全 文 ：收稿日期:2008-11-27;　修订日期:2009-06-30
基金项目:云南省教育厅资助项目(No.2005KY416440)
作者简介:郭美仙(1980-),女(汉族),云南凤庆人 ,现任大理学院药学院
助理实验师 ,主要从事药理学实验教学及中药药理研究工作.
＊通讯作者简介:刘晓波(1972-), 男(苗族),贵州思南人 , 现任大理学院
药学院药理学副教授 ,主要从事药理学教学及中药药理研究工作.
苦石莲对小鼠急性实验性肝损伤的保护作用
郭美仙 , 刘　明 , 施贵荣 , 何正春 , 刘晓波＊
(大理学院·药学院 ,云南 大理　671000)
摘要:目的 研究苦石莲对 D-半乳糖胺(D-GalN)、酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响。方法 苦石莲总提取物灌
胃给药 7d后 ,用 D-GalN、酒精导致小鼠急性实验性肝损伤 ,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和
肝脏系数。结果 苦石莲对小鼠急性实验性肝损伤血清 ALT、AST活性和肝脏系数均有明显抑制作用(P<0.01, P<
0.05)。结论 苦石莲对 D-GalN、酒精所致小鼠急性实验性肝损伤具有一定的保护作用。
关键词:苦石莲;　实验性肝损伤
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)11-2786-02
ProtectiveEffectofCaesalpiniaminaxHanceagainstAcuteLiverInjuryinMice
GUOMei-xian, LIUMing, SHIGui-rong, HEZheng-chun, LIUXiao-bo＊
(SchoolofPharmacology, DaliColege, Dali, Yunnan, 671000, China)
Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveefectofCaesalpiniaminaxHanceagainstacuteliverinjuryinmicemadebyD-
GalNactosamineandalcohol.MethodsTheacutehepaticinjurymodelmadebyD-GalNactosamineandalcoholafteri.g.mice
theCaesalpiniaminaxHancefor7 days, thentheactivitiesofalanineaminotransferase(ALT)andaspartateaminotransferase
(AST)inserumwereexamined.ResultsCaesalpiniaminaxHancecoulddecreasetheliverindex(P<0.01, P<0.05)andthe
activitiesofALTandAST(P<0.01, P<0.05)inserum.ConclusionCaesalpiniaminaxHancehasprotectiveeffectagainsta-
cuteliverinjuryinmice.
Keywords:CaesalpiniaminaxHance;　Acuteliverinjury
　　苦石莲为豆科植物喙荚云实属(南蛇簕)Caesalpiniaminax
Hance的干燥成熟种子。苦石莲性寒味苦 , 入心 、脾 、肾三经 , 具
有散瘀止痛 、清热 、祛湿的功效 , 可用于治疗哕逆 、痢疾 、淋浊 、尿
血 、跌打损伤 [ 1] 。在大理白族民间苦石莲种子入药有着悠久的
历史 , 有很好的用药基础 , 常用于治疗胃肠道疾病 、扁桃体炎 、鼻
炎 、无名肿痛等 ,疗效显著。还用于治疗肝炎 、腮腺炎 、痢疾 、风湿
性关节痛 、痧症 、病毒性感冒发热 、淋浊 、尿血等 [ 2] 。本实验研究
苦石莲对 D-半乳糖胺(D-GalN)、酒精所致小鼠急性实验性肝
损伤的影响。
1　材料与仪器
1.1　药物 苦石莲总提取物由大理学院药学院天然药物化学实
验室提供(苦石莲购买于大理地区 , 经大理学院药学院马晓匡教
授鉴定为云实属南蛇簕的干燥成熟种子)。
1.2　动物 昆明种小鼠(普通级),雌雄各半 ,体质量 18 ～ 22g,由
云南生物制药有限公司提供 ,合格证号:SCXK(滇)2005-0007。
1.3　试剂 联苯双酯滴丸(浙江医药股份有限公司新昌制药厂 ,
批号:061003);D-半乳糖胺(上海楷洋生物技术有限公司 , 批
号:G0500);酒精(天津市化学试剂三厂);谷丙转氨酶(ALT)测
定试剂盒(四川省成都市迈克科技有限责任公司提供 , 批号:
0907061);谷草转氨酶(AST)测定试剂盒(上海荣盛生物技术有
限公司提供 , 批号:20070725)。
1.4　仪器 台式高速冷冻离心机(TL-16K, 上海市离心机械研
究所);722型光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂);电子天平
(EL104, 梅特勒 -托利多仪器上海有限公司)。
2　方法
2.1　对 D-GalN所致急性实验性肝损伤的影响 [ 3～ 6] 取健康小
鼠 84只 ,雌雄各半 , 随机分为 6组 ,每组 14只 , 分别为正常组 、模
型组 、联苯双酯组(0.45g· kg-1)、苦石莲高剂量组(0.84 g·
kg-1)、苦石莲中剂量组(0.56g· kg-1)、苦石莲低剂量组(0.28g
· kg-1)。联苯双酯组 、苦石莲高 、中 、低剂量组小鼠均按 20ml·
kg-1灌胃给药 ,正常组及模型组小鼠灌胃给等体积生理盐水 , 2
次 /d, 连续给药 7d。于第 7天第 2次给药 1h后 , 除正常组外 , 其
余各组小鼠均腹腔注射 D-GalN, 0.45g· kg-1 , 正常组小鼠腹腔
注射等体积蒸馏水。末次给药 16h后摘眼球取血 , 分离血清 , 检
测 ALT、AST活性。采血后 , 迅速颈椎脱臼处死小鼠 , 取出整个肝
脏用生理盐水漂洗 ,除去血液 , 滤纸拭干 ,称重 , 计算肝脏系数。
2.2　对酒精所致实验性肝损伤的影响 [ 3 , 4 , 6] 分组及给药方法同
“ 2.1”项 , 于第 7天第 2次给药 8h后 , 除正常组外 , 其余各组小鼠
均灌胃给 50度酒精溶液 , 20ml· kg-1 ,正常组小鼠灌胃给等体积
蒸馏水 。末次给药 4h后摘眼球取血 , 分离血清 , 检测 ALT、AST
活性。取肝脏称重 ,计算肝脏系数。
2.3　计算肝脏系数 肝脏系数 =肝脏重量(mg)/体质量(g)×
100%
2.4　数据处理 所有数据均以 x±s表示 , 采用 t检验观察其组间
差异。
3　结果
3.1　苦石莲总提取物对 D-GalN所致小鼠急性实验性肝损伤
的影响 对血清 ALT、AST的活性和肝脏系数的影响。结果见
表 1。
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.11
表 1　苦石莲对 D-GalN所致小鼠肝损伤血清 ALT、AST和肝脏系数的影响( x±s)
组别 剂量/g· kg-1
ALT
/U· L-1
AST
/U· L-1
肝脏系数
/mg· g-1
正常 - 21.62±4.86 88.44±15.29 43.24±6.91
模型 - 39.36±5.58＊＊ 135.89±21.85＊＊ 56.20±8.75＊＊
联苯双酯 0.45 23.44±4.13■■ 91.85±14.21■■ 45.93±7.22■■
苦石莲提取物(高) 0.84 21.42±3.81■■ 89.97±13.71■■ 46.07±5.98■■
苦石莲提取物(中) 0.56 25.74±6.11■■ 98.88±16.90■■ 48.44±6.54■
苦石莲提取物(低) 0.28 36.37±4.07＊＊ 118.88±21.14＊＊■ 52.47±6.64＊＊
　　与正常组比较 , ＊＊P<0.01 ;与模型组比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01;n=14
由表 1可知 , 与正常组比较 , D-GalN模型组血清 ALT、AST活性和肝脏系数
显著升高(P<0.01), 表明造模成功;与模型组比较 , 苦石莲各剂量组均能明显抑
制血清 ALT、AST和肝脏系数的升高 , 除低剂量组血清 ALT和肝脏系数无差异外 ,
其余各组均有显著性差异(P<0.01或 P<0.05)。结果显示苦石莲总提取物对 D
-GalN所致小鼠急性实验性肝损伤有一定的保护作用。
3.2　苦石莲总提取物对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响 对血清 ALT、
AST的活性和肝脏系数的影响。结果见表 2。
表 2　苦石莲对酒精所致小鼠肝损伤血清 ALT、AST和肝脏系数的影响( x±s)
组别 剂量C/g· kg-1
ALT
/U· L-1
AST
/U· L-1
肝脏系数
C/mg· g-1
正常 - 23.34±5.80 87.86±12.90 42.93±7.75
模型 - 30.33±4.07＊＊ 112.19±19.55＊＊ 52.40±8.50＊＊
联苯双酯 0.45 25.02±3.95■■ 90.14±14.59■■ 45.38±6.10■■
苦石莲提取物(高) 0.84 23.27±4.13■■ 86.98±9.56■■ 44.89±6.22■■
苦石莲提取物(中) 0.56 24.23±5.22■■ 91.79±13.74■■ 46.36±6.92■
苦石莲提取物(低) 0.28 25.49±6.87■ 94.01±15.50■■ 48.95±7.84＊
　　与正常组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01 ;与模型组比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01;n=14
由表 2可知 ,与正常组比较 , 酒精模型组血清 ALT、AST活性和肝脏系数显著
升高(P<0.01), 表明造模成功;与模型组比较 ,苦石莲各剂量组均能明显抑制血
清 ALT、AST和肝脏系数的升高 , 除低剂量组肝脏系数无差异外 , 其余各组均有显
著性差异(P<0.01或 P<0.05)。结果显示苦石莲总提取物对酒精所致小鼠急性
实验性肝损伤有一定的保护作用。
4　讨论
肝损伤是一种临床常见的危害人类健康的疾病 , 肝损伤涉及的病理因素比较
广泛 , 如病毒 、生物 、药物 、理化 、酒精等 , 都可以导致肝损伤。当肝细胞受损时 , 细
胞内 ALT、AST等会释放入血 , 血清 ALT目前仍被认为是反映肝损伤的敏感指标 ,
ALT绝大部分位于细胞浆 , 而 AST则主要位于线粒体 , 少部分位于胞浆。肝损伤
较轻时仅使细胞膜通透性增加 ,胞浆内 ALT释放入血;肝细胞受损严重时 , 线粒体
内 AST才释放入血。目前检测血清 ALT、AST活性和肝脏系数 , 仍作为判断肝损伤
的程度和药物治疗肝损伤的效果的重要指标 [ 5] 。
D-GlaN是肝细胞内尿苷二磷酸葡萄糖的干扰剂。 D-GlaN可造成肝弥漫
性坏死或炎症 , 是目前最接近人临床病毒性肝炎病理变化的模型。其损害肝细胞
的机理是 D-GlaN进入体内后与磷酸尿苷(UDP)结合以形成 UDP-半乳糖胺 ,
致使尿嘧啶核苷耗竭及肝脏转录功能障碍 , 从
而使依赖生物合成的核酸 、糖蛋白 、脂糖等物质
合成受抑制 , 限制了细胞器及酶的生成和补
充 , 细胞器和细胞膜受损 、Ca2+内流入细胞 , 从
而造成肝细胞损伤 , 严重的可造成肝细胞坏
死 [ 7] 。酒精则是通过其代谢中间产物乙醛与
生物大分子的功能基团结合从而干扰其功能 ,
当机体进入大量酒精后 , 激活氧分子产生自由
基 , 使肝细胞膜的脂质过氧化和消耗还原性谷
胱甘肽 , 另外 ,酒精大量脱氢氧化 , 使三羧酸循
环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢 , 从
而导致肝细胞损伤 [ 8] 。
实验结果表明 , 苦石莲对 D-GalN、酒精所
致小鼠急性实验性肝损伤血清 ALT、AST活性
的异常升高具有显著的抑制作用 , 但具体的保
肝作用机理还有待进一步研究。
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