全 文 ：第 13卷第 3期 湖　北　工　学　院　学　报 1998年 9月
Vol. 13No. 3 　 Journal of Hubei Polytechnic University Sep. 1998
收稿日期　 1998- 04- 30
钦传光　男　 1965年生　讲师　武汉　湖北工学院生物工程系　 430068
纸色谱法鉴定蛇莓红色素的成分
钦传光　马　丽　丁　焰　　　王微宏
(生物工程系 ) (湖南医科大学 )
摘　要　采用各种标准展开系统 ,对蛇莓果中的红色素及其水解产物进行纸层析分离 ,结果均只
发现一个红色斑点 . 测得红斑的 R f值并与文献值比较 ,结合紫外 - 可见光吸收光谱特性分析 ,鉴
定了该红色素的化学结构为天竺葵素 - 3-葡萄糖苷 .
关键词　纸色谱 ;蛇莓色素 ;花色苷 ;鉴定
中图法分类号　 O 658, O 629
蔷薇科植物蛇莓 ( Duchesnea Indica Focke )又称三叶莓、红顶果、地杨梅、龙吐珠等 ,属多
年生草本植物 ,广泛分布在我国大部分地区 ,是一味常用的中草药 ,具有清热解毒、镇痛抗癌等
多方面的疗效 [1 ] . 目前对蛇莓的研究仅限于它的药用方面 ,而对蛇莓果成份的研究鲜有报道 .
文献 [2]曾对蛇莓红色素的稳定性作了较系统的研究 ,结果表明该色素具有花色苷的各种特
性 .弄清蛇莓果色素的化学组成和结构 ,对于植物的化学分类和在食品工业上开发利用该天
然色素具有重要意义 .
笔者通过实验提取蛇莓红色素 ,进行了纸色谱分离 ,并根据色素的吸收光谱特性及其在各
种展开系统中的 R f 值 ,初步鉴定了蛇莓红色素只含一种花色苷 ,其结构为天竺葵素 - 3- 葡
萄糖苷 (Ⅰ ) ,即翠菊苷 ,其分子结构如图 1. 对Ⅰ 的水解液进行纸层析和光谱测定 ,证实了水解
液中的呈色部分为天竺葵素 (Ⅱ ) ,其分子结构如图 1.
　　
OH
HO
O+ OH
O Glu
　　　
OH
HO
O+ OH
OH
Ⅰ Ⅱ
图 1　Ⅰ 与Ⅱ 的分子结构示意图
1　仪器与试剂
1. 1　仪器设备
日立 7530型紫外- 可见分光光度计 ,国产 721分光光度计 ,水循环式真空泵 , GS-15R型
离心机 ,恒温水浴锅 ,红外灯 ,新华 3号滤纸 ,展开缸等 .
1. 2　试剂
正丁醇 ,三氯化铝 ,冰醋酸 ,无水乙醇 ,乙酸乙酯 ,甲酸 ,浓盐酸等 ,均为分析纯 .
1. 3　展开剂
实验共采用了 6种展开剂 , 1#为 BAW (正丁醇∶冰醋酸∶蒸馏水= 4∶ 1∶ 5) , 2# 为 BuH-
Cl(正丁醇∶ 2 M盐酸= 1∶ 1,取上层 ) , 3#为 1% HCl(浓盐酸∶蒸馏水= 3∶ 97) , 4# 为 HOAc
- HCl(浓盐酸∶冰醋酸∶蒸馏水= 3∶ 15∶ 8) , 5# 为 Fo restal (浓盐酸∶冰醋酸∶蒸馏水= 3
∶ 30∶ 10) , 6#为甲酸溶液 (甲酸∶浓盐酸∶蒸馏水= 5∶ 2∶ 3) .
2　材料与方法
2. 1　样品的采集与处理
采集武汉地区产鲜蛇莓果 1. 5 kg ,用纯水淘洗干净 ,沥干后当日进行色素提取 .
2. 2　蛇莓色素的提取
称取 130 g鲜蛇莓果 ,加 200 mL无水乙醇和 10 mL浓盐酸和 10 mL水 . 浸泡 5 h后抽
滤 ,洗涤至滤液基本无色 ,得滤液 300 mL. 再离心分离 ,澄清的色素溶液装入棕色瓶中备用 .
取色素溶液 20 m L ,真空浓缩后烘干 ,经重量法测定非挥发性可溶固形物浓度为 11. 7 g /L.
2. 3　蛇莓色素的水解
吸取 40 mL蛇莓色素提取液 ,加 5 m L浓盐酸和 5 mL水 ,置水浴中加热 , 70～ 90℃下保
持 1 h后取出 ,迅速冷却至室温 . 每次用 20 mL乙酸乙酯萃取 ,重复 3次 ,合并酯层 . 回收乙
酸乙酯 ,残物用含 1% HCl的乙醇溶液溶解 ,点样纸层析 ,测定吸收光谱 .
3　结果讨论
3. 1　蛇莓色素纸层析条件与结果
取 5个展个缸 ,分别盛装 1# 、 2# 、 3# 、 4# 、 5# 展开剂 , ( 33± 1)℃下将 5张点有蛇莓色素提
取液样的滤纸条分别插入 5个展开缸内 ,预先平衡 15 min后 ,再上行展开 . 当展开前沿达 ( 9
± 1) cm处 ,取出纸条 ,晾干后观察色斑 ,只发现一个紫红斑点 ,测量红斑的 Rf 值 (取 3次平
均 ) ,并与文献 [3]中的 Rf值对照 ,结果见表 1.
从表 1可见 ,蛇莓红色素的 Rf 测定值与Ⅰ 的文献值基本吻合 ,该色素可能具有Ⅰ 的结
构 .
表 1　蛇莓色素展开后的 Rf值
　 Rf 值
展开剂 1# 2# 3# 4# 5#
测定值 0. 46 0. 36 0. 18 0. 38 0. 78
文献值 0. 44 0. 38 0. 14 0. 35 -
表 2　蛇莓色素水解液展开的 Rf值
　 R f 值
展开剂 1# 4# 6#
测定值 0. 75 0. 63 0. 28
文献值 0. 80 0. 68 0. 31
3. 2　蛇莓色素的吸收光谱特性
用日立 7530型分光光度计扫描蛇莓色素的 EtO H- HCl溶液在 200～ 700 nm间的吸收
光谱 . 结果表明 ,该红色素在 270 nm和 510 nm处有两个吸收强峰 ,在添加 AlCl3后不发生位
移 . 文献 [3]给出Ⅰ在 MeOH- HCl溶液中的吸收峰波长为 270 nm和 506 nm , AlCl3也不使
其发生位移 . 可见 ,蛇莓色素的吸收光谱特性与Ⅰ相吻合 .
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3. 3　蛇莓色素水解产物的展开条件与结果
取 3只展开缸 ,分别盛装 1# 、 4# 、 6#展开剂 ,将 2. 2中点样的 3张滤纸条分别插入展开缸
中 , ( 33± 1)℃下预先平衡 15 min后 ,再上行展开 . 当展开剂前沿达 ( 9± 1) cm时 ,取出纸条 ,
晾干后观察色斑 ,也都只有一个红斑 ,测定红斑的 Rf 值 ,并与Ⅱ的文献值对比 ,结果见表 2.
从表 2可见 ,蛇莓色素水解后 ,呈色产物的 Rf 值及颜色与Ⅱ的文献值基本吻合 ,说明蛇莓
色素水解后可生成天竺葵素 ,反应式为:
　　
OH
HO
O
+
OH
O Glu
　 HCl△ 　
OH
HO
O
+
OH
OH
　+ Glu
3. 4　蛇莓色素水解后的吸收光谱特性
用日立 7530型分光光度计扫描色素水解液在 200～ 700 nm间的吸收光谱 . 结果表明 ,蛇
莓色素水解后 ,在 EtO H- HCl溶液中 , 270 nm和 520 nm处有两个吸收强峰 ,加 AlCl3后 ,吸
收峰不发生位移 . 文献 [3]给出Ⅱ的 MeOH- HCl溶液在 270 nm和 520 nm处也有两个吸收
峰 ,且不受 AlCl3的影响 . 可见 ,蛇莓色素水解后 ,呈色产物的吸收光谱特性与Ⅱ的文献值吻
合 .
4　结论
综合以上分析结果 ,可初步鉴定蛇莓果中的红色素为天竺葵素 - 3-葡萄糖苷 . 该花色苷
的更精细的化学结构证据需进一步深入的研究 .
参　考　文　献
1　徐国均主编 . 中草药彩色图谱 . 福州:福建科学技术出版社 , 1995, 934～ 935
2　钦传光 ,张泗军 ,丁焰等 . 蛇莓红色素稳定性的研究 . 食品与机械 , 1997, ( 5): 34～ 35
3　马自超 ,庞业珍编 . 天然食用色素化学及生产工艺学 . 北京:中国林业出版社 , 1994: 59～ 78
7　第 13卷第 3期　　　　　　　钦传光等　纸色谱法鉴定蛇莓红色素的成分
Component Identif ication of the Red Pigment
from Mockstrawberry Fruit by
Paper- layer Chromatography
Qin Chuanguang　Ma Li　Ding Yan　Wang Weihong
Abstract　 The red pigment ex tracted f rom mockst raw berry f rui t w as separated by paper-
lay er ch romatog raphy. Its Rf values in various development so lv ent systems w ere measured.
Af ter the comparison wi th the litera ture v alues and the analysis of the properties o f UV - Vis
abso rption spect rum o f the red pigment , the chemical st ructure of the red pigment f rom
mockst raw berry f ruit w as identified as pelarg onidin- 3- g lucoside.
Keywords　 paper- layer chromato graphy; mockstraw berry pigment; anthocyanin; identifica-
tion
(责任编辑　徐雄立 )　　
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