全 文 ：蒙药花锚总双苯吡酮提取工艺研究
邰巴达拉胡，娜 拉，拉喜那木吉拉，巴根那＊
（内蒙古民族大学，内蒙古 通辽０２８０００）
摘 要：目的：确定蒙药花锚双苯吡酮提取工艺。方法：首先用单因素试验法考察花锚双苯吡酮提取的
主要影响因素，然后采用正交试验法，以花锚双苯吡酮的量为指标，优化蒙药花锚总双苯吡酮提取的最
佳工艺。结果：花锚双苯吡酮提取的最佳工艺为乙醇浓度９０％，料液比为１∶４０，提取时间８ｈ，提取量
可达到１３．８２６ｍｇ／ｇ。结论：该实验确定的最佳工艺简便易行，提取率和提取量较高，可为花锚双苯吡酮
工业化生产提供参考依据。
关键词：花锚；双苯吡酮；提取工艺
中图分类号：Ｒ２８４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３－２１９７（２０１５）１９－００１６－０３
ＤＯＩ：１０．１１９５４／ｙｔｃｔｙｙ．２０１５１９００８
收稿日期：２０１５－０４－２３
基金项目：国家自然科学基金项目（８１３６０６７３）；内蒙古民族大学校级研究生资助项目（ＮＭＤＳＳ１４３２）
作者简介：邰巴达拉胡（１９８８－），男，蒙古族，内蒙古民族大学硕士研究生，研究方向为蒙药与方剂学。
通讯作者：巴根那（１９６０－），男，博士，内蒙古民族大学教授、博士生导师，研究方向为蒙药与方剂学。
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｔｏｔａｌ Ｘａｎｔｈｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｈａｌｅｎｉａ Ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ
Ｔａｉｂａｄａｌａｈｕ，Ｎａｌａ，Ｌａｘｉｎａｍｕｊｉｌａ，Ｂａｇｅｎｎａ
（Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｔｏｎｇｌｉａｏ ０２８０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｘａｎｔｈｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ
ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｘａｎｔｈｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ，ｔｈｅｎ Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ
ｔｏｔａｌ ｘａｎｔｈｏｎｅｓ ａｓ ｉｎｄｅｘ，ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
ｔｅｓｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｘａｎｔｈｏｎｅｓ ｆｒｏｍ Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ ｗａｓ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ９０％，ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｓｏｌｉｄ ｔｏ
ｌｉｑｕｉｄ ｗａｓ １∶４０，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ８ｈ．ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｃａｎ ｒｅａｃｈ １３．８２６ｍｇ／ｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｏｃｅｓｓ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｔｈｅ ｅｘ－
ｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｓ ｈｉｇｈｅｒ，ｉｔ ｃａｎ ｐｒｏｖｉｄｅ ｓｏｍｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｈａｌｅｎｉａ ｘａｎｔｈｏｎｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ；Ｘａｎｔｈｏｎｅｓ；Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ
蒙药花锚（Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ Ｌ．Ｃｏｒｎａｚ．），蒙药名为
希依日－地格达，是蒙医传统药材。系龙胆科（Ｇｅｎｔｉａｎａｃｅ－
ａｅ）花锚属（Ｈａｌｅｎｉａ）一年生植物的干燥全草［１］，生于山沟、
林缘、林下、水池湿草地［２］，主要分布在大兴安岭林区各地
以及蒙古、西伯利亚、远东、欧洲等地［３］。该药味苦，性平，
效柔、腻，主要功能为退黄，平息“协日”，利胆，愈伤。临床
用于肝、胆热，口苦，目黄，头痛，高烧，尿黄，“协日”热，肺
热，伤热等疾病［４］。据文献［５］报道，目前已从蒙药花锚中分
离得到了双苯吡酮及其苷类、黄酮及其苷类、裂环烯醚萜
类、三萜类和生物碱等类型成分，其中双苯吡酮（ｘａｎｔｈｏｎｅｓ）
类化合物是龙胆科植物的主要化学成分，也是蒙药花锚的
主要成分之一，有苯并色原酮、呫吨酮、氧杂蒽酮等别名。
是一种黄色的酚性化合物，植物中多为淡黄或无色的苷类
形式存在［６－７］。本文采用正交试验法，以总双苯吡酮含量为
指标，研究提取时间、溶剂量和乙醇浓度对蒙药花锚中双苯
吡酮提取的影响，从中优化提取的最佳条件，为工业化生产
提供参考依据。
１ 实验材料
ＵＶ－２５０１型紫外－可见分光光度计（岛津），Ｒｏｔａｖａｐｏｒ
Ｒ－２１０旋转蒸发仪（瑞士）Ｖａｃｕｕｍ Ｐｕｍｐ Ｖ－７００真空泵（瑞
士），ＩＳＯ９００１电子分析天平（北京赛多利斯天平有限公司）。
芦丁２００８６５６９（中国药品生物制品检定所），亚硝酸钠、硝酸
铝、氢氧化钠和乙醇等均为分析纯。蒙药花锚采集于内蒙
古锡林郭勒盟东乌珠穆沁旗，经内蒙古民族大学蒙医药学
院巴特尔教授鉴定为龙胆科（Ｇｅｎｔｉａｎａｃｅａｅ）花锚属（Ｈａｌｅｎ－
ｉａ）一年生植物花锚（Ｈａｌｅｎｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ Ｌ．Ｃｏｒｎａｚ．）的干
—６１—
燥全草。
２ 双苯吡酮测定方法
２．１ 芦丁对照液制备
精密称取芦丁对照品５．０ｍｇ，置于１０ｍＬ容量瓶中，加
无水乙醇溶解，并用无水乙醇至刻度，摇匀，即得。
２．２ 总双苯吡酮溶液制备
称取蒙药花锚粉末１０．０ｇ，精密称定，置于２５０ｍＬ圆底
烧瓶中，加９５％乙醇２００ｍＬ，回流提取８ｈ，滤过，滤液即为
样品液。
２．３ 检测波长扫描
分别取样品液和对照液０．６ｍＬ，分别置于２５．０ｍＬ和
５０．０ｍＬ容量瓶中，其余按线性关系考察操作。在４００～
８００ｎｍ范围内进行扫描，结果见图１。
Ａ为样品液；Ｂ为对照液
图１ ＵＶ扫描
２．４ 标准曲线绘制
分别取对照液０、０．５、１．５、２．０、２．５、３．０ｍＬ，于５０ｍＬ容量
瓶中，加５％亚硝酸钠溶液１．５ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ，加１０％硝
酸铝溶液１．５ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ，加４％氢氧化钠２０ｍＬ，加水
至刻度，摇匀，放置２０ｍｉｎ后以第一管为空白对照参比按分光
光度法，在５１０ｎｍ波长处测定吸光度，以吸光度为横坐标，浓度
为纵坐标，回归方程为：ｙ＝０．０８３ ７ｘ＋０．０３５ １，Ｒ２＝０．９９９ ３，线
性范围为２．５～６０μｇ／ｍＬ。结果见图２。
图２ 标准曲线
２．５ 精密度试验
取样品液６份，每份０．６ｍＬ，按“２．４”项下测定其吸光
度，测得吸光值的ＲＳＤ为１．８２％。
２．６ 稳定性试验
精密吸取样品液０．６ｍＬ，置于２５ｍＬ 容量瓶中，按
“２．４”项下测定其吸光度，每隔３０ｍｉｎ测定１次，连续３ｈ，测
得吸光值的ＲＳＤ为１．９６％。
２．７ 重复性试验
称取蒙药花锚粉末６份，每份５．０ｇ，精密称定，按“２．２”
项下制备供试液。分别取供试液０．６ｍＬ，按“２．４”项下测定
其吸光度，测得吸光值的ＲＳＤ为１．９４％。
２．８ 加样回收试验
精密吸取样品液６份，每份０．６ｍＬ，分别加对照品溶液
０．６ｍＬ，其他试剂加入量及时间同“２．４”项下操作。测定其
吸光度，计算平均加样回收率为９９．８７％，ＲＳＤ为１．９７％。
３ 单因素试验
３．１ 测定方法
分别精密吸取单因素试验和正交试验项下溶液０．６
ｍＬ，置于２５．０ｍＬ容量瓶中，按“２．４”项下操作，测定其吸光
度并计算总双苯吡酮含量。
３．２ 乙醇浓度对花锚总双苯吡酮的影响
称取花锚粉末５份，每份１０．０ｇ，于５００ｍＬ圆底烧瓶
中，分别加入不同浓度的乙醇溶液（５０％、６０％、７０％、８０％、
９０％）２００ｍＬ，回流提取 ８ｈ，滤过。分别精密吸取滤液
０．６ｍＬ，其他试剂加入量及时间同“２．４”项下操作。测定其
吸光度，计算其百分含量，结果见图３。
图３ 乙醇浓度对花锚双苯吡酮的影响
３．３ 提取时间对花锚总双苯吡酮提取率的影响
称取花锚粉末５份，每份１０．０ｇ，于５００ｍＬ圆底烧瓶
中，分别加９０％乙醇２００ｍＬ，于同一温度下分别回流提取
４、６、８、１０ｈ，每份提取１次，滤过。分别精密吸取滤液０．６
ｍＬ，按“２．４”项下操作。测定其吸光度，计算其百分含量，
结果见图４。
图４ 提取时间对花锚总双苯吡酮的影响
—７１—
３．４ 料液比对花锚双苯吡酮含量的影响
称取花锚粉６份，每份１０．０ｇ，于５００ｍＬ圆底烧瓶中，
分别加９０％乙醇１∶５、１∶１０、１∶２０、１∶３０、１∶４０，回流提
取８ｈ，滤过。分别精密吸取滤液０．６ｍＬ，其他试剂加入量及
时间同“２．４”项下操作。测定其吸光度，计算其百分含量，
结果见图５。
图５ 溶剂量对花锚总双苯吡酮提取率的影响
４ 正交实验
４．１ 影响因素及水平
根据单因素试验结果，确定乙醇浓度、料液比、提取时
间作为考察因素，以双苯吡酮含量为评价指标，用Ｌ９（３４）正
交表安排试验，因素水平见表１。
表１ 影响因素和水平
水平
因素
乙醇浓度（％）Ａ 料液比（ｍＬ）Ｂ 提取时间（ｈ）Ｃ
１ ７０ １∶３０ ６
２ ８０ １∶４０ ８
３ ９０ １∶５０ １０
４．２ 正交实验结果与分析
称取药材，共计９份，每份１０．０ｇ，按正交试验表安排实
验，以双苯吡酮测得量为考察指标，结果如表２所示。
表２ 提取工艺正交实验设计
实验号
乙醇浓度（％）
Ａ
料液比（ｍＬ）
Ｂ
提取时间（ｈ）
Ｃ
Ｄ
双苯吡酮
含量（％）
１ １ １ １ １ ５．６２
２ １ ２ ２ ２ ５．６４
３ １ ３ ３ ３ ６．８１
４ ２ １ ２ ３ ６．３４
５ ２ ２ ３ １ ６．７８
６ ２ ３ １ ２ ７．１４
７ ３ １ ３ ２ ７．２５
８ ３ ２ １ ３ ５．３８
９ ３ ３ ２ １ ６．２４
Ｋ１ ５．１８３ ５．９１５ ５．６６２ ５．４８２
Ｋ２ ６．０８７ ５．２８４ ６．１２５ ６．０２２
Ｋ３ ６．１５８ ５．８４６ ６．０８３ ５．９８５
极差 ０．３８６ ０．４１５ ０．７３９ ０．３５２
对表２进行数据处理，由直观分析可知，以总黄酮含量
为评价指标，主要因素依次为提取时间、料液比、乙醇浓度，
最佳工艺为Ａ３Ｂ２Ｃ２。花锚总双苯吡酮提取的最佳工艺为：
乙醇溶剂浓度为９０％，提取时间为８ｈ，料液比１∶４０，提取
量可以达到１３．８２６ｍｇ／ｇ。为确认是否为双苯吡酮，对提取
物进行理化鉴别。
５ 花锚双苯吡酮的定性鉴别
按照优化提取工艺得到的花锚总双苯吡酮通过如下几
种鉴别实验进行定性研究：①浓氨水反应：取该样品溶液点
滴在滤纸上，将滤纸在氨水上方蒸熏０．５ｍｉｎ，立即置于紫外
光下观察，呈明显的黄褐色荧光斑点；②ＡｌＣｌ３ 反应：取样品
溶液点滴在滤纸上，滴加１％ ＡｌＣｌ３ 乙醇溶液，风干后在可
见光下观察，呈灰黄色，在紫外光下呈黄色荧光斑点；③乙
酸镁反应：取样品溶液点滴在滤纸上，滴加１％乙酸镁甲醇
溶液，风干后在紫外光下观察，呈黄色斑点；④盐酸－镁粉
反应：取乙醇提取液１ｍＬ于试管中加镁粉，再加入浓盐酸数
滴（１次性加入），在泡沫处呈橙黄色。
６ 讨论
从方法学考察结果看，在实验条件下芦丁具有良好的
线性关系，精密度、准确度和稳定性均较高，可作为蒙药花
锚总双苯吡酮含量测定的依据。花锚总双苯吡酮提取的最
佳工艺为：乙醇溶剂浓度为９０％，提取时间为８ｈ，料液比１
∶４０，提取量可以达到１３．８２６ｍｇ／ｇ。通过理化鉴别实验进
一步验证，优化工艺条件下得到的花锚提取物主要为双苯
吡酮。
参考文献：
［１］ 内蒙古卫生厅．内蒙古蒙药材标准［Ｓ］．赤峰：内蒙古科学技
术出版社，１９８７：４１８．
［２］ 占布拉·道尔吉．蒙医正典［Ｍ］．呼和浩特：内蒙古人民出版
社，２００６：２２７．
［３］ 中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国卫生部
药品标准·蒙药分册［Ｓ］．北京：中国医药科技出版社，１９９８：
４５．
［４］ 内蒙古自治区革命委员会卫生局．内蒙古中草药［Ｍ］．呼和
浩特：内蒙古人民出版社，１９７２：１０４．
［５］ 中华本草编委会．中华本草·蒙药卷［Ｍ］．上海：上海科学技
术出版社，２００４：１５７．
［６］ 谭沛，刘永隆．植物口山酮贰类化合物［Ｊ］．天然产物研究与
开发，１９９５，７（１）：４５－５４．
［７］ 马昌．山酮在植物中的分布及其药理作用［Ｊ］．安徽农业科
学，２００９，３７（３１）：１５２４４－１５２４５．
（责任编辑：余 婷）
—８１—