , 含量下降约
1%,故对照品溶液配好后宜当日使用。
致谢　四川联合大学华西药学院晁若冰教授 、本院周泽清教
授为实验提供大力支持与帮助。
参考文献:
[ 1] 　中华人民共和国药典[ S] .(一部)北京:化学工业出版社 ,
2000 , 148.
[ 2] 　贾冬英 ,姚开.橙皮苷的高效液相色谱定量分析.华西药学杂
志 , 2001 , 16(6):444-446.
[ 3] 　邓思珊 ,诸克丹.HPLC法测定胃得安中橙皮苷的含量.中国
药学标准 ,2002 , 3(2):39-41.
HPLC测定乙肝健 A片中花锚口山酮的含量
王　宏
(青海三普药业股份有限公司 ,青海 西宁 810007)
收稿日期:2003-03-07
作者简介:王　宏(1965～ ),女 ,山东黄县人 ,工程师,主要研究方向:药品质量检验及质量标准的研究 ,电话:(0971)-8144023。
关键词:HPLC;乙肝健 A片;花锚口山酮类成分
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2004)03-0257-02
　　乙肝健 A片是以花锚草为原料制成的单方制剂 , 与乙
肝健 B片合用 ,具有利胆退黄 , 改善肝功能 ,调节免疫机能的
功效。用于治疗急慢性乙型肝炎和其他肝炎[ 1] 。该品种被
收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十二册中 ,无含量测
定方法。为进一步控制该品种的内在质量 ,对处方中花锚口山
酮类成分[ 2](以下简称花锚对照品)进行含量测定。
1　仪器 、试剂与药品
1.1　仪器:SSI PC2000 型高效液相色谱仪(美国), AE240
型双量程电子分析天平(十万分之一), SK3200H 型超声波
清洗器 , 电热恒温水浴锅。
1.2　试剂与药品:花锚对照品由本公司自制 , 经液相色谱面
积归一法计算其纯度为 100%。乙肝健 A 片为本公司产品。
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第 26 卷　第 3 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
Mar., 2004
Vol.26　No.3
醋酸乙酯 ,三氯甲烷为分析纯 , 甲醇为色谱纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件:色谱柱:C18 , 10μm(4.6mm ×250mm);流动
相:醋酸乙酯-甲醇(7∶3);检测波长:332nm;柱温:室温;流
速:1.0mL·min-1;进样量:10μL 。在此条件下 ,样品中花锚
对照品出峰快 ,分离好。
2.2　实验条件的选择:检测波长:据文献[ 3]载花锚对照品在
332nm 波长处有最大吸收。 流动相:根据花锚对照品的极
性 ,我们选择了不同浓度配比的醋酸乙酯 、甲醇为流动相进
行试验 ,结果表明选用醋酸乙酯-甲醇(7∶3)为流动相 , 出峰
快 ,分离效果好。样品提取用溶剂与方法:我们曾采用醋酸
乙酯超声提取 30min , 但色谱图显示提取效果不佳 , 后采用
三氯甲烷加热回流提取 ,将提取液过滤 , 挥干 ,加醋酸乙酯溶
解的方法 ,结果表明 , 提取效果较好。
花锚对照品 HPLC色谱图
乙肝健 A片 HPLC色谱图
2.3　供试品溶液的制备:
2.3.1　对照品溶液的制备:精密称取花锚对照品 0.0022g ,
加醋酸乙酯 50mL 使溶解。对照品溶液浓度为 0.044mg·
m L-1。
2.3.2　样品溶液的制备:取乙肝健 A 片适量 ,研细 ,精密称
取约 0.5g , 置 50mL烧瓶中 , 加三氯甲烷 25mL , 精密称定 ,加
热回流 1h ,放冷至室温 , 再称定重量 , 用三氯甲烷补足减失
的重量 ,滤过 , 取滤液 5mL , 挥干 , 加醋酸乙酯 3mL 使溶解 ,
作为样品溶液。
2.4　线性关系考察:精密吸取对照品溶液 2 , 3 , 5 , 7 , 9mL , 分
别置 10mL 量瓶中 , 加醋酸乙酯稀释至刻度 , 摇匀。以 10μL
定量环载量法注入高效液相色谱仪 , 记录峰面积。以对照品
溶液浓度为横坐标 , 峰面积为纵坐标 , 求得回归方程:Y =
19401.9+8340.04X , r=0.9995 , 结果表明花锚对照品在
8.8～ 39.6μg·mL-1之间有良好的线性关系。
2.5　精密度试验:将对照品溶液以 10μL定量环载量法连续
进样 5 次 , 分别记录峰面积 ,计算其相对标准偏差。结果为:
RSD=1.86%(n =5)。
2.6　回收率试验:精密量取已知花锚 酮类含量的样品溶
液 1mL共 5份 , 精确加入已知浓度的对照品溶液 , 按含量测
定方法测定 , 计算平均加样回收率为 98.35%, RSD =2.6%
(n =5)。
2.7　重复性试验:取同一批乙肝健 A 片适量 , 研细 , 按样品
溶液制备方法平行处理 5 份样品 , 依法测定 , 求得:RSD =
2.05%(n =5)。
2.8　样品含量测定:分别取不同批号样品 , 按样品溶液制备
方法进行处理 , 依法测定 ,结果见表 1。
表 1　 HPLC测定乙肝健 A片中花锚对照品的
含量结果(n=5)
批号 含量(mg·片-1) R SD(%)
021005 8.1 2.05
021104 8.1 2.13
021207 8.0 2.61
021208 8.5 2.33
3　讨论
3.1　本文中的花锚口山酮类成分是指 1-羟基-2、3 、5 、7-四甲
氧基口山酮和 1-羟基-2、3、5-三甲氧基口山酮的混合物。
3.2　本含量测定方法经各项试验考察 , 结果表明:方法灵
敏 、可靠 ,重现性好 , 可用于乙肝健 A片质量控制 。
参考文献:
[ 1 ] 　中华人民共和国药典委员会编《卫生部药品标准中药成方制
剂》[ S] .第十二册.
[ 2 ] 　青海省卫生厅编《青海省药品标准》[ S] .1992.
[ 3 ] 　青海省卫生厅编《青海省药品标准》[ S] .1992.
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