全 文 ：宁夏农林科技 1 99 3年第 1 期 2 5
银 白杨 ` 河北杨过氧化物酶
同工酶的遗传分析初报 ’
宋玉霞 李桂华
( 宁夏农林科学院林研所 )
同工酶是指那些生物催化功能相同或蛋
自质结构相近 、 分子组成 却 不 尽 相同的酶
类 。 近年来 , 在遗传育种的生化分析方面 ,
应用同工酶的分析研究已很广泛 , 特别是引
用酶谱分析的方法鉴别无性系 , 有其独特之
处 。
一 、 材料与方法
1
.供试材料
我所 7 0年代采用 银白杨 ( P a p 。 l u 5 a l-
为a 乙 . ) 与河北杨 ( P . h o p e i e n s s s H u e t
比 o w ) 的花枝进行 切 枝 水培 、 室内人工控
制 授粉杂交方法 , 获 得了 F : 代杂种苗木 。
经多年繁殖成无性系测 试 林 , 在 1 12 个系号
中选择了 5 个优良无性系进行过氧化物酶同
工酶的测试分离 。
2
. 同工酶试验分析
样品采集后置冰瓶中带回 , 每样称取 2
克 , 冰浴研磨 , 加酶缓冲提取液 , 离心后置
o ℃保存备用 。 采用聚丙烯酞胺凝胶电泳分
离 , 改良醋酸联苯胺染色 , 凝胶透光照相并
描绘 , 风干保存 。
二 、 结果与讨论
从电泳图谱可清楚地看出 , 整个酶谱有
3 个染色区 (位点 ) 。 谱带 迁 移率 ( R F )
最快的为 C 区 , 较 快 的 为 B区 , 最慢的为A
区 。
1
. 亲本过氧化物酶同工酶谱分析
酶谱显示了银白杨 、 河北杨及其无性系
钓过氧化物酶谱表现型 。 从酶谱上可看出 ,
亲本银白杨和河 北 杨 的 酶谱表现具明显差
异 。 在 A 区 , 它们都为多聚体 , 根据酶带迁
移率大小共分 出 8 条 带 , 银白杨具有 A : 、
A 3
、
A
: 、
A 。 、 A 7 、 A 。六条带 , 其中 A S
带染色最深 , 活 性 最强 。 河北杨具有 A : 、
A
` 、
A : 三条带 , 其中A ` 、 A 。带染色最深 。
在 B 区 , 根据迁移率大小共分 出 七 条 带 。
银 白杨具 有 B : 、 B 3 、 B ` 、 B 。 、 B , 五 条带 -
其中B : 、 B 。 、 B ` 、 B 。四条带染色最 深 , 活
性最强 。 河北杨具有 B : 、 B 3 、 B ` 、 B S 、 B 。
五条带 , 其 中 B : 、 B ` 、 B S三 条 带 染 色 最
深 , 活性 最强 。 C区酶带活性相对较弱不做
分析。 两亲本酶谱在 A 区差别较 大 , 在 B区
有共同的三条染色最深的带。 从酶谱上可看
出 , 两亲本酶带迁移率不同 , 但它们都含有
五条染色最深的酶带 , 这也可 以说是代表杨
树的特征带。 银白杨与河北杨具有相同的儿
条酶带 , 反映出它们有相同的遗传背景 , 而
谱带又有很大的不同之处 , 可 以证明它们是
具有不同遗传基因型的种 。
2
. 无性系的过氧化物酶同工酶谱分析
从酶谱图和迁移率表 (附表 ) 上看出 ,
在 A 区五个无性系都具有银白杨 A 。带 、 河北
杨的A : 、 A 。带 , 而 银 白 杨的 A : 、 A 3带 、
河北杨的 A ` 带全部消失 。 银白杨的 A 。 、 A ,
带则是在有的无性系中表现 , 有些无性系中
消失。 见图谱 , 无性系 6 1 1 8 、 69 0 1 、 6 9 0 2具
辛本研 究在马国哗所长指导下 进 行 , 参
加工作的还有孙文福 、 田静宇同志。
6 21 9 9 3年第 1 期 宁更农林科技
附表 银白杨 x河北杨及亲本过教化物酶酶带迁移率比较表
1 名 3 4 5 6 7 8 9 1 3 24 与 G 7
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注 : + 、 + + 十 + + 为酶 带活性 , 十 十 + > 十 十 > 十 .
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从以上电泳结果的分析可看出 : ( 1 )
银 白杨 x 河 白杨无性系的酶谱均为双亲酶带
的互补 ,并都产生了新的杂种谱带 。说明无性
系一方面接受了双亲的遗传物质 , 在酶谱上
表现出双亲的特有酶带 , 另一方面 , 由于双亲
遗传因子的相互作用 , 在子代上又产生了新
的酶带 。 ( 2 )无性系的谱带除表现出共有的
双亲酶带外又表现 出各自的谱带特点 , 说 明
它们还具有遗传差异性 。 由遗传差异性 的影
响 , 决定了无性系的表型差异 。 ( 3 ) 从亲
子代酶带遗传数量来看 , 亲本银白杨的谱带
在无性系谱带中表现 出来 的 多 于 亲本河北
杨 , 这可 以证明树 木 遗 传 的一个很戈特点
是 “ 母体效应 ” 。 为选择亲本组合提 洪丁理
论依据 。 ( 4 ) 从无性系酶带表现型和赞因
型可看出 , 银白杨 又河 北 杨 的 杂交是成功
的 , 亲子代具有很强的遗传稳定性 , 尘炭的
是真正的杂种 , 并具有杂种优势 。
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过 氧化物酶 同酶谱示意 图
有 银 白 杨 的 A 。 、 A 7带 , 而 6 9 0 3 、 6 0 7 6只
有 银 白 杨 的 A 6带 。 在 B区 , 无性系 6 1 1 8 、
69 0 3
、
6 0 7 6具有银白杨的 B ,带 , 6 9 0 1 、 6 9 0 2具
有河 北杨的 B : 带 ,所有无性系均有 B 。 、 B ` 、
B
。这三条带 , 这 也 是两亲本的共同带 。 另
外 , 从酶谱上还可看出 , 无性系酶谱都表现
出了两亲本未出现的带 。