全 文 ：收稿日期:2006-12-07;　修订日期:2007-03-07
作者简介:朴丽花 (1973-),女(朝鲜族),吉林延吉人 ,现任延边大学医学
部讲师 ,硕士学位 ,主要从事组织化学方面的研究工作.
翻白草对四氧嘧啶性糖尿病大鼠的
降糖作用及对胰岛的病理学影响
朴丽花 , 洪　花 , 金　政 ,蔡英兰
(延边大学 ,吉林 延吉　133000)
摘要:目的 探讨翻白草对实验性糖尿病大鼠的降血糖作用。 方法 动物灌胃给药 , 用四氧嘧啶制备实验性糖尿病大鼠
模型。应用免疫组织化学方法观察胰岛 B细胞形态学改变 , 比色分析法检测血糖 、胆固醇及甘油三酯的含量。 结果 翻
白草对四氧嘧啶性糖尿病大鼠的胰岛 B细胞有明显的修复作用并可以降低血糖 、胆固醇及甘油三酯的含量。 结论 翻白
草对实验性糖尿病大鼠具有降血糖作用。
关键词:翻白草;　降血糖;　胰岛 B细胞;　大鼠
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)07-1663-02
TheEffectsofPotentilladiscolorBungeonBloodSugarandPathologyofPancreasIsletin
DiabeticRatsInducedbyAloxan
PIAOLi-hua,HONGHua, JINZheng, CAIYing-lan
(YanbianUniversity, Yanji133000 China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatethehypoglycemiceffectsofextractofPotentiladiscolorBungeonexperimentaldiabetesin
rats.MethodsExperimentaldiabeticratsmodelwasinducedbyaloxan.ThepancreasisletBcellsweredetectedbyimmunohis-
tochemistrytechnology.ThecontentsofbloodsugarandTG, cholesterolwereinvestigatedbycolorimetricmethod.ResultsPDB
hadrepairefectonpancreasisletBcels, anditdecreasedthecontentsofbloodsugarandTG.ConclusionThePotentilladis-
colorBungehastheefectofdecreasingbloodsugarindiabeticrats.
Keywords:PotentilladiscolorBunge;　Decreasebloodsugar;　PancreasisletBcel;　Rats
　　随着社会的进步与发展 , 糖尿病的发病率日趋增高 , 中国在
近 20年内糖尿病患病率增加了 3倍多 [ 1] 。虽然糖尿病的病因尚
未被阐明 , 但目前认为胰岛素绝对或相对不足或胰岛素抵抗是糖
尿病的主要病理基础。胰岛素的主要作用是促进细胞吸收血液
内的葡萄糖作为细胞代谢的主要能量来源 ,同时也促进肝细胞将
葡萄糖合成糖原或转化为脂肪 。胰岛素的这种作用受阻 、胰岛素
分泌不足或两者同时存在缺陷 , 可导致血糖增高。目前 , 尚缺乏
针对病因的有效治疗手段 ,因此 , 糖尿病的治疗中最关键的环节
还是降血糖。目前 , 用于糖尿病治疗的药物大部分为西药。西药
的降糖作用是肯定的 , 但其不良反应也是有目共睹。而中药在这
方面有相对的优势 , 它不良反应少 , 能有效防治并发症且疗效肯
定。在民间用翻白草泡水口服降糖的偏方 , 具有良好的临床
效果 [ 2] 。
1　材料
1.1 　翻白草 由延边大学医学部药学院天然药物教研室分离
提取。
1.2　美吡达 海南金晓制药有限公司。
1.3　试剂 四氧嘧啶为 HONGKONGFARCOChemicalSupplies
公司产品;小鼠抗大鼠胰岛素血清为武汉博士德生物工程有限公
司产品;血糖试剂盒为北京北化康临床试剂有限公司提供;甘油
三酯试剂盒为浙江东瓯生物工程有限公司提供;总胆固醇试剂盒
为上海荣盛生物技术有限公司提供;其他试剂均为国产分析纯。
1.4　动物 实验动物采用实验用 Wistar雄性大鼠 , 体重为 190
～ 230g,由延边大学医学部实验动物科提供。
2　方法
2.1　四氧嘧啶性糖尿病大鼠模型的制备 采取两次给药法 [ 3] ,
将四氧嘧啶用生理盐水配成 2%注射液(四氧嘧啶现配现用)。
第 1次禁食不禁水 12h后腹腔注射四氧嘧啶 120 mg/kg, 15 min
后腹腔注射胰岛素 0.1 ml, 并分别于给四氧嘧啶后 2.5 h和 5 h
灌胃给予 25%葡萄糖 1 ml/100 g。第 2次禁食不禁水 12 h后腹
腔注射四氧嘧啶 100 mg/kg。 15 min后腹腔注射胰岛素 0.1 ml,
并分别于给四氧嘧啶后 2.5 h和 5 h灌胃给予 25%葡萄糖 1 ml/
100 g。实验采用葡萄糖氧化酶法取眼眶后静脉丛血测末次给药
后 72h的空腹血糖值 , 以空腹血糖 >11.1 mmol/L作为糖尿病
大鼠。
2.2 　动物分组及给药方法 正常大鼠 60只按随机数字表法分
为正常对照组 、糖尿病对照组 、药物对照组 、实验(大 、中 、小 3个
剂量)组。实验期间各组大鼠均给予普通饲料喂养自由饮水 , 实
验组每日分别灌胃翻白草 9, 4.5, 2.25 g/kg;药物对照组每日灌
胃美吡达 5 mg/kg;糖尿病对照组和正常对照组每日灌胃相应体
积的蒸馏水 ,实验周期为 4周。
2.3　生化检测 实验前后实验动物禁食 12 h, 分别取眼眶后静
脉丛血 ,分离血清 , 分别测空腹血糖 、总胆固醇 、甘油三酯。血糖
测定采用葡萄糖氧化酶法 , 总胆固醇与甘油三酯测定各采用
CHOD-PAP法和酶偶联比色法。
2.4　免疫组织化学观察 实验 4周后大鼠脱颈处死 , 迅速剖取
胰尾 , 应用免疫组织化学 SABC法显示胰岛 B细胞。
2.5　统计学处理 用 SPSS10.0统计软件处理 ,进行配对 t检验
及方差分析。
3　结果
3.1　免疫组织化学观察结果 正常对照组胰岛多为圆形 、椭圆
形 、多边形或不规则形 ,大小不一。SABC法染色后胰岛 B细胞为
棕褐色的免疫反应阳性 , 多位于胰岛中央 , 占据胰岛的绝大部分,
排列紧密 ,细胞界限较清楚, 多数呈圆形或椭圆形 , 免疫反应阳性
物质分布于细胞质内 ,胰岛素分泌颗粒呈颗粒状 , 细胞质内分泌颗
粒丰富 ,界限较清楚, 着色深 ,未经染色的核呈空泡状 , 呈圆形或椭
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2007VOL.18NO.7 时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期
圆形 ,居中。 B细胞群中存在的少量空白区为胰岛其他细胞所在
位置。胰腺外分泌部的腺泡细胞间偶见单个免疫反应阳性细胞。
糖尿病对照组胰岛形状多不规则, 边缘不整齐。胰岛内免疫反应
阳性细胞数量明显减少 ,每个胰岛内仅见数个散在的免疫反应阳
性细胞 ,细胞之间出现较大的不规则空白区域, 细胞质内分泌颗粒
明显减少甚至缺失 ,颗粒着色浅 , 界限模糊 ,分布不均匀 , 空泡状的
核界限不清甚至固缩。外分泌部腺泡细胞间很难见到单个免疫反
应阳性细胞。实验大剂量组胰岛 B细胞免疫组织化学改变与正常
对照组相比, 胰岛形状不规则 ,胰岛内免疫反应阳性细胞数量亦明
显减少 ,界限不清, 但部分细胞胞质内分泌颗粒与糖尿病对照组相
比数量较多, 着色深 , 界限较清楚 , 分布较均匀。少数细胞核界限
清楚。实验中剂量组与药物对照组和糖尿病对照组相比胰岛内免
疫反应阳性细胞数量相对较多 ,但细胞间仍有较大的空白区域 , 细
胞轮廓较清楚 ,胞质内分泌颗粒较多 ,着色深 ,界限较清楚 , 分布较
均匀。少数细胞核界限清楚。实验组小剂量组与糖尿病对照组相
比免疫组织化学改变相近。实验组及药物对照组外分泌部腺泡细
胞间亦可见到单个免疫反应阳性细胞。
3.2　生化指标检测结果 实验前后血糖 、总胆固醇及甘油三酯
的含量结果见表 1 ～ 3。
表 1　实验前后血糖水平的比较( x±s) mmol· L-1
组别 实验前 实验后
正常对照 4.945±0.417 4.876±0.622#
糖尿病对照 18.917±3.400 18.447±2.339▲
药物对照 18.642±1.263 6.726±1.994＊#
实验大剂量 18.615±3.314 5.132±0.604＊#
实验中剂量 19.822±1.259 5.756±0.861＊#
实验小剂量 19.324±2.425 14.978±2.306＊#▲
　　与实验前比较 , ＊P< 0.05,与糖尿病对照组比较 , #P< 0.05,与正常
组比较 , ▲P<0.05
表 2　实验前后血清胆固醇含量的比较( x±s) mmol· L-1
组 别 实验前 实验后
正常对照 1.68±0.28 1.61±0.22#
糖尿病对照 2.33±0.61 2.16±0.33
药物对照 2.56±0.48 1.83±0.32＊#
实验大剂量 2.24±0.30 1.59±0.18＊#
实验中剂量 2.19±0.39 1.77±0.26＊#
实验小剂量 2.18±0.51 1.93±0.30
　　与实验前比较 , ＊P<0.05,与糖尿病对照组比较 , #P<0.05;n=10
　　　　表 3　实验前后血清甘油三酯含量的比较( x±s)　　mmol· L-1
组 别 实验前 实验后
正常对照 0.77±0.16 0.62±0.21#
糖尿病对照 2.37±0.65 1.98±0.63
药物对照 2.26±1.14 0.62±0.22＊#
实验大剂量 2.47±1.09 0.49±0.19＊#
实验中剂量 2.22±0.41 0.91±0.33＊#
实验小剂量 2.29±0.39 1.72±0.31＊
　　与实验前比较 , ＊P< 0.05,与糖尿病对照组比较 , #P<0.05
4　讨论
翻白草 [ 2]始载于《救荒本草》, 其味甘 、微苦 , 性平 , 无毒 , 归
肝 、胃 、大肠经 , 有清热润燥 、凉血解毒 、止血消肿 、止痢之功效 ,多
用于治疗痢疾 、疟疾 、肿痛 、各种出血。而近年来翻白草在糖尿病
的治疗中取得了良好的临床效果。本实验生化检测结果表明:实
验组(大 、中剂量组)经翻白草治疗 4周后 ,与实验前相比各组空
腹血糖均显著降低(P<0.05);与糖尿病对照组相比大 、中 、小剂
量组空腹血糖亦显著降低(P<0.05)。在翻白草的 3个剂量组与
药物对照组(美吡达:与实验前相比 P<0.05,与糖尿病对照组相
比 P<0.05)的降糖效果比较中 , 翻白草大 、中剂量组的降血糖疗
效比药物对照组好 ,接近正常对照组的血糖水平。比较翻白草三
个剂量组之间的降糖效果 ,小剂量组与正常对照组相比空腹血糖
有显著性差异(P<0.05), 而大 、中剂量组与正常对照组相比空
腹血糖无差异(P>0.05), 表明高剂量组降糖效果与中剂量组差
不多 , 所以可用中剂量代替高剂量使用 , 可减少用药量。姜长玲
等 [ 4]在临床研究中证明翻白草能明显降低 II型 DM患者的 TG,
TC, LDL-C, ApoB,也通过降低纤维蛋白原和血小板的粘附聚集
而全面改善其血液流变学差异。同年韩永明等 [ 5]的在体实验也
证实翻白草组体重明显增加(给药前后比较 P<0.05,给药前后
体重差值与造模对照组比较(P<0.01), 翻白草组与实验对照组
比较 , 两者之间无显著性差异(P>0.05)。本实验生化检测结果
表明 , 实验组(大 、中剂量组)经翻白草治疗 4周后 , 与实验前相
比血脂(总胆固醇 、甘油三酯)含量均显著减少(P<0.05), 而小
剂量组实验前后血脂无显著差异(P>0.05), 表明翻白草在降低
糖尿病动物血糖的同时可纠正其脂类代谢异常 ,翻白草对糖尿病
动物降血脂疗效与所含黄酮类有关 [ 5] 。
四氧嘧啶是一种特异性胰岛 B细胞毒剂 , 可选择性破坏实
验动物的胰岛 B细胞引起实验性糖尿病。 众多实验性研究表
明 , 有些中药复方或单味药有刺激实验动物胰岛 B细胞分泌胰
岛素及促使受损的胰岛 B细胞修复和再生等功能 , 从而降低血
糖。本实验观察了经翻白草治疗 4周后糖尿病大鼠胰岛 B细胞
免疫组化的形态学改变。结果表明 ,翻白草治疗组及药物对照组
胰岛 B细胞免疫组化显示结果相似 , 没有明显区别 , B细胞数量
减少 , 部分胞质内分泌颗粒明显减少甚至缺失 , 颗粒着色浅 ,但大
剂量组 、中剂量组及药物对照组与糖尿病对照组相比 , 部分 B细
胞胞质内分泌颗粒相对较多 ,着色较深 , 其中以实验大 、中剂量组
这种阳性细胞较多 ,翻白草治疗组及药物对照组外分泌部腺泡细
胞间见到单个免疫反应阳性细胞 ,提示翻白草不仅对糖尿病大鼠
受损的胰岛 B细胞形态结构具有一定的改善作用 , 还可以使胰
岛再生 ,而且大 、中剂量组这种作用相等。
参考文献:
[ 1 ] 　胡绍文 ,郭瑞林.实用糖尿病学 ,第 1版 [ M] .北京:人民军医出版
社 , 1998:18.
[ 2 ] 　刘金环 ,阮维国.翻白草水煎剂中微量元素的研究 [ J] .河北大学学
报(自然科学版), 2003(3):337.
[ 3 ] 　艾　静 ,郭　键 ,张永春 ,等.四氧嘧啶致大鼠高血糖模型的实验研
究 [ J] .哈尔滨医科大学学报 , 2001, 35(2):94.
[ 4 ] 　姜长玲 ,胡晓晨 ,赵晓刚.翻白草对 2型糖尿病脂代谢和血液流变
学的影响 [ J] .中国中医药信息杂志 , 2002, 9(8):41.
[ 5 ] 　韩永明 ,张业辉 ,熊迎春.中药翻白草对糖尿病大鼠血糖的影响
[ J] .湖北中医学院学报, 2002, 4(1):23.
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2007VOL.18NO.7