全 文 ： CHINA MEDICINE AND PHARMACY 117
2 0 1 4 年 1 月 第 4 卷 第 1 期 ·药品鉴定·
当 归 藤 为 紫 金 牛 科 植 物 当 归 藤（Embelia
parviflora Wall. ex A .DC. ）的干燥根与老茎，别名小
花酸藤子、筛箕蔃、土当归等。其味苦、涩，性温，具
有补血、活血、益精壮阳、强腰膝的功效，常用于治
疗血虚诸症、月经不调、闭经、产后虚弱、腰腿酸痛、
跌打骨折等症 [1-2]，在广西少数民族地区常将其作
当归使用，故民间流传有“谁人懂得筛箕蔃，不愁不
生养”之说，说明该药可治疗不孕症等 [3]。当归藤
还有温肾补血作用，广西特产中成药“桂龙药膏”以
该药材为原料。有文献报道 [4] 从该药材的根茎乙
醇提取物中分离得到 4 个结晶，其中 3 个鉴定为正
三十烷酸乙酯、正三十烷酸及 α- 菠甾醇，另一个
结晶初步分析为具侧链的羟基苯醌类成分。现代药
理研究表明，儿茶素具有抗癌、抗氧化、抗诱变、抗糖
尿病、抗菌消炎、抗衰老、降脂减肥等多种功能，并且
其作为一种新型的天然抗氧化剂在食品领域中得到
了广泛应用 [5]。目前，关于该药材中儿茶素含量测定
未见报道，本文建立了当归藤中儿茶素的含量测定
方法，为当归藤的质量控制提供科学依据。
1  仪器与试药
1.1  仪器
Agilent1100 高效液相色谱议（美国安捷伦公
司）；BP211D 电子分析天平（德国赛多利斯）；C
18
柱（Diamonsil-2，5μm，4.6×250mm 迪 马 公 司）；
LG-16W 高 速 微 量 离 心 机（北 京 医 用 离 心 机 厂）；
SB2200-T 超声波清洗器（上海必能信公司）。
1.2  试药
儿茶素对照品（中国药品生物制品检定所提
供，批号 877-200001，供含量测定用）；水为超纯
水，甲醇、乙腈（Fisher；色谱纯），冰乙酸（国药集团
化学试剂有限公司，色谱纯）；提取用甲醇、乙醇（国
药集团化学试剂有限公司，分析纯）。
2  方法与结果
2.1  色谱条件[6]
色 谱 柱 为 C
18
柱（Diamonsil-2，5μm，4.6×
HPLC法测定当归藤中儿茶素的含量
卢森华1    刘  鼎2    李怡萱2    农  莉2    陈  勇2▲
1. 广西壮族自治区玉林食品药品检验所，广西玉林 537001；2. 广西中医药大学药学院，广西南宁 530001
[ 摘要 ] 目的 建立当归藤中儿茶素的含量高效液相色谱法。方法 采用 HPLC 法进行测定，色谱柱为 C18 柱
（5μm，4.6×250mm），流动相为甲醇 -0.5% 冰乙酸溶液（15 ︰ 85），检测波长为 280nm。结果 儿茶素进样
量在 0.26 ～ 1.35μg 之间与峰面积值呈现良好的线性关系，r=0.9997，平均回收率为 98.26%，RSD 为 2.6%
（n=6）。结论 所建立的含量测定方法可行，质量可控，稳定性良好。
[ 关键词 ] 当归藤；HPLC；儿茶素
[ 中图分类号 ] R917      [ 文献标识码 ] B      [ 文章编号 ] 2095-0616（2014）01-117-03
Content determination of catech in the Embelia parviflora Wall.
by HPLC
LU  Senhua
1
    LIU  Ding
2
    LI  Yixuan
2
    NONG  Li
2
    CHEN  Yong
2
1.Guangxi Zhuang Autonomous Region Institute for Food and Drug Control,Yulin 537001,China;2.Faculty of
Pharmacy，Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning 530001,China
[Abstract] Objective To establish a method for the content determination of Catech in the Embelia parviflora Wall
by HPLC. Methods HPLC was performed on an C
18
column(5μm，4.6×250mm) using methanol-0.1% H
3
PO
4
(15 ︰
85) as the mobile phase under the detection wavelength of 280nm determinate scutellarin of barbata. Results The
linear range of scutellarin was 0.26 ～ 1.35μg,the mean recovery was 98.26% with RSD 2.6%(n=6). Conclusion
The method of determination is feasible formulated granules could be control lable in quality and shows good stability.
[Key words] Embelia parviflora Wall.;HPLC;Catechin
[ 基金项目 ] 广西自然科学基金创新研究团队项目“中药
新药基础研究”（2011GXNSFF018006）；广西中医药管
理局中医药自筹经费项目（gzzc1120）；广西中药药效研
究重点实验室自主研究课题（10-046-04-Z8）。
▲
通讯作者
118 CHINA MEDICINE AND PHARMACY
2 0 1 4 年 1 月 第 4 卷 第 1 期·药品鉴定·
250mm，迪马公司），流动相为甲醇 -0.5% 冰乙酸溶
液（15 ︰ 85），流速为 0.8mL/min，柱温为 30℃，检
测波长为 280nm，进样量为 5μL，理论塔板数以儿
茶素峰计算应不低于 5000，分离度应大于 1.5。
2.2  对照品溶液制备
精密取干燥至恒重的儿茶素对照品，称定重量
为 5.64mg，置 25mL 量瓶中，加适量甲醇超声使溶
解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每毫升含
儿茶素 0.225mg）。
2.3  供试品溶液制备
取当归藤药材粉末约 1g，精密称定，置于锥形
瓶中，加入 50% 乙醇 20mL，称重，超声提取 1h，放
冷，称定重量，用 50% 乙醇补足损失的重量，滤过，
取续滤液约 2mL 至离心管中，10000 转 /min 离心
10min，取上清液备用，即得。
2.4  测定方法
分别精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液各
5μL，在上述色谱条件下，供试品中儿茶素色谱峰
与对照品色谱峰保留时间一致，并与其他共存成分
分离度大于 1.5。色谱图见图 1、2。
min0 5 10 15 20 25 30
mAU
-10
0
10
20
30
40
2
5
.4
6
0
Catechin
图 1    儿茶素对照品HPLC色谱图
min0 5 10 15 20 25 30
mAU
-10
0
10
20
30
40
2
5
.4
7
6
Catechin
图 2    供试品 HPLC色谱图
2.5  线性关系考察
分 别 精 密 吸 取 上 述 儿 茶 素 对 照 品 溶 液
（0.225mg/mL）1、2、3、4、5、6μL 进样，测定峰面积，
以进样量（x）为横坐标，峰面积（y）为纵坐标绘制
标准曲线，并作最小二乘法线性回归，得回归方程：
y=1118x+4.663，r=0.9997。结果表明儿茶素对照品
浓度在 0.26 ～ 1.35μg 之间与峰面积值呈现良好
的线性关系。
2.6  精密度试验
精 密 吸 取 儿 茶 素 对 照 品 溶 液（0.225mg/mL）
5μL，连续进样 6 次，测定峰面积，其平均峰面积
值为 1221.0，RSD 为 0.32%，表明仪器精密度良好。
2.7  重复性试验
取同一批药材粉末 4 份（产地：广西金秀），每
份 1g，精密测定，按供试品制备方法制备，测定峰
面积并计算儿茶素含量，平均值为 0.152%，RSD 为
0.38％。表明本法重复性良好。
2.8  稳定性试验 
取一份上述供试品溶液，每次精密吸取 5μL，
分别于 1，2，4，6，12，24h 进样，测定其峰面积值并
计算儿茶素含量，儿茶素的平均峰含量为 0.153%，
RSD 为 0.65%，表明供试品溶液在 24h 内稳定性好。
2.9  加样回收试验
取 已 知 含 量 的 供 试 品 6 份（产 地：广 西 金
秀），每 份 约 0.5g（含 量 为 0.148%），精 密 称 定，
分别加入一定量的儿茶素对照品溶液，照供试品
溶液制备方法处理并测定儿茶素含量，计算回收
率，平均回收率为 98.26%，RSD 为 2.6%。结果
见表 1。
表1    供试品回收率试验结果
编号
样品量
（g）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
平均回收率
（%）
RSD
（%）
1 0.5076 0.725 1.49 101.25
98.26 2.6
2 0.5047 0.725 1.44 95.07
3 0.5033 0.725 1.44 95.71
4 0.5025 0.725 1.45 97.67
5 0.5051 0.725 1.46 98.90
6 0.5048 0.725 1.48 100.95
2.10  样品含量测定
分别取不同产地当归藤药材粉末各一份，每份
约 1g，精密称定，按供试品制备方法处理，测定峰面
积，计算儿茶素含量。结果见表 2。
表2    样品测定结果
产地 儿茶素含量（%）
广西金秀 0.152
广西天等 0.010
广西玉林 0.135
广西靖西Ⅰ 0.125
广西靖西Ⅱ 0.119
广西平乐 0.053
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3  讨论
3.1  含测对象的选择
大量研究发现，儿茶素具有抗氧化、抗诱变、协
同抗癌、抗心血管疾病、抗衰老、清除自由基和降脂
减肥等多种生理功能，并在食品、化妆品领域中得
到较广泛应用。我们在当归藤中发现含有可观的
儿茶素含量，可作为含测对象；同时在选定的几种
备选含测物质中儿茶素易得，价格便宜。
3.2  方法选择
管海波等 [7] 在对当归藤化学成分的研究过
程中，分离得到大量的儿茶素，并利用紫外分光光
度法测定了当归藤中儿茶素含量，但紫外分光光
度法精密度低，所以本文用 HPLC 法测定儿茶素
的含量。
3.3  色谱条件的选择
照紫外 - 可见分光光度法，在 200 ～ 800nm
扫 描，结 果 在 280nm 处 有 最 大 吸 收，故 选 280nm
为 测 定 波 长。 分 别 比 较 甲 醇 - 水（15 ∶ 85）、乙
腈 - 水（15 ∶ 85）、甲醇 -0.5% 冰乙酸（15 ∶ 85、
10 ∶ 90、20 ∶ 80）几个系统，以甲醇 -0.5% 冰乙
酸（15 ∶ 85）效 果 最 好。 分 别 设 定 20 ℃、25 ℃、
30 ℃、35 ℃ 不 同 的 柱 温 进 行 比 较，在 30 ℃ 条 件
下，峰 分 离 效 果 最 好 [8]。 分 别 考 察 了 0.8、0.9、
1.0mL/min 不同流速下的色谱图，分离效果都很
好，但以 0.8mL/min 测得的柱效最高，因此确定最
佳流速为 0.8mL/min。
3.4  提取方法选择
分别采用索氏静置、回流提取和超声提取进行
比较，超声与回流提取效果差不多，考虑到用超声
比较简单，故选超声；另分别考察了相同取样量以
5%、30%、50%、70%、95% 乙醇进行提取，50% 乙醇
提取效果较优 [9]；另对超声提取时间进行比较，结
果测得超声提取 1h 后趋于稳定，故选定提取时间
为 1h。
3.5  展望
儿茶素药理作用广泛，近几年对儿茶素的药理
活性的研究越来越多，研究显示儿茶素有多样的
生物活性，对多种疾病的预防与治疗都有使用价
值，此外儿茶素与其他抗癌药联合使用具有增效
作用，作为抗癌辅助治疗具有广阔的前景 [10]。然
而儿茶素类成分复杂，自身具有易氧化、易降解的
生物学特性，体内与体外的研究结果并不完全一
致，儿茶素类的手性研究及其体内与金属离子、蛋
白质等物质的相互作用可能是今后研究的重点。
鉴于儿茶素类物质具有良好的保健功能，各种儿
茶素现已广泛使用在食品、保健品中，但目前儿
茶素类作为单独药物应用于临床还有一定距离。
我们相信随着构效关系、代谢动力学、作用机制
等研究的深入，儿茶素类物质的应用可得到进一
步深化。
[参考文献]
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（收稿日期：2013-08-03）