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用大孔吸附树脂分离槭叶草有效成分



全 文 :用大孔吸附树脂分离槭叶草有效成分
魏永慧1 , 王艳茹1 , 丰利2
(1.北华大学医学院 ,吉林 吉林 132011; 2.吉林特产高等专科学校 ,吉林 吉林 132109)
摘要:大孔吸附树脂可用于槭叶草中有效成分 ———黄酮类化合物的提取。经对比实
验研究发现采用该提取 、分离方法 ,无论从质量还是收率上均好于聚酰胺柱层析法
及重结晶法。该方法成本低 ,方法简单易行;其产率可达 7%;产品经薄层层析鉴
定 ,其 Rf值为 0.70 ,确为黄酮类化合物 。
关键词:大孔吸附树脂;槭叶草;黄酮类化合物
中图分类号:S567.2 文献标识码:A
槭叶草[ Mukdenia rossii(oliv.)Koidz.] 为虎耳草科多年生草本植物 ,其根部含有许多具
有医用价值的有效成分 ,尤以黄酮类化合物为主。黄酮类化合物具有明显的生理活性 ,可降血
压 、降胆固醇及防止血栓形成等。我们曾采用聚酰胺柱层析法及重结晶法 ,进行了槭叶草中黄
酮类化合物的提取和分离 ,但收率较低 。现采用大孔吸附树脂法提取和分离 ,收率明显高于前
法且质量同前。这一方法的推广及使用 ,将有利于中药材的开发和利用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 槭叶草根 采自秋季长白山区 ,阴干后 ,粉碎成粉末状待用。
1.1.2 大孔吸附树脂 天津农药股份有限公司树脂分公司 D-101型 。
1.2 方法
1.2.1 大孔吸附树脂的预处理及再生
1.2.1.1 预处理 取市售大孔吸附树脂 ,用乙醇加热回流 、洗脱 ,洗至洗脱液蒸干后无残留物 。
经乙醇洗净的树脂 ,挥去溶剂后 ,保存待用(一般洗脱 3 ~ 4次即可)。
1.2.1.2 装柱 以乙醇湿法装柱。继续用乙醇在柱上流动清洗 ,不时检查流出的乙醇 ,至与
水混合不呈白色浑浊为止(乙醇∶水=1∶5)。然后以大量的蒸馏水洗去乙醇待用(必须洗净
乙醇 ,否则将影响吸附效果)。
1.2.1.3 再生 将样品溶于少量水中 ,加至柱的上端 ,或将样品先溶于少量乙醇 ,拌入适量的
树脂 ,挥去乙醇后 ,再将拌有样品的树脂加到柱上 。先用水 ,继而用乙醇—水为溶剂洗脱 ,逐步
加大乙醇的浓度 。一般用 95%的乙醇洗脱至无色时 ,树脂即已再生 ,然后以大量的蒸馏水洗
去乙醇 ,即可进行下一步的使用 。经反复使用后 ,吸附树脂颜色变深 ,吸附效果下降 ,可采用
5%NaOH(或 3%HCl)溶液洗涤或浸泡 2 ~ 4h ,至树脂接近原颜色为宜 ,继续用蒸馏水洗至中
性 ,即可再用。
1.2.2 提取与分离
1.2.2.1 提取 以乙醇和水为溶剂 ,用 95%的乙醇溶解回流提取。称取槭叶草根粉末 100g ,
用滤纸袋装好后 ,取 150mL 95%的乙醇于 250mL 圆底烧瓶中 ,用索式提取器回流提取 。水
收稿日期:2002-01-21
作者简介:魏永慧(1962-),女 ,湖南衡阳人 ,北华大学医学院副教授 ,从事有机化学及天然药物化学研究工作。
35特产研究 Special Wild Economic Animal and Plant Research 2002 年第 1 期
文章编号:1001-4721(2002)01-0035-02
DOI:10.16720/j.cnki.tcyj.2002.01.013
浴下回流 3 ~ 4h ,直至回流液滴基本无色 。
1.2.2.2 浓缩 取上述回流液于蒸馏烧瓶中 ,以常压蒸馏浓缩 ,蒸出溶剂 ,直至烧瓶中的提取
液为 10 ~ 15mL 时停止加热。
1.2.2.3 分离 取上述浓缩液 ,加至已处理好的大孔吸附树脂柱上(药材和树脂的比例为 1∶
2 ~ 3),慢慢滴加完毕后 ,先用水洗 ,后改用 30%~ 50%的乙醇溶液 ,并逐步增大乙醇溶液的浓
度进行洗脱。7 ~ 10mL/次 ,洗脱 2 ~ 3次 ,收集 、合并洗脱液约100mL。将洗脱液减压蒸馏 ,回
收乙醇 ,至干。低温真空干燥 ,得黄棕色粉末 ,约 6.8g ,即为黄酮类化合物。
取少量上述样品 ,配成乙醇溶液 ,作薄层层析 ,测得其 Rf =0.70。
重复上述操作 1.2.2.1 ~ 1.2.2.3的步骤 ,所得结果基本同上。
2 结果与讨论
2.1 结果
我们采用大孔吸附树脂法已分离出槭叶草中的有效成分———黄酮类化合物 ,与其它方法
得到的产品(对照)比较 ,结果如下 。
   表 1 产  品  性  能  比  较
方法 色泽 溶解性 产量(n=10) Rf(薄层) 颜色反应
水 醇 (g)
柱层析法 黄棕 差 好 3.2 0.70 阳性
重结晶法 黄白 差 好 5.4 0.67 阳性
大孔吸附法 黄棕 差 好 6.8 0.70 阳性
2.2 讨论
显然 ,利用大孔吸附树脂法提取 、分离得到的产品 ,与其它方法得到的产品各项性能指标
均无差异 ,而产品的收率高于其它方法 。
采用大孔吸附树脂方法提取 、分离的黄酮类化合物 ,已初步通过有关的药理实验 ,证实其
具有较好的降低血脂 、降低胆固醇的作用。
从方法上看 ,用大孔吸附树脂分离槭叶草有效成分———黄酮类化合物 ,具有收率高 、质量
好的特点 ,尤其是大孔吸附树脂的再生性及循环使用 ,大大降低了生产成本 ,更适用于工业化
生产 ,可广泛应用于大量生产中。相信 ,随着本研究工作的进一步深入 ,大孔吸附树脂法在中
草药研究中的应用将会日趋成熟 ,必将为更好地开发和利用中药材提供有效的帮助 。
参考文献:
[ 1] 魏永慧 , 等.槭叶草中黄酮类化合物的提取[ J] . 特产研究 , 2000 , 22(4):38.
[ 2] 阴 键.中药现代研究与临床应用[ M] .北京:学苑出版社 , 1993.
[ 3] 许鸿章 , 等.用大孔吸附树脂分离抗菌素[ J] . 医药工业 , 1979 ,(1).
Separating Useful Composition from Mukdenia
rossii(oliv.)Koidz.with the Big Aperture Adsorption Resin
WEI Yong-hui1 ,WANG Yan-ru1 , FENG Li2
(1.Medical College , Beihua University , Jilin , Jilin 132011;2.Jilin College of Special Wild Animal
and P lant Science , Jilin , Jilin 132109)
Abstract:Useful composition could be separated from Mukdenia rossii(oliv.) Koidz.with the big aper ture
adsorption resin.We do some experiment to compare separating effects the result showed that the big aper ture
adsorption resin was better than others in the method and result of separating.The result of separating is about 7%.
The composition was tested by the thin layer chromatog raphy and its Rf value is 0.70.It w as defined as flavonoids
compound.
Key words:Big aper ture adsorption resin , Favonoids compound
36 特 产 研 究 2002 年