全 文 ：优化野生黄蔷薇不定芽的分化
庞发虎1，杜瑞卿1，王永勤2 (1．南阳师范学院生命科学与技术学院，河南南阳 473061;2．北京农业生物技术研究中心，北京 010089)
摘要 ［目的］优化野生黄蔷薇不定芽的分化，为野生黄蔷薇的组织培养与离体快繁提供技术参考。［方法］利用均匀设计试验，采取不
同的影响因素对野生黄蔷薇不定芽进行诱导分化，并对结果进行了通径分析。［结果］影响分化率(Y)的 3个因素的最佳理论组合水平
是:6-BA(X1)1． 0 mg /L，NAA(X2)0． 50 mg /L，CPPU(X3)0． 3 mg /L，重要性依次为 NAA ＞6-BA ＞ CPPU，标准回归方程为 Y = 0． 619 5X1 +
0． 568 6X2 － 0． 362 8X3，具有统计学意义。［结论］均匀设计方案与通径分析在优化野生黄蔷薇不定芽分化方面的应用是成功的，值得在
植物组织培养方面推广应用。
关键词 野生黄蔷薇;通径分析;离体培养;优化;均匀设计
中图分类号 S685． 12 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)28 －17166 －02
Optimization on Adventitious Bud Inducement Differentiation of Wild Rosa hugonis
PANG Fa-hu et al (College of Life Science and Technology，Nanyang Normal University，Nanyang，Henan 473061)
Abstract ［Objective］The adventitious bud inducement differentiation was optimized in order to provide the technical reference for tissue cul-
ture and rapid propagation of the wild Rosa hugonis in vitro．［Method］Effects of the adventitious bud inducement differentiation of the wild
yellow rose were studied in field experiment by adopting different influence factors using the uniform design experiment and path analysis．
［Result］The best theory combination levels influencing differentiation rate were 6-BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 50 mg /L + CPPU 0． 3 mg /L，the
importance were NAA(X2)＞ 6-BA(X1)＞ CPPU(X3)，the standard regression equation was Y = 0． 619 5X1 + 0． 568 6X2 － 0． 362 8X3，it was
statistics significance． ［Conclusion］It was deserved to be used and successful in optimization on adventitious bud inducement differentiation of
the yellow wild Rosa hugonis using uniform design experiment and path analysis．
Key words Rosa hugonis;Path analysis;Culture in vitro;Optimization;Uniform design
基金项目 河南省科技厅基础与前沿项目(082300460170)。
作者简介 庞发虎(1975 － ) ，男，山西运城人，副教授，硕士，从事植物
生物技术研究，E-mail:pangfahu@ 163． com。
收稿日期 2011-07-11
野生黄蔷薇［1］(Rosa hugonis)为蔷薇科蔷薇属落叶灌木，
原产我国，现主要分布于甘肃、陕西、山西、河南、青海、四川等
省区。野生黄蔷薇多生长于海拔 1 000 ～ 2 300 m的向阳山坡
灌丛或沟谷、路旁，为阳性树种，喜光不耐阴，喜温暖湿润气候，
较耐寒、耐贫瘠、抗干旱、不耐涝，适生范围广，根系发达。在生
长季节，野生黄蔷薇叶色浓绿，花色金黄，枝条上混生细密针刺
呈现红色，果实似玛瑙坠于枝上，经久不落，是优良的新型园林
观赏树种［2］。它不仅可布置花坛、花镜、花篱，也可作为道路的
绿化带和隔离带。其果实可以生食，酿酒和制醋，或制药用。
许多研究还发现，野生黄蔷薇也非常适合作月季砧木［3］。可
见，野生黄蔷薇具有很高的观赏价值和经济价值，推广应用
前景广阔。黄蔷薇常规方法繁殖系数低［4］，组织培养可以解
决这一问题，但有关黄蔷薇的组织培养国内外报道较少［5］。
笔者利用均匀设计和通径分析对野生黄蔷薇的快繁体系进
行优化，旨在筛选出适于野生黄蔷薇离体培养的最佳培养
基，为野生黄蔷薇的组织培养与离体快繁提供技术参考。
1 材料与方法
1． 1 材料 野生黄蔷薇采自河南的伏牛山区。
1． 2 方法
1． 2． 1 黄蔷薇无菌苗的获得。取当年生带腋芽的茎段，用
自来水冲洗 100 ～120 min后，用洗涤剂洗涤，无菌水冲洗干
净，经75%乙醇处理8 s后，再用0． 1%HgCl2 溶液表面灭菌8
～10 min，无菌水冲洗 4 ～5次，接种于诱导培养基上。
1． 2． 2 不定芽诱导分化。切去无菌苗两端已褪色的组织，
在无菌操作下，将茎段切成1． 0 ～1． 5 cm长的小段，接种于诱
导分化的培养基上［6 －8］，基本培养基为 MS + 3． 2 mg /L Ag-
NO3 +30． 0 g /L蔗糖 + 6． 5 g /L琼脂，pH 6． 0;添加的植物生
长调节素为 6-BA、NAA 和 CPPU［N-(2-氯-4-吡啶基)-N-苯
基脲］，采用 U8
* (82 × 4)均匀设计表安排试验［9］，水平及编
码见表 1。每瓶接种 1 个茎段，共接种 30 瓶，重复 3 次。培
养室温度为 22 ～25 ℃，光照2 000 lx，每天光照14 h。30 d后
统计其诱导分化率。
表 1 不定芽诱导分化的因素水平及试验方案
Table 1 Factors and levels as well as the experiment design of adventi-
tious bud inducement differentiation
试验组
Experi-
mental
groups
因素水平
Factors and levels
6-BA(X1)
mg /L
NAA (X2)
mg /L
CPPU(X3)
mg /L
分化率
Differentiation∥%
实测值(Y1)
Actual value
预测值(Y2)
Forecast
value
1 0． 3 (1) 0． 10 (4) 1． 0 (4) 72． 22 73． 476 7
2 0． 5 (2) 0． 55 (8) 0． 8 (3) 82． 38 82． 330 3
3 0． 8 (3) 0． 08 (3) 0． 5 (2) 78． 49 78． 941 7
4 1． 0 (4) 0． 50 (7) 0． 3 (1) 88． 14 87． 358 3
5 1． 2 (5) 0． 05 (2) 1． 0 (4) 76． 39 77． 100 7
6 1． 5 (6) 0． 30 (6) 0． 8 (3) 83． 76 83． 526 5
7 2． 0 (7) 0． 01 (1) 0． 5 (2) 83． 98 83． 725 1
8 2． 2 (8) 0． 25 (5) 0． 3 (1) 88． 63 84． 847 8
1． 2． 3 数据分析。采用通径分析［10 －11］，利用 MATLAB 7． 0
编程运算。
2 结果与分析
依据表 1 均匀设计方案进行试验，对 6-BA(X1)、NAA
(X2)、CPPU(X3)、分化率(Y)标准化处理。自变量 X1、X2、X3
与因变量 Y的相关系数(r)分别为 0． 673、0． 504、－ 0． 817，自
变量 X1、X2、X3 的通径系数 b1、b2、b3 分别为 0． 619 5、
0． 568 6、－0． 362 8，标准回归方程为 Y = 0． 619 5X1 + 0． 568 6
X2 － 0． 362 8X3。X对 Y的直接决定系数矩阵 B
2 =(b2il)n ×1，
Xi 与 Xj 通过相关对 Y的间接决定系数 R
2
ij，及 Xi 对 Y的决策
系数 R2(i)见表 2。
回归方程及其通径系数的检验结果显示，U = 0． 995，F
=32． 723 ＞ F0． 01(3，4)=6． 591，回归方程极其显著，通径系数
责任编辑 郑丹丹 责任校对 李岩安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(28):17166 － 17167
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.28.206
b1、b2 极显著(t1 = 8． 135，t2 = 6． 339) ，b3 不显著(t3 =
－1． 982)。可见，分析在统计学上有意义。
表 2 不定芽诱导分化试验结果通径分析
Table 2 Path analysis of the adventitious bud inducement differentia-
tion experiment results
自变量
Independe-
nt variable
R2ij
X1 X2 X3
b2i1 R2(i)
X1 0． 383 8 0． 134 6 －0． 068 4 0． 383 8 0． 450 0
X2 0． 323 3 0． 094 0 0． 323 3 0． 551 9
X3 0． 131 6 0． 131 6 0． 157 0
由表 2可知，直接决定系数由大到小依次为 6-BA、NAA、
CPPU，即对分化率直接影响最大的因素为 6-BA，其次为
NAA，最小的因素为 CPPU。从间接决定系数来看，6-BA 与
NAA相互关联对分化率的影响最大，有利于提高分化率;
NAA与 CPPU相互关联对分化率的影响次之，6-BA与 CPPU
相互关联对分化率的影响最小，而且是负向的，即 6-BA 与
CPPU交互作用不利于提高分化率。从各因素对分化率的综
合影响决策系数 R2(i)来看，各因素的重要性依次为 NAA ＞
6-BA ＞ CPPU。依据标准回归方程，可得分化率的预测值，见
表 1。预测值中最大的是 87． 358 3，对应于实际值 88． 14，两
者相差较小;预测值中第二大值是 84． 847 8，对应于实际最
大值(88． 63) ，而且两者相差较大。因此，认为试验组 4为最
佳组合水平，即 6-BA为 1． 0 mg /L，NAA为 0． 50 mg /L，CPPU
为 0． 3 mg /L时，分化率在理论上应该最好。
3 结论与讨论
在植物组织培养中，生物调节物质的浓度和比值对根、芽
的生长影响较大［12 －13］。试验结果表明，细胞分裂素 6-BA与生
长素 NAA比值适中时，能提高诱导芽的分化。因此，要想在短
期内使不定芽得到大量分化，掌握好 6-BA和NAA的浓度和比
例是很重要的。在野生黄蔷薇的离体培养中发现，不定芽常出
现不同程度的黄化现象。根据资料分析［2］及预试验，笔者在培
养基中加入活性炭，有效地解除了褐化现象。利用均匀设计和
通径分析对野生黄蔷薇的快繁体系进行优化，结果表明，在影
响黄蔷薇无菌苗茎段分化率的 3 个因素中，重要性依次为
NAA ＞6-BA ＞CPPU;6-BA(X1)、NAA(X2)、CPPU(X3)与黄蔷薇
无菌苗茎段分化率(Y)的标准回归方程为 Y = 0． 619 5X1 +
0．568 6X2 －0．362 8X3，具有统计学意义;影响黄蔷薇无菌苗茎
段分化率的 3个因素的最佳理论组合水平是:6-BA 1． 0 mg /L，
NAA 0． 50 mg /L，CPPU 0． 3 mg /L，此条件下分化率在理论上最
好。均匀设计方案与通径分析在优化黄蔷薇无菌苗不定芽分
化的培养基方面的应用具有统计学意义，是成功的，值得在植
物组织培养方面推广应用。
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(上接第 17175页)
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