全 文 ：第４２卷　第６期
２０１４年６月
西北农林科技大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔ．Ｓｃｉ．Ｅｄ．）
Ｖｏｌ．４２ Ｎｏ．６
Ｊｕｎ．２０１４
网络出版时间：２０１４－０５－２８　１１：３４ ＤＯＩ：１０．１３２０７／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｎｗａｆｕ．２０１４．０６．０１５
网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｏｉ／１０．１３２０７／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｎｗａｆｕ．２０１４．０６．０１５．ｈｔｍｌ
山荆子中根皮苷和黄酮含量的测定及其
乙醇提取物的抗氧化活性
　［收稿日期］　２０１３－０５－０８
　［基金项目］　国家科技支撑计划项目（２００７ＢＡＩ３８Ｂ０３）
　［作者简介］　丁传波（１９８６－），男，山东菏泽人，硕士，主要从事天然药物研究与开发。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｏｄｉｌｉｑｉａｎ＠１６３．ｃｏｍ
　［通信作者］　郑毅男（１９４５－），男，吉林长春人，教授，博士生导师，主要从事中药新药研究与开发。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｅｎｙｉｎａｎ＠ｔｏｍ．ｃｏｍ
刘文丛（１９６８－），男，吉林长春人，教授，硕士生导师，主要从事天然药物研究与开发。Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｗｌｗ６８０３＠１２６．ｃｏｍ
丁传波，赵　婷，董　岭，陈大勇，李慧萍，高　畅，李　伟，郑毅男，刘文丛
（吉林农业大学 中药材学院，吉林 长春１３０１１８）
［摘　要］　 【目的】测定山荆子鲜叶、茎皮和果中根皮苷及阴干的果实和叶中黄酮的含量，并比较阴干叶和果实
乙醇提取物的抗氧化活性。【方法】采用超声波辅助甲醇提取山荆子鲜叶、茎皮和果实中的根皮苷，用高效液相色谱
法测定提取物中目标产物的含量；用超声波辅助乙醇提取山荆子阴干叶和果实中的黄酮，用亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化
钠法测定其叶和果实中的黄酮含量，并通过清除ＤＰＰＨ、ＡＢＴＳ自由基和还原力比较研究其乙醇提取物的抗氧化活
性。【结果】山荆子鲜叶、茎皮和果实中的根皮苷含量分别为（１２．００±３．６０），（２１．６０±６．１０）和（１．１８±０．１５）ｍｇ／ｇ；
阴干的叶和果实中黄酮含量分别为（４．７８±０．６２）和（０．６８±０．０４）ｍｇ／ｇ。在清除ＤＰＰＨ自由基、ＡＢＴＳ自由基活性
及还原力方面，山荆子阴干叶乙醇提取物较果实的抗氧化活性强。【结论】超声波辅助提取技术结合 ＨＰＬＣ法测定
山荆子叶、茎皮和果实中根皮苷含量操作简单，重复性好，结果准确。山荆子阴干叶和果实的乙醇提取物都具有较强
的抗氧化活性，且叶乙醇提取物的抗氧化活性较强。
［关键词］　山荆子；根皮苷；ＨＰＬＣ；黄酮；抗氧化
［中图分类号］　Ｒ９１７；Ｑ９４９．７５１．８ ［文献标志码］　Ａ ［文章编号］　１６７１－９３８７（２０１４）０６－０１６１－０７
Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ａｎｄ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ （Ｌｉｎｎ．）
Ｂｏｒｋｈ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ
ＤＩＮＧ　Ｃｈｕａｎ－ｂｏ，ＺＨＡＯ　Ｔｉｎｇ，ＤＯＮＧ　Ｌｉｎｇ，ＣＨＥＮ　Ｄａ－ｙｏｎｇ，ＬＩ　Ｈｕｉ－ｐｉｎｇ，
ＧＡＯ　Ｃｈａｎｇ，ＬＩ　Ｗｅｉ，ＺＨＥＮＧ　Ｙｉ－ｎａｎ，ＬＩＵ　Ｗｅｎ－ｃｏｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，Ｊｉｌｉｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ，Ｊｉｌｉｎ１３０１１８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ａｉｍｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ｉｎ　ｌｅａｖｅｓ，ｂａｒｋ　ａｎｄ
ｆｒｕｉｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ，ａｎｄ　ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ
ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ．【Ｍｅｔｈｏｄ】Ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃ－
ｔｅｄ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｍｅｔｈａｎｏｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ，ｂａｒｋ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａａｎｄ　ｗａｓ　ｑｕａｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ
ＨＰＬＣ．Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｒｏｍ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ
ａｎｄ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＮａＮＯ２－Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＯＨ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｆｒｏｍ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａｉｎ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ａｎｄ　ＡＢＴＳ　ｒａｄｉｃａｌｓ　ａｎｄ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ
ｐｏｗｅｒ　ｗｅｒｅ　ａｓｓｅｓｓｅｄ　ａｓ　ｗｅｌ．【Ｒｅｓｕｌｔ】Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ｉｎ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａｌｅａｖｅｓ，ｂａｒｋ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｗｅｒｅ
（１２．００±３．６０），（２１．６０±６．１０）ａｎｄ（１．１８±０．１５）ｍｇ／ｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｓｈａｄｙ
ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａ　ｗｅｒｅ（４．７８±０．６２）ａｎｄ（０．６８±０．０４）ｍｇ／ｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａｌｅａｖｅｓ　ｈａｄ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ａｎｄ　ＡＢＴＳ　ｒａｄｉｃａｌｓ
ａｎｄ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｐｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｆｒｏｍ　ｆｒｕｉｔｓ．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ａｎｄ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｉｎ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｉｔｈ　ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ．Ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ
ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍ．ｂａｃｃａｔａｈａｄ　ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ
ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ　ｗａｓ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ；ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ；ＨＰＬＣ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ
　　山荆子［Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ（Ｌｉｎｎ．）Ｂｏｒｋｈ．］，别名
山丁子、林荆子、山定子等，是蔷薇科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）苹
果属（Ｍａｌｕｓ）多年生木本植物，主要分布于我国东
北、华北及西南等地，朝鲜及俄罗斯西伯利亚地区也
有分布［１］。目前，针对山荆子的研究主要集中在其
绿化观赏及抗旱作用等方面［２－３］，对于其化学成分的
研究少有报道。李伟［４］研究表明，山荆子花和叶中
的挥发油包括萜类、酯类和烯烃类化合物等，主要成
分是法呢烯。山荆子叶中主要活性成分是黄酮类和
多酚类化合物，其中根皮苷是其药理活性成分之
一［５－６］。根皮苷是一种广泛分布于苹果果实、树皮和
叶以及多穗柯甜茶嫩叶中的多酚类化合物，具有抗
氧化［７］、调节血糖［８］、清除自由基［９－１０］等多种药理活
性。目前，对于山荆子叶中根皮苷的研究仅见少数
文献报道［６］，茎皮及果中的根皮苷含量尚未见报道。
本试验测定了同时期山荆子鲜叶、茎皮和果实中根
皮苷的含量及其阴干叶和果实中的黄酮含量，并比
较了山荆子阴干叶和果实乙醇提取物的抗氧化活
性，以期为山荆子的品质评价及开发利用提供理论
依据。
１　材料与方法
１．１　材　料
１．１．１　植物材料　山荆子鲜叶、青果及茎皮均于
０６－０２在同株采收，于吉林农业大学校园内不同的地
点采取３批样品，经吉林农业大学中药材学院郑毅
男教授鉴定为蔷薇科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）苹果属（Ｍａｌｕｓ）山
荆子。
１．１．２　仪器与试剂　ＬＣ－２０Ａ型高效液相色谱仪
（日本岛津，ＳＰＤ－２０Ａ紫外检测器），超声波清洗器
（ＫＱ－２５０ＤＢ，昆山超声仪器有限公司），ＢＰ２１１Ｄ电
子天平（德国Ｓａｒｔｏｒｉｏｕｓ公司），ＳＺ－９３自动双重纯
水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂），ＵＶ－２４５０紫外分
光光度计（日本ＳＨＩ－ＭＡＤＺＵ公司）等。根皮苷对
照品（批号：Ｋ１１１２２８）购于西安开来生物工程有限
公司，ＶＣ、２，２′氨基－二（３－乙基－苯并噻唑啉磺酸－６）
铵盐（ＡＢＴＳ）、１，１－二苯基－２－三硝基苯肼（ＤＰＰＨ）购
于Ｓｉｇｍａ公司，２，６－二叔丁基－４－甲基苯酚（ＢＨＴ）、
亚油酸购于西亚试剂公司，芦丁对照品纯度为
９８．６％（实验室自制），乙腈（色谱纯）购于美国Ｆｉｓｈ－
ｅｒ公司，纯水为杭州娃哈哈有限公司生产。其余试
剂均为分析纯试剂。
１．２　方　法
１．２．１　山荆子鲜叶、茎皮、果实中根皮苷含量的测
定　（１）根皮苷标准曲线的制作。精密称取根皮苷
对照品１０．００ｍｇ，置于１００ｍＬ容量瓶中用甲醇溶
解后定容，用０．４５μｍ微孔滤膜过滤，即可制得质
量浓度为０．１０ｍｇ／ｍＬ的根皮苷对照品溶液。
取上述制备的根皮苷对照品溶液０．２０，０．４０，
０．６０，０．８０和１．００ｍＬ，分别定容到１ｍＬ离心管
中，摇匀后进行 ＨＰＬＣ检测。用外标法计算峰面
积，以质量浓度（μｇ／ｍＬ）为横坐标（Ｘ），以峰面积为
纵坐标（Ｙ），建立标准曲线，求回归方程，用于测定
山荆子鲜叶、茎皮、果实中的根皮苷含量。
（２）山荆子鲜叶、茎皮、果实中根皮苷含量的测
定。精密称取新鲜的山荆子叶１．００６　０ｇ，茎皮
１．００２　５ｇ，青果０．９９５　５ｇ，剪碎后各自放入规格相
同的２５０ｍＬ锥形瓶中，分别加入５０ｍＬ甲醇，于
４０℃在４０Ｈｚ、２５０Ｗ 超声波作用条件下提取３０
ｍｉｎ，提取２次，合并２次提取液，过滤后定容至１００
ｍＬ容量瓶中，０．４５μｍ微孔滤膜过滤，即得山荆子
鲜叶、茎皮和果实的甲醇提取物。对样品进行
ＨＰＬＣ检测，以甲醇为对照，计算根皮苷含量。
（３）ＨＰＬＣ条件。色谱柱：大连依利特 Ｈｙｐｅｒ－
ｓｉｌＯＤＳ２（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；柱温：３０℃；流
动相：乙腈－水（Ｖ（乙腈）∶Ｖ（水）＝２５∶７５）；流速：
１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长：２８５ｎｍ；进样量：２０μＬ。
１．２．２　阴干山荆子叶、果实中黄酮含量的测定　
（１）芦丁标准曲线的制作。精确称取芦丁对照品
（１０５℃干燥至恒定质量）１０．００ｍｇ于１００ｍＬ容量
瓶中，加６０．００ｍＬ体积分数７５％的乙醇溶解之后
再定容至１００ｍＬ，配制成质量浓度为０．１０ｍｇ／ｍＬ
的芦丁溶液。将芦丁溶液用体积分数７５％的乙醇
配制成质量浓度分别为０，０．０１，０．０２，０．０３，０．０４，
２６１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４２卷
０．０５ｍｇ／ｍＬ的标准溶液，备用。
准确吸取不同质量浓度的芦丁标准溶液１．００
ｍＬ，置于１０ｍＬ具塞试管中，加入质量分数５％的
ＮａＮＯ２溶液０．３０ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ后加入质量
分数１０％Ａｌ（ＮＯ３）３ 溶液０．３０ｍＬ，摇匀，放置６
ｍｉｎ后加入质量分数４％ＮａＯＨ 溶液４．００ｍＬ，摇
匀，用体积分数７５％乙醇定容，１５ｍｉｎ后于５１０ｎｍ
下测定吸光度。以芦丁质量浓度为横坐标（Ｘ 轴）、
吸光度为纵坐标（Ｙ 轴）绘制标准曲线，求回归方程，
用于测定阴干的山荆子叶和果实中的黄酮含量。
（２）阴干山荆子叶、果实中黄酮含量的测定。
分别称取７０ｇ阴干后的山荆子叶和果，粉碎，按料
（ｇ）液（ｍＬ）比１∶２５分别加入体积分数７５％的乙
醇，于４０℃在４０Ｈｚ、２５０Ｗ 超声波作用条件下提
取３０ｍｉｎ，提取３次，合并３次提取液。减压浓缩至
浸膏状，冷冻干燥即得山荆子叶和果实乙醇提取物。
测定样品在５１０ｎｍ下的吸光度，计算黄酮含量。
１．２．３　山荆子阴干叶和果实乙醇提取物的抗氧化
活性测定　抗氧化活性测定参照文献［１１－１２］的方
法并略有改动。（１）清除 ＤＰＰＨ 自由基活性的测
定。将山荆子阴干叶和果实乙醇提取物及ＶＣ（阳性
对照）配制成不同质量浓度（０．０１２　５，０．１２５，１．２５，
２．５０和５．００ｍｇ／ｍＬ）的溶液。将ＤＰＰＨ用无水乙
醇配制成２×１０－４　ｍｏｌ／Ｌ的溶液。取２．００ｍＬ样品
溶液，加入７．５０ｍＬ　ＤＰＰＨ 溶液，振荡，摇匀，室温
下反应１ｈ，在５１７ｎｍ下测定其吸光度，以体积分
数７５％的乙醇为空白对照。自由基清除率＝（Ａｓ－
Ａｉ）／Ａｓ×１００％。式中：Ａｓ 表示空白对照在５１７ｎｍ
的吸光度，Ａｉ 表示样品在５１７ｎｍ的吸光度。试验
重复３次，取平均值作图。
（２）清除ＡＢＴＳ自由基活性的测定。用去离子
水配制７ｍｍｏｌ／Ｌ的 ＡＢＴＳ溶液及２．４５ｍｍｏｌ／Ｌ
的过硫酸钾溶液。取过硫酸钾溶液５．００ｍＬ，加入
到１５．００ｍＬ　ＡＢＴＳ溶液中，在室温下置于黑暗处
反应１６ｈ，形成ＡＢＴＳ自由基储备液。用体积分数
７５％乙醇对ＡＢＴＳ自由基储备液进行稀释，使其在
７３４ｎｍ下的吸光度为０．７０±０．０５，备用。准确吸取
０．８０ｍＬ不同质量浓度（０．０１９，０．１９，１．９０，３．８５，
７．７０ｍｇ／ｍＬ）的样品溶液及 ＢＨＴ 溶液（阳性对
照），加入７ｍＬ稀释的ＡＢＴＳ液，振荡混匀，在室温
下反应３０ｍｉｎ，于７３４ｎｍ下测定其吸光度，以体积
分数７５％的乙醇为空白对照。试验重复３次，取平
均值作图。
ＡＢＴＳ自由基清除率＝（Ａ２－Ａ１）／Ａ２×１００％。
式中：Ａ１ 为样品在７３４ｎｍ下的吸光度，Ａ２ 为空白
对照在７３４ｎｍ下的吸光度。
（３）还原力测定。将山荆子阴干叶、果实乙醇提
取物以及阳性对照ＢＨＴ配制成不同质量浓度的溶
液（０．０１９，０．１９，１．９０，３．８５，７．７０ｍｇ／ｍＬ）。取各质
量浓度的溶液０．２０ｍＬ，加入２．５０ｍＬ的磷酸盐缓
冲液（０．２０ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ　６．６）和２．５０ｍＬ质量分数
１％的铁氰化钾，剧烈振荡，混匀后５０℃下水浴２０
ｍｉｎ。然后向体系中加入２．５０ｍＬ质量分数１０％的
三氯乙酸。混匀后在４　２００ｒ／ｍｉｎ下离心１０ｍｉｎ，
取上清液２．００ｍＬ于１０ｍＬ试管中，加入２．５０ｍＬ
蒸馏水和０．５０ｍＬ质量分数０．１０％的三氯化铁，１０
ｍｉｎ后于７００ｎｍ下测定其吸光度。吸光度越高表
明还原力越强。试验重复３次，取平均值作图。
２　结果与分析
２．１　山荆子中鲜叶、茎皮、果实中根皮苷含量的测定
经分析，根皮苷标准品峰面积（Ｙ）与其质量浓度
（Ｘ）的回归方程为：Ｙ＝２．０００×１０５　Ｘ＋１．８７４　６×１０４，
Ｒ２＝０．９９６　２（ｎ＝５），在２０．００～１００．００μｇ／ｍＬ范围
内根皮苷质量浓度与峰面积呈良好的线性关系。
山荆子中鲜叶、茎皮、果实样品的 ＨＰＬＣ结果
见图１。从图１可以看出，在本试验的 ＨＰＬＣ条件
下，山荆子鲜叶、茎皮和果实中的根皮苷 ＨＰＬＣ峰
能与其他物质的 ＨＰＬＣ峰完全分开，说明本试验设
置的条件，适用于山荆子鲜叶、茎皮和果实中根皮苷
的含量测定。经测算，山荆子鲜叶、茎皮和果实中根
皮苷的含量分别为（１２．００±３．６０），（２１．６０±６．１０）
和（１．１８±０．１５）ｍｇ／ｇ。可见根皮苷在茎皮中的含
量最高，其次是叶，在果实中含量最低，其茎皮中根
皮苷的含量是叶的１．８０倍，是果实的１７倍。
２．２　山荆子阴干叶和果实中黄酮含量的测定
芦丁质量浓度（Ｘ）与５１０ｎｍ下吸光度（Ｙ）的回
归方程为：Ｙ＝１２．９９３　Ｘ－６×１０－４，Ｒ２＝０．９９８　６。
在０～０．０５ｍｇ／ｍＬ内，芦丁的质量浓度与其吸光度
呈良好的线性关系。
经测算，山荆子阴干叶中黄酮含量（（４．７８±
０．６２）ｍｇ／ｇ）约是果实（（０．６８±０．０４）ｍｇ／ｇ）中的７
倍。
２．３　阴干山荆子叶和果实乙醇提取物对ＤＰＰＨ自
由基的清除活性
ＤＰＰＨ是一种在常温下很稳定的自由基，因此
常被用来评价化合物的抗氧化活性。从图２可以看
出，山荆子阴干叶和果实乙醇提取物对ＤＰＰＨ自由基
３６１第６期 丁传波，等：山荆子中根皮苷和黄酮含量的测定及其乙醇提取物的抗氧化活性
具有较强的清除效果，当山荆子叶和果实乙醇提取物
的质量浓度为０．０１２　５ｍｇ／ｍＬ时，其对ＤＰＰＨ自由
基的清除率分别为５７．５０％和１４．５０％，显然山荆子
叶乙醇提取物对ＤＰＰＨ自由基的半数清除率（ＩＣ５０）
＜０．０１２　５ｍｇ／ｍＬ，较果实乙醇提取物清除ＤＰＰＨ自
由基的能力强。在相同的质量浓度（０．０１２　５ｍｇ／ｍＬ）
下，天然抗氧化剂 ＶＣ 对ＤＰＰＨ自由基的清除率为
８６．７０％。随着质量浓度的增加，山荆子阴干叶和果
实乙醇提取物样品对ＤＰＰＨ自由基的清除率逐渐增
大，而ＶＣ 的清除率变化不大。各样品清除ＤＰＰＨ自
由基的能力从小到大依次为：山荆子果实乙醇提取
物＜山荆子叶乙醇提取物＜ＶＣ。
图１　山荆子鲜叶、茎皮和果实中根皮苷的 ＨＰＬＣ色谱图
Ｆｉｇ．１　ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ｆｒｏｍ　ｆｒｅｓｈ　ｌｅａｖｅｓ，ｂａｒｋ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ
２．４　阴干山荆子叶和果实乙醇提取物对ＡＢＴＳ自
由基的清除活性
图３显示，随着样品质量浓度的增加，阴干山荆
子叶和果实乙醇提取物及ＢＨＴ对ＡＢＴＳ自由基的
清除率不断增大，当ＢＨＴ的质量浓度增加到０．１９
ｍｇ／ｍＬ时，其对ＡＢＴＳ自由基的清除率为９２．４％，
４６１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４２卷
之后趋于稳定，表明ＡＢＴＳ自由基基本被清除。而
在此质量浓度下，山荆子阴干叶和果实乙醇提取物
对ＡＢＴＳ自由基的清除率分别为６６．５％和４７．０％，
可见叶乙醇提取物的ＩＣ５０＜０．１９ｍｇ／ｍＬ，果实乙醇
提取物的ＩＣ５０接近于０．１９ｍｇ／ｍＬ。表明山荆子叶
和果实乙醇提取物具有较强的抗氧化活性。
图２　山荆子阴干叶和果实乙醇提取物对ＤＰＰＨ自由基的清除活性
Ｆｉｇ．２　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＤＰＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ｂｙ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ
图３　山荆子阴干叶和果实乙醇提取物对ＡＢＴＳ自由基的清除活性
Ｆｉｇ．３　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＡＢＴＳ　ｒａｄｉｃａｌ　ｂｙ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ
２．５　阴干山荆子叶和果实乙醇提取物的还原力
抗氧化剂能够通过自身的还原作用给出电子，
使自由基变成稳定的分子，从而失去活性，还原力越
大，其抗氧化活性就越强，因此可通过还原力的大小
来判断物质抗氧化活性的强弱。由图４可知，当样
品和ＢＨＴ的质量浓度为０．０１９ｍｇ／ｍＬ时，ＢＨＴ、
山荆子阴干叶和果实乙醇提取物在７００ｎｍ下的吸
光度分别为０．０７６，０．０６１和０．０７９，但随着质量浓
５６１第６期 丁传波，等：山荆子中根皮苷和黄酮含量的测定及其乙醇提取物的抗氧化活性
度的不断增大，三者的还原力差距逐渐加大。在
０．０１９～７．７ｍｇ／ｍＬ的质量浓度内，山荆子阴干叶
和果实的还原力与其质量浓度呈现量效关系，即随
着质量浓度的增大而增强，且山荆子叶的还原力较
果实强，但均较ＢＨＴ弱。
图４　山荆子阴干叶和果实乙醇提取物的还原力比较
Ｆｉｇ．４　Ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｐｏｗｅｒ　ｏｆ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　ｓｈａｄｙ　ｄｒｉｅｄ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ
３　讨　论
本研究采用超声波辅助提取山荆子茎皮、叶和
果实中的根皮苷，这种方法较传统的热回流提取操
作简单、提取时间短；采用乙腈－水为流动相的方法
与文献［１３］有所不同，但能够较好地将根皮苷分离
出来，且峰形较好。
黄酮是一类复杂的化合物，具有多种药理活性，
可以提高抗氧化酶水平、清除自由基、保护机体因自
由基过多而产生的损伤［１４－１５］。山荆子叶和果实中含
有较多的黄酮类化合物，但对于其黄酮含量及活性
研究较少，仅有少数研究报道了其抗肥胖活性［１６］。
本试验通过亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠方法测定了
山荆子叶和果实中的黄酮含量，并就山荆子叶和果
实乙醇提取物对ＤＰＰＨ、ＡＢＴＳ自由基的清除能力
和还原能力进行了测定，结果显示，山荆子叶和果实
乙醇提取物均具有较强的抗氧化活性和还原力，这
可能与其含有较多的黄酮类物质有关，但其具体机
制还有待进一步研究。本研究结果显示，山荆子中
根皮苷含量茎皮＞叶＞果实，这与李荣涛等［１７］的研
究结果一致。
４　结　论
本研究采用超声波辅助提取结合 ＨＰＬＣ法，测
出山荆子鲜茎皮、叶和果实中的根皮苷含量分别为
（２１．６０±６．１０），（１２．００±３．６０），（１．１８±０．１５）
ｍｇ／ｇ；本研究还测定了阴干山荆子叶和果实中的黄
酮含量，结果表明，阴干的山荆子叶乙醇提取物中黄
酮含量约为果实的７倍。结果显示，山荆子是一种
天然的抗氧化剂，具有广阔的开发和利用前景。
［参考文献］
［１］　李育农．苹果属植物种质资源研究 ［Ｍ］．北京：中国农业出版
社，２００１：６７．
Ｌｉ　Ｙ　Ｎ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ　ｏｆ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　Ｍｉｌ
［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｃｈｉｎａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　Ｐｒｅｓｓ，２００１：６７．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２］　马树华．四种北方阔叶树苗木对汽车尾气污染的生理反应与抗
性评价 ［Ｄ］．哈尔滨：东北林业大学，２００４．
Ｍａ　Ｓ　Ｈ．Ｔｈｅ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｌｃａｌ　ａｎｄ　ｂｉｏｃｈｅｍｃｉａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｏｆ　ｓｅｅｄ－
ｉｎｇｓ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｄｅｃｉｄｕｏｕｓ　ｔｒｅｅｓ　ｔｏ　ａｕｔｏｍｏｂｉｌｅ　ｅｘｈａｕｓｔ
ａｎｄ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ［Ｄ］．Ｈａｒｂｉｎ：Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔ　Ｕｎｉ－
ｖｅｒｓｉｔｙ，２００４．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［３］　孙志虎，王庆成．应用ＰＶ技术对北方４种阔叶树抗旱性的研
究 ［Ｊ］．林业科技，２００３，３９（２）：３３－３８．
Ｓｕｎ　Ｚ　Ｈ，Ｗａｎｇ　Ｑ　Ｃ．Ｔｈｅ　ｄｒｏｕｇｈｔ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｂｒｏａｄ－
ｌｅａｖｅｄ　ｓｐｅｃｉｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｎｏｒｔｈ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　ｗｉｔｈ　ＰＶ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ［Ｊ］．
Ｓｃｉｅｎｔｉａ　Ｓｉｌｖａｅ　Ｓｉｎｉｃａｅ，２００３，３９（２）：３３－３８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［４］　李　伟．顶空固相微萃取－气相色谱质谱法分析山荆子花和叶
中的挥发性成分 ［Ｊ］．天然产物研究与开发．２０１２，２４（４）：４９０－
４９３．
Ｌｉ　Ｗ．ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ－ＭＳ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖｏｌａｔｉｌｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ
ｔｈｅ　ｆｌｏｗｅｒｓ　ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ（Ｌｉｎｎ．）Ｂｏｒｋｈ［Ｊ］．Ｎａｔ
Ｐｒｏｄ　Ｒｅｓ　Ｄｅｖ，２０１２，２４（４）：４９０－４９３．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［５］　聂继云，吕德国，李　静，等．２２种苹果种质资源果实类黄酮分
６６１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４２卷
析 ［Ｊ］．中国农业科技，２０１０，４３（２１）：４４５５－４４６２．
Ｎｉｅ　Ｊ　Ｙ，ＬüＤ　Ｇ，Ｌｉ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｆｌａ－
ｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｆｒｕｉｔｓ　ｏｆ　２２ａｐｐｌｅ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｔｉａ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ　Ｓｉｎｉｃａ，２０１０，４３（２１）：４４５５－４４６２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［６］　李　萍．苹果属植物叶片类黄酮的含量及多样性研究 ［Ｄ］．北
京：中国农业科学院，２０１０．
Ｌｉ　Ｐ．Ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　ｌｅａｖ－
ｅｓ　ｏｆ　Ｍａｌｕｓ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｄ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌ－
ｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１０．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［７］　张泽生，胡　莎，邵　婵，等．根皮苷对由高脂导致果蝇氧化损
伤的保护作用 ［Ｊ］．食品科技，２０１２，３７（４）：１９５－１９８．
Ｚｈａｎｇ　Ｚ　Ｓ，Ｈｕ　Ｓ，Ｓｈａｏ　Ｃ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ
ｏｎ　ｔｈｅ　ｆａｔ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｄａｍａｇｅ　ｉｎ　ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ　ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ
［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，３７（４）：１９５－１９８．（ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［８］　Ｄｕｄａｓｈ　Ｊ，Ｚｈａｎｇ　Ｘ，Ｚｅｃｋ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ　ｄｉｈｙｄ　ｒｏｃｈａ
ｌｃｏｎｅｓ　ａｓ　ｐｏｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ　ｓｏｄｉｕｍ　ｇｌｕｃｏｆｌｅ　ｃｏ－ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ　２
（ＳＧＬＴ２）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ　ａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００４，１４：５１２１．
［９］　Ｒｅｚｋ　Ｂ　Ｍ，Ｈａｅｎｅｎ　Ｇ　Ｒ，Ｂａｓｔ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
ｏｆ　ｐｈｌｏｒｅｔｉｎ：Ｔｈｅ　ｄｉｓｃｌｏｓｕｒｅ　ｏｆ　ａ　ｎｅｗ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｐｈａｒｍａｃｏｐｈ－
ｏｒｅ　ｉｎ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ
Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２００２，２９５：９－１３．
［１０］　Ｖａｓａｎｔｈａ　Ｒｕｐａｓｉｎｇｈｅ　Ｈ　Ｐ，Ｙａｓｍｉｎ　Ａｆｓａｎａ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｘｉ－
ｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｑｕｅｏｕｓ　ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ｏｍｅｇａ－３ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ａｎｄ　ｆｉｓｈ　ｏｉｌ
ｂｙ　ｐｈｌｏｒｅｔｉｎ　ａｎｄ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２０１０，１５：２５１－２５７．
［１１］　Ｈｅ　Ｊ　Ｓ，Ｈｕａｎｇ　Ｂ，Ｂａｎ　Ｘ　Ｑ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ａｎｔｉｏｘｉ－
ｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｒｏｍ　Ｍｅｃｏｎｏｐｓｉｓ　ｑｕｉｎｔｕ－
ｐｌｉｎｅｒｖｉａ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１２，１４１：１０４－
１１０．
［１２］　Ｈｕａｎｇ　Ｂ，Ｋｅ　Ｈ　Ｂ，Ｈｅ　Ｊ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｈａｌｅｎｉａ　ｅｌｌｉｐｔｉｃａ
ｅｘｈｉｂｉｔ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ
ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２０１１，４９：１８５－１９０．
［１３］　李胜华，伍贤进，牛友芽，等．ＨＰＬＣ法测定多穗柯叶中根皮苷
含量 ［Ｊ］．食品工业科技，２００９，３０（８）：３２７－３３１．
Ｌｉ　Ｓ　Ｈ，Ｗｕ　Ｘ　Ｊ，Ｎｉｕ　Ｙ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｅｔｅｍｉｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ｉｎ
Ｌｉｔｈｏｃａｒｐｕｓ　ｐｏｌｙｓｔａｒｃｈ　Ｒｅｈｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，２００９，３０（８）：３２７－３３１．（ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［１４］　Ｔａｃｈａｋｉｔｔｉｒｕｎｇｒｏｄ　Ｓ，Ｏｋｏｎｏｇｉ　Ｓ，Ｃｈｏｗｗａｎａｐｏｏｎｐｏｈｎ　Ｓ．Ｓｔｕｄｙ
ｏｎ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　Ｔｈａｉｌａｎｄ：Ｍｅｃｈａ－
ｎｉｓｍ　ｏｆ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｕａｖａ　ｌｅａｆ　ｅｘｔｒａｃｔ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００７，１０３：３８１－３８８．
［１５］　Ｔｅｒａｏ　Ｊ．Ｄｉｅｔａｒｙ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｓ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ［Ｊ］．Ｆｏｒｕｍ　ｏｆ　Ｎｕ－
ｔｒｉｔｉｏｎ，２００９，６１：８７－９４．
［１６］　Ｗｅｉ　Ｘ，Ｚｈａｏ　Ｒ，Ｓｕｎ　Ｙ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ｌｅａｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　Ｓｉｂｅｒｉａｎ
Ｃｒａｂａｐｐｌｅ（Ｍａｌｕｓ　ｂａｃｃａｔａ（Ｌｉｎｎ．）Ｂｏｒｋｈ）ｃｏｎｔａｉｎｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ
ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｅｎｚｙｍｅ　Ｉｎｈｉｂｉ－
ｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９，２４：２３４－３４０．
［１７］　李荣涛，刘杰超，焦中高．ＲＰ－ＨＰＬＣ测定苹果树枝、叶中根皮
苷的含量 ［Ｊ］．食品工业科技，２００９，３０（１２）：３８５－３８７．
Ｌｉ　Ｒ　Ｔ，Ｌｉｕ　Ｊ　Ｃ，Ｊｉａｏ　Ｚ　Ｇ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈｌｏｒｉｄｚｉｎ　ｉｎ　ａｐ－
ｐｌｅ　ｔｒｅｅ　ｂｒａｎｃｈ　ａｎｄ　ｌｅａｆ　ｂｙ　ＲＰ－ＨＰＬＣ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈ－
ｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，２００９，３０（１２）：３８５－３８７．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ

）
（上接第１６０页）
［４３］　Ｔａｍｕｒａ　Ｋ，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ　Ｄ，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ　Ｎ，ｅｔ　ａｌ．ＭＥＧＡ５：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｕｓｉｎｇ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ，ｅｖｏ－
ｌｕｔｉｏｎａｒｙ　ｄｉｓｔａｎｃｅ，ａｎｄ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｐａｒｓｉｍｏｎｙ　ｍｅｔｈｏｄｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ
Ｂｉｏｌ　Ｅｖｏｌ，２０１１，２８（１０）：２７３１－２７３９．
［４４］　Ｇｒａｎｔ　Ｖ．Ｔｈｅ　ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ　ｐｒｏｃｅｓｓ：Ａ　ｃｒｉｔｉｃａｌ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｅｖｏｌｕ－
ｔｉｏｎａｒｙ　ｔｈｅｏｒｙ［Ｍ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｕｍｂｉａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｐｒｅｓｓ，
１９９１．
［４５］　Ｆｒａｎｋｈａｍ　Ｒ，Ｂｒｉｓｃｏｅ　Ｄ　Ａ，Ｂａｌｏｕ　Ｊ　Ｄ．Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｔｏ　ｃｏｎｓｅｒ－
ｖａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ［Ｍ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｐｒｅｓｓ，
２００２：２９－６２．
［４６］　Ｗｒｉｇｈｔ　Ｓ．Ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｂｙ　Ｆ－ｓｔａ－
ｔｉｓｔｉｃｓ　ｗｉｔｈ　ｓｐｅｃｉａｌ　ｒｅｇａｒｄ　ｔｏ　ｓｙｓｔｅｍｓ　ｏｆ　ｍａｔｉｎｇ［Ｊ］．Ｅｖｏｌｕ－
ｔｉｏｎ，１９６５，１９：３９５－４２０．
［４７］　闫　超，刘　平，刘孟军，等．枣树的结实特性影响因素 ［Ｊ］．
林业科学，２０１０，４６（４）：７８－８６．
Ｙａｎ　Ｃ，Ｌｉｕ　Ｐ，Ｌｉｕ　Ｍ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｆｒｕｉｔｉｎｇ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｚｉｚｉｐｈｕｓ　ｊｕｊｕｂａ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｔｉａ　Ｓｉｌｖａｅ
Ｓｉｎｉｃａｅ，２０１０，４６（４）：７８－８６．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［４８］　Ｗｒｉｇｈｔ　Ｓ．Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍｅｎｄｅｌｉａｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，
１９３１，１６（２）：９７－１５９．
［４９］　李　宁．陕北地区枣树ＰＯＤ同功酶和核型研究 ［Ｄ］．甘肃兰
州：甘肃农业大学，２００８．
Ｌｉ　Ｎ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ　ｉｓｏｚｙｍｅ　ａｎｄ　ｋａｒｙｏｔｙｐｅ　ｏｆ　ｊｕｊｕｂｅ
ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｉｎ　Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｓｈａａｎｘｉ［Ｄ］．Ｌａｎｚｈｏｕ，Ｇａｎｓｕ：Ｇａｎｓｕ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００８．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［５０］　齐向英，李　宁，陈宗礼．狗头枣染色体数目与核型分析 ［Ｊ］．
安徽农业科学，２００８，３６（２６）：１１３０５－１１３０６．
Ｑｉ　Ｘ　Ｙ，Ｌｉ　Ｎ，Ｃｈｅｎ　Ｚ　Ｌ．Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ａｎｄ　ｋａｒｙｏｔｙｐｅ
ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｄａｔｅ　Ｇｏｕｔｏｕｚａｏ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｎｈｕｉ　Ａｇ－
ｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００８，３６（２６）：１１３０５－１１３０６．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［５１］　彭建营，王永蕙，彭士琪．用花粉形态鉴定枣品种和酸枣类型
［Ｊ］．河北农业大学学报，１９９２，１５（Ｓｕｐｐｌ．）：３１－３４．
Ｐｅｎｇ　Ｊ　Ｙ，Ｗａｎｇ　Ｙ　Ｈ，Ｐｅｎｇ　Ｓ　Ｑ．Ａｐｐｒａｉｓａｌ　ｊｕｊｕｂｅ　ａｎｄ　ｗｉｌｄ　ｊｕ－
ｊｕｂｅ　ｃｕｌｔｉｖａｒ　ｔｙｐｅ　ｂｙ　ｐｏｌｅｎ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉ－
ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｈｅｂｅｉ，１９９２，１５（Ｓｕｐｐｌ．）：３１－３４．（ｉｎ
Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［５２］　王秀伶，邵建柱，张学英，等．ＰＯＤ同工酶在酸枣、枣分类中的
应用 ［Ｊ］．武汉植物学研究，１９９９，１７（４）：３０７－３１３．
Ｗａｎｇ　Ｘ　Ｌ，Ｓｈａｏ　Ｊ　Ｚ，Ｚｈａｎｇ　Ｘ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｌａｓｓｉｆｉ－
ｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｊｕｊｕｂｅ　ａｎｄ　ｗｉｌｄ　ｊｕｊｕｂｅ　ｂｙ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ　ｉｓｏｚｙｍｅ［Ｊ］．
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｗｕｈａｎ　Ｂｏｔａｎｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９９，１７（４）：３０７－３１３．
（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
７６１第６期 丁传波，等：山荆子中根皮苷和黄酮含量的测定及其乙醇提取物的抗氧化活性