全 文 ：收稿日期:2009-05-21;　修订日期:2009-10-13
基金项目:国家自然科学基金(No.30860393)
作者简介:张小玲(1974-),女(汉族),湖南冷水江人, 现为桂林医学院实
验师 ,病理学与病理生理学硕士研究生,主要从事天然药物与病理生理学
研究工作.
＊通讯作者简介:朱　华(1957-), 男(汉族),广西柳州人 , 现任桂林医学
院教授 , 博士研究生导师 , 博士学位 ,主要从事天然药物与病理生理学研
究工作.
狗肝菜多糖对 D-半乳糖胺所致大鼠急性
肝损伤的保护作用
张小玲1 ,肖胜军 1 ,高　雅2 ,容明智 1 ,张可锋 1 ,沈　洁1 ,陈力锋 1 ,朱　华1, 2＊
(1.桂林医学院 ,广西 桂林　541001;2.广西中医学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 观察狗肝菜多糖对 D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的影响。方法 建立 D-半乳糖胺(D-GalN)诱发的
大鼠急性肝损伤模型 , 不同浓度狗肝菜多糖干预后 , 测定动物血清 ALT、AST。肝组织常规制片及 HE染色观察组织病理
学改变。结果 狗肝菜多糖能使肝损伤动物血清 ALT、AST水平显著降低。组织病理学检测发现狗肝菜多糖处理后肝组
织损害程度降低 。结论 狗肝菜多糖对 D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤具有保护作用。
关键词:狗肝菜多糖;　急性肝损伤;　保肝
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)02-0278-01
ProtectiveEffectoftheDiclipterachinensisPolysaccharideonRatAcuteLiverInjuryIn-
ducedbyD-GalN
ZHANGXiao-ling1＊ , XIAOSheng-jun1 , GAOYa2 , RONGMing-zhi1 , ZHANGKe-feng2 , SHENJie1 ,CHENLi-feng1 ,
ZHUHua1, 2＊
(1.GuilinMedicalColege, Guilin541001, China, 2.GuangxiTraditionalChineseMedicalUniversity, Nanning
530001, China)
Abstract:ObjectiveToobservetheeffectoftheDiclipterachinensispolysaccharideontheratacuteliverinjuryinducedbyD-
GalN.MethodsD-GalN-inducedacuteliverinjurymodelwasesablishedinrats.AfteradministrateddiferentdoseofDi-
clipterachinensispolysaccharide, ratserumwasconeatedfordetectionofthecontentsofALT, AST.HEstainingwasusedtoeval-
uatehistopathologicalchangeofliver.ResultsDiclipterachinensispolysaccharidecouldreducetheserumconcentsofALT, AST,
alleviatehistopathologicalinjury.ConclusionDiclipterachinensispolysaccharidehasprotectiveefectonD-GalN-inducedacute
liverinjury.
Keywords:Diclipterachinensispolysaccharide;　Acuteliverinjury;　Liverprotection
　　狗肝菜 Diclipterachinensis(L.)Nees.是爵床科 (Acanthace-
ae)华九头狮子草属(Dicliptera),全草味甘 、微苦 、性寒 , 归心 、肝 、
肺经 , 具有清热 、凉血 、利湿 、解毒 、生津 、利尿等功效 , 临床常用于
治疗感冒发热 、热病发斑 、暑热烦渴 、吐衄血 、便血 、尿血 、崩漏 、肺
热咳嗽 、咽喉肿痛 、肝热目赤 、眼结膜炎 、小儿惊风 、小便淋沥 、带
下 、带状疱疹 、痈肿疔疖 、蛇犬咬伤等证 [ 1 , 2] 。 《中国药典 》(2005
版)Ⅰ部曾收录 , 拟定其来源为爵床科植物狗肝菜的干燥全
草 [ 1] 。狗肝菜为广西民间药食两用的中草药 , 也是壮族地区常
用壮药 , 主要含有多糖 、有机酸 、氨基酸等物质 [ 2] 。多糖类中药
作为具有抗氧化及免疫调节作用 , 有抗肝炎及肝损伤作用 [ 3] 。
本文利用 D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤模型来评价狗肝菜
多糖抗肝损伤的作用 。
1　材料
1.1　动物 SD大鼠 ,体质量(200±20)g, 雌雄各半 , 由桂林医学
院实验动物中心提供 ,合格证号:SCXK桂 2007-0001。
1.2　药物与试剂 狗肝菜多糖提取方法见参考文献 [ 4] , AST(谷
草转氨酶)试剂盒(批号:20080818)、ALT(丙氨酸氨基转移酶)
试剂盒(批号:20080808)均购自南京建成生物工程研究所。 D-
半乳糖胺(D-GalN):江苏启冬化学有限公司 , 批号:20081108。
联苯双酯滴丸:广州星群(药业)股份有限公司 ,批号:EF40049。
1.3　仪器及设备 电子天平(TP-4101, Denver), 超声波清洗仪
(B2200S-T, 必能信超声有限公司产品), 旋转蒸发仪(BOCHIB
-490),移液器(Eppendorf)、真空泵(SHB-Ⅲ , 郑州长城科工贸
有限公司),电热恒温水浴锅(DK-S26, 上海精密实验设备有限
公司),旋涡混合器(WH-861, 上海环球物化仪器厂), 离心机
(TDL-4,上海安亭科学仪器厂), 分光光度计(722型 , 上海第三
分析仪器厂)。
2　方法
2.1　D-半乳糖胺致大鼠急性肝损伤模型的建立及药物处理
取健康大鼠 36只 ,雌雄各半 , 180 ～ 220 g,适应性饲养 2 d, 每组 6
只 , 随机分为空白组 , 模型组 ,联苯双酯组(阳性药物对照组), 狗
肝菜多糖高 、中 、低剂量组。联苯双酯组剂量为 50 mg· kg-1;狗
肝菜多糖高 、中 、低剂量组狗肝菜多糖剂量分别为 300, 200, 100
mg· kg-1。除空白对照组和模型组给予等体积生理盐水外 , 各
组均灌胃给药 , 1次 /d,连续 7 d。第 6天给药 1h后 , 除空白对照
组腹腔注射等体积生理盐水外 ,其余各组分别腹腔注射 D-半乳
糖胺 400 mg· kg-1 , 禁食不禁水 ,末次给药 1h后 ,摘除眼球取血 ,
放置 1h, 3 000r/min离心 , 取上清液 , -20℃冰箱中保存 , 检测生
化指标 ALT、AST;快速取出肝脏 , 取肝左叶相同部位组织于 4%
中性缓冲福尔马林溶液中固定 16 h, 常规石蜡包埋及切片 , HE
染色。
2.2　统计学方法 各项指标均 x±s, 统计软件 SPSS11.5对组间
比较进行独立样本 t检验。
3　结果
3.1　血清学指标 结果见表 1。其中模型组血清 ALT和 AST两
种转氨酶活性均明显高于空白组说明模型建立成功。 狗肝菜多
糖高 、中 、低剂量组血清 ALT、AST水平均较模型组明显降低 , 其
中高 、中剂量组有统计学意义(P<0.01)。
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.2
表 1　D-半乳糖胺肝损伤模型的血清学改变( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 ALT/IU· L-1 AST/IU· L-1
空白 - 5.1±3.5＊＊ 21.9±2.7＊＊
模型 - 128.0±17.3 80.9±5.9
联苯双酯 50 10.0±11.2＊＊ 31.7±10.4＊＊
狗肝菜多糖(高)剂量 300 15.1±14.9＊＊ 31.2±10.3＊＊
狗肝菜多糖(中)剂量 200 20.9±11.2＊＊ 22.9±20.2＊＊
狗肝菜多糖(低)剂量 100 109.6±9.7 76.7±4.6
　　与模型组比较 , ＊P<0.05, P<0.01
3.2　组织病理学改变 D-半乳糖胺模型组肝损伤严重 , 肝小叶
中央大部分区域肝细胞水肿 , 出现肝细胞的碎片状坏死 , 小叶周
边肝细胞中至重度脂肪变性;阳性对照组和高剂量组病理改变相
同 , 中央静脉周围肝细胞轻度水肿 ,出现少量点状坏死;多糖中剂
量组肝小叶中央肝细胞水肿及周边少量肝细胞轻度脂肪变性 ,出
现散在点状坏死;多糖低剂量组中央静脉严重水肿 , 有散在点状
坏死及碎片状坏死 , 小叶周边肝细胞轻至中度脂肪变性。见图
1。
图 1　各组组织病理学改变
4　讨论
D-半乳糖胺是肝细胞磷酸尿嘧啶核苷的干扰剂 , 当 D-
GalN进入体内后与磷酸尿苷(UDP)结合形成 UDP-半乳糖胺
致使 UDP耗竭 ,从而使依赖其生物合成的核酸 、糖蛋白 、脂肪 、糖
等物质合成受到抑制 ,限制了细胞器及酶的生成和补充 , 导致肝
细胞受损。因此 , D-GalN肝损伤模型可用于抗病毒性肝炎药物
的研究 [ 5] 。
肝细胞损伤时 , ALT、AST从胞浆内释放并进入血液 , 血清中
ALT、AST升高。血清学检测发现狗肝菜多糖可使 D-GalN所致
大鼠肝损伤模型 ALT、AST水平下降;大鼠肝脏病变明显减轻 ,
用高 、中 、低剂量的狗肝菜多糖处理后 ,大鼠肝组织细胞水肿及脂
肪变性均较模型组明显减少 ,其中以狗肝菜多糖高剂量组的作用
最明显 , 效果与联苯双酯治疗组相当 , 说明狗肝菜多糖对 D-
GalN所致肝损害有一定的保护作用 , 且其作用效应与应用剂量
有关。但有关狗肝菜多糖保护肝细胞的确切机制仍有待进一步
研究。
参考文献:
[ 1 ] 　中国药典委员会.中国药典 [ S] .北京:化学工业出版社 , 2005:
369.
[ 2 ] 　郑宏钧 ,詹亚华.现代中药材鉴别手册 [ M] .北京:中国医药科技
出版社 , 2001:837.
[ 3 ] 　黄　皓 ,干　信.天然多糖类活性物质抗乙肝病毒的研究进展
[ J] .中草药 , 2006, 37(10):1594.
[ 4 ] 　冯小映 ,周　诚 ,黄　恩 ,等.狗肝菜多糖含量的测定 [ J] .中药材 ,
2003, 26(9):643.
[ 5 ] 　陈雪龙.实验性肝损伤动物模型的研究进展 [ J] .实验动物科学 ,
2008, 15(3):47.
收稿日期:2009-04-25;　修订日期:2009-09-10
基金项目:国家自然科学基金(No.20565002);
海南省自然科学基金资助项目(No.208002)
作者简介:齐江宁(1983-),男(汉族),河北石家庄人 ,现为海南大学 2007级硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事中药微量元素分析研究工作.
＊通讯作者简介:胡广林(1967-),男(汉族),湖南澧县人 ,现任海南大学研究员 ,博士学位 ,主要从事中药与天然产物化学方面的研究工作.
枸杞酒中 6种矿物质元素的溶出规律
齐江宁 ,胡广林＊ ,庞京团 ,韩　彬 ,刘冬平
(海南大学材料与化工学院 ,热带生物资源教育部重点实验室 ,海南 海口　570228)
摘要:目的 对枸杞酒中 6种矿物质元素 Ca, Mg, Fe, Zn, Mn和 Cu的溶出规律进行研究。方法 采用传统药酒泡制方法配
制枸杞酒 , 高压密封消解法消解样品 ,火焰原子吸收光谱法(FAAS)和石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)检测。 结果 枸杞
酒泡制过程中 Ca, Mg, Fe, Zn, Mn, Cu含量随浸泡时间的溶出动力学方程回归关系极显著(P<0.01), Mg、Fe溶出速度快 ,
15 d时就已达到溶出平衡点 , 其它元素在 30 d内还未达到溶出最大量。从药酒中各元素的溶出率来看 , 30d时累积溶出
率以 Cu最高(65.93%), 其次为 Fe(58.29%)、Mg(47.11%)和 Zn(42.61%), Ca(19.88%)和 Mn(17.62%)的累积溶出
率都较低。结论 枸杞酒中 6种矿物质元素溶出规律明显 ,可用于从矿物质元素角度理解枸杞酒中的化学组成和安全功
效性及为药酒的日常饮用提供参考。
关键词:枸杞酒;　矿物质元素;　溶出;　拟合
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2010)02-0279-03
TheDissolutionLawofSixKindsofMineralElementsinFructusLyciMedicinalLiquor
QIJiang-ning, HUGuang-lin＊ , PANGJing-tuan, HANBin, LIUDong-ping
(ColegeofMaterialScienceandChemicalEngineering, KeyLaboratoryofTropicalBiologicalResourcesofMin-
istryofEducation, Haikou, Hainan, 570228, P.R.China)
Abstract:ObjectiveTostudythedissolutioncharacteristicsofsixkindsofmineralelements.MethodsTraditionaltechnology
wasadoptedtoproducemedicinalliquor.TheFAASandGFAAScombinedwithpressurizedsampledigestionwereappliedtode-
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.2 时珍国医国药 2010年第 21卷第 2期