全 文 :·论 著·
甘肃黄芩 、苦参 、金银花对深部酵母样真菌感染的
体外抑菌试验研究
张美玲1 , 魏莲花2 , 田 洹1 , 王宏伟1 , 黄亚乐1
(1.甘肃中医学院附属医院检验科 , 甘肃 兰州 730020;2.甘肃省临床检验中心 , 甘肃 兰州 730000)
摘要:目的 探讨甘肃黄芩 、苦参 、金银花中抑制深部酵母样真菌感染的有效活性成分。方法 将甘肃黄芩 、苦
参 、金银花洗净 、烘干 、粉碎成(80 目)细粉 , 收集临床分离酵母样真菌 5 种共 8 株 , 接种于 90 mm 萨布罗平板 ,在
无菌条件下 , 将平板打孔为 6 mm , 每孔填入黄芩 、苦参 、金银花药粉 25.73 mg , 在药粉中滴加无菌蒸馏水 3 ~ 5
滴 , 35 ℃培养 24 ~ 48 h , 观察抑菌环大小 。结果 黄芩药粉对 5 种酵母样真菌抑菌环直径分别为 16.0 、13.5 、
13.0 、13.0、10.5 mm;苦参粉和金银花粉抑菌环为 0。结论 甘肃黄芩中含有抑制酵母样真菌的有效活性成分 ,
甘肃苦参 、金银花中无有效活性成分。
关键词:中草药;抑菌物质;深部感染;酵母样真菌
中图分类号:R379.4 文献标识码:A 文章编号:1005-4529(2009)02-0149-02
Bacteriostasis Test in vitro of Deep Yeast-like Fungi by Radix Scutellariae ,
Radix Sophorae Flavescentis and Flos Lonicerae in Gansu
ZHANG Mei-ling* , WEI Lian-hua , TIAN Yuan , WANG Hong-wei , HUANG Ya-le
(*A f f i l iated Hospi tal , Gansu College o f Tradi t ional Chinese Medicine ,
Lanzhou , Gansu 730020 , China)
Abstract:OBJECTIVE To find the activ e principle in Radix Scutellariae , Radix Sophor ae F lavescentis and F lo s
Lonicerae in Gansu inhibiting yeast-like fungi of deep infection.METHODS Radix Scutellariae , Radix Sopho rae
F lavescentis and Flos Lonicer ae we re separately cleaned , toasted and grinded to fine pow er.F ive kinds of (8
strains)yeast-like fungi that we re co llected and spread into 90mm Sabouraud plate.On aseptic condition , bo red
holes on Sabouraud plate w ith the drilling instrument of 6mm diamete r , and filled every holes w ith 25.73mg fine
pow der of Radix Scutellariae , Radix Sopho rae F lave scentis and Flos Lonicerae , and added 3 to 5 drops of distilled
w ater in the medicinal pow der.Under 35℃, the bacte ria we re cultur ed fo r 24 to 48 hour s , and the size of
bacte rio static ring wa s observ ed.RESULTS The diameter s o f the bacterio static ring o f Radix Scutellariae powder
inhibiting five kinds of y east-like f ungi w ere separately 16.0mm , 13.5mm , 13.0mm , 13.0mm and 10.5mm ,
re spectively , and the diame te r of Radix Sophorae F lavescentis and F lo s Lonicer ae powder w as 0.CONCLUSIONS
There is the active principle inhibiting yeast-like fungi in Radix Scutellariae , but no t that in Radix Sopho rae
F lavescentis and Flos Lonicerae.
Key words:T raditional chinese materia medica;Bacterio static substance;Deep infection;Yeast-like fungus
收稿日期:2008-04-16 ; 修回日期:2008-07-20
基金项目:甘肃省科技攻关计划项目(2GS064-A43-020-28)
广谱抗菌药物 、免疫抑制剂 、细胞毒性药物的广
泛应用甚至滥用 ,导致条件致病真菌感染日趋增多 ,
在医院 ,由酵母样真菌如白色假丝酵母菌 、光滑假丝
酵母菌 、热带假丝酵母菌 、克柔假丝酵母菌等引起的
各种深部真菌感染几乎遍及临床各科。酵母样真菌
导致的呼吸系统 、伤口 、肠道感染 、菌血症 、甚至败血
症已经严重影响患者的身心健康。到目前为止 ,国
内外市场上用于抗真菌药物大多为化学药物 ,用于
深部真菌感染治疗抗菌效果不理想 ,不良反应大 ,因
此 ,开展中草药抗真菌研究 ,前景非常广阔 。本研究
选用了 3种甘肃地产中草药黄芩 、苦参 、金银花进行
体外抑菌试验研究 ,目的是找出其有效活性成分进
行提纯 ,用于临床深部真菌感染的预防及治疗。
1 材料与方法
1.1 药物来源 甘肃黄芩:为唇形科植物 、甘肃黄
芩的干燥根和根茎 ,产自甘肃陇西;甘肃苦参:为豆
·149·中华医院感染学杂志 2009 年第 19 卷第 2 期
科植物苦参的干燥根 ,产自甘肃陇西;甘肃金银花:
为忍冬科植物叶藏花的干燥花蕾 ,产自甘肃陇南 。
药材由本院中药制剂室提供。
1.2 菌株来源 5种菌株由甘肃省临床检验中心
微生物实验室提供 ,其中白色假丝酵母菌 3株 、光滑
假丝酵母菌 1株 、克柔假丝酵母菌 1株 、热带假丝酵
母菌 2株 、葡萄牙假丝酵母菌 1株 。
1.3 培养基 科玛嘉平板采用法国 CHROM agar
公司干粉配制;萨布罗平板采用杭州天和微生物实
验有限公司的干粉配制。
1.4 菌液配制 将 5种菌株接种于萨布罗琼脂斜
面上 ,35 ℃生长 24 ~ 48 h ,用无菌生理盐水冲洗斜
面 ,调至 0.5个麦氏单位 。
1.5 药粉准备 将 3种药材洗净 、烘干 ,粉碎成(80
目)细粉。
1.6 方法 用无菌棉拭子蘸取配制好的菌液按 3
个方向密涂于萨布罗平板上 ,静置 15 min 待菌液浸
透培养基后在无菌条件下 ,用直径 6 mm 的打孔器
在平板上打 7个孔 ,孔中分别填入黄芩 、苦参 、金银
花的药粉 25.37 mg ,每种药平行装 2孔 , 35 ℃孵育
24 ~ 48 h ,观察结果。
2 结 果
黄芩生药粉对 5种深部感染酵母样真菌有抑制
作用 ,说明黄芩生药粉中含有比较高抑制酵母样真
菌的有效活性成分;金银花 、苦参药粉不能抑制酵母
样真菌的生长 ,说明金银花 、苦参生药粉中不含抑制
酵母样真菌的有效活性成分 ,结果见表 1。
表 1 甘肃黄芩 、苦参 、金银花体外抑菌环直径(mm)比较
病原菌 黄芩 苦参 金银花
白色假丝酵母菌 15~ 17 0 0
光滑假丝酵母菌 13~ 14 0 0
葡萄牙假丝酵母菌 12~ 14 0 0
热带假丝酵母菌 12~ 14 0 0
克柔假丝酵母菌 10~ 11 0 0
3 讨 论
随着现代医学的发展 ,广谱抗菌药物 、免疫抑制
剂 、细胞毒性药物广泛应用于临床 ,骨髓移植 、器官
移植及介入治疗等的不断开展 ,使得酵母样真菌成
为医院深部真菌感染最重要的致病菌[ 1] ,亦成为危
重患者的严重并发症 ,给临床治疗带来很大困难 ,据
报道重症急性胰腺炎患者合并深部真菌感染后 ,治
疗预后极差 ,死亡率很高[ 2] 。因此 ,临床医生必须重
视危重患者酵母样真菌感染的预防和治疗 。
目前市场上用于治疗真菌感染药物基本为:多
烯类 、咪唑类和其他 3类 。多烯类最有效着为两性
霉素 B ,但用于系统治疗可引起白细胞降低 ,心 、肝 、
肾损害[ 3] ,在临床使用中受到一定的限制;咪唑类是
目前合成抗真菌药中最好的一类 ,其中的氟康唑和
伊曲康唑有抗菌谱广 、抗菌活性强 、体内分布广泛 、
组织中浓度高 、半衰期长 、毒性小等优点 ,但随着临
床广泛使用 ,其耐药性不断增强 ,尤其是氟康唑对光
滑假丝酵母菌 、克柔假丝酵母菌天然耐药[ 4] ,这给临
床治疗中药物的选用造成很多限制 ,因此开发高效
低毒抗真菌天然药物具有重要的意义 。我国中草药
在治疗真菌感染方面有悠久的历史 ,本研究的目的
在于筛选抗真菌作用最强的中草药 ,找出其中的有
效活性成分 ,探索其抗真菌的相关机制 ,为抗真菌新
药研发提供一些思路。
黄芩 、苦参 、金银花均为清热解毒药 ,祖国医学
认为具有抗炎 、抗菌功能 ,文献报道 ,含有苦参 、金银
花的中药复方制剂对白色假丝酵母菌有抑制作用 ,
黄芩单体对深部感染白色假丝酵母菌有很好的抑制
作用[ 5] ,本研究观察发现苦参单体 、金银花单体对白
色假丝酵母菌 、光滑假丝酵母菌 、热带假丝酵母菌 、
葡萄牙假丝酵母菌 、克柔假丝酵母菌均无抑制作用 ,
25.37 mg 黄芩单体对白色假丝酵母菌 、光滑假丝酵
母菌 、热带假丝酵母菌 、葡萄牙假丝酵母菌 、克柔假
丝酵母菌均有抑制作用。结果表明 ,黄芩对深部感
染酵母样真菌体外抑菌作用很强 ,但对其在临床中
预防和治疗作用等尚需进一步研究。
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