全 文 ：Chinese Journal of New Drugs 2013，22(4)
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中国新药杂志 2013 年第 22 卷第 4 期
［基金项目］ 国家自然科学基金(81102763) ;教育部博士点基金新
教师基金(201000 96120004)
［作者简介］ 谈景福，男，硕士研究生，主要从事中药质量分析及中药资
源评价研究。联系电话:15251759810，E-mail:tanjingfu1987@163． com。
［通讯作者］ 秦民坚，男，教授，博士生导师，主要从事药用植物物种
资源与质量相关研究。联系电话: (025)85391290，E-mail:minjianqin
@ sina． com。王强，男，教授，博士生导师，主要从中药及其制剂质量分
析研究。联系电话:(025)83271390，E-mail:qwang1949@163． com。
·实验研究·
翻白草中一个新的黄酮苷类成分
谈景福1，2，3，杨 杰1，2，裴正龙2，秦民坚1，3，王 强1，2
(中国药科大学 1 天然药物活性组分与药效国家重点实验室，2 中药分析教研室，
3 中药资源教研室，南京 210009)
［摘要］ 目的:研究翻白草的化学成分。方法:采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20 和大孔吸附树脂等色谱
分离手段对翻白草 90%乙醇提取物的正丁醇萃取部位进行分离纯化，并根据理化性质和波谱数据鉴定化合
物的结构。结果:分离得到 1 个黄酮苷类化合物，鉴定为山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯基-(2→1)-
β-D-吡喃木糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucopyranside butyl ester-(2→1)-β-D-xylopyranoside，1)。结论:化合物
1 为新化合物。
［关键词］ 翻白草;正丁醇部位;黄酮苷类;山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯基-(2→1)-β-D-吡
喃木糖苷
［中图分类号］ R932 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1003 － 3734(2013)04 － 0469 － 04
A new flavone glycosides compound from the whole herbs of Potentilla discolor
TAN Jing-fu1，2，3，YANG Jie1，2，PEI Zheng-long2，QIN Min-jian1，3，WANG Qiang1，2
(1 Key Laboratory of Modern Traditional Chinese Medicines of Ministry of Education，2 Research Department of
Chinese Material Medical Analysis，3 Research Department of Traditional Chinese Medicinal Resources，
China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China)
［Abstract］ Objective:To investigate the chemical constituents of the whole herbs of Potentilla discolor
Bunge． Methods:The chemical constituents in normal butanol fraction of 90% ethanol extract from the whole
herbs of P． discolor were isolated and purified by column chromatography over silica gel，ODS，Sephadex LH-20
and macroporous adsorptive resins． The structures were identified on the basis of physico-chemical properties and
spectral data analyses． Results:A flavone glycoside was isolated and identified as kaempferol-3-O-β-D-glucopyran-
side butyl ester-(2→1)-β-D-xyl opyranoside (1)． Conclusion:Compound 1 is a new compound．
［Key words］ Potentilla discolor Bunge;n-butyl alcohol fraction;flavone glycosides;kaempferol-3-O-β-D-
glucopyranside butyl ester(2→1)-β-D-xylopyranoside
翻白草，又名鸡腿儿、鸡腿根、鸡脚草、鸭脚参、
白背叶、天青地白，始载于《救荒本草》，为蔷薇科委
陵菜属植物翻白草 Potentilla discolor Bunge． 的干燥
全草，是一种常见中药［1］。翻白草性平、味甘、微
苦、无毒，归肝、胃、大肠经，具有止血止痢、清热解
毒、消肿之功效，为《中华人民共和国药典》2010 年
版收载。现代医学研究表明，翻白草具有抗菌、止
泻、抗肿瘤、免疫抑制和降血糖的药理作用，在民间
和临床上均有抗糖尿病的应用［2 － 5］。文献报道从翻
白草中分离得到的化合物主要有黄酮类、三萜类、单
宁类和一些脂肪酸及酚酸类化合物［6 － 10］。为了更
全面地了解翻白草的药效物质基础，本课题对翻白
草 90%乙醇提取物的正丁醇萃取部位进行了深入
系统的化学成分研究。通过各种柱色谱方法，从中
分离并鉴定一个新的黄酮类化合物山柰酚-3-O-β-D-
吡喃葡萄糖醛酸正丁酯基-(2→1)-β-D-吡喃木糖苷
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［kaempferol-3-O-β-D-glucopyranside butyl ester-(2→
1)-β-D-xylopyranoside，1］。
材 料
XT 4 型双目体视显微熔点仪(上海精密仪器
有限公司) ;FT IR 8400S型红外光谱仪 (KBr压
片，日本岛津公司) ;Bruker V 500 MHz 核磁共振谱
仪(德国 Bruker公司) ;1100LC /ESI-MSD(美国 Agi-
lent公司)。薄层色谱硅胶 H、薄层色谱硅胶 GF254、
柱色谱硅胶(100 ～ 200 目，200 ～ 300 目)均购自青
岛海洋化工厂;大孔吸附树脂 HPD400(河北沧州宝
恩公司) ;ODS 柱(40 ～ 60 μm，Fuji) ，Sephadex LH-
20 葡聚糖凝胶(瑞典 Pharmacia公司)。所用试剂均
为分析纯。
供试翻白草购自广西南宁药材批发市场，由中
国药科大学王强教授鉴定为蔷薇科(Rosaceae)委陵
菜属植物翻白草 Potentiila discolor Bunge 的干燥全
草，凭证标本存放于中国药科大学中药分析教研室。
方法与结果
1 提取分离
翻白草 14 kg，用 90%乙醇加热回流提取 3 次，
每次 3 h。合并提取液，减压浓缩成浸膏，再以适量
水混悬后用正丁醇萃取，减压回收溶剂，得正丁醇萃
取部位约 300 g。把获得的正丁醇部位用水溶解，滤
除不溶物，滤液经大孔吸附树脂柱色谱，依次用
10%，30%，50%，90%的乙醇梯度洗脱，减压回收溶
剂，得 I ～ IV 4 个部位的浸膏。其中Ⅱ号浸膏，用三
氯甲烷-甲醇溶解后，上硅胶(200 ～ 300 目)柱色谱，
三氯甲烷-甲醇-水洗脱，然后经 ODS 和 Sephadex
LH-20 反复纯化，得化合物 1(5 mg)。
2 结构鉴定
化合物 1，黄色粉末，易溶于甲醇，与 1%三氯化
铝溶液反应显黄色荧光，且盐酸镁粉反应和三氯化
铁反应均呈阳性，UV 中在 254 nm(带Ⅱ)和 350 nm
(带Ⅰ)处有吸收，说明该化合物为黄酮类化合物。
HR-TOF-MS给出相对分子质量m/z［M －H］－ 649．4218
(calcd． for C30 H33 O16，649． 422 6) ，结合
13 C-NMR
和1H-NMR谱确定其分子式为 C30H34O16。
1H-NMR 图谱上，δ 6． 43 (1H，d，J = 2． 0 Hz)
和 6． 19 (1H，d，J = 2． 0 Hz)两质子信号说明 A 环
的 C-5，C-7 位被取代;而 δ 8． 05 (2H，d，J = 8． 5
Hz)和 6． 87 (2H，d，J = 8． 5 Hz)信号说明在 B环上
有两组邻位质子，故推测 C-4被取代。对比13C-NMR
数据，发现母核部分与山柰酚的数据一致［11］。另外，
结合氢谱中出现的 δ 0． 70，1． 11，1. 34，3． 96 信号和碳
谱中 δ 64． 1，29． 8，18． 1，13． 2 的信号，可知该化合物
含有正丁酯基。此外，13C-NMR谱上共有 30 个碳信
号，除去推测含有的山柰酚苷元和正丁酯基外，还有
11个碳信号，其中 δ 98． 2 与 104． 4 可确定为糖的端
基碳信号，由此可推测该化合物为山柰酚的糖苷，其
中一个六碳糖和一个五碳糖。根据13 C-NMR 数据，
与文献［12］对照可知这两个糖分别为 D-吡喃葡萄
糖醛酸、D-吡喃木糖(xyl)。另根据文献［13］，由于
该化合物的端基氢化学位移值为 δ 4． 61，且为两重
峰(J = 7． 0 Hz) ，可确定该化合物中的 D-吡喃木糖
糖基应为 β构型。综合13 C-NMR，HMBC，ROESY 谱
上的信号可确定糖的连接顺序和连接位置。由 δ
132． 5(C-3)可知，糖链连接在 C-3 位。在 HMBC 谱
中，木糖基的端基碳 C-1(δ 104． 4)与葡萄糖醛酸
基的 H-2″ (δ 3． 50)有远程相关，说明木糖基与葡萄
糖醛酸基为(1→2)连接，见图 1 ～ 2。
在 ROESY 谱中，葡萄糖醛酸基的端基氢 H-1″
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［δ 5． 70 (1H，d，J = 7． 5 Hz) ］与母核上 H-6 ［δ
8. 05(2H，d，J = 8． 5 Hz) ］出现相关峰，说明葡萄糖
醛酸基连接在黄酮母核上。见图 3 ～ 4。
图 3 化合物 1 的 NOESY谱
图 4 化合物 1 的主要 ROESY相关
另外，HMBC谱还给出正丁基中-CH2-(δ 3． 92)
还与葡萄糖醛酸基 C-6 (δ 168． 1)有远程相关，说明
正丁基与葡萄糖醛酸的羧基成酯。因此确定，-β-D-
吡喃葡萄糖醛酸正丁酯基(2→1)-β-D-吡喃木糖连接
在苷元的 C-3。通过 1H-NMR谱、13 C-NMR谱、1H-1H
COSY和 HMBC谱可以将该化合物的碳氢信号进行
全归属，其波谱数据见表 1。
表 1 化合物 1 的核磁数据
No． δC δH［mult．，J = Hz］ No． δC δH［mult．，J = Hz］
2 155． 7 glu
3 132． 5 1″ 98． 2 5． 70(1H，d，7． 5)
4 177． 2 2″ 81 3． 50(1H，m)
5 161． 2 3″ 75． 5 3． 72(1H，m)
6 98． 7 6． 19(1H，d，J = 2． 0 Hz) 4″ 70． 9 3． 40(1H，m)
7 164． 2 5″ 75． 9 3． 15(1H，m)
8 93． 6 6． 43(1H，d，J = 2． 0 Hz) 6″ 168． 1
9 156． 3 but 64． 1，29． 8，18． 1，13． 2 0． 70，1． 11，1． 34，3． 92
10 103． 8 xyl
1 120． 6 1 104． 4 4． 61(1H，d，J = 7． 0 Hz)
2，6 130． 8 8． 05(2H，d，J = 8． 5 Hz) 2 73． 7 3． 09(1H，m)
3，5 115． 5 6． 87(2H，d，J = 8． 5 Hz) 3 75． 8 3． 53(1H，m)
4 160． 1 4 69． 4 3． 29(1H，m)
5 65． 6 3． 72，3． 07(1H，m)
综合以上信息，确定该化合物为山柰酚-3-O-β-
D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯基-(2→1)-β-D-吡喃木糖
苷 (kaempferol-3-O-β-D-glucopyranside butyl ester-
(2→1)-β-D-xyl opyranoside)。将药材提取物与该
新化合物进行 TLC 比对，经过三氯化铝试液显色，
药材提取物色谱中与对照品色谱相应的位置显相同
颜色的黄色斑点。该化合物为一新化合物。
［ 参 考 文 献 ］
［1］ 江苏新医学院． 中药大辞典［M］． 上海:上海科学技术出版
社，1977:1369．
［2］ 王晓敏，王建红，徐东平，等． 翻白草水提液对糖尿病小鼠
降血糖作用［J］． 江西中医学院学报，2005，17(2) :53 － 54．
［3］ 孟令云，朱黎霞，郑海洪，等． 翻白草高血糖动物模型的作
用研究［J］． 中国药理学通报，2001，29(4) :35 － 36．
(下转第 491 页)
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表 3 盐酸小檗碱加样回收率试验结果 n = 6
称样量 / g 样品含量 /mg 对照品加入量 /mg 测定量 /mg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD /%
0． 150 1 1． 813 1． 772 3． 499 95． 13 96． 18 1． 2
0． 150 8 1． 822 1． 772 3． 518 95． 73
0． 149 5 1． 806 1． 772 3． 511 96． 22
0． 148 8 1． 798 1． 772 3． 487 95． 34
0． 151 3 1． 828 1． 772 3． 571 98． 38
0． 149 8 1． 810 1． 772 3． 515 96． 24
2． 2． 10 样品含量测定 取 3 批葛连解糖颗粒样
品，按“2． 2． 3”项方法制备供试品溶液，依法测定，以
平均峰面积按照回归方程计算含量。结果见表 4。
表 4 样品含量测定结果 n = 3
批号
盐酸小檗碱
含量 /mg·g － 1 平均含量 /mg·g － 1
20100318 11． 998 11． 975
11． 901
12． 027
20100320 11． 802 11． 827
11． 754
11． 925
20100322 11． 755 11． 696
11． 714
11． 618
讨 论
因本品成分较复杂，提取后，颜色较深，因此采
用氧化铝柱纯化的方法去除杂质。经预试，葛根、枸
杞子、地黄、胡芦巴的 TLC 特征成分在水洗脱液中
明显，黄连的 TLC特征成分在 50%乙醇洗脱液中明
显，从而确定了各 TLC鉴别用供试品溶液的制备方
法。纯化后的溶液点样，斑点较清晰，干扰较少。
本实验中，参考文献［1 －3］，分别用甲醇和 30%
乙醇溶液制备葛根素含量测定供试品溶液，实验结果
表明发现甲醇溶出成分较复杂，对葛根素峰有干扰，
而 30%乙醇制备的供试品溶液中葛根素含量较高，
且阴性无干扰。因此选择 30%乙醇溶液为溶剂。
盐酸小檗碱的含量测定方法参考文献［4］，选用
其中分离效果较好的 Kromasil C18色谱柱。在考察流
动相时发现甲醇-水系统分离度较低，盐酸小檗碱峰
较宽，且基线噪音较大;乙腈-水系统的峰型拖尾严
重;乙腈-磷酸盐溶液系统盐酸小檗碱峰与相邻峰基
线分离度较好，且峰形好，故选择乙腈-0． 01 mol·L －1
磷酸二氢钾水溶液(35∶ 65)作为流动相。
［ 参 考 文 献 ］
［1］ 苏玉娟，李延雪，隋译． 速消酯胶囊的质量标准研究［J］． 中草
药，2006，37(4) :548 － 550．
［2］ 王昌利，朱玲，孙静． 复方龙脉宁滴丸质量标准研究［J］． 中成
药，2010，32(2) :239 － 243．
［3］ 国家药典委员会． 中华人民共和国药典［S］． 2010 年版． 一
部． 北京:中国医药科技出版社，2010:312 － 313．
［4］ 谢晓燕，张忠君，于春英． 高效液相色谱法测定七味柏苓片中
盐酸小檗碱和五味子乙素的含量［J］． 中成药，2010，32(9) :
1636 － 1638．
编辑:周卓 /接受日期:
櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃櫃
2013 － 01 － 21
(上接第 471 页)
［4］ 孟令云，朱黎霞，杜慧． 翻白草对家兔血糖影响的研究［J］．
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［5］ 马瑛，温少珍． 翻白草治疗 II 型糖尿病 50 例疗效观察［J］．
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Nat Prod，1987，50(4) :660 － 663．
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编辑:郭超伟 /接受日期:2012 － 09 － 17