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香荚兰炭疽病病原菌的鉴定及其有效杀菌剂筛选



全 文 :香荚兰炭疽病病原菌的鉴定
及 其 有 效杀菌 剂 筛 选
黄 伙 平
(福建省亚热带植物研究所 )
香英兰作为食品香料植物在热带地区普遍种植 以来 , 许多产区发生炭疽病 。 该病是
香英兰最严重的病害 , 而且分布十分广泛〔 ` ’ 7 〕 。 它侵染 香荚兰叶片 、 茎 蔓 、 根 以及 果
英 , 严重时造成死株和落果 , 影响香荚兰生产 。 本所地处厦门地 区 , 于 19 6 0年前后 , 从
国外引种香英兰 , 种植后不久 , 就发生炭疽病 , 当时曾初步报道该病 是 C ol l e ot t r i c h u m
s p
。 所致。 但 到 目前 为止 , 对于该病原菌种的鉴定及有效杀菌剂的筛选在 国内尚未见
报道 。 本文 旨在报道这方面研究所获得的结果 。
材 料 和 方 法
病原菌分离 : 采集新鲜的香英兰病组织 , 切成小块 ( 3 x 4毫米 ) , 先在 70 肠酒精中
浸 l 分钟后 , 移入 0 。 l 肠升汞水中浸 1 分钟 , 然后用灭菌蒸馏水洗涤 3 次 , 沥干多 余 的
水滴 , 置于马铃薯葡萄糖洋菜 ( P D A ) 平板上 。 或 在 70 肠酒 精 中 浸 l 分 钟 后 移 入
0

5帕次氯酸钠溶液中浸 2 分钟 , 取出沥干多余的溶液 , 直接置于 P D A 平板上 。 经上述
两种方法消毒后的病组织小片均置于 25 一 26 ℃的培养箱中培养 3 天 。
接种试验 : 把分离到的菌株扩 大培养 , 用培养 10 天的菌种制备抱子悬浮液 , 浓度为
1 大 1 0 `个抱子 /毫升 。 用经火焰消毒过的小刀片和大头针分别把香荚兰健叶小心划伤和
刺伤 , 然后把创伤的健叶分别涂 以抱子悬浮液和蒸馏水 , 业且在 25 一 26 ℃下保湿培养 48
小时后 , 置于阴凉处培养 , 直至出现症状时 , 再取病组织进行分离 。
杀菌剂生物测定 : 以多菌灵 ( 5 0帕可湿粉 ) 、 福美双 ( 5 0肠可湿粉 ) 、 甲墓托布津
( 7 0 外可湿粉 ) 、 代森钱 ( 5 0帕水剂 ) 、 退菌特 ( 5 0 肠可湿粉 ) 、 C . W . 5 2 4 (乳 油 ) 、
多硫磷 ( 7 5肠乳油 ) 、 敌菌灵 ( 5 0肠 可湿 粉 ) 、 百菌清 ( 7 5 肠可 湿 粉 ) 、 F s 4 9 ( 5 0肠
可湿粉 ) 等 1 0种杀菌剂 , 用纸片法 〔 “ 〕进行室 内生物测定 。供试菌种即上述分离到的病原
菌 , 各处理 3 个重复 , 在 27 土 0 . 5℃下培养 60 小时 , 测量抑菌圈直径 。 计算结 果 时 , 把
测量值减去滤片直径 ( 6 毫米 ) 得到校正直径 , 以此来 比较各杀菌剂的抑菌作用 。
结 果
一 、 病原菌鉴定
症状 : 香荚兰的茎 、 蔓叶片 、 果荚及不定根均受侵染 , 尤以近地面的老叶为重 。 叶
片发病时先端或边缘 出现暗褐色斑点 , 周围水渍状 , 呈半圆形或不规则形 , 具隐约可见
的轮纹 , 后来斑点中心变白 , 有时整个叶片腐烂干缩。 在斑点上或干缩的叶片上散生着
黑色小颗粒 , 潮湿时病斑上出现粉红色粘状物 (病原菌的分生抱子团 ) 。 茎蔓在初期出
现水渍状斑点 , 略凹陷 , 后变成暗褐色 , 呈椭圆形或不规则形 。 病斑包茎时 , 致茎蔓断
离 , 使病部以 _上部分萎蔫枯死 。 果英上生有褐色椭圆形或不规则形的小斑点 , 严重时 ,
导致落果 。 不 定根的根尖呈褐色至深褐色 , 有时也会致地下不定根腐烂 。
病原菌 : 病组织经两种方法消毒培养后 , 均能获得培养物 , 业经接种能诱致香荚兰
出现与上述相仿的症状 , 而且又可再分离到该培养物 。 将该菌的分生抱子盘及培养物在
光学显微镜下观察和测定结果表明 , 分生抱子盘深褐色 , 近圆形 , 直径为 82 一 34 2微米 ,
具刚毛 ; 刚毛束生 , 深褐色 , 有隔 , 大小为 6 0一 13 3 x 3 . 5一 4 . 5微米 。 分生抱子椭圆形 ,
少数棒状 , 无色 , 12 . 5一 20 . o x 3 . 5一 5 . 0微米 , 分生抱子团粉红色 。
二 、 杀菌剂生物测定
1 9 7 9年 , 对参试农药 : 多菌灵 、 甲墓托布津 、 福美双 、 退菌 特 、 F 8 4 9 、 代森 钱 、
敌菌灵 、 百菌清 、 C W 5 2 4 、 多硫磷等 10 种杀菌剂在室内进行生物测定结果见表 1 。
表 1 杀菌剂甘炭泣病病原菌的抑制效果
杀 菌剂 名 称 { 规 格 } 稀 释 倍 数 抑 菌 圈 直 径 (毫米 )
多 菌 灵
福 美 双
甲基托布津
代 森 按
退 菌 特
C

W
·
5 2 4
5 0 帕可湿粉
5 0务 1 1
7 0呱 1 1
5 0 听水 剂
5 。帕可湿粉
乳 宁It】
7 5帕乳 油
5 0肠可湿粉
7 5帕 !l !I
5 0肠 1 材
2 5

4二
1 9

2 案
1 8

7 .
18

3 辛
1 7

4 兴
多 硫 磷
敌 菌 灵
8

9
4

2
3

5
2

7
)1ln)0(们”卜月é只八Unéǎ广门08妇积剐出创8(
百 菌 清
F 8 4 9
. . . . . . . . . 匕 . . . . . . 一~ 一司一一州 . . . . . . . , , . . . . . , 曰脚 . . . . . .. , 表示差异极显著 ( P < % ) , . 表示差异显著 ( P < 5% ) 。从表 1可 以看出 , 参试杀菌剂对炭疽菌均有抑制作用 。 其中 , 以 50 肠多菌灵可湿粉
80 0倍液效果最好 , 其抑菌圈直径平均为 2 5 . 4毫米 。 50 沁福美双可湿粉 8 0 倍液 、 70 务托
布津可湿粉 8 0 倍液 、 50 帕代森铁水剂 10 0 0倍液 、 50 肠退菌特可湿粉 80 0倍 液以及 C . W .
5 2 4乳油 8 0倍液的抑菌圈直径分别为 19 . 2、 1 8 .7 、 1 8 . 3、 1 7 . 4和 1 4 .1毫米 , 其抑菌作用
虽然不如多菌灵 , 但是 , 这些杀菌剂的效果均明显地比多硫磷 、 敌菌灵 、 百 菌 清 以 及
F 8 4 9好 。
讨 论
据文献报道 〔 ` 〕 , R i dl e y 早在 1 8 8 7年在 塞 舌尔 群 岛就首先记录香荚兰炭疽病 。 该病
在马达加斯加 、 科摩罗 、 塞舌尔 、 西 印度等产 区 是 由 C a l o s p o r a v a n i l l a , M a s s e e引起
的 , 塔希提的香荚兰炭疽病是 由 C o l l e t o t r i e h u m v a n i l l a e S e a l i a 所致 , 哥伦 比 亚 、
毛里求斯 、 斯里兰卡则是 由 G l o e o s p o r i u m v a n i l l a e C o o k e造成的 。 而我们从厦 门地
区种植的香荚兰中分离到的病原菌 , 据其分生抱子盘 、 刚毛 、 分生抱子的大小 、 形态特
征 , 与魏景超 〔 ` 在 《真菌鉴定手册 》中记载的 C o l l e t o t r i e h u m o r e h i d e a r u m A l l e s e h的
形态特征相比较 , 则是一致的 , 因此 , 认为引起厦门地区种植的香荚兰炭疽病的病原菌
应是 C o l l e t o t r i e h u m o r e h i d e a r u m A l l e s e h .
从杀菌剂室内生物测定结果来看 , 认为多菌灵 、 福美双 、 甲基托布津 、 代森按 、 退
菌特等这几种药剂 可以用作防治香荚兰炭疽病的有效杀菌剂 。 据报道 , 用苯来特防治黑胡
桃炭疽病 ( G n o m on ia le tP os t y l a) 效果显著 。 〕 , 以 O。 2肠福 美 双 处 理辣椒种子可明 显
地减轻辣椒炭疽病 ( C o l l e t o t r i e h n m e a p s i e i ) 〔 6 〕 。 多菌灵则一是苯 来特在植 物 体 内 或
水中的水解产物即杀菌的有效成份 。 因此 , 尽管上述这些有效药剂未经 田间防治试验 ,
但据本试验结果 , 推荐这 5 种杀菌剂防治香荚兰炭疽病与有关报道是一致的 。 但是 , 由
于多菌灵是内吸广谱杀菌剂 , 长期单独使用会导致病菌产生抗药性 , 而 且抗多菌灵的菌
株对托布津也有 抗 性 “ 〕 , 因 此 ,在使用多菌灵时 , 必须与其他表而保护 .刊如福美双 、 退
菌特等混合使用 , 以免抗药性的产生 。 此外 , 在使用代森铁时 , 应注意药害问题 。 已经
证明 , 以该药剂 的 1 0 0 0倍液浇灌或喷雾对香荚兰是安全的 , 但使用更高浓度时 , 则未经
试验 , 因此 , 使用高浓度的代森钱应特别小心 , 以免发生药害 。 据报迈一 吐 〕 , 及时修剪业
烧毁病残组织 , 结合喷药 , 本病可 以得到控制 。
参 考 文 献
〔 1 〕 魏坛超 , 1 0 79 . 典菌鉴定手姗 , 上海科技 出版社 , 4 7 5 .
〔 2 〕 张译溥等 , 1 9 6 3 . 杀菌剂及杀菌剂的生物测定 , 1 12 , 中国工业出版社 。
〔 3 〕 南开大学元素有机化学研究所 , 1 9 7 9 . 国外农药进展 (三 ) , 73 一 7 5 , 化学出版社 。
〔 4 〕 C o r r e l l , D . S . , i 9 5 3 . E e o n o m i e B a t a n y , 7 ( 4 ) : 3 3 1一 3 3 .
〔 5 〕 B e r r y , F . H . , l g 7 7 . P l a n t D i s e a s e R e p o r * , 6 2 ( 5 ) : 3 7 8一 7 9 .
〔 6 〕 5 i d d i q u i , M . R . o t 、 } . , 2 9了7 . S e e d r e s o a r e h , 5 ( l ) : 6 7一 7 2 .
〔 7 〕 P u r s e g l o v e , J . W . l g 7 9 . T r ) p i e a l C r o p s 一 M o n o e o t y l e 汪0 0 5 , -J o g m a n ,
P

4 0 3一 1 3 。