全 文 ：檵木叶是常用的民间药,收载于《中国药典》1977年
版 (一部),为金缕梅科植物檵木 Loropetalumchinense
(R.Br.)Oliv.的干燥叶,具有清热解毒、收敛、止血的功效,
用于治疗烧、烫伤,外伤出血,吐血,崩漏,腹泻[1]。主要用
于止血,为特效外敷止血的药材[2]。资源初步调查的结果
表明:在湖南的药用品种除檵木外,还有红花檵木L.chi-
nense(R.Br.)Oliv.var.rnbrumYieh。
对檵木叶成分研究的文献报道很少,仅有人对其抗
菌成分部位的提取、分离进行了初步研究[3],而现代研究
表明:槲皮素能增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆
性等作用[4],是檵木叶的有效成分之一。为了开发檵木叶
这一民间药用资源,有效地控制檵木叶的质量,本文建
立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定有效成分槲皮
素的含量。
1实验材料
1.1 仪器
日本岛津LC-10A高效液相色谱仪,SPD-10AV紫外
检测器;CT-100恒温箱;N3000数据处理系统;上海必能
信CQ-250型超声波清洗器;BP211DAG电子天平 (德国
Sartorius)。
1.2试药
乙腈为色谱醇,甲醇、磷酸、盐酸均为分析纯,水为重
蒸水。槲皮素(中国药品生物制品检定所,批号:100081-
200406);檵木叶由湖南中医药大学药学院中药鉴定教研
室周小江博士鉴定品种,见表1。
〔收稿日期〕2007-10-12
〔作者简介〕李雪晶(1973-),女,助教,主要从事高等教育及新药开发研究。
檵木叶中槲皮素的含量测定
李雪晶,高 叶,周小江
(湖南中医药大学,湖南 长沙 410208)
〔摘要〕目的 建立反相高效液相法测定檵木叶中槲皮素含量的方法。方法 采用十八烷基硅烷键合硅胶柱,
流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液(32∶68);检测波长为360nm。结果 槲皮素在0.06～0.62μg范围内呈良好的线性
关系(r=0.9999);平均回收率为98.2%,RSD=2.0%。结论 该方法不仅操作简单、准确,且重复性好,可用于檵木叶
的质量控制。
〔关键词〕反相高效液相法;檵木叶;槲皮素;含量测定
〔中图分类号〕R284.1 〔文献标识码〕B 〔文章编号〕1674-070X(2008)02-0046-02
ContentdeterminationofquercetininFolium Loropetali
LIXue-jing,GAOYe,ZHOUXiao-jiang
(TCMUniversityofHunan,Changsha,Hunan410208,China)
〔Abstract〕ObjectiveTostudyaRP-HPLCmethodforthecontentdeterminationof
QuercetininFolium Loropetali.MethodsTheC18column,mixtureofacetonitrileand0.4%
phosphoricacid(32:68)asmobilephaseandUVdetectionat360nmwereusedforthedeter-
mination.ResultsQuercetinwasbeterinlinearcorelationbetween0.06～0.62μg(r=0.9999),
therecoveryratewas98.18%,RSD=1.97%.ConclusionThemethodisverystableandaccurate
andhasgoodreappearance.whichcanbeusedforqualitycontrolofFoliumLoropetali.
〔Keywords〕RP-HPLC;FoliumLoropetali;quercetin;contentdetermination
2008年4月第28卷第2期
Apr.2008Vol.28No.2
湖 南 中 医 药 大 学 学 报
JournalofTCM Univ.ofHunan46
(下转第50页)
2方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μm)(迪
马公司);流动相:乙腈-0.4%磷酸水溶液(32∶68);检测波
长:360nm;流速:1.0mL/min;柱温:40℃;进样量:10
μL。在此色谱条件下,理论塔板数以槲皮素峰计算达到
5800,分离度良好,见图1～2。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取干燥的槲皮素对照品,分别加甲醇制成每1
mL含0.024mg和0.062mg的溶液,即得。
2.3 供试品溶液的制备
取檵木叶粉碎,过3号筛,取粉末约 1.0g,精密称定,
置锥形瓶中,精密加入 80%甲醇 50mL,称定重量,回流
提取 1h,放冷,再称定重量,以 80%甲醇补足减失的重
量,滤过,精密吸取续滤液 25mL,置锥形瓶中,加入 5%
的盐酸10mL及甲醇5mL,水浴回流30min,取出,放
冷,转移至 50mL的量瓶中,用甲醇洗涤锥形瓶 3次,每
次约 3mL,一并转移至量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,过
0.45μm微孔滤膜,即得。
2.4 线性关系的考察
分别精密吸取浓度为 0.0240mg/mL的槲皮素对照
品溶液 2.5、5、10、15、18μL及浓度为 0.062mg/mL的槲
皮素对照品溶液 10μL,注入液相色谱仪,测定,以槲皮
素的进样量(μg)为橫坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制
标准曲线。回归方程为:
Y=4E+06X+14882(r=0.9999)
结果表明槲皮素在 0.06～0.62μg范围内具有良好的
线性关系。
2.5 精密度试验
精密吸取槲皮素对照品溶液(0.024mg/mL)10μL,重
复进样6次,峰面积积分值的RSD=1.0%。表明本方法精密
度良好。
2.6 重复性试验
取同一批檵木叶 (采自湖南中医药大学药植园),粉
碎,过 3号筛,取粉末 5份,每份约 1.0g,精密称定,按
“2.3”项下的方法制备样品,进行含量测定。结果分别为
0.301%,0.284%,0.296%,0.291%,0.289%,平均为0.292%,
RSD为2.2%。表明本方法具有较好的重复性。
2.7 稳定性试验
取同一批檵木叶的供试品溶液,每隔2h进样1次,
每次 10μL,连续进样 6次,峰面积积分值的 RSD为
1.9%。结果表明样品在10h内稳定。
2.8 回收率试验
贮备溶液:精密称取槲皮素对照品14.4mg,置100
mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,制成每 1mL中含槲皮
素0.144mg的溶液。
取已知含量(槲皮素含量为0.292%)的檵木叶,粉碎,
过 3号筛,取约 0.5g(6份),精密称定,置锥形瓶中,分别
精密加入贮备溶液 10mL2份,12mL2份,14mL2
份,水浴挥干,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,按上述
色谱条件测定,计算回收率,结果:平均回收率为 98.2%,
RSD=2.0%,详见表2。
2.9 样品测定
按拟定的含量测定方法测定了檵木叶中槲皮素的含
量,按外标法计算,结果:檵木叶中槲皮素含量为0.146%~
0.168%,红花檵木叶中槲皮素含量为0.213%~0.292%,详
见表3。
表1檵木叶的实验材料来源
种类
檵木
红花檵木
拉丁学名
Loropetalumchinense(R.Br.)Oliv.
L.chinense(R.Br.)Oliv.var.rnbrumYieh
产地及采集时间
采自湖南省长沙市岳麓山﹑长沙县(2007-09)
采自湖南省长沙市岳麓山﹑长沙县(2007-09) 湖南中医药大学药植园(2007-08)
图1槲皮素对照品HPLC图谱
t/min
t/min
图2檵木叶HPLC图谱
表2回收率试验结果
试验号
1
2
3
4
5
6
取样量
(g)
0.5037
0.5054
0.5041
0.5066
0.5004
0.4838
样品中的
量(mg)
1.471
1.476
1.472
1.479
1.461
1.412
加入量
(mg)
1.440
1.440
1.728
1.728
2.016
2.016
测得量
(mg)
2.894
2.895
3.197
3.209
3.408
3.331
回收率
(%)
98.82
98.54
99.83
100.12
96.58
95.19
平均回
收率(%)
98.2
RSD
(%)
2.0
李雪晶,等 檵木叶中槲皮素的含量测定第2期 47
组 别 止泻起效时间 止痛起效时间
治疗组 11.85±7.83△ 11.07±5.53△
对照组 15.93±10.19 13.77±5.15
注:与对照组比较△P<0.05。
组 别 n 痊愈 显效 有效 无效 总显效率(%)总有效率(%)
治疗组 3013 12 4 1 83.3 96.7
对照组 30 8 9 9 4 56.7 86.7
表2两组湿热证疗效比较 (例)
表3两组止泻止痛起效时间比较 (h,x±s)
3讨论
供试品溶液制备:曾对提取溶媒进行了考察,结果以
加入80%甲醇回流提取 1h为佳;曾对酸水解进行了考
察,结果以5%的盐酸水解30min效果最好。
选用RP-HPLC测定檵木叶中槲皮素的含量,不仅操
作简便、准确,而且重复性好,可用于檵木叶的质量控制。
本文仅测定了檵木叶中有效成分之一——槲皮素的含
量,要更全面的控制檵木叶的质量,还有待进一步研究。
参考文献:
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工业出版社,1977:528-529.
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测[J].中成药,2006,28(1):132-134.
[4]孙文基,绳金房.天然活性成分简明手册[M].北京:中国医药科技
出版社,1998:476.
表3样品测定结果 (n=3,%)
品 种
檵木叶
红花檵木叶
采集地
长沙市岳麓山
长沙县
药植园
长沙市岳麓山
长沙县
药植园
槲皮素的含量
0.146
0.165
0.168
0.263
0.213
0.292
RSD
1.5
1.2
0.99
1.4
1.7
2.2
(上接第47页)
(P<0.05),结果见表3。
3讨论
急性感染性腹泻多属于中医学“泄泻”中“暴泻”范
畴。《素问·阴阳应象大论》曰:“湿胜则濡泄”。《难经》云:
“湿多成五泄”。《杂病源流犀烛·泄泻源流》云:“湿盛则飧
泄,乃独由于湿耳。不知风寒热虚,虽皆能为病,苟脾强无
湿,四者均不得而干之,何自成泄?是泄虽有风寒热虚之
不同,要未有不原于湿者也。”指出感受其他邪气,往往与
湿邪相兼,影响于脾胃,使脾胃功能障碍而成泄泻。湿热
泄泻多由感受湿热,或为夏令暑湿时邪伤及肠胃,或饮食
肥甘及误食不洁之物,致肠胃湿热蕴结,腑气不通,故腹
痛、泻下臭秽之物;又肠中有热,热邪类火,火性急迫,故
泻下急迫而肛门灼热。细究之,湿、热为病之本,这与现代
医学认为与病毒、细菌、饮食等因素所致的认识是一致
的。故其治疗大法,应清热祛湿解毒为主,佐以行气化滞。
九香止泻肠溶片为主要由秦皮、山楂、椿皮等药组成的复
方。现代药理研究表明,秦皮煎剂对痢疾杆菌、大肠杆菌绿
脓杆菌、金黄色葡萄球杆菌均有抑制作用[3],其主要成分秦
皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷均有明显抗炎作用[4];山楂榨取
的原液对痢疾杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球
菌、乙型链球菌和伤寒杆菌等均有一定的抑制作用[5],山楂
醇提取液对受刺激兔、鼠离体胃肠平滑肌收缩具有明显的
抑制作用。椿皮具有抗菌抗病毒、解热镇痛、镇咳平喘、镇
静作用,其水、醇提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大
肠杆菌均有抑杀作用。秦皮清热燥湿、解毒、止痢;山楂消
食化积,行气散瘀,椿皮清热燥湿,涩肠止泻,收敛止血。
全方各药相辅为用,与湿热泄泻病机契合,共奏清热燥
湿,涩肠止泻,行气止痛之功。前期研究提示九香止泻肠
溶片对小鼠腹泻指数及腹腔毛细血管通透性各剂量组分
别优于肠康片组及颠茄磺苄啶片组,具有较好的止泻抗
炎作用[6],为临床应用提供了科学的实验及理论依据,综
上所述,九香止泻肠溶片组方具有传统及现代医学研究
依据,临床疗效可靠,具有较好的应用前景。
参考文献:
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素的试验观察[J].中国消毒杂志,2000,17(2):85.
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2007,27(6):34.

(本文编辑 马 薇)
(本文编辑 徐爱良)
湖南中医药大学学报 2008年第28卷50