全 文 ：［收稿日期］ 20120711(010)
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(81173540)
［第一作者］ 葛婷婷，硕士，研究方向为新药研发，E-mail:
zyykuailebaobei@ 163． com
［通讯作者］ * 程建明，中药学博士，副研究员，研究方向为新
药研 发，Tel:025-86798011，E-mail: cjm7895 @
163． com
·化学与分析·
HPLC测定荔枝草提取物中高车前苷的含量
葛婷婷，程建明 *
(南京中医药大学，南京 210029)
［摘要］ 目的:建立荔枝草提取物中高车前苷含量的高效液相(HPLC)测定方法。方法:Hedera ODS-2 色谱柱(4. 6
mm × 250 mm，5 μm) ，流动相甲醇-0. 5%冰醋酸水溶液(50∶ 50) ，柱温 30 ℃，流速 1 mL·min － 1，检测波长 335 nm。结果:高车
前苷在 0. 20 ～ 2. 01 μg 呈良好的线性关系，平均回收率 101. 70%，RSD 1. 84%。结论:该方法简便、准确、专属性强，可以作为
荔枝草提取物中高车前苷含量测定的一种有效方法。
［关键词］ 荔枝草提取物;HPLC;高车前苷;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)23-0059-03
Determination of Homoplantaginin Content in Salvia plebeia Extract by HPLC
GE Ting-ting，CHENG Jian-ming*
(Nanjing University of Traditional Chinese Medicine，Nanjing 210029，China)
［Abstract］ Objective: To establish the assay method for determining content of homoplantaginin in
extract of Salvia plebeia． Method:Hedera ODS-2 column was used with methanol-0. 5% acetic acid (50 ∶ 50)as
mobile phase; the column temperature was maintained at 30 ℃; the flow rate was 1 mL·min － 1;detection
wavelength was set at 335 nm． Result:Homoplantaginin showed a good linear relationship within 0. 20-2. 01 μg．
The average of coefficient of recovery was 101. 70%，RSD was 1. 84% ． Conclusion:This method is simple，
accurate，specific，and can be considered as an effective method for determining content of homoplantaginin in the
extract of Salvia plebeia．
［Key words］ Salvia plebeia extract;HPLC;homoplantaginin;content determination
荔枝草为唇形科植物荔枝草 Salvia plebeia R．
Br．的地上部分，主产于江苏、浙江、安徽。其味苦、
辛，性凉，有清热解毒、止咳及平喘、凉血、利尿等功
效。主治感冒发热，咽喉肿痛，肺热咳嗽，咳血等。
现代临床上常用荔枝草及其复方制剂治疗咳嗽﹑咽
炎等病症，效果良好［1］。全草主要含黄酮类化合
物，包括高车前苷及其苷元、泽兰黄酮、假荆芥属苷、
半齿泽兰素等。现代药理研究表明荔枝草黄酮类化
合物具有抑菌［2］、止咳平喘［3］、祛痰及抗组胺［4］、保
肝［5］等作用。通过药效学初步研究发现，荔枝草总
黄酮提取物具有明显的抗炎作用，且对急性咽炎模
型大鼠具有一定得治疗作用。作者旨在提取荔枝草
总黄酮提取物，通过大孔树脂分离纯化得到总黄酮
提取物［6］，经过研究开发成一种治疗慢性咽炎的药
物。本研究主要建立一种检测荔枝草中主要黄酮成
分高车前苷的 HPLC 方法，为更好的建立荔枝草提
取物及其制剂的质量标准提供依据。
1 仪器与试药
Agilent 1100 高效液相色谱仪，Agilent 1100 二
极管阵列检测器(DAD) ，Agilent 1100 化学工作站，
HT-230A 柱温箱，TGL-16G 型高速离心机(上海安
亭科学仪器厂) ，KH3200 DE 型数控超声波清洗器
(昆山禾创超声仪器有限公司) ，BP 211 D 型电子天
平，MP 51001 型电子天平(上海恒平科学仪器有限
公司)。
D101 大孔树脂(河北沧州宝恩化工有限公
·95·
第 18 卷第 23 期
2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 23
Dec．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.23.025
司) ，高车前苷对照品(自制，含量达 98%以上) ，荔
枝草 提 取 物 (自 制，批 号 20120503，20120504，
20120505) ，甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 样品的制备
2. 1. 1 对照品溶液的配制 精密称取对照品5 mg，
置于 10 mL 的量瓶中，用流动相(50%甲醇)定容至
刻度，得浓度为 503 mg·L － 1的高车前苷储备液。再
吸取上述储备液 2 mL 至 10 mL 量瓶中，加流动相定
容至 10 mL，即得高车前苷标准品溶液。
2. 1. 2 供试品溶液的配制 荔枝草提取物的制备:
荔枝草药材适量，加 6 倍量 60%的乙醇回流提取 3
次，每次 1 h，纱布过滤后合并滤液，回收乙醇至药液
浓度为 0. 8 g·mL － 1，高速离心后上清液通过 D101
大孔树脂柱，用 7 倍柱体积 75%的乙醇通过大孔树
脂，收集 75% 乙醇部分，回收乙醇后，水浴蒸至近
干，减压干燥，研钵研细，过 80 目筛即得。
精密称取荔枝草提取物样品 10 mg，加流动相
(50%甲醇) ，超声溶解，定容至 10 mL，摇匀。
2. 2 色谱条件摸索 在文献的基础上调整各参数，
选择色谱峰分离较好的色谱条件。最终确定色谱条
件为 Hedera ODS-2 色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5
μm) ，流动相甲醇-0. 5% 冰醋酸水溶液(50 ∶ 50) ，柱
温 30 ℃，流速 1 mL·min － 1，检测波长 335 nm。
2. 3 系统适应性考察 分别精密吸取上述 2 种溶
液各 10 μL，按上述色谱条件分别测定，结果塔板
数 ＞ 5 000，分离度 R ＞ 1. 5，见图 1。
A. 对照品;B. 样品;a. 高车前苷
图 1 荔枝草提取物 HPLC
2. 4 线性关系考察 精密吸取高车前苷对照品溶
液 2，5，8，10，15，20 μL，按上述色谱条件进行测定，
记录峰面积。以进样量(X)对峰面积(Y)进行线性回
归，得回归方程 Y = 1 021. 4X － 8. 193 9(r = 0. 999 9) ，
结果表高车前苷在 0. 20 ～ 2. 01 μg 线性关系良好。
2. 5 精密度试验 精密吸取高车前苷对照品溶液
10 μL，连续进样 6 次，按上述色谱条件进行测定，记
录峰面积，计算得高车前苷峰面积的 RSD 为
0. 90%，表明仪器的精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一批次样品按 2. 1. 2 项下
方法制得供试品溶液，分别于制备后 0，2，4，6，8，
12，18 h 进样 10 μL，按上述的色谱条件进行测定，
记录峰面积，计算得峰面积的 RSD 为 0. 61%，结果
表明供试品溶液至少在 18 h 内稳定。
2. 7 重复性试验 取同一批次样品按 2. 1. 2 项下
方法制得 6 份供试品溶液，按上述色谱条件进行测
定，结 果 高 车 前 苷 的 平 均 含 量 在 9. 86%，RSD
为 1. 97%。
2. 8 加样回收试验 取同批号的荔枝草提取物
5 mg，精密称定，置 10 mL 量瓶中，共 6 份，分别精密
量取高车前苷对照品溶液 1 mL(浓度为 0. 503 g·
L － 1) ，按 2. 1. 2 项下方法制备供试品溶液，按 2. 2 项
下色谱条件进行色谱分析和测定，计算加样回收率，
结果平均回收率为 101. 70%，RSD 为 1. 84%，结果
见表 1。
表 1 高车前苷回收率试验
称样量
/mg
样品中含量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
4. 98 0. 498 1. 020 103. 71
5. 04 0. 504 1. 021 102. 77
5. 03 0. 503 1. 014 101. 53
101. 70 1. 84
5. 02 0. 502 0. 998 98. 54
5. 03 0. 503 1. 010 100. 77
5. 05 0. 505 1. 022 102. 87
注:加入量为 0. 503 mg。
2. 9 样品含量测定 取 3 批荔枝草提取物样品，
分别将对照品溶液和供试品溶液各进样 10 μL，
HPLC 测定，用标准曲线法计算，3 批样品中高车前
苷 含 量 测 定 结 果 分 别 为 10. 35%，10. 35%，
10. 40%，结果见表 2。
3 讨论
供试品溶液和对照品溶液均用流动相配制，避
免溶剂峰的影响;采用等度洗脱，方法简单，色谱峰
分离效果好;流动相采用文献报道的常用有机溶剂
甲醇和水，加入一定浓度的冰醋酸调整峰型，效果
较好。
·06·
第 18 卷第 23 期
2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 23
Dec．，2012
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
表 2 样品含量测定结果
批号
样品量
/mg
样品百分
含量 /%
各批平均
含量 /%
平均含量
/%
20120503
10. 04
10. 06
10. 04
10. 03
10. 35
20120504
10. 06
10. 02
10. 03
10. 04
10. 35 10. 37
20120505
9. 99
10. 02
10. 40
10. 40
10. 40
考察了温度对高车前苷色谱峰的影响，发现不
同温度对高车前苷的分离度和峰型好坏有一定的影
响，温度为 40，35 ℃，甲醇比例为 48%时，峰型不是
很好，而当温度为 30 ℃时，甲醇比例为 48% 时，峰
型较好，但是保留时间比较长，因此增加甲醇比例，
调整保留时间，最终定为甲醇比例为 50%，温度为
30 ℃，峰型和分离度均较好。
在荔枝草中高车前苷是其主要黄酮类成分，故
对制剂中高车前苷的含量测定很有实际意义。作者
采用 HPLC 测定荔枝草提取物中高车前苷的含量，
大大提高了试验的灵敏性和选择性，测定结果准确
性可靠。
［参考文献］
［1］ 傅国强，王硕，王跃生 ． 荔枝草及其混淆品的 HPLC
指纹图谱鉴定［J］． 江西中医学院学报，2008，20
(6) :72.
［2］ 裴云萍，吴正红，方芸，等 ． 荔枝草及复方荔枝草提取
液体外抑菌实验［J］． 江苏药学及临床研究，2001，9
(3) :6.
［3］ 郭仁永，李玲，郝洪 ． 荔枝草止咳平喘作用的研究
［J］． 国医论坛，2000，15(4) :41.
［4］ 刘旭杰，李玲，郝海鸥 ． 荔枝草的祛痰及抗组胺作用
［J］． 第四军医大学学报，2003，24(19) :1776.
［5］ 卢汝梅，杨长水，韦建华 ． 荔枝草化学成分研究［J］．
中草药，2011，42(5) :859.
［6］ 张旭，王锦玉，仝燕，等 ． 大孔树脂技术在中药提取
纯化中的应用及展望［J］． 中国实验方剂学杂志，
2012，16(6) :286.
［责任编辑 顾雪竹］
［收稿日期］ 20120322(010)
［基金项目］ 辽宁省化工环保工程技术研究中心 \大连大学创新教育基金项目(2011144)
［通讯作者］ * 丁仕强，硕士，实验师，从事分析教学，Tel:0411-87402436，E-mail:dsq920@ 163． com
HPLC测定前列安通胶囊中芍药苷的含量
丁仕强 *
(大连大学环境与化学工程学院，辽宁 大连 116622)
［摘要］ 目的:采用高效液相色谱建立前列安通胶囊中芍药苷含量的检测方法。方法:采用 Waters Nova-Pak C18色谱柱
(4. 6 mm × 150 mm，4 μm) ，以乙腈-水(15∶ 85)为流动相，流速为 1. 0 mL·min － 1，检测波长 230 nm，芍药苷的保留时间为 3. 757
min。结果:芍药苷质量在 0. 20 ～ 4. 0 μg 呈良好线性关系 (r = 0. 997 6)。低、中、高 3 个浓度的平均加样回收率分别为
97. 85% ～ 100. 38% (RSD 0. 37% ～ 0. 81%)。结论:该方法简便快速，结果准确可靠，可用于前列安通胶囊中芍药苷的 HPLC
含量测定。
［关键词］ 高效液相色谱;前列安通胶囊;芍药苷
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)23-0061-03
Determination of Paeoniflorin in Qianlie Antong Capsule by HPLC
DING Shi-qiang*
(College of Environment and Chemical Engineering，Dalian University，Dalian 116622，China)
［Abstract］ Objective:To determine the content of the paeoniflorin in Qianlie Antong capsule by HPLC．
Method:The separation was performed on Waters Nova-Pak C18 (4. 6 mm × 150 mm，4 μm) column eluted
·16·
第 18 卷第 23 期
2012 年 12 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 23
Dec．，2012