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以体内吸收分布特点指导花锚成分的研究



全 文 :以体内吸收分布特点指导花锚成分的研究
高 洁 , 王素娟 , 徐瑞明 , 杨永春 , 张守仁 , 司伊康 , 石建功*
(中国医学科学院 、中国协和医科大学 药物研究所 , 北京 100050)
摘要:目的 以体内吸收和分布特点为指导 ,对传统抗肝炎藏药花锚的成分进行研究;探索用此方法进行中草
药药效成分研究的可行性。方法 利用高效液相色谱二极管阵列检测方法 , 确定能被吸收和分布在大鼠血液 、器官
和组织中的花锚成分 ,并利用各种色谱分离技术和波谱鉴定其结构 。结果 从花锚乙醇提取物中分离鉴定了能被
吸收并分布在大鼠血液 、器官和组织中的 6 个 酮苷元类成分。结论 花锚中的 酮苷元类成分是能够在大鼠体内
检测到的主要被吸收和分布的成分 ,在消化 、吸收和代谢过程中它们很快被转化为 酮苷元。因此 , 花锚中 酮苷
类成分的活性主要是通过转化为 酮苷元来实现。利用现代灵敏分析检测手段 ,以天然药物成分的吸收分布特点
为指导 ,进行天然药物成分的研究是一种可行并且值得进行深入探索的方法。
关键词:花锚;吸收分布特点指导;方法探索
中图分类号:R284.1;R284.2   文献标识码:A   文章编号:0513-4870(2004)03-0198-06
Studies on chemical constituents of Halenia elliptica guided by
in vivo absorption and distribution of the constituents
GAO Jie , WANG Su-juan , XU Rui-ming , YANG Yong-chun , ZHANG Shou-ren ,
SI Yi-kang , SHI Jian-gong*
(Institute of Materia Medica , Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College , Beijing 100050 , China)
Abstract:Aim To investigate the chemical constituents of the Tibetan herbal medicine Halenia elliptica
by guidance of in vivo absorption and distribution of the constituents.Methods HPLC with a diode array
detector(DAD)and HPLC-MS were used for detecting the constituents of extracts of Halenia elliptica and
animal samples.Several kinds of column chromatography were used for the isolation and purification of the main
in vivo absorbed and distributed compounds from the extract of Halenia elliptica.Results  Six main
components detected in the extracts of the animal samples were isolated from the ethanolic extract of Halenia
elliptica.Conclusion After rats were treated with different extracts of Halenia elliptica , low polar components
xanthone aglycon of Halenia elliptica were clearly observed in the extracts of liver , lipid , blood , hidney , heart
and brain tissue of rats , while the polar components xanthone glycosides were detected in very small amounts in
the animal samples.The xanthone glycosides can be decomposed into xanthone aglycons during the digestion ,
absorption and metabolism procedure.Therefore , the in vivo activity of the xanthone glycosides might be
exhibited by their decomposed products.It is an accessibly valuable method to investigate chemical components
of herbal medicines under the guidance by detecting in vivo absorption and distribution of chemical components
of the herbal medicine extract.
Key words:Halenia elliptica;guidance of in vivo absorption and distribution of the constituents;method
exploration
收稿日期:2003-07-25.
基金项目:教育部博士点基金(20020023029);国家自然科学基金资助项目(20372084).
*通讯作者 Tel:86-10-83154789, Fax:86-10-63017757 , E-mail:shi jg@imm.ac.cn
·198· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2004 , 39(3):198-203
DOI :10.16438/j.0513-4870.2004.03.011
  花锚是治疗肝胆系统疾病的最常用藏药之一 ,
为龙胆科植物椭叶花锚(Halenia elliptica D.Don)的
地上部分;性味苦寒 ,有清热利湿 ,平胆利肝的功效 。
有关花锚的化学成分及其抗肝炎活性已有报
道[ 1 ~ 6] ,从中分离得到十多种多甲氧基取代 酮及
其苷类化合物 ,并认为花锚苷(haleniaside)、去甲氧
基花锚苷(demethoxyhaleniaside)是抗肝炎的主要活
性成分[ 1, 2] 。作者在对其进行药理活性筛选中发现
花锚的乙酸乙酯萃取物的抗肝炎活性较水相的更
强 ,这与以往的文献报道不尽相同 。因此 ,本文利用
高效液相色谱二极管阵列检测和高效液相色谱-质
谱联用技术 ,以检测和比较花锚提取物和不同部位
中成分的吸收分布特点为指导 ,对能够在体内吸收
分布的花锚特征成分进行了研究 ,探索以体内吸收
分布特点为指导的天然药物成分研究方法的可行
性。
材料与方法
材料 、试剂和动物 花锚(Halenian elliptica)于
1999年采自青海 ,由宋万志教授鉴定 。C18固相萃取
柱(500 mg)为美国 Alltech 公司产品。Sephadex LH-
20凝胶为 Pharmacia 公司产品;柱色谱硅胶(160 ~
200目)和薄层色谱硅胶 GF254均为青岛海洋化工厂
产品;RA 型大孔吸附树脂为北京化工七厂产品 。
Wistar大鼠 ,体重(220±10)g , ♀,由中国医学科学
院动物中心提供 。
高效液相色谱仪器和条件  Agilent 1100 高效
液相色谱仪 ,配有二极管阵列检测器(G1315B)。色
谱柱:YMC-Pack GEL ODS C18(100 mm ×4.6 mm , 3
μm);流动相梯度:甲醇-水 50∶50(15 min)~ 80∶20(3
min)~ 100∶0(7 min);流速:1.0 mL·min-1;进样量:
10μL;检测波长:280 nm 。 Inova 300 MHz核磁共振
仪 ,VGZAB-2F 质谱仪。
高效液相色谱-质谱(LC-MS)联用仪和条件
Agilent 1100 series LC MSD trap SL 液质联用仪 ,色谱
柱:Zorbax SB-C18 2.1 mm ×30 mm , 3.5 μm;流动相:
甲醇-水(含 5 mmol-1的甲酸铵):30∶70 ~ 80∶20(10
min)~ 100∶0(5 min);流速:0.4 mL·min-1;柱温:
35 ℃;进样量 1 μL;检测波长 280 nm 。质谱条件:正
离子模式 ESI , 雾化气:N2 , 384 kPa;干燥气:N2 , 8
L·min-1 ,325 ℃;HV capillary 3500V ,扫描范围 50 ~
1 000 amu。
花锚提取物 、萃取物和成分群及其制剂的制备
花锚干燥全草(150 g)用乙醇回流提取 3 次 ,减压回
收溶剂得乙醇提取物(25 g);取 20 g 乙醇提取物悬
浮于 200 mL 蒸馏水中 ,用乙酸乙酯萃取 5次 ,每次
200mL ,乙酸乙酯相和水相分别减压回收溶剂后得
到乙酸乙酯萃取物(6 g)和水相溶解物(14 g)。取乙
酸乙酯萃取物(4 g)进行硅胶柱色谱分离 ,用石油醚
-丙酮梯度洗脱 ,薄层色谱检测合并相同部分;石油
醚-丙酮(5∶1)洗脱部分 ,再用凝胶Sephadex LH-20柱
色谱分离得到 酮苷元成分群(1.8 g)。取水相浸
膏 10 g ,用 100 mL 蒸镏水溶解后 ,通过大孔吸附树
脂 ,用水洗脱除去糖部分 ,再用 95%乙醇洗脱;乙醇
洗脱部分减压回收溶剂后 ,用凝胶 Sephadex LH-20
柱色谱分离 ,以 95%的乙醇洗脱 ,最先流出的部分
减压蒸干 ,用适量 80%乙醇加热溶解 ,放置过夜后
析出沉淀 ,过滤得到 酮苷成分群(3.2 g)。
根据提取率将花锚乙醇总浸膏(1 g)、乙酸乙酯
萃取物(0.3 g)、水相溶解物(0.7 g)、 酮苷成分群
(0.3 g)和 酮苷元成分群(0.15 g)分别与适量 5%
吐温 80 ,蒸馏水 10 mL 和羧甲基纤维素钠(3%)5
mL配成悬浊药物制剂。
大鼠血液 、器官和组织提取物的制备及其前处
理 将 12只大鼠随机平均分为 6组;对照组给蒸馏
水 ,分别给花锚乙醇提取物 、乙酸乙酯萃取物 、水相
溶解物 、 酮苷成分群和苷元成分群制剂 , ig 给药(4
mL 次),连续给药3 d ,2次 d。d 4给药 1次 ,2 h后 ,
断头取血 ,每组各取(8.7±0.2)g[(11±1)mL] ,并
分别加入5倍体积的甲醇 ,充分搅拌沉淀蛋白 ,静置
10 min后离心(4 000 r·min-1),取上清液 ,减压浓缩
得血液样品提取物 。取血后的大鼠立刻取其主要脏
器和组织:肝(10±1.5)g ,脂肪(10±2)g ,肾(2.6±
0.2)g ,心(1.2±0.1)g 和脑(3.0±0.2)g 。在各组
脏器和组织中加入适量蒸馏水分别匀浆后 ,再加入
5倍体积的甲醇充分搅拌提取 ,静置后离心(4 000
r·min-1),取上清液 ,减压浓缩至干后 ,置于 -20 ℃
冰箱中保存备用。
取血液 、器官和组织提取物 ,分别加入适量蒸馏
水超声混悬后 ,加压通过固相萃取柱(预先用甲醇
10 mL和蒸馏水 10 mL 活化),先后用蒸馏水 10 mL
和甲醇 20 mL 洗脱 , 甲醇洗脱液减压蒸干 , 置于
-20 ℃冰箱中保存备用 。
分析用样品的制备 取经过前处理的血液 、器
官和组织提取物样品 ,定量加入甲醇(每 5 g 加入甲
醇 1 mL),超声溶解后 ,用 0.5 μm 微孔滤膜过滤 ,备
用 。取花锚乙醇提取物 、乙酸乙酯萃取物 、水相溶解
·199·高 洁等:以体内吸收分布特点指导花锚成分的研究
物 、 酮苷成分群和 酮苷元成分群各 20 mg ,分别
加入甲醇 20mL ,超声溶解 ,用0.5μm微孔滤膜过滤
备用 。
花锚主要成分的分离和结构鉴定 同批花锚材
料(10 kg)用上述方法得到乙酸乙酯萃取部分和水
相部分 。取乙酸乙酯萃取部分 50 g ,干法上样进行
硅胶柱色谱分离 ,石油醚-丙酮(100∶1 ~ 1∶1)用
HPLC检查 ,石油醚-丙酮(10∶1)洗脱部分主要含有 1
号峰;石油醚-丙酮(5∶1)洗脱的两个部分中分别主
要含有 2和 3号色谱峰;4 ~ 7号峰主要存在于石油
醚-丙酮(3∶1)洗脱部分。主要含有 1 ~ 3 号峰的部
分再分别经过 Sephadex LH-20柱色谱纯化 ,以石油
醚-氯仿-甲醇(5∶5∶1)为洗脱剂得到 1 ~ 3号峰单一
峰样品;丙酮重结晶得到 1(黄色柱状结晶 ,16 mg)、2
(淡黄色针状结晶 ,68 mg)和 3(淡黄色针状结晶 ,32
mg)。含有 4 ~ 7号峰的部分经过反相制备高效液相
色谱分离纯化[色谱柱:20 mm×250 mm , 10 μ;流动
相:以甲醇-水(85∶15)]得到5号单一峰样品(7 mg);
7号峰经薄层色谱检测[展开剂:石油醚-丙酮(2.5∶
1)]显示有两个成分 ,再经正相硅胶制备薄层色谱分
离纯化得到 7a(5 mg)和 7b(2 mg),均为淡黄色粉
末 。4和 6号峰由于在原植物提取物中含量很低 ,
未能分离得到足够的样品 ,因此结构未定 。
结果与讨论
1 花锚乙醇提取物的高效液相色谱-质谱联用分析
花锚乙醇提取物的二极管阵列检测色谱图与质
谱检测色谱图十分相似(图 1),主要色谱峰的分子
量均与花锚中已报道的 酮苷和苷元一致(表 1)。
从花锚及同属植物中已鉴定的 酮苷类成分的糖部
分主要由葡萄糖和木糖组成 ,双糖苷主要是龙胆二
糖苷 (gentiobiose , 1 , 6-diglucose)和 樱 草 糖 苷
(premeverose , 1 , 6-xylosylglucose)[ 2~ 4 , 9 , 10] ;通过对表 1
中 酮双糖苷类成分的 HPLC-MSn(多级质谱)分析 ,
表明含有木糖基团的结构均首先失去一个五碳糖单
元(m z 133),然后失去一个六碳糖单元(m z 162)。
因此 ,在表 1中对通过HPLC-MS 检测到的信号峰与
可能对应的化合物结构进行了初步指定 ,但这些信
号峰的准确结构尚待其他实验数据的进一步证实。
Table 1 Xanthones identified by LC-MS in the ethanolic extract of H.elliptica
tR min Compounds M.W. No.of Isolated compounds
3.7 1-O-diglucosyl-trimethoxylxanthone 626(302)
4.4 1-O-xylosylglucosyl-trimethoxylxanthone 596(302)
4.7 1-O-diglucosyl-tetramethoxylxanthone 656(332)
5.2 1-O-xylosylglucosyl-tet ramethoxylxanthone 626(332)
5.7 1-O-xylosylglucosyl-tet ramethoxylxanthone 626(332)
5.9 1-O-xylosylglucosyl-trimethoxylxanthone 596(302)
6.2 1-O-xylosylglucosyl-tet ramethoxylxanthone 626(332)
6.4 1-O-xylosylglucosyl-quintamethoxylxanthone 656(362)
6.9 1 , 7-dihydroxy-2 , 3-dimethoxylxanthone 288 7a
7.1 1 , 5-dihydroxy-2 , 3-dimethoxylxanthone 288 7b
7.2 dihydroxy-trimethoxylxanthone 318
7.6 dihydroxy-trimethoxylxanthone 318 6
8.0 1 , 7-Dihydroxy-2 , 3 ,4 , 5-tet ramethoxylxanthone 348 5
8.5 1-hydroxyl-2 ,3 , 5-trimethoxylxanthone 302 3
9.3 1-hydroxy-2 ,3 , 4 ,5-tetramethoxylxanthone 332 2
9.8 1-hydroxy-2 ,3 , 4 ,7-tetramethoxylxanthone 332 1
Data in parathesis are molecular weights of corresponding aglycons
Figure 1 UV(up)and base peak(low)detected HPLC
chromatograms of the ethanolic extract of H.elliptica
  以上实验证明花锚乙醇提取物中主要含有 酮
苷及其苷元 ,同时也证明了用二极管阵列检测进行
花锚成分体内吸收 、分布和指导分离研究的可行性。
图 2表明经过分离处理后花锚乙醇提取物中的 酮
苷元和苷成分群得到很好的分离 。
2 花锚中 酮类成分在大鼠脏器和组织中的吸收
和分布特点
二极管阵列检测高效液相色谱显示(图3 ~ 5),
·200· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2004 , 39(3):198-203
Figure 2 A comparison of HPLC chromatograms of the
ethanolic extract of H.elliptica , the glycosides and
aglycon portions
(a)在取样时间点花锚乙醇提取物 、乙酸乙酯萃取物
和 酮苷元成分群中的 酮苷元类成分在大鼠肝
脏 、脂肪 、血液 、肾脏 、脑组织和心脏中均有分布;表
明 酮苷元类成分能以原型被吸收并在体内分布 。
(b)色谱峰的强弱表明在单位重量的血液 、器官和组
织中 酮苷元类成分的分布量存在显著差别;其中 ,
肝脏分布最多 ,脂肪次之 ,心脏最少 ,在血液 、肾脏和
脑组织中的分布量相当并且较少。肝脏是药物代谢
的主要器官 ,因此 ,在取样时间点花锚成分在肝脏中
分布最多 。由于每只大鼠肝脏组织的重量远远大于
血液 ,以上实验结果也表明给药后从肝脏组织中检
测或分离鉴定药物成分和代谢产物比“血清化学”方
法中所用的血清更加灵敏可行。另外 ,在取样时间
点 酮苷元类成分在大鼠脂肪组织中具有高含量的
原因可能为:首先 , 酮苷元类成分是多甲氧基取代
的化合物 ,极性低 、脂溶性强 ,因此 ,吸收后容易分布
进入脂肪;其次 ,大鼠脏器和组织的取样是在连续给
药3 d后进行的 ,因此 ,具有亲脂性特征的 酮苷元
类成分有可能在脂肪和脑组织中蓄积 。(c)比较空
白肝脏 、给药肝脏提取物和药物制剂的色谱图(图
6),可清楚地看出在给乙醇提取物和乙酸乙酯萃取
物组的大鼠肝脏提取物中 , 保留时间为9 ~ 12 min
Figure 3 A comparison of HPLC chromatograms of the
ethanolic extract of H.elliptica and extracts of animal
samples obtained after rats were treated with the ethanolic
extract by op
Figure 4 HPLC chromatograms of the EtOAc soluble
fraction of the ethanolic extract of H.elliptica and extracts
of animal samples obtained after rats were treated with the
EtOAc soluble fraction by op
Figure 5 A comparison of HPLC chromatograms of the
aglycon portion and extracts of animal samples obtained
after rats were treated with the aglycon portion by op
Figure 6 A comparison of HPLC chromatograms of the
extract of liver blank , the EtOAc soluble fraction , the
ethanolic extract of H.elliptica , and the liver extracts
obtained after rats were treated with the EtOAc soluble
fraction and the ethanolic extract of H.elliptica by op ,
respectively , as well as the HPLC chromatogram of the
extract of liver blank
的 4 ,6和7号色谱峰(尤其是 4和 6号峰)的相对强
度明显增加。其中 ,4 和 6 号峰在花锚提取物中的
含量很低 ,未能分离得到;但是经过 LC-MS 分析证
明 4和 6号峰的分子量均为m z 318 ,推断为 2和 或
3的脱甲基代谢产物 。因此 ,推断脱甲基是花锚中
酮苷元类成分的代谢反应之一 。
·201·高 洁等:以体内吸收分布特点指导花锚成分的研究
  图 7和 8显示 ,在给水相溶解物和 酮苷成分
群的大鼠血液 、器官和组织提取物中 ,在取样时间点
大极性的 酮苷类成分在各组织脏器中的分布量很
低 ,而与苷元成分群相同或相似的低极性成分的相
对含量显著增加 ,尤其在脂肪和脑组织提取物中更
为明显;同时 ,单位脂肪和脑组织中这些成分的含量
高于肝脏组织。以上实验结果证明花锚中的 酮苷
类成分能够在消化 、吸收和代谢过程中降解为苷元;
同时 ,单位脂肪组织中这些成分的含量高于肝脏组
织的现象 ,说明由 酮苷类成分代谢产生的苷元类
成分能够分布在脂肪和脑组织并在相应组织蓄积
(连续给药 3 d),而在肝脏组织中的蓄积量相对较
少。这一结果提示如果应用药物成分的吸收分布特
点为指导进行天然药物中低极性成分的研究 ,脂肪
组织应是重要的检测和分析对象。
Figure 7 A comparison of HPLC chromatograms of the
water soluble fraction of the ethanolic extract of H.
elliptica and extracts of animal samples obtained after rats
were treated with the water soluble fraction by op
Figure 8 A comparison of HPLC chromatograms of the
glycosides portion and extracts of animal samples obtained
after rats were treated with the glycosides portion by op
3 能够吸收 、分布在大鼠组织中的花锚成分的分离
和结构鉴定
根据以上实验结果 ,确定 HPLC 色谱图中的1 ~
7号色谱峰为主要目标成分 ,以HPLC色谱分析为指
导 ,利用硅胶 、Sephadex LH-20以及制备高效液相色
谱分离方法 ,从花锚乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物
中分离得到了6个能被吸收并分布在大鼠器官和组
织中的主要成分;并利用包括MS 、一维和二维NMR
波谱手段确定了它们的结构 ,证明花锚提取物和给
药后肝脏提取物色谱峰中的 6个主要共有成分为多
甲氧基取代的 酮:1-羟基-2 , 3 , 4 ,7-四甲氧基 酮
(1)、1-羟基-2 ,3 ,4 ,5-四甲氧基 酮(2)、1-羟基-2 ,3 ,
5-三甲氧基 酮(3)、1 ,7-二羟基-2 , 3 ,4 ,5-四甲氧基
酮(5)、1 , 7-二羟基-2 ,3-二甲氧基 酮(7a)和 1 ,5-
二羟基-2 ,3-二甲氧基 酮(7b)(图 9)。其中 4和 6
号峰在乙醇提取物中的含量很低 ,因此未能分离鉴
定;分离鉴定的化合物均为花锚中报道的已知成分 ,
它们的药理学活性试验 、其他微量成分以及通过消
化 、吸收和代谢过程产生的相关成分的的分离 、结构
鉴定研究将进一步进行 。
Figure 9   HPLC chromatograms of the isolated
components and their structures
4 给药方法和取样时间点的确定
在中草药的传统用药实践中 ,通常的用药方法
是 1日 2 次 ,约 3 d 后观察效果 ,然后调整处方;因
此 ,中草药通常在给药 3 d 后才可以观察出效果。
另外 ,在常规药理和药物代谢实验研究中 ,口服给药
的取样时间点为给药后的 0.5 ~ 3 h;同时 ,参考血清
药理学和血清药物化学研究中所用的给药时间和采
样时间点 ,在该方法探索研究中 ,确定每天给药 2次
(次 12 h),连续给药3 d ,d 4给药 2 h后进行动物血
液 、器官和组织的取样 。
结论
利用高效液相色谱二极管阵列检测和 HPLC-
MS 方法 ,以检测能够吸收分布在大鼠血液 、器官和
·202· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2004 , 39(3):198-203
组织中的花锚成分为指导 ,利用各种色谱分离技术
和波谱鉴定手段 ,从花锚乙醇提取物中分离并鉴定
了能够吸收分布在大鼠血液 、器官和组织中的 6个
酮苷元成分。同时 ,证明花锚中的 酮苷类成分
在消化 、吸收和代谢过程中能够转化为 酮苷元 。
因此 ,认为花锚中 酮苷类成分的活性主要是通过
转化为 酮苷元来实现;这与本文的相关药理实验
结果相吻合 ,说明花锚中的 酮苷元是其更重要的
活性成分 。同时 ,也证明 ,利用现代灵敏分析检测手
段 ,以天然药物成分的吸收分布特点为指导 ,进行天
然药物成分的研究是一种可行并且值得进行深入探
索的方法。在中药现代化研究中 ,尽管有各种新思
路和新方法的提出和讨论 ,但是在多数情况下 ,均缺
乏实验基础 。本方法是对现有活性跟踪方法以及
“血清药理学”和“血清药物化学”研究方法的扩展和
补充 。
References:
[ 1] Sun HF , Hu BL , Fan SF , et al.Three new xanthones from
Halenia elliptica [ J] .Acta Bot Sin (植物学报), 1983 , 25
(5):460-467.
[ 2] Sun HF , Hu BL , Fan SF , et al.Three new gly cosides from
Halenia elliptica [ J] .Acta Bot Sin (植物学报), 1987 , 29
(4):422-428.
[ 3] Dhasmana H , Garg HS.Two xanthone glucosides from
Halenia elliptica [ J] .Phytochemistry , 1989 , 28(10):2819
-2821.
[ 4] Dhasmana H , Garg HS.Xanthones of Halenia elliptica [ J] .
Phytochemistry , 1990 , 29(3):961-964.
[ 5] Bennett GJ , Lee HH. Halenia elliptica xanthone: A
structural revision [ J] .Phytochemistry , 1991 , 30(4):1347
-1348.
[ 6] Zhang JM , Bao WL, Gao HP , et al. Studies on
theantihepatic damage and toxicity of elliptic leaf apergentian
(Halenia eliptica) and its xanthone [ J] .Chin Tradit Herb
Drugs(中草药), 1984 , 15(10):466-468.
[ 7] Ghosal S , Sharma PV , Jaiswal DK.Chemical constituents of
gentianaceae XXIII:tetraoxygenated and pentaoxygenated
xanthones and xanthone O-glucosides of Swertia angustifolia
Buch.-Ham [ J] .J Pharm Sci , 1978 , 67(1):55-60.
[ 8] Liu JS , Huang MF.Isolution and identification of xanthones
in Swertia mileesis [ J] .Chin Tradit Herb Drugs(中草药),
1982 , 13(10):1-2.
[ 9] Maria-Carmen RI , Andrew M , Kurt H.Xanthones and
secoriridoid glucosides of Halenia campanulata [ J ] .
Phytochemistry , 1992 , 31(4):1387-1389.
[ 10] Bao BQ , Sun QS , Bao BGN.Development of studies on
chemical components and bioactivities of Halenia [ J] .J
Chin Med Mater(中药材), 2003 , 26(5):382-385.
·203·高 洁等:以体内吸收分布特点指导花锚成分的研究