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芳香新塔花和小新塔花的红外指纹图谱研究



全 文 :第 38卷第 2期 西南民族大学学报·自然科学版 Mar. 2012
Journal of Southwest University for Nationalities⋅Natural Science Edition ___________________________________________________________________
___________________________
收稿日期:2011-11-24
通讯作者:刘圆, 女, 重庆忠县人, 教授, 博士, 副院长, 主要从事少数民族药物的研究和教学工作;
E-mail: yuanliu163@yahoo.com.cn.
基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金项目优秀科研团队及重大孵化项目(11NZYTH02); 四川省科技支撑计划
(2011SZ0233); 四川省杰出青年学术技术带头人后续计划(2011JQ0051); 塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室开
放课题项目(BRYB1005).
文章编号: 1003-2843(2012)02-0256-07
芳香新塔花和小新塔花的红外指纹图谱研究
丁玲 1, 孟庆艳 2, 彭镰心 3, 刘圆 1
(1.西南民族大学少数民族药物研究所, 四川 成都 610041; 2.新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室,
新疆 阿拉尔 843300; 3.成都大学生物产业学院, 四川 成都 610106)
摘 要:目的:对不同产地的芳香新塔花和小新塔花药材进行红外指纹图谱的鉴别研究. 方法:借助于傅里叶变换红外
光谱分析仪, 采用双指标序列分析法和系统聚类分析法, 鉴别不同产地的芳香新塔花和小新塔花. 结果:应用双指标序
列分析法可以较准确、直观的区分同属不同种药材及不同产地的同种药材;应用聚类分析法能够把芳香新塔花和小新
塔花样品完全分开. 结论:本文所建立的方法可以简便、快速地鉴别药材, 为芳香新塔花和小新塔花的鉴别提供新的方
法.
关键词:芳香新塔花;小新塔花;红外指纹图谱
中图分类号: R284 文献标识码:A
doi:10.3969/j.issn.1003-2483.2012.02.20


芳香新塔花 Ziziphora clinopodioides Lam.、小新塔花 Z. tenuior Linn.为唇形科(Labiatate)新塔花属(Ziziphora)
植物. 全世界新塔花属植物有 30 余种, 分布于地中海至亚洲中部. 我国产芳香新塔花、新塔花、小新塔花、天
山新塔花和南疆新塔花等 5 种新塔花属植物, 为一年生或多年生草本或半灌木, 广泛生长于砾石坡地及半荒漠
草滩上. 芳香新塔花, 又名唇香草、香草、山薄荷、小叶薄荷, 维吾尔语称为续则或苏则[1-3], 《中国高等植物
图鉴》称新塔花;多年生半灌木植物, 维族民间常用药材, 在我国主要分布于新疆阿尔泰山、天山、准葛尔西部
山地、帕米尔高原及昆仑山, 前苏联、蒙古有分布[4-6], 全株地上部分均可入药, 性辛凉、微苦, 现代药理研究
表明具有强心利湿、理气化痰、消炎散结的功效[7], 维吾尔民族医用于治疗心脏病、肝炎、胃病和水肿等;具
有薄荷香味, 是很有前景的香料植物;还可作为城市绿化香化环境;也可作为蜜源植物. 小新塔花为一年生草本,
主产于我国新疆南北, 苏联、伊朗经西亚至巴尔干半岛有分布. 目前对于小新塔花的研究报道极少, 维医认为具
有强心、降压和抗心率不齐的作用. 芳香新塔花与小新塔花为同属植物, 性状特征相似, 从外形上鉴别比较困难.
利用红外光谱的指纹特性, 可以反映药材化学成分的整体信息.
目前对于新塔花的红外指纹图谱的文章报道较少, 本实验拟应用傅里叶变换红外光谱分析仪结合共有峰率
和变异峰率双指标序列分析法和聚类分析法鉴别不同种、不同产地的芳香新塔花、小新塔花.
1 材料与仪器
1.1 实验材料
所有芳香新塔花、小新塔花样品, 均由新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室助理研
究员孟庆艳采集并鉴定, 来源见表 1.
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第 2期 ___________________________________________________________________ 丁玲 等: 芳香新塔花和小新塔花的红外指纹图谱研究
表 1 小新塔花和芳香新塔花的来源
样品 名称 来源 采集时间
G1 小新塔花 伊犁州昭苏格登山 2010-7-27
G2 博乐塞里木湖畔 2010-7-25
G3 伊犁州牧马场 2010-7-28
G4 伊犁州巩留野核桃沟 2010-7-28
G5 芳香新塔花 塔城 166团 2010-7-10
G6 伊犁州巩留野核桃沟 2010-7-29
G7 博乐塞里木湖畔 2010-7-25
G8 阿尔泰 2010-7-20
G9 伊犁州新源南山 2010-7-29
G10 伊犁州昭苏牧马场 2010-7-28
G11 昌吉州木垒县博斯坦 2010-7-25
G12 伊犁州霍城果子沟 2010-7-25
G13 昌吉州木垒县龙王庙水库 2010-7-22
G14 昌吉州木垒县水磨沟 2010-7-23
G15 伊犁州昭苏格登山 2010-7-27
1.2 仪器
Nicolet380(K)傅立叶红外光谱仪, DLaTGS检测器, 光谱范围 4000~400 cm-1, 分辨率 2 cm-1, 累加扫描次数
64, 数据点间隔 0.964 cm-1.
2 实验方法
2.1 测定方法
将芳香新塔花、小新塔花药材阴干、粉碎后过 200目筛, 取其筛后细粉少量, 与光谱纯溴化钾粉末混合均匀
压片, 直接测定其红外光谱. 同一个样品测定 6次, 取其吸收峰的吸光度的平均值进行分析.
2.2 数据分析
通过测定, 得到芳香新塔花、小新塔花样品粉末的FTIR光谱图. 根据吸收峰的吸光度值特点, 记录不同波数
段上的吸光度;以各样品不同波数段上的吸光度为指标, 应用SPSS11.5软件进行聚类分析, 得到不同图谱的聚类
结果树状图.
3 实验结果
3.1 特征吸光谱带的提取
将 15 个芳香新塔花、小新塔花样品按照以上实验方法进行红外光谱测定, 其吸收峰波数见表 2, 红外光谱
图见图 1和图 2, 由红外光谱图可以看出小新塔花与芳香新塔花的红外图谱极其相似, 吸收峰波数相近, 只是吸
收峰强度差别较大, 由此可知小新塔花和芳香新塔花的化学成分相似, 成分含量有所差别.
确定共有峰的方法:对于一组吸收峰, 若组内吸收峰的最大波数与最小波数差显著小于与其邻组峰之间的
平均波数差, 且每个样品都含该组峰的波数, 以此可确定为一组共有峰. 如表2中, 对于2922.21 cm-1这组峰, 组
内最大波数差为 2.84 cm-1, 平均波数为 2922.29 cm-1, 与邻近的前后两组峰的平均波数差分别是 408.71 cm-1和
69.78 cm-1, 这两个值明显大于 2.84 cm-1, 由此判断该组峰为共有峰.
第 38卷

258 西南民族大学学报·自然科学版 ___________________________________________________________________
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Wavenumbers (cm-1)
图 1 小新塔花的红外光谱(2号样品)

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Wavenumbers (cm-1)
图 2 芳香新塔花的红外光谱(11号样品)

表 2 不同产地的小新塔花和芳香新塔花的红外指纹图谱波数及共有峰
样品 指纹图谱的波数/cm-1
G1 3416.27 2922.21
G2 3409.60 2922.78
G3 3409.95 2921.13 2852.27
G4 3408.72 2922.44
G5 3397.21 2922.94
G6 3379.21 2922.17
G7 3360.13 2922.35
G8 3375.10 2921.70
G9 3397.34 2920.90 2852.07
G10 3365.31 2922.19
G11 3389.00 2923.24
G12 3388.67 2921.98
G13 3355.45 2923.04
G14 3342.06 2923.74 2853.19
G15 3331.64
G1 1609.90 1428.70 1245.87 1032.00
G2 1613.36 1416.69 1246.68 1033.67
G3 1607.89 1514.91 1420.01 1261.61 1035.02
G4 1607.82 1411.83 1260.64 1053.85
G5 1608.24 1417.54 1255.93 1031.23
G6 1609.14 1420.88 1257.95 1034.77
G7 1607.86 1419.99 1246.07 1030.65 774.56
G8 1608.49 1417.60 1256.24 1034.87
G9 1606.96 1515.23 1422.07 1260.05 1033.25 774.07
G10 1607.49 1431.00 1248.91 1032.75
G11 1611.19 1424.16 1248.53 1032.28
G12 1610.17 1423.85 1259.22 1030.30
G13 1610.81 1420.18 1257.16 1031.88
G14 1641.98 1415.36 1257.21 1045.84 684.60
G15 1608.18 1419.02 1246.15 1032.35
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第 2期 ___________________________________________________________________ 丁玲 等: 芳香新塔花和小新塔花的红外指纹图谱研究
G1 529.34 467.74 433.90
G2 521.19 466.06
G3 586.00 472.61
G4 589.09 434.86 403.09
G5 595.01 539.20 470.77 449.55 420.30 404.33
G6 538.17 471.77 420.19 403.68
G7 519.82 473.19 435.56
G8 535.68 461.85
G9 522.92 472.21
G10 528.64 460.78
G11 519.03 464.86
G12 527.94 465.00 443.31
G13 522.54 473.50 422.94
G14 612.90 593.85 539.82 470.06 436.52 419.87
G15 532.51 457.29

3.2 新塔花红外指纹图谱共有峰率和变异峰率双指标序列
参考文献[8-10], 共有峰率 P=(共有峰数 Ng/两个红外图谱中的独立峰数 Nd)×100 %, 变异峰率 Pv为该红外
指纹图中相对于共有峰的变异峰数与其共有峰数的比值, 计算各样品红外指纹图谱的共有峰率和变异峰率, 并
且根据共有峰率的大小将其排成序列, 这种方法为双指标序列分析法. 本实验中, 以 15个样品为参照点建立 15
个共有峰率和变异峰率双指标序列, 形成 15 维序列空间, 加上共有峰率和变异峰率双指标空间, 可以在 2+n 维
(n为样品的数量)空间考察样品之间的异同, 该方法有较好的鉴别力. 15个新塔花样品的双指标序列表示如下:
G1:G2(88.9;12.5, 0) G12(80;12.5, 12.5) G8(77.8;14.3, 14.3) G7(72.7;12.5, 25) G10G11G15(70;28.6, 14.3)
G4G13(63.6;28.6, 28.6) G6(63.6;14.3, 42.9)G5(61.5;12.5, 50)G3(63.6;28.6, 42.9) G9(53.8;28.6,57.1)
G14(43.8;28.6, 100)
G2:G1(88.9;0, 12.5) G8G10G11G15(77.8;14.3, 14.3) G12G13(70;14.3, 28.6) G3G6G7(63.6;14.3, 42.9) G5(58.3;
14.3, 71.4) G4(54.5;33.3, 50) G9(46.7;14.3, 57.1) G14(46.7;14.3, 100)
G3:G1G4(63.6;42.9, 28.6) G2(63.6;42.9, 14.3) G9(61.5;25, 37.5) G7(53.8;42.9, 42.9) G8G10G11G15(50;66.7,
33.3) G5(46.7;42.9, 55.6) G12G13(46.2;66.7, 50) G6(42.9;66.7, 66.7)
G4:G1(63.6;28.6, 28.6) G5(61.5;12.5, 50) G3(58.3;28.6, 42.9) G2(54.5;50, 33.3) G12(50;50, 50) G6G7(46.2;
50, 66.7) G8G10G11G15(41.7;80, 60) G13(38.5;80, 80) G14(35.3;50, 133.3) G9(33.3;80, 120)
G5:G12(75; 33.3, 0) G6(69.2; 33.3, 11.1) G11(66.7; 50, 0) G1G4(61.5; 50, 12.5) G7(57.1; 50, 25)
G2G8G10G15(53.8;71.4, 14.3) G9(53.3;50, 37.5) G14(52.9;33.3,55.6) G13(50;71.4, 28.6) G3(46.7;55.6, 42.9)
G6:G8(80;25, 0) G13(72.7;25, 12.5) G5(69.2;33.3, 11.1) G1G2G10G11G15(63.6;42.9, 14.3) G12(58.3;42.9, 28.6)
G7(53.8;42.9, 42.9) G9(50;42.9, 57.1) G3(46.2;66.7, 66.7) G4(46.2;66.7, 50) G14(41.2;42.9, 100)
G7:G10(80;25, 0) G1G12(72.7;25, 12.5) G2G8G11G15(63.6;42.9, 14.3) G9(61.5;25, 37.5) G13(58.3;42.9, 28.6)
G5(57.1;25, 50)G3G6(53.8;42.9, 42.9) G4(46.2;66.7,50) G14(41.2;42.9, 100)
G8:G6(80;0, 25) G1G2G10G11G15(77.8;14.3, 14.3) G12G13(70;14.3, 28.6) G7(63.6;14.3, 42.9) G9(58.3;14.3,
57.1) G5(53.8;14.3, 71.4) G3(50;33.3, 66.7) G4(41.7;60, 80) G14(37.5;33.3, 133.3)
G9:G11(72.7;37.5, 0) G12(66.7;37.5, 12.5) G3G7(61.5;37.5, 25) G2G8G10G15(58.3;57.1,14.3) G1G13(53.8;
57.1, 28.6) G5(53.3;37.5, 50) G6(50;51.7,42.9) G4(33.3;120, 80) G14(31.6;83.3, 133.3)
G10:G7(80;0, 25) G2G8G11G15(77.8;14.3, 14.3) G1G12G13(70;14.3, 28.6) G6G9(63.6;14.3, 42.9) G5(53.8;
14.3, 71.4) G3(50;33.3, 66.7) G4(41.7;60, 80) G14(37.5;33.3, 133.3)
G11:G12(88.9;0, 12.5) G2G8G10G15(77.8;14.3, 14.3) G9(72.7;0, 37.5) G1G13(70;14.3, 28.6) G5(66.7;0, 50)
G6G7(63.6;14.3, 42.9) G3(50;33.3, 66.7) G4(41.7;60, 80) G14(37.5;33.3, 133.3)
G12:G11(88.9;12.5, 0) G1(80;12.5, 12.5) G7(80;12.5, 25) G5(75;0, 33.3) G2G8G10G15(70;28.6, 14.3) G9(66.7;
12.5, 37.5) G13(63.6;28.6, 28.6) G6(58.3;28.6, 42.9) G4(50;50, 50) G3(46.2;50, 66.7) G14(43.8;28.6, 100)
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G13:G6(72.7;12.5, 25) G2G8G10G11G15(70;28.6, 14.3) G1G12(63.6;28.6, 28.6) G7(58.3;28.6, 42.9) G9(53.8;
28.6, 57.1) G14(53.3;12.5, 75) G5(50;28.6, 71.4) G3(46.2;50, 66.7) G4(38.5;80, 80)
G14:G13(53.3;75, 12.5) G5(52.9;55.6, 33.3) G2(46.7;100, 14.3) G1G12(43.8;100, 28.6) G3G6G7(41.2;100, 42.9)
G8G10G11G15(37.5;133.3, 33.3) G4(35.3;50, 133.3) G9(31.6;133.3, 83.3)
G15:G2G8G10G11(77.8;14.3, 14.3) G1G12G13(70;28.6, 14.3) G6G7(63.6;14.3, 42.9) G9(58.3;14.3, 57.1)
G5(53.8;14.3, 71.4) G3(50;33.3, 66.7) G4(41.7;60, 80) G14(37.5;33.3, 133.3)
*G1: G2(88.9;12.5, 0)表示该序列以 G1为标准计算其他样品指纹图谱的共有峰率和变异峰率, 该序列片段
表示G1与G2的共有峰率是 88.9, 其中G1的变异峰率是 12.5, G2的变异峰率是 0. G1:G2(88.9;12.5, 0) G12(80;
12.5, 12.5)表明G1相对于G2、G12有相同的变异峰率, 均为 12.5, 但共有峰率却明显不同, 分别为 88.9、80. G13:
G1G12(63.6;28.6, 28.6)表示 G1G12与 G13共有峰率相同, 为 63.6, G1G12与 G13具有相同的变异峰率.
由以上序列可以看出, 在不同的序列中, 不同的样品的共有峰率一般不同, 样品之间的关系一般不同. 与某
一样品具有相同共有峰率的样品, 一般具有不同的变异峰率. 利用双指标序列分析的方法可以很直接地找出与
某一样品关系最近和最远的样品, 能够对样品进行更深层次的区分, 如 G9:G2G8G10G15(58.3;57.1, 14.3)中,
G2G8G10G15与 G9具有相同的共有峰率和变异峰率, 表明 G2G8G10G15相对于 G9非常相似. G1:G2(88.9;
12.5, 0) G12(80;12.5, 12.5)中, G1相对于 G2, G12有相同的变异峰率, 但共有峰率不同, 以此可以更好地做出区
分.
本研究根据各个样品共有峰率和变异峰率得出 3组数据如下:
A:G1:G2(88.9;12.5, 0), G2:G1(88.9;0, 12.5), G11:G12(88.9;0, 12.5) , G12:G11(88.9;12.5, 0),
B:G6:G8(80;25, 0), G7:G10(80;25, 0), G8:G6(80;0, 25), G10:G7(80;0, 25), G15:G2G8G10G11(77.8;
14.3, 14.3), G5:G12(75;33.3, 0), , G9:G11(72.7;37.5, 0), G13:G6(72.7;12.5, 25)
C:G3:G1G4(63.6;42.9, 28.6), G4:G1(63.6;28.6, 28.6), G14:G13(53.3;75, 12.5)
在 A组中, G1为伊犁州昭苏格登山的小新塔花, G2为博乐塞里木湖畔的小新塔花, G11为昌吉州木垒县博斯
坦的芳香新塔花, G12伊犁州霍城果子沟的芳香新塔花, 上述序列分析显示, G1与 G2之间, G11与 G12之间有很
高的共有峰率和很低的变异峰率, G1与 G2为小新塔花, G11与 G12为芳香新塔花, 反映了同种药材性质相似.
在 B组中, G6为伊犁州巩留野核桃沟的芳香新塔花, G7为博乐塞里木湖畔的芳香新塔花, G8为阿尔泰的芳
香新塔花, G9为伊犁州新源南山的芳香新塔花, G10为伊犁州昭苏牧马场的芳香新塔花, G11为昌吉州木垒县博
斯坦的芳香新塔花, G12 为伊犁州霍城果子沟的芳香新塔花, G13 为昌吉州木垒县龙王庙水库的芳香新塔花,
G15 为伊犁州昭苏格登山的芳香新塔花, 它们之间共有峰率顺序:G6:G8= G7:G10﹥G15:G2G8G10G11﹥
G5:G12﹥G9:G11= G13:G6, 以上表明, G6与 G8, G7与 G10的化学成分最为相近, G9与 G11, G13与 G6差
异最大, 实验表明不同产地的同种样品成分发生了变化.
在 C组中, G1为伊犁州昭苏格登山的小新塔花, G3为伊犁州牧马场的小新塔花, G2为博乐塞里木湖畔的小
新塔花, G4为伊犁州巩留野核桃沟的小新塔花, G1G4与G3有相同的共有峰率, G1与G4具有相同的共有峰率
和变异峰率, G1、G3和 G4都为伊犁州的小新塔花, 产地比较接近的药材, 气候、光照条件、生长环境接近, 相
似性较高.
上述分析表明, 采用多维共有峰率和变异峰率的双指标序列分析法可以较准确地反映实际情况, 对不同种、
不同产地的新塔花药材具有准确、直观的鉴别能力.
3.3 不同产地的新塔花 FTIR光谱聚类分析
本研究以不同种、不同产地的的芳香新塔花、小新塔花样品为对象, 以不同波数段上的吸光度为指标, 在小
新塔花红外指纹 4个样品图(见图 3)和芳香新塔花指纹 11个样品图(见图 4)上各采集 8组数据, 记录所有的吸收
峰值及相对应的吸光度值, 对这些值应用 SPSS11.5 软件进行聚类分析, 距离计算方法采用欧氏距离的平方
(Squared Euclidean Distance), 聚类方法采用重心法(Centroid Clustering)[11-14].
图 5是不同种、不同产地的新塔花聚类结果树状图. 横坐标表示样品与样品之间的距离, 纵坐标表示样品号,
1-4为不同产地的小新塔花, 5-15为不同产地的芳香新塔花, 由树状图可知, 15个样品可聚为 2大类, 即 1-4聚为
261

第 2期 ___________________________________________________________________ 丁玲 等: 芳香新塔花和小新塔花的红外指纹图谱研究
一类, 5-15聚为一类, 此分类准确度较高. 由此可知, 同种药材指纹图谱相似度较高;由 5-15号样品的聚类结果
可知, 相近产地的药材并没有较好的聚为一类, 说明产地对药材的化学成分影响很大, 可能受地理环境、气候条
件、光照等多方面因素的影响, 栽培药材要合理的选择产地.
1.4
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Wavenumbers (cm-1)
图 3 不同产地的小新塔花红外指纹图谱
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图 4 不同产地的芳香新塔花红外指纹图谱

图 5 样品聚类分析树状图
第 38卷

262 西南民族大学学报·自然科学版 ___________________________________________________________________
4 结论
本文运用共有峰率和变异峰率双指标序列分析法和系统聚类分析法对不同种和不同产地的新塔花进行红外
指纹图谱研究. 运用共有峰率和变异峰率双指标序列分析法准确、细致的反映出不同种新塔花和不同产地的新
塔花亲远关系, 若样品数量过多, 在统计共有峰率和变异峰率的过程中数据处理就比较麻烦. 系统聚类分析图
比较明了, 两种新塔花属植物可以完全分开, 样品聚类准确度较高, 但要准确辨认出关系最近的样品比较困难,
在样品量较大时, 聚类分析方法精密度低于双指标序列分析法. 在进行聚类分析时要选择合适的聚类方法和计
算方法, 以达到符合实际情况的实验结果.
运用以上两种方法分析结果表明, 同种药材化学成分相近, 不同产地的同种药材的化学成分会随着地理环
境、气候、光照条件的差异发生变化. 采用共有峰率和变异峰率的双指标分析法和系统聚类分析法, 计算和处理
新塔花的红外指纹光谱图数据, 对于鉴别不同种、不同产地的芳香新塔花、小新塔花均取得了良好的效果.

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Study on the infrared fingerprint of Ziziphora clinopodioides Lam.and Ziziphora
tenuior Linn.
DING Ling1, MENG Qing-yan2, PENG Lian-xin3, LIU Yuan1
(1. Ethnic Pharmaceutical Institute of Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, P.R.C.; 2. Key Laboratory of
Biological Resource Protection and Utilization of Tarim Basin of the Production and Construction Corps of Xinjiang, Alaer 843300, P.R.C.;
3. Faculty of Biotechnology Industry of Chengdu University, Chendu 610106, P.R.C.)
Abstract: Obiective: To study infrared fingerprints of Z. clinopodioides Lam. and Z. tenuior Linn. from different regions.
Method: Based on their infrared fingerprint spectra, Z. clinopodioides Lam. and Z. tenuior Linn samples from 15 geographical
origins with common and variant peak ratio and dual-index sequence analysis. Result: The classification is well correlated to
their gene, geographical origins and weather. In the same class, the chemical components are similar to each other, which can
be considered as the criterion for evaluating their quality. The results show that their infrared spectra characteristics of the
same species are similar in the range of 4000~400 cm-1, but vary significantly for different species. Conclusion: The method
is rapid and simple, and could be applied to evaluate the quality of this traditional medical herbs.
Key words: Z. clinopodioides Lam.; Z. tenuior Linn.;IR fingerprint