全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(1)∶010 ～ 012
基金项目:江西省主要学科学术和技术带头人培养计划资助项目(编号:2010DR01700)
作者简介:肖草茂(1985—) ，男，江西南康，硕士，研究实习员，从事天然药物的研究工作。Email:xiaocm_pharm@ yahoo． com． cn
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:zhucqing@ sohu． com．
翻白草中酚酸类化学成分的研究
肖草茂，李玉云，胡 蓉，曾宪仪，肖小华，王丽华，朱才庆*
(江西省药物研究所，江西 南昌 330029)
摘要:目的 研究翻白草中的酚酸类化学成分。方法 采用硅胶、大孔树脂及聚酰胺柱色谱等手段，分离纯化翻白草中 70%
乙醇提取部位的酚酸类成分，并通过光谱法鉴定结构。结果 分离并鉴定了 6 个单体化合物，分别为 3 －甲基鞣花酸 － 4 －
O － α － L －鼠李糖苷(I)、3，3，4 －三甲基鞣花酸 － 4 － O － β － D －葡萄糖苷(Ⅱ)、3，3 －二甲基鞣花酸(Ⅲ)、没食子酸(Ⅳ)、
委陵菜酸(Ⅴ)、山奈酚 － 3 － O － β － D － 6 － O －(对羟基桂皮酰基)－吡喃葡萄糖苷(Ⅵ)。结论 化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ为首次
从该植物中分离得到。
关键词:翻白草;酚酸类成分;3 －甲基鞣花酸 － 4 － O － α － L －鼠李糖苷;3，3，4 －三甲基鞣花酸 － 4 － O － β － D －葡萄糖
苷;3，3 －二甲基鞣花酸
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)01 － 0010 － 04
Study on the chemical constituents of phenolic acids from Potentilla discolor
XIAO Cao － mao，LI Yu － yun，HU Rong，ZENG Xian － yi，XIAO Xiao － hua，WANG Li － hua，ZHU Cai － qing*
(Jiangxi Institute of Materia Madica，Nanchang，Jiangxi，330029 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To study the phenolic acids constituents in Potentilla discolor．METHODS The compounds were isolated
by silica gel chromatography，macroporous resins and polyamide column chromatography from the 70% ethanol extract，and their struc-
tures were identified by spectroscopy． RESULTS Six compounds were isolated from Potentilla discolor and their structures were identi-
fied as 3 － methylellagic acid －4 －O － α － L － rhamnopyranoside (I) ，3，3，4 － trimethylellagic acid － 4 － O － β － D － glucopyrano-
side(Ⅱ) ，3，3 － dimethylellagic acid(Ⅲ) ，gallic acid(Ⅳ) ，tormentic acid(Ⅴ)and kaempferol － 3 －O － β － D －6 －O －(p － hydroxycin-
namoyl)－ gluco pyranoside(VI)． CONCLUSION The CompoundsⅡ，Ⅲ，Ⅴ，Ⅵ were isolated from this herb for the first time．
Key words:Potentilla discolor;Phenolic acids constituents;3 － methylellagic acid － 4 － O － α － L － rhamnopyranoside;3，3，4 －
trimethylellagic acid － 4 － O － β － D － glucopyranoside;3，3 － dimethy lellagic acid
CLC number:R284 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2013)01 － 0010 － 04
翻白草 Potentilla discolor Bge． 为蔷薇科委陵菜
属植物，其根部或干燥全草均可入药，具有抗菌、止
泻、清热解毒之功效，在中国各地均有分布［1］。翻
白草对治疗Ⅱ型糖尿病及其并发症有较好的疗效，
能降低糖尿病动物的血糖［2 － 3］。翻白草的化学成分
主要为鞣质类、三萜类及黄酮类化合物，其中，鞣质
类、三萜类化合物中含有大量酚酸类结构的成
分［1］，酚酸类成分对 α －葡萄糖苷酶和 α －淀粉酶
具有抑制作用［4 － 5］。为了证实该降糖机制，寻找其
药理活性成分，现研究了翻白草中的酚酸类成分。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
vns － 600 核磁共振仪(Bruker 公司) ;反相中压
液相色谱(利穗科技有限公司)。翻白草药材(2010
年 6 月采于河北南洋) ，由江西省药物研究所朱良
辉研究员鉴定为翻白草 Potentilla discolor;薄层色谱
和柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂) ;溶剂为分析纯。
1． 2 提取与分离
翻白草全草 10 kg，粉碎后加入 8 倍体积 70%
乙醇回流提取(2． 5 h × 2) ，提取液减压浓缩，得浸膏
960 g。将上述浸膏用蒸馏水溶解后，用石油醚
(60 ～ 90 ℃)脱脂 3 次。将脱脂后粗提物经 D － 101
大孔树脂吸附，先后用纯水、30%乙醇、50%乙醇、
75%乙醇、乙醇洗脱至无色，分别得到 FA 浸膏
(133 g)、FB 浸膏(48 g)、FC 浸膏(31 g)、FD 浸膏
(38 g)和 FE 浸膏(29 g)。将 FC 浸膏经硅胶柱色谱
经三氯甲烷 －甲醇(10∶1 ～ 2∶1)洗脱，每 300 mL
收集 1 份，洗脱至 48 份。将 FC(1 － 2)合并后，反复
经硅胶柱色谱由三氯甲烷 －甲醇(10∶1)洗脱得到
16 mg化合物 V;将 FC(3 － 4)流份合并后经硅胶柱
色谱由三氯甲烷 －甲醇(10∶1 ～ 5∶1)洗脱，得到
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2013.01.008
65 mg化合物Ⅱ和 17． 5 mg Ⅲ;FC(6 － 8)出现白色
沉淀，重结晶后得到 200 mg 化合物Ⅰ;将 FC(17 －
21)合并后，经硅胶柱色谱经三氯甲烷 －甲醇(5∶
1)洗脱，得到 13 mg 化合物Ⅵ;将 FC(21 － 26)合并
后经反相中压柱层析由甲醇 －水(5∶95)洗脱后，
得到 100 mg化合物Ⅳ。
1． 3 结构鉴定
1． 3． 1 化合物Ⅰ的鉴定 化合物 I 为白色无定形
粉末，难溶于三氯甲烷、乙醇、甲醇等溶剂，易溶于吡
啶、二甲基亚砜等有机试剂。三氯化铁显浅绿色，香
草醛 － 浓硫酸反应显橙红色。1HNMR(600 MHz，
DMSO － d6) :δ7． 52(1H，s，H － 5) ，7． 74(1H，s，H －
5) ，4． 04(3H，s，3 － OCH3) ，5． 12(1H，brs，H － 1) ，
1． 14 (3H，d，J = 6． 0 Hz)。13 CNMR (150 MHz，
DMSO － d6) :δ111． 4(C － 1) ，136． 0(C － 2) ，139． 9
(C －3) ，152． 6(C － 4) ，111． 2(C － 5) ，107． 1(C －
6) ，158． 6(C － 7) ，114． 2(C － 1) ，141． 2(C － 2) ，
141． 7(C － 3) ，146． 3(C － 4) ，111． 5(C － 5) ，
112. 9(C － 6) ，158． 5(C － 7) ，60． 9(3 － OCH3) ，
100． 0(C － 1″) ，69． 8(C － 2″) ，69． 9(C － 3″) ，71． 7
(C －4″) ，69． 7(C －5″) ，17． 8(C － 6″)。以上数据及
理化性质与文献［6］报道的基本一致，故鉴定化合物
Ⅰ为 3 － 甲基鞣花酸 － 4 － O － α － L － 鼠李糖苷
(3 － methylellagic acid － 4 － O － α － L － rhamnopyr-
anoside)。
1． 3． 2 化合物Ⅱ的鉴定 化合物Ⅱ为白色无定形
粉末，难溶于三氯甲烷、乙醇、甲醇等溶剂，易溶于吡
啶、二甲基亚砜等有机试剂。三氯化铁显浅绿色，香
草醛 － 浓硫酸反应显橙红色。1HNMR(600 MHz，
DMSO － d6) :δ7． 64(1H，s，H － 5) ，7． 84(1H，s，H －
5) ，4． 05(3H，s，3 － OCH3) ，4． 10(3H，s，3 －
OCH3) ，4． 05(3H，s，4 － OCH3) ) ，5． 18(1H，brs，H －
1)。13CNMR(150 MHz，DMSO － d6) :δ119． 9(C －1) ，
141． 1(C －2) ，140． 8(C － 3) ，151． 8(C － 4) ，111． 2
(C －5) ，112． 5(C － 6) ，158． 0(C － 7) ，112． 8(C －
1) ，141． 6(C －2) ，141． 1(C － 3) ，154． 2(C － 4) ，
107． 5(C － 5) ，113． 5(C － 6) ，158． 3(C － 7) ，
61. 2(3 － OCH3) ，61． 5(3 － OCH3) ，56． 7(4 －
OCH3) ，101． 2(C － 1″) ，73． 2(C － 2″) ，77． 2(C －
3″) ，69． 4 (C －4″) ，76． 4(C －5″) ，60． 4(C －6″)。以
上数据及理化性质与文献［7］报道的基本一致，故鉴
定化合物Ⅱ为 3，3，4 － 三甲基鞣花酸 － 4 － O －
β － D －葡萄糖苷(3，3 ，4 － tri － methylellagic acid －
4 － O － β － D － glucopyranoside)。
1． 3． 3 化合物Ⅲ的鉴定 化合物Ⅲ为白色无定形
粉末，难溶于三氯甲烷、乙醇、甲醇等溶剂，易溶于吡
啶、二甲基亚砜等有机试剂。三氯化铁显浅绿色，香
草醛 － 浓硫酸反应显橙红色。1HNMR(600 MHz，
DMSO － d6) :δ10． 79(2H，s，H － 4、4) ，7． 51(2H，s，
H －5、5) ，4． 04(6H，s，3、3 － OCH3)。
13 CNMR(150
MHz，DMSO － d6) :δ158． 9、152． 7、141． 7、140． 7、
121． 6、112． 1、111． 9、61． 4。上述信号与文献［7］报道
的基本一致，故鉴定化合物Ⅲ为 3、3 －二甲基鞣花
酸(3，3 － dimethylellagic acid)。
1． 3． 4 化合物Ⅳ的鉴定 化合物Ⅳ为浅黄色针晶，
用三氯化铁溶液显蓝色，提示该化合物中有酚羟基，
用溴甲酚绿显阳性，提示该化合物中有羧基。以三
氯甲烷 －乙酸乙酯 －甲醇 －甲酸(5∶5∶1∶1)为
展开剂，在紫外灯下检视，显示暗紫色斑点。与没食
子酸对照品薄层检识比较，Rf 值基本相同(约为
0. 45) ;HPLC 检识，与没食子酸对照品保留时间一
致。故鉴定化合物Ⅳ为没食子酸(gallic acid)。
1． 3． 5 化合物Ⅴ的鉴定 化合物Ⅴ为白色无定形
粉末，易溶于甲醇、乙醇。10%硫酸乙醇显紫红色，
提示该化合物为三萜类成分。1HNMR(600 MHz，
CD3OD) :δ0． 69(3H，s) ，0． 71，0． 89，0. 91，1． 09，
1. 24(3H each，s) ，5． 19(1H，H － 12，s)。13 CNMR
(150 MHz，CD3OD) :δ46． 7(C － 1) ，68． 1(C － 2) ，
83． 1(C －3) ，39． 1(C － 4) ，55． 3(C － 5) ，18． 2(C －
6) ，37． 2(C － 7) ，39． 7(C － 8) ，46． 7(C － 9) ，37． 8
(C －10) ，23． 3(C －11) ，127． 8(C －12) ，138． 7(C －
13) ，41． 2(C － 14) ，27． 9(C － 15) ，25． 1(C － 16) ，
48． 0(C － 17) ，53． 6(C － 18) ，72． 1(C － 19) ，41． 7
(C －20) ，25． 6(C － 21) ，37． 6(C － 22) ，28． 1 (C －
23) ，15． 2(C － 24) ，15． 6(C － 25) ，16． 1(C － 26) ，
23． 4(C －27) ，180． 8(C － 28) ，25． 9(C － 29) ，16． 0
(C － 30)。以上数据及理化性质与文献［8］基本一
致，故鉴定化合物Ⅴ为委陵菜酸(tormentic acid)。
1． 3． 6 化合物Ⅵ的鉴定 化合物Ⅵ为黄色粉末，易
溶于甲醇、乙醇等有机溶液。三氯化铝显示后荧光
加强，三氯化铁显蓝色，提示该化合为黄酮类化合
物。从1HNMR(600 MHz，DMSO － d6) :δ12． 57(1H，
s，5 － OH) ，10． 87(1H，s，7 － OH) ，10． 15(1H，s，
4 － OH) ，10． 05(1H，s，4″ － OH) ，δ7． 99(2H，d，J =
1． 8 Hz ，H －2，6) ，6． 86(1H，d，J = 1． 8 Hz，H － 3，
5) ，6． 38(1H，d，J = 2． 4 Hz，H － 8) ，6． 15(1H，d，
J = 1． 8 Hz，H －6) ，7． 37(2H，d，J = 1． 8 Hz ，H － 6″，
8″) ，6． 85(1H，d，J = 1． 8 Hz，H － 5″，9″) ，δ5． 44(1H，
d，J = 6． 0)。从13 CNMR(150 MHz，DMSO － d6) :
δ156． 9(C －2) ，133． 5(C － 3) ，177． 9(C － 4) ，160． 5
(C －5) ，99． 2(C －6) ，164． 6(C － 7) ，94． 1(C － 8) ，
156． 8(C － 9) ，101． 4(C － 10) ，121． 1(C － 1) ，
11第 1 期 肖草茂，等。翻白草中酚酸类化学成分的研究
华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(1)∶012 ～ 015
131. 2(C － 2) ，115． 6(C － 3) ，160． 2(C － 4) ，
115. 6(C － 5) ，131． 2(C － 6) ) ，δ101． 4(C － 1) ，
74． 6(C －2) ，74． 7(C － 3) ，76． 5(C － 4) ，70． 4(C －
5) ，63． 4(C － 6) ，δ166． 6(C － 1″) ，114． 1(C － 2″) ，
145． 1(C － 3″) ，125． 4(C － 4″) ，130． 6(C － 5″) ，
116. 2(C － 6″) ，160． 4(C － 7″) ，116． 2(C － 8″) ，
130. 6(C － 9″)。上述数据和理化性质与文献［9］基
本一致，故鉴定化合物Ⅵ为山奈酚 － 3 － O － β － D －
6 － O － (对羟基桂皮酰基)－ 吡喃葡萄糖苷
［kaempferol － 3 － O － β － D － 6 － O －(p － hydroxy-
cinnamoyl)－ glucopyranoside］。
2 讨论
利用溶剂提取及多种色谱分离翻白草中酚酸类
成分，得到了 4 个鞣质类成分、1 个委陵菜酸和 1 个
黄酮苷。民间利用翻白草泡茶饮用来治疗 II 型糖
尿病及其并发症，表明翻白草具有降血糖作用，其降
血糖机制可能是由于其酚酸类成分对 α －葡萄糖苷
酶和 α －淀粉酶具有抑制作用。为了证实该作用机
制，我们主要研究其酚酸类成分，为后续的药效筛选
研究工作奠定基础。
参考文献:
［1］ 薛培凤，赵玉英．翻白草化学成分［J］． 中国药学杂志，2005，
40(14) :1052 － 1054．
［2］ 王晓敏，王建红，徐东平，等． 翻白草水提液对糖尿病小鼠降
血糖作用［J］．江西中医学院学报，2005，17(2) :53 － 54．
［3］ 孟令云，朱黎霞，郑海洪，等． 翻白草高血糖动物模型的作用
研究［J］．中国药理学通报，2001，29(4) :35 － 37．
［4］ Chen ZJ，Yuan P，Ye XP，et al． － Glucosides and α － amylase in-
hibitory activties from 41 herbs for diabetes［J］． Chin Tradit Pat
Med，2008，30(11) :166 － 169．
［5］ Ye XP，Song CQ，Yuan P，et al． a － Glucosides and a － amylase
inhibitory activties of common constituents from traditional Chi-
nese medicine uesd for ddiabetes mellitus［J］． J Chin Med Mater，
2010，8(5) :349 － 352．
［6］ 张莉，杨杰，陈筱清，等．翻白草的化学成分［J］．植物资源与
环境学报，2010，19(2) :94 － 96．
［7］ 阮汉利，周雪峰，张勇慧，等．湖北大戟中的鞣质类成分［J］．
中草药，2006，37(12) :1782 － 1784．
［8］ 刘普，段宏泉． 委陵菜三萜成分研究［J］． 中国中药杂志，
2006，31(22) :1875 － 1876．
［9］ 钟海军，陈纪军． 翻白叶的化学成分［J］． 中草药，2006，31
(7) :488 － 490．
收稿日期:2012 － 03 － 11
基金项目:国家重大新药创制科技重大专项课题靶向释药系统与新制剂技术平台的建设 (立项编号:2009ZX09310 － 002)
作者简介:张青(1986—) ，女，正攻读药剂学专业的硕士学位。
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:xinba789@ yahoo． com． cn
星点设计 －效应面法优化低密度脂蛋白纳米粒处方与制备工艺
张 青，马伟从，张 霞，蹇 丹，毛声俊*
(四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室，四川 成都 610041)
摘要:目的 研制低密度脂蛋白纳米粒，优选其处方与制备工艺。方法 采用薄膜 －超声法制备脂微乳，连接含载脂蛋白
apoprotein B － 100 中、低密度脂蛋白受体结合域序列的合成肽制备纳米粒。以脂质浓度、超声功率及超声时间为考察因素，粒
径为指标，采用星点设计 －效应面法优化其处方及制备工艺。结果 优选的脂质浓度为 0． 1%;超声功率为 380 w，超声时间
为 6 h。制备的纳米粒平均粒径为 27． 7 nm，PDI为 0． 17，ζ －电位为 － 28． 7 mV。结论 采用星点设计 －效应面法优化低密度
脂蛋白纳米粒的处方与制备工艺，制备的纳米粒粒径与预测值接近，表明用该法优化其处方与制备工艺可行。
关键词:低密度脂蛋白;纳米粒;星点设计―效应面法;处方设计;制备工艺
中图分类号:R94 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)01 － 0012 － 04
Optimization of formulation and preparation process of low density lipoprotein nanoparticle
by central composite design － response surface methodology
ZHANG Qing，MA Wei － cong，ZHANG Xia，JIAN Dan，MAO Sheng － jun*
(Key Laboratory of Drug Targeting and Drug Delivery System，Ministry of Education，West China School of Pharmacy，Sichuan Univer-
sity，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To prepare the low density lipoprotein (LDL)nanoparticle and optimize its formulation and preparation