全 文 :mined with immunohistochemical method to detect the expressions of MMP-9 and TIMP-1. Results Compared with
the psuedo-operation group,MMP-9 increased markedly in model group( P<0.05) ; the expression of other groups
lies between the pseudo-operation group and model group ( P<0.05) . There was a significant TIMP-1 increase in
treatment groups compared with model group( P<0.05) . Conclusion BMSCs incubated with Dihuang- yinzi can
protect the brain through adjusting the expressions of MMP-9 and TIMP-1.
Key words: bone marrow stromal stem cells ( BMSCs) ; cerebral infarction; Dihuangyinzi; matrix metallopro-
teinases-9; tissue inhibitor of metalloproteinases-1
櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊櫊
收稿日期:2013-11-03
作者简介:宁艳梅( 1977-) ,女,讲师,医学硕士,主要从事临床中药学的教学与科研工作。
大叶三七止血、镇痛与补虚作用实验研究
宁艳梅,杨 韬,邓 毅,韩 涛,杨秀娟
(甘肃中医学院药学院,甘肃 兰州 730000)
摘要:目的 基于三七基础功效验证大叶三七对小鼠的止血、镇痛、补虚强壮作用。方法 采用断尾法
和试管法观察大叶三七对小鼠的止血作用,采用热板法和扭体法观察大叶三七对小鼠的镇痛作用,采用抗疲
劳实验和免疫指数测定法观察大叶三七对小鼠的补虚强壮作用,并进行比较。结果 三七和大叶三七均能
显著缩短小鼠的出血时间,减少小鼠扭体次数,并能提高小鼠痛阈,延长小鼠游泳时间,并使胸腺、脾脏指数
呈增加趋势。结论 三七与大叶三七对小鼠均有止血及镇痛作用,效果呈现同水平趋势;对小鼠均有补虚强
壮作用,大叶三七的作用较三七显著。
关键词:大叶三七;三七;止血;镇痛;补虚
中图分类号:R285.5 文献标志码:B 文章编号:1003-8450(2014)02-0004-03
三七为五加科人参属植物三七的干燥根,具有
散瘀止血、消肿定痛之功效,主治咯血、吐血、衄血、
便血、崩漏、外伤出血、胸腹刺痛、跌仆肿痛等症[1],
有“止血神药”及“伤科要药”之称。因其能散瘀血,
且止血而不留瘀,故对出血兼有淤滞者更为适宜。
《本草纲目》云:“三七止血,散血,定痛。”《玉揪药
解》云:“三七和营止血,通脉行瘀,行瘀血而敛新
血。”此外三七尚有补虚强壮的作用,在民间用于治
疗虚损劳伤[2]。大叶三七为五加科人参属植物珠
子参的根茎,别名钮子七、扣子七,性温,味苦、甘,有
舒经活络、补血止血、消肿止痛的功效,用于跌打损
伤、腰腿疼痛、月经不调、吐血、便血及虚劳咳嗽等
症[3 - 4]。因二者来源相近、功效相似,所以笔者通过
动物实验,比较三七与大叶三七的作用,为大叶三七
的推广应用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SPF级健康昆明种小鼠 36只,体质量 18~22 g,
雌雄兼具,由甘肃中医学院实验动物中心提供,实验
动物许可证号:SCXK(甘)2009-0004。
1.2 药物来源与制备
大叶三七采自陕西省凤县,经甘肃中医学院药
学院药用植物与栽培实验室杨韬实验师鉴定为五加
科人参属植物珠子参的根茎;三七由甘肃省中医院
提供。将三七和大叶三七粉碎,过 5 号筛,每 0.2 g
药粉加 10 mL水,每天实验前现配成 0.02 g /mL 的
混悬液。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组与给药 将 36 只小鼠随机分为生
理盐水组、三七组、大叶三七组,灌胃给药,三七组、
大叶三七组分别给予相同剂量(0.196 67 mg /g)的
对应药物混悬液,生理盐水组给予生理盐水 0
.2 mL /只,每日 1次,连续 14 d。
1.3.2 出血时间测定 采用断尾法[5],于末次给药
30 min后,分别距小鼠尾尖 0.5 cm 处剪断,自血液
流出时开始计时,每隔 15 s 用滤纸吸拭 1 次,至血
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甘肃 中 医 学 院 学 报
J. GANSU COLLEGE OF TCM
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液自然停止流出,记录 3组的出血时间。
1.3.3 凝血时间测定 采用试管法[6],于末次给药
30 min后,断头取血,接入试管中,自血液离开小鼠
身体时开始计时,每隔 15 s 倾斜试管 1 次,直到倾
斜到 90°血液不再流动时停止计时,记录 3 组的凝
血时间。
1.3.4 扭体实验[5] 于末次给药 60 min后,腹腔注
射 0.7%冰醋酸,剂量为 0.2 mL /只,同时开始计时,
观察记录 10 min内各组的扭体次数。
抑制率=(生理盐水组扭体次数-用药组扭体次
数)/生理盐水组扭体次数×100%
1.3.5 热板实验[5] 选取雄性小鼠,首先调节恒温
水浴箱,使水温控制在(55±0.5)℃。预热 1 0 min
后,筛选小鼠正常痛阈,痛阈在 5 ~ 30 s 内为合格小
鼠,连测 2 次,间隔 5 min,以平均值(不超过 3 0 s)
作为小鼠正常痛阈。将合格的小鼠随机分组,灌胃
给药,分别在给药后 30,45,60 s 测其痛阈值,如痛
阈值超过 60 s,即停止测试,按 60 s计。
1.3.6 游泳时间测定[5] 于末次给药 30 min后,小
鼠尾根负重 1 /10 体质量的铅丝,放入游泳缸中,开
始计时,直到小鼠头部沉入水中超过 10 s 停止计
时,记录小鼠的游泳时间。
1.3.7 免疫指数测定[5] 于末次给药 24 h后称重、
处死、解剖,称取胸腺、脾脏,并按照以下公式计算胸
腺、脾脏指数。胸腺(脾脏)指数 =胸腺(脾脏)质量
(mg)/体质量(g)
1.3.8 统计方法 所有数据采用 SPSS 19.0 统计软
件处理,计量资料以 珋x±s 表示,采用 F 检验,组间均
数比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),P
<0.05为差异有统计意义。
2 实验结果
2.1 三七和大叶三七对小鼠出血及凝血时间的影响
表 1结果显示:与生理盐水组比较,三七组与大
叶三七组均能显著缩短小鼠的出血时间(P<0.01 或
P<0.05),但是三七组与大叶三七组比较差异无统
计意义(P>0.05);三七组与大叶三七组凝血时间均
有缩短的趋势,但各组间比较差异均无统计意义(P
>0.05)。
表 1 三七和大叶三七对小鼠出血及
凝血时间的影响(珔x±s)
组别 n 出血时间 / s 凝血时间 / s
生理盐水组 12 267.10±77.83 167.00±45.60
三七组 12 173.22±73.29** 122.00±54.85
大叶三七组 12 181.67±48.84* 151.88±59.75
注:与生理盐水组比较* P<0.05,**P<0.01。
2.2 三七和大叶三七镇痛作用的比较
表 2结果显示:与生理盐水组比较,三七组与大
叶三七组均能显著减少小鼠扭体次数(P<0.01) ,提
高小鼠痛阈值(P<0.05 或 P<0.01) ,但是三七组与
大叶三七组比较差异无统计意义(P>0.05) ,表明二
者有相似的镇痛作用;在给药 30,45 min 时,大叶三
七的痛阈高于三七,而在给药 60 min 时,三七的镇
痛作用明显增强,而大叶三七的痛阈降低,表明大叶
三七起效较快,持续时间相对较短,三七起效缓慢,
持续时间相对较长。三七组与大叶三七组给药后痛
阈均较给药前显著升高,差异有统计意义(P<0.05
或 P<0.01)。
表 2 三七和大叶三七镇痛作用的比较(珔x±s)
组别 n
扭体反应
扭体次数 抑制率 /%
镇痛作用
给药前痛阈 / s
给药后痛阈 / s
30 min 45 min 60 min
生理盐水组 12 49.30±8.74 23.21±6.42 18.84±14.13 20.10±13.78 22.56±12.78
三七组 12 32.40±6.48** 34.28 22.15±7.60 35.98±16.90**△ 34.89±19.45**△ 41.69±17.26**△△
大叶三七组 12 32.40±12.02** 34.28 20.07±6.86 41.37±13.85**△△ 44.14±17.73**△△ 37.83±17.62*△△
注:与生理盐水组比较* P<0.05,**P<0.01;与同组给药前比较△P<0.05,△△P<0.01。
2.3 三七和大叶三七对小鼠游泳时间的影响
表 3结果显示:与生理盐水组比较,三七组与大
叶三七组游泳时间均显著延长,差异均有统计意义
(P<0.05或 P<0.01),但以大叶三七组作用更为显
著(P<0.05)。
2.4 三七和大叶三七对小鼠免疫指数的影响
表 4结果显示:与生理盐水组比较,三七组与大
叶三七组胸腺、脾脏指数均有增高的趋势,并以大叶
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三七组增高较为明显,但 3 组间比较差异均无统计
意义(P>0.05)。
表 3 三七和大叶三七对小鼠游泳时间的影响(珔x±s)
组别 n 游泳时间 /min
生理盐水组 12 78.00±40.082
三七组 12 131.79±64.522*
大叶三七组 12 190.67±58.215**△
注:与生理盐水组比较* P<0.05,**P<0.01;与三七组
比较△P<0.05。
表 4 三七和大叶三七对小鼠
免疫指数的影响(珔x±s,mg/10 g)
组别 n 胸腺指数 脾脏指数
生理盐水组 12 3.62±0.69 5.50±1.886
三七组 12 4.04±1.34 6.21±2.992
大叶三七组 12 4.15±1.30 7.29±1.935
3 讨论
三七是一味常用药,据《中国医药大辞典》记
载:“三七功用补血,去瘀损,止血衄,能通能补,功
效最良,是方药中之最珍贵者。”其味甘、微苦,性
温,入肝经血分,功善止血,又能化瘀生新,有止血不
留瘀、化瘀不伤正的特点,对人体内外各种出血,无
论有无淤滞,均可应用。现代药理证实,三七含多种
人参皂苷和氨基酸,可抗疲劳、抗衰老、促进造血功
能、促进记忆、提高免疫功能、增强应激能力等[7]。
大叶三七性微温,味苦、甘,有舒经活络、补血止
血的功效,生品用于跌打损伤、腰腿疼痛、月经不调、
吐血、便血,熟品用于气血双亏、虚劳咳嗽。其与三
七来源相近,具有相似的药性与功用特点,但未在临
床得以应用且相关研究也甚少。本实验通过比较三
七与大叶三七的止血、镇痛及补虚强壮作用,从而验
证大叶三七的药用价值,以期得以推广应用。
通过本实验结果得出以下结论:三七与大叶三
七对小鼠均有止血、止痛及补虚强壮作用,且二药对
小鼠的止血及镇痛作用呈现同水平趋势,部分实验
数据显示镇痛效果的持续时间有差别,对于小鼠的
补虚强壮作用,大叶三七较三七显著,但此结果还有
待进一步研究证实。
参考文献:
[1]侯家玉.中药药理学[M].北京:中国中医药出版社,
2002:131-132.
[2]高学敏.中药学[M].北京:中国中医药出版社,2007:2
96-297.
[3]中国医学科学院药物研究所.中药志[M].北京:人民卫
生出版社,1979:11-16.
[4]赵汝能.甘肃中草药资源志(上册)[M].兰州:甘肃科学
技术出版社,2004:1234-1236.
[5]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,
2000:483-484.
[6]徐叔云,卞如濂,陈修.药物实验方法学[M].3 版.北京:
人民卫生出版社,2002:1270.
[7]田代华.实用中药辞典[M].北京:人民卫生出版社,
2002:48.
[编辑: 徐燕]
Experimental research on big leaf Sanqi to stop bleeding,ease pain and tonify deficiency in mice
Ning Yanmei,Yang Tao,Deng Yi,Han Tao,Yang Xiujuan
( Gansu College of TCM,Lanzhou 730000,China)
Abstract: Objective To compare the effects of Sanqi and big leaf Sanqi to stop bleeding,ease pain and to-
nify deficiency in mice. Methods By using the end-cutting method and the test tube method,we observed the he-
mostatic effects on mice. By using the hot plate method and the body torsion method,the analgesic action on mice
was observed. We observed the deficiency tonification and strong function in mice by taking the anti-fatigue experi-
ment and immune index measurement. Results Compared with physiological saline,Sanqi group and big leaf Sanqi
group shortened the bleeding and clotting time. All reduced the mice body torsion times and improved the mice pain
threshold. All extended the mice swimming time and increased the thymus and spleen weight. Conclusion Sanqi
and big leaf sanqi have hemostatic and analgesic effect on mice and show the same level. They all have deficiency
tonification and strong role in mice. The role of big leaf Sanqi is more significant.
Key words: Sanqi; big leaf Sanqi; hemostasis; analgesia; deficiency tonification
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