全 文 ：19 9 5 年 6 月
第 3 2 卷第 3 期
四川 大学学报 (自然科学版 )
J o ur n a l o f S c i ha n uUn ie r s v ity (N
a tr a ul S e ie n e e E过 it io n )
J Un
.
V o l
.
3 2
9 19 5
N 0
甘蓝型油菜与蓝花子属间倍半二倍体的
形成及其细胞遗传学特性
杨 毅 李旭峰 王 幼平 罗 鹏
(生 物 系 )
摘要 对甘蓝型油菜与蓝花子的属间远缘杂交得到的杂种 Fl ,经加倍后获得双二倍体植
株 . 该植株作母本再与甘蓝型油菜杂交获得其倍半二倍体 . 用充气液体培养基加 8一轻基喳琳预
处理 ,对不能以根尖为材料作染色体制片的植物 , 以其幼嫩花蕾进行体细胞染色体制片 ,对甘蓝
型油菜与蓝花子属间倍半二倍体 的细胞遗传学特性进行 了研究 . 该植物的染色体 数 目为
2二 = 盯 . 大多数 PM sC 的染色体在减数分裂过程中配对不规则 ,并在后期 I 中出现多极分裂现
象 .
关键词 甘蓝型油菜 , 蓝花子 ,倍半二倍体 , 细胞遗传学 , 染色体预处理
中图法分类号 Q g招
倍半二倍体是研究油菜一蓝花子附加系的重要中间材料 , 因而在研究附加系的过程中 ,
对倍半二倍体的研究便是一项重要的工作 . 李旭峰等 〔 ’ 〕利用人工去雄授粉方法 ,得到了油菜
与蓝花子属间远缘杂种 F ; ,利用组织培养无性繁殖方法 , 保存杂种 F , 植株 ,并用所研究的
染色体加倍的新培养基 ,获得了甘蓝型油菜与蓝花子属间杂种双二倍体 〔`口. 为倍半二倍体的
研究奠定了材料基础 .
1 材料和方法
1
.
1 材料
以甘蓝型油菜与蓝花子杂种双二倍体为杂交母本 , 甘蓝型油菜品种 (加拿大双低 )为杂
交父本 .
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 杂交 将组织培养的油菜— 蓝花子杂种双二倍体小苗移栽到我校试验田 内 ,以它作母本与甘蓝型油菜回交 ,以获得倍半二倍体种子 . 再将倍半二倍体杂种种子播种于田间 .
1
.
2
.
2 倍半二倍体的体细胞染色体制片及 P M cs 制片法
( 1) 充气预处理法 取倍半二倍体的幼嫩 花蕾 ,置于具有一定营养成分的 0 . 0 1m ol L/
8
一经基喳琳溶液中 ,用小型充气机充气处理 4一 1 h0 , 卡诺液固定 ,最后以 70 % 乙醇溶液保存
备用 . 将预处理的花蕾在 60 ℃ 、 l m ol / L H cl 中解离 8一 10 m in , 剥取幼嫩子房用改 良苯酚品
本文于 1 9 9 4 年 9月 l刁 日收到 ,修改稿于 一9 9 5 年 3 月 3 1 日收到
1 9 9 5 年 6 月
第 3 2卷第 3期
四川 大学学报 ( 自然科学版 )
J o ur n a l o S fic h ua n U n i v e r si ty ( N
a tur a l S e i e n e e E过i ti o n )
J U n
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V o l
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3 2
19 9 5
N0
甘蓝型油菜与蓝花子属间倍半二倍体的
形成及其细胞遗传学特性
杨 毅 李旭峰 王 幼平 罗 鹏
(生 物 系 )
摘要 对甘蓝型油菜与蓝花子的属间远缘杂交得到的杂种 F l ,经加倍后获得双二倍体植
株 . 该植株作母本再与甘蓝型油菜杂交获得其倍半二倍体 . 用充气液体培养基加 8一轻基喳琳预
处理 ,对不能以根尖为材料作染色体制片的植物 , 以其幼嫩花蕾进行体细胞染色体制片 ,对甘蓝
型油菜与蓝花子属间倍半二倍体 的细胞遗传学特性进行 了研究 . 该植物的染色体 数 目为
2二 = 盯 . 大多数 PM sC 的染色体在减数分裂过程中配对不规则 ,并在后期 I 中出现多极分裂现
象 .
关键词 甘蓝型油菜 , 蓝花子 ,倍半二倍体 , 细胞遗传学 , 染色体预处理
中图法分类号 Q g招
倍半二倍体是研究油菜一蓝花子附加系的重要中间材料 , 因而在研究附加系的过程中 ,
对倍半二倍体的研究便是一项重要的工作 . 李旭峰等 〔 ’ 〕利用人工去雄授粉方法 ,得到了油菜
与蓝花子属间远缘杂种 F ; ,利用组织培养无性繁殖方法 , 保存杂种 F , 植株 ,并用所研究的
染色体加倍的新培养基 ,获得了甘蓝型油菜与蓝花子属间杂种双二倍体 〔`口. 为倍半二倍体的
研究奠定了材料基础 .
1 材料和方法
1
.
1 材料
以甘蓝型油菜与蓝花子杂种双二倍体为杂交母本 , 甘蓝型油菜品种 (加拿大双低 )为杂
交父本 .
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 杂交 将组织培养的油菜— 蓝花子杂种双二倍体小苗移栽到我校试验田 内 ,以它作母本与甘蓝型油菜回交 ,以获得倍半二倍体种子 . 再将倍半二倍体杂种种子播种于田间 .
1
.
2
.
2 倍半二倍体的体细胞染色体制片及 P M cs 制片法
( 1) 充气预处理法 取倍半二倍体的幼嫩 花蕾 ,置于具有一定营养成分的 0 . 0 1m ol L/
8
一经基喳琳溶液中 ,用小型充气机充气处理 4一 1 h0 , 卡诺液固定 ,最后以 70 % 乙醇溶液保存
备用 . 将预处理的花蕾在 60 ℃ 、 l m ol / L H cl 中解离 8一 10 m in , 剥取幼嫩子房用改 良苯酚品
本文于 1 9 9 4 年 9月 l刁 日收到 ,修改稿于 一9 9 5 年 3 月 3 1 日收到
第 3 期 杨毅等 :甘蓝型油菜与蓝花子属 间倍半二倍体的形 成及其细胞遗传学特性 3钧
甘 蓝型油菜与蓝花子属间倍半二倍体 .双二倍体的染色体数为 2n 一 5 6 , 甘蓝型油菜的染色
体数为 2。 ~ 38 ,所以倍半二倍体的染色体数应为 2 , 一 47 . 经体细胞染色体制片检查 , 其体
细胞染色体数目为 2n 一 4 7 ,证实了我们所获得的材料是倍半二倍体 .
播种后的倍半二倍体在 生育期间 ,其开花时间比油菜及其母本双二倍体晚 ; 在 3一 4 月
内 , 不能正常开花 ,这是 由于温度 比较低 ,倍半二倍体一般要在 15 ℃ 以上才能正常开花 ; 倍
半二倍体的花蕾要 比油菜及其母本小 , 其花为白色 , 花瓣较小 ,仅是其母本的一半 ;整个植株
要比油菜及其母本小 、 细 ;它对温度及土壤温度的要求与蓝花子相似 ; 其生育期 比油菜长约
3 d0
,与蓝花子相似 . 说明所研究的倍半二倍体 已具有蓝花子的某些特性 .
在对倍半二倍体的 P M sC 行为的观察过程 中 , 由于倍半二倍体植株的花药退化 , 花粉比
较少 ,具有活力的花粉更少 . 因此观察倍半二倍体植株 P M sC 的染色体减数分裂行为比较困
难 . 我们发现倍半二倍体在减数分裂过程 中不能规则配对 ,所以在末期 I 中 , 出现多极分裂
现象 . 不同数 目的染色体聚集在一起 ,形成各 自独立的核 ; 在相当于四 分体的时期产生大小
不一的小抱子细胞群 ,一般为 5一 7 个 ,有的多达 9 个 ,各个小饱子内所含的核量不等 ; 花粉
粒无活性 ,这是倍半二倍体不育的直接原 因之一
由于倍半二倍体是一个重要的中间材料 , 通过对它的研究 ,我们设计 了油菜一蓝花子 附
加系研究体系 , 其具体路线如下 :
双二 倍体 ( A A c C R R ) x 甘 蓝型 油菜 ( A A C C )
!
{
倍 半 二倍体 ` A A C C )R x
2 . = 4 7
甘蓝型油菜 ( A A C C )
2 ” = 38
{
B e Z 中 l司材料 ( A A e +c x R )
!杏
花药绘养
{
A C R I
,
A C R 2
. … AC R I RZ , . . . , … A C R I R Z R 3 R 4 R S R 6 R 7 R S
3
.
2 特殊植物材料染色体处理的新方法— 液体培养基加 8 一经基喳琳的充气处理由于倍半二倍体的种子非常少 , 不能用根尖制片的方法来进行染色体处理 . 通过我们的
试验 ,发现用充气的液体培养基加上 0 . 0 1 m ol / L 的 8一轻基哇琳处理花蕾时 , 取其柱头压片
能得到非常好的体细胞染色体中期分裂相 ,且分裂相较多 , 染色体分散良好 . 文 [ 2〕用类似方
法在植物根尖上取得了 比较好的分裂相 , 但没有见到处理植物花蕾的报道 . 因此 , 用充气液
体培养基加 8一轻基唆琳的处理方法是对植物 以及特殊植物材料染色体研究的一个有益探
索 .
3 5 0 四川大学学报 ( 自然科学版 ) 第 3 2 卷
参 考 文 献
1I L X F
, e心以 . J . o f H au z h o n g A g r i . U n iv . S u P . S u m , 1 9 9 4 , ] 7 : 1 3
2 aP
n
W H
.
G e n o m e
,
1 9 9 3
,
3 6
:
3 8 7
3 李旭峰等 . 四川大学学报 ( 自然科学版 ) , 1 9 9 1 ,专辑 : 61
T H E F O R M A T I O N A N D C Y T O G E N E T I C C H A R A C T E R I S T I C S O F S E S QU I D I P
-
L O I D B E T W E E N R A P E S E E D ( B RA S 泞 I C A N A P U S L
.
) A N D O I L R A D I S H
( R A P H A N U S S A Z
,
1 1厂U S L
.
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.
R A P H A N I S T RO I D E S M A K L呵O )
Y al g h 众 X Zfej 儿g H恤 g y洲娜9 L OU 衡岭
( D e P a r tm e n t of B i
o l o g y )
A b s t r a e t T h is Pa P e r f i r s t r e P o r st t h e f o r m a t i o n a n d e y t o g e n e t i e e h a r a e t e r is t i cs o f s es q u id i Pl o 记 s
be t w e e n r a Pes
e d ( B
o a s s云ca 忍 a脚 s L · ) a n d 0 11 r a d is h ( R a 户ha 几 u s 污 a t` v “ 5 L . v a r · r a Pha 介云s tr o 落d e s
M a k i n o )
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t i P s f o r e h r o m o s o m e P r e P a r a t io n
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