全 文 :翻白草石油醚提取液降血糖功能性研究
张 俭 , 伍贤进
(怀化学院生物工程系 ,湖南怀化 418008)
摘要:为探讨翻白草石油醚提取液对糖尿病 KM小鼠的影响 ,选取糖尿病 KM小鼠 80只 ,分为 4组:模型对照组 、
盐酸二甲双胍组 、翻白草高剂量组和翻白草低剂量组 ,采用自制的翻白草石油醚提取液灌胃给药 , 1次 /d,连续 7 d, 检
测体重和血糖变化。结果给药 1d后 , 与模型对照组相比 ,各试验组小鼠血糖浓度均明显降低;给药 7 d后 ,除模型对
照组外 ,各试验组小鼠血糖浓度均恢复到造模前正常水平 , 体重有所增加。该结果表明 ,翻白草石油醚提取液对糖尿
病 KM小鼠有明显的降血糖作用 , 且高低剂量组降血糖效果没有明显差异。
关键词:翻白草;石油醚;四氧嘧啶;降血糖
中图分类号:R282.71 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2009)04-0369-02
收稿日期:2009-01-05
基金项 目:国家 科技 基础 条件 平台 建 设子 项目 (编号:
2005DKA21006);湖南省植物学重点建设学科资助项目。
作者简介:张 俭(1967—),男 ,湖南洞口人 ,硕士 ,副教授 ,主要从事
细胞生物学和药物学的研究。 E-mail:hhzhangjian@163.com。
翻白草(PotenilladiscolorBunge, PDB),又名鸡腿子、白
头翁 ,为蔷薇科委陵菜属多年生草本植物 ,主要产于河南 、安
徽 、台湾等地区 ,全国各地均有分布 [ 1] 。全草入药 ,具有清热
润燥 、凉血解毒 、止血消肿 、止痢之功效 [ 2 -3 ] 。翻白草的主要
药用成分有熊果酸 、鞣质 、黄酮类等 [ 4] 。熊果酸有抗炎 、抗
菌 、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应 [ 5] 。黄酮类物质有
促进胰岛细胞膜专一受体结合的作用 ,能调整糖 、脂肪代谢 。
研究表明 ,翻白草能降低Ⅱ型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗 ,增强
它的细胞免疫能力 [ 6] 。民间常用翻白草治疗糖尿病 。翻白
草资源十分丰富 ,药用成分含量较高 ,是一种极有开发价值的
中药资源 。
目前人们通常用水煎煮的方法对翻白草的生物活性成分
进行提取 [ 7 ] ,而对于用石油醚提取翻百草有效成分的方法 ,
国内外未见报道 。本试验使用石油醚作为萃取剂 ,探究其提
取液对糖尿病 KM小鼠动物血糖作用的影响 ,为其临床应用
提供参考依据 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验材料 翻白草 , 2006年 9月采于湖南溆浦 ,经怀
化学院伍贤进教授鉴定为蔷薇科委陵菜属草本植物 。
1.1.2 试验动物 KM纯系小鼠 ,清洁级 ,雌 、雄各半 ,体重
(22±2)g,由中山大学实验动物中心引进(动物合格证:粤检
证字 2003A064号)。小鼠饲料购自中南大学湘雅医学院实
验动物中心 。动物房温度 22 ℃(空调),相对湿度为 70% ~
80%。
1.1.3 试剂与仪器 四氧嘧啶(美国 Sigma公司),盐酸二甲
双胍(北京中慧药业有限公司 ,批号:20061104),石油醚等其
他试剂均为国产分析纯。电子天平(梅特勒 -托利仪器厂 ,型
号 AL104),超声循环提取仪 (北京宏祥隆生物技术有限公
司 ,型号 CTXNW-10B),旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂 ,
RE52AA),紫外分光光度计 (上海光谱仪器有限公司 ,型号
UV-752),雅培利舒坦血糖仪(美国 ThereSense公司)。
1.2 翻白草提取液的制备
称取翻白草干草 3 000g,烘干 ,磨成粉末 , 70%乙醇超声
循环提取 。将醇提液浓缩后用石油醚萃取 2次 ,萃取液用旋
转蒸发仪浓缩备用 。
1.3 小鼠糖尿病造模
KM小鼠禁食不禁水 8h后 ,以 1%四氧嘧啶生理盐水溶
液按 200mg/kg对 KM小鼠进行腹腔注射 [ 8] , 48 h内注意观
察小鼠状态 ,血糖未升高的 KM小鼠按 100 mg/kg腹腔注射
四氧嘧啶生理盐水溶液 ,连续追加 2次 。 3 d后禁食 12 h空
腹测血糖 ,以血糖浓度高于 11.1 mmol/L的为糖尿病小鼠 。
1.4 试验分组
选取造模成功的 KM小鼠 80只 ,雌雄各半 ,分成 4大组 ,
模型对照组 、盐酸二甲双胍组 、翻白草高剂量组 、翻白草低剂
量组各 20只 。
1.5 给药
翻白草高剂量组:将浓缩的翻白草石油醚萃取物加蒸馏
水配成 60%溶液 ,灌胃给药 , 0.8 ml/次 。翻白草低剂量组:将
浓缩的翻白草石油醚萃取物加蒸馏水配成 20%溶液 ,灌胃给
药 , 0.8ml/次 。模型对照组:灌胃给生理盐水 , 0.8ml/次 。盐
酸二甲双胍组:盐酸二甲双胍 1.0 g/kg, 腹腔给药 ,
0.8ml/次 [ 9] 。以上 4组均为 1次 /d,连续 7 d。
1.6 血糖的测定
将各小组 KM小鼠末次给药前小鼠禁食 10 h,末次给药
3h后采用剪尾采血 。先将动物固定 ,将鼠尾浸在 40 ℃左右
温水中 5 min,使尾部血管充盈 ,剪去小鼠尾尖 1 mm,尾尖流
出血液 ,用雅培利舒坦血糖测试仪检测血糖浓度 。
1.7 小鼠体重的测定
各组 KM小鼠连续给药期间 ,每天记录小鼠体重 ,观察记
录小鼠状况 。
2 结果与分析
2.1 临床症状观察
KM小鼠注射四氧嘧啶造模后 , 3 d后各组出现多饮、多
—369—江苏农业科学 2009年第 4期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2009.04.149
食 、多尿 、体重减轻的 “三多一少 ”症状 ,并逐渐加重。给药
后 ,翻白草高 、低剂量组和盐酸二甲双胍组 KM小鼠的症状减
轻 ,且随试验进程症状得到缓解;而模型对照组的症状随试验
进程加重 , 2只小鼠死亡 。
2.2 翻白草石油醚提取液对小鼠血糖的影响
翻白草石油醚提取液高剂量组可使糖尿病 KM小鼠的高
血糖降低 。 KM小鼠造模后血糖升高 ,但随着 1次 /d、连续 7
d的翻白草提取液灌胃治疗 ,其血糖浓度逐渐降低 ,逐渐接近
造模前正常水平(图 1)。
翻白草石油醚提取液低剂量组可使四氧嘧啶糖尿病 KM
小鼠的高血糖降低 。其作用与高剂量组相比 ,从给药后到 2d
前 ,效果较缓慢 。从给药后 3 d开始 ,高 、低剂量对 KM小鼠
降血糖的作用相差不大 ,直到降低到接近正常水平(图 2)。
2.3 各组小鼠体重和血糖浓度的相互关系
在试验过程中除模型对照组 KM小鼠体重在造模后一直
下降及 2只小鼠死亡外 ,盐酸二甲双胍 、翻白草高低剂量组的
KM小鼠体重随着试验进程均得以回升(图 3)。
在试验过程中 ,除模型对照组 KM小鼠血糖浓度在造模
后继续上升没有下降及 2只小鼠死亡外 ,盐酸二甲双胍 、翻白
草高低剂量组的小鼠血糖浓度随着试验进程逐渐下降 ,并恢
复到造模前正常水平 。翻白草石油醚提取液的降血糖作用与
盐酸二甲双胍相似(图 4)。
3 讨论
本研究采用石油醚作为萃取剂 ,对翻白草有效成分进行
提取 ,分析给药后四氧嘧啶糖尿病 KM小鼠体重和血糖变化 ,
来探究翻白草石油醚提取液对糖尿病 KM小鼠的影响 。结果
表明:给药后 ,除模型对照组外 ,其他各组 KM小鼠体重有所
回升 。翻白草提取液具有明显的降血糖作用 ,其药效与盐酸
二甲双胍的效果相近 。翻白草石油醚高 、低两剂量组的降血
糖效果无明显差异 ,可能是中草药试验的特点 ,高剂量吸收低
的缘故 。因为在各剂量组中 ,给药体积是相同的 ,高剂量在小
鼠胃内小环境中形成高渗透压 ,因此吸收少难见疗效 。提示
人们在翻白草提取液在临床应用中可用低剂量代替高剂量使
用 ,减少用药量和副作用 。
翻白草石油醚萃取物的总黄酮含量较高 。翻白草黄酮的
药效作用 ,可能是通过减弱四氧嘧啶对胰岛 β细胞的损伤或
改善受损伤的胰岛 β细胞来治疗糖尿病或缓解糖尿病症状 ,
这可能是翻白草具有抗糖尿病的重要原因之一 。本研究初步
证实了翻白草石油醚萃取物具有明显的降血糖作用 ,但其具
体作用机理有待深入研究。
参考文献:
[ 1]江苏新医学院.中药大辞典:上册 [ M].上海:上海科学技术出
版社 , 1977:1369-1370.
[ 2]邹俊利.翻白草的研究进展 [ J].黑龙江医药科学 , 2006, 29(4):
104-105.
[ 3]李时珍.本草纲目 [ M] .张守康 , 较注.北京:中国中医药出版
社 , 1998:702.
[ 4]张 俭 ,伍贤进 ,谭运兰 ,等.翻白草营养成分及部分药用成分的
测定与分析 [ J] .食品科技 , 2006, 31(9):237-239.
[ 5]李胜华 ,伍贤进 ,郁建平 ,等.超声波提取翻白草中熊果酸工艺优
化研究 [ J] .食品科学, 2007, 28(8):160-164.
[ 6]郭新民 ,崔荣军.翻白草对Ⅱ型糖尿病大鼠血清胰岛素和胸腺指
数的影响 [ J] .牡丹江医学院学报 , 2004, 25(4):1-3.
[ 7]王晓敏 ,王建红 ,徐冬平 ,等.翻白草水提液对糖尿病小鼠降血糖
作用[ J] .江西中医学院学报 , 2005, 17(2):53-54.
[ 8] DhanabalSP, SureshkumarM, RamanathanM, etal.Hypoglyemic
efectofethanolicextractofMusasapientumonaloxaninduceddia-
betesmelitrsinratsanditsrelationwithantioxidantpotential[ J].
HerbPharmacother, 2005, 5(2):7-19.
[ 9]赵燕燕 ,张秋燕 ,李 挥 ,等.麦冬消渴胶囊对四氧嘧啶糖尿病大
鼠血糖血脂的影响 [ J].河北大学学报:自然科学版 , 2005, 25
(3):281-284.
—370— 江苏农业科学 2009年第 4期