全 文 :
应用昆虫学报 Chinese Journal of Applied Entomology 2015, 52(5): 11741180. DOI: 10.7679/j.issn.20951353.2015.140
* 资助项目 Supported projects:国家科技支撑计划课题(2012BAK11B03)
**第一作者 First author,E-mail:1711219953@qq.com
***通讯作者 Corresponding author,E-mail:maohua.chen@nwsuaf.edu.cn
收稿日期 Received:2015-04-09,接受日期 Accepted:2015-05-22
陕西苹果园山楂叶螨抗药性监测*
彭丽娟** 左亚运 段辛乐 陈茂华***
(西北农林科技大学植物保护学院,农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室,杨凌 712100)
摘 要 【目的】 明确陕西省苹果园的山楂叶螨 Tetranychus viennensis Zacher种群对 5种药剂的抗性水
平。【方法】 采用玻片浸渍法,建立了山楂叶螨室内饲养的相对敏感种群对 5种杀虫剂的敏感基线,同时
从陕西乾县、礼泉、兴平、澄城、安塞、淳化、凤翔和扶风 8个不同地区的苹果园采集山楂叶螨,分析这
些田间种群的抗药性水平。【结果】 山楂叶螨室内相对敏感种群对阿维菌素的敏感性最高,对毒死蜱敏感
性最低;各种群对哒螨灵已产生了 13.29~69.63倍的抗性;对高效氯氟氰菊酯已经产生了 7.99~46.74倍
的抗性;除兴平种群对阿维菌素表现为低抗水平外(抗性倍数 7.63),其余种群对阿维菌素表现为敏感或
者敏感性下降(抗性倍数 1.89~3.94);除扶风种群对毒死蜱抗性水平处于敏感性下降的阶段外,其它 7
个种群对毒死蜱的均处于敏感阶段;各种群对噻虫嗪均处于敏感阶段。【结论】 山楂叶螨室内相对敏感种
群对 5种不同杀虫剂的敏感性不同;各田间种群对哒螨灵和高效氯氟氰菊酯两种药剂已经产生了不同水平
的抗药性,除兴平种群对阿维菌素产生低抗水平抗性外,其余田间种群对阿维菌素、毒死蜱和噻虫嗪抗性
均表现为敏感或者敏感性下降;田间防治时应该减少哒螨灵和高效氯氟氰菊酯两种药剂的使用,同时注意
不同农药的轮换使用,以此延缓山楂叶螨对杀虫剂产生高水平抗药性。
关键词 山楂叶螨,毒力,抗药性监测,苹果园
Resistance of Tetranychus viennensis to insecticides in apple
orchards in Shaanxi Province
PENG Li-Juan** ZUO Ya-Yun Duan Xin-Le CHEN Mao-Hua***
(College of Plant Protection, Northwest A&F University, Key Laboratory of Crop Pest Integrated Pest Management on
the Loess Plateau of Ministry of Agriculture, Yangling 712100, China)
Abstract [Objectives] To investigate insecticide resistance in Tetranychus viennensis (Zacher) in apple orchards in
Shaanxi Province. [Methods] The slide-dip method was used to test the toxicity of five insecticides to a susceptible
population of T. viennensis, and to specimens from eight wild populations collected from apple orchards at Qianxian, Liquan,
Xingping, Chengcheng, Ansai, Chunhua, Fengxiang and Fufeng, Shaanxi Province. [Results] The susceptible population
was the most sensitive to abamectin, and the least sensitive to chlorpyrifos. The eight wild populations had moderate to high
resistance to pyridaben (resistance ratios of 13.29-69.63), and low to high resistance to lambda-cyhalothrin (resistance ratios of
7.99-46.74), and were susceptible, or had low levels of resistance, to abamectin (resistance ratios of 1.89-7.63). The Fufeng
population was slightly resistant to chlorpyrifos but all other populations were susceptible to this pesticide, and all populations
were susceptible to thiamethoxam. [Conclusion] The susceptible population of T. viennensis showed different sensitivity to
the five insecticides tested. Field populations varied in their resistance to pyridaben and lambda-cyhalothrin, and were
susceptible, or had low levels of resistance, to abamectin, chlorpyrifos and thiamethoxam. These results suggest that the
application of pyridaben and lambda-cyhalothrin should be reduced, and rotation of insecticides should be considered to
manage the development of insecticide resistance in T. viennensis.
Key words Tetranychus viennensis, toxicity, insecticide resistance monitoring, apple orchard
5期 彭丽娟等: 陕西苹果园山楂叶螨抗药性监测 ·1175·
山楂叶螨 Tetranychus viennensis Zacher是我
国北方落叶果树的主要害虫之一,在我国分布广
泛,危害较重,其主要危害苹果、梨、桃、李、
杏、山楂等果树,其中苹果、梨、桃受害最重(匡
海源,1986;Gotoh,1986;Kasap,2003;Ji et al.,
2005;Geng et al.,2014;Zhang et al.,2014)。
山楂叶螨危害不仅影响当年受害的果实产量,而
且严重削弱树势,对随后几年的果实产量及品质
也有较大的影响(秦玉川等,1990;蔡宁华等,
1992;武予清和刘芹轩,1994;张金勇和陈汉杰,
2000)。
化学杀螨剂的大量使用容易导致苹果园中
叶螨产生抗药性,山楂叶螨对内吸磷、对硫磷、
三氯杀螨醇、甲氰菊酯等多种药剂已经产生了抗
性(刘芹轩,1966;张昌辉和曹子刚,1966;冯
明祥,1988;曹子刚等,1990;孟昭礼等,1997;
张国洲,2002;刘金香等,2006)。陕西省是我
国主要的苹果生产区之一,近年来苹果园山楂叶
螨在该省危害严重(王刚云等,2002)。国内外
对二斑叶螨 Tetranychus urticae Koch和朱砂叶螨
Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)的抗药性
报道较多,但对山楂叶螨的抗药性研究较少。本
研究利用室内敏感品系建立山楂叶螨对常用 5
种杀虫剂的相对敏感基线;同时在陕西省 8个不
同地区的苹果园采集山楂叶螨田间种群,分析这
些田间种群对 5种不同类型杀虫剂的抗性水平,
研究结果能为山楂叶螨的抗药性治理和综合防
治提供依据。
1 材料与方法
1.1 供试叶螨
相对敏感种群:山楂叶螨相对敏感品系
(SQ)采自陕西杨凌西北农林科技大学校园苹
果树,室内连续饲养 25 代,饲养过程中不接触
任何农药。
田间种群:于 2014 年 7 月,在陕西省乾县
(QX)、礼泉(LQ)、兴平(XP)、澄城(CC)、
安塞(AS)、淳化(CH)、凤翔(FX)和扶风(FF)
8个不同地区苹果园采集山楂叶螨种群,每个地
区种群分别采自 3个以上不同苹果园,共采集至
少 100片被山楂叶螨危害严重的苹果叶片,用塑
料袋带回实验室,继续用新鲜的没有接触任何药
剂的苹果叶片饲养至下一代,分析下一代的成螨
的抗性水平。
山楂叶螨室内饲养条件为(25±1)℃,相对
湿度 60%±10%,光周期为 L︰D =16︰8。
1.2 供试农药
供试药剂:96%毒死蜱原药(青岛美德龙化
工有限公司),96%高效氯氟氰菊酯原药(盐城
农博生物科技有限公司),92%阿维菌素原药(山
东中农生物科技有限公司),96%噻虫嗪原药(山
东中农生物科技有限公司),95.4%哒螨灵原药
(山东中农联合农药工业有限公司)。
1.3 毒力测定方法
室内生物测定参照联合国粮农组织(FAO,
1980)推荐的玻片浸渍法(Slide-dip method),
并略加改动。将双面胶带剪成约 2 cm长,贴在载
玻片的一端,用摄子揭去粘胶上的纸片,用零号
毛笔选择个体大小一致的雌成螨 40头,将其背部
粘在胶带上,避免粘到山楂叶螨的足、螨须和口
器,每片胶带粘 4行,每行粘 10头。将载玻片置
于有盖培养皿中,后将培养皿放于温度(25±1)℃、
相对湿度 60%±10%、光周期为 L︰D =16︰8的
培养箱中,4 h后用双目解剖镜观察,剔除死亡
和无活力的个体,保证每个载玻片至少有 30 头
以上雌成螨,不足进行补添,然后进行生物测定。
药剂稀释 5~7个浓度梯度,将带螨的玻片端浸入
药液中,轻轻摇动 5 s后取出,快速用吸水纸吸
去载玻片和螨体周围的多余药液,后把培养皿放
回培养箱中。以清水作为对照处理,每个处理重
复 3次。24 h后用双目解剖镜检查结果(用零号
毛笔轻轻触动叶螨的足,完全不动者计为死亡),
记录死亡数。
1.4 数据处理
用 Abbott公式校正后,用 Finey机率值分析
法进行统计分析,用 DPS 软件处理试验数据。
计算各种药剂的毒力回归方程、LC50 及相关系
·1176· 应用昆虫学报 Chinese Journal of Applied Entomology 52卷
数。将各杀虫剂的 LC50值与室内敏感种群毒力
基线的 LC50 值进行比较,计算抗性倍数
(Resistance ratio,RR)。敏感性或者抗性水平
分为敏感(RR<3)、敏感性下降(3≤RR<5)、
低水平抗性(5≤RR<10)、中等水平抗性(10≤
RR<40)、高水平抗性(40≤RR<160)和极高水
平抗性(RR≥160)(沈晋良和吴益东,1995)。
2 结果与分析
2.1 山楂叶螨相对敏感种群对 5 种杀虫剂的敏
感基线
通过 5 种杀虫剂对山楂叶螨相对敏感品系
的毒力测定,得到了 5种药剂的毒力方程和致死
中浓度(表 1)。山楂叶螨对阿维菌素的敏感性
最高,LC50为 0.0070 mg/L;对哒螨灵、高效氯
氟氰菊酯、噻虫嗪的 LC50依次为 0.0093 mg/L、
10.1331 mg/L和 26.9428 mg/L;对毒死蜱敏感性
最低,LC50为 138.182 mg/L。
2.2 山楂叶螨田间种群对 5 种杀虫剂的抗性水平
陕西省 8个山楂叶螨田间种群对 5种不同类
型杀虫剂的抗性水平如表 2所示。不同苹果园山
楂叶螨种群对阿维菌素的抗性倍数介于
1.89~7.63 之间。兴平(XP)山楂叶螨种群对阿
维菌素的抗性达到低抗水平,抗性倍数为 7.63;
乾县(QX)和安塞(AS)的山楂叶螨种群对阿
维菌素的抗性处于敏感性下降阶段,抗性倍数分
别为 3.94 和 3.09;其它 5 个不同苹果园的山楂
叶螨种群对阿维菌素的抗性仍于敏感阶段
(RR<3)。
供试的山楂叶螨田间种群对哒螨灵的抗性
倍数介于 13.29~69.63 之间。礼泉(LQ)和扶
风(FF)的山楂叶螨种群对哒螨灵的抗性达到高
抗水平,抗性倍数分别为 69.63 和 42.09;乾县
(QX)、兴平(XP)、澄城(CC)、安塞(AS)、
淳化(CH)和扶风(FF)的山楂叶螨种群对哒
螨灵的抗性达到中抗水平,抗性倍数在 13.29~
32.28之间。
采自 8 个地区的山楂叶螨种群对噻虫嗪仍
处于敏感阶段,抗性倍数介于 0.64~1.75 之间。
供试山楂叶螨种群对高效氯氟氰菊酯的抗性倍
数介于 7.99~46.74之间。兴平(XP)的山楂叶
螨种群对高效氯氟氰菊酯的抗性达到高抗水平,
抗性倍数为 46.74;乾县(QX)、礼泉(LQ)、
安塞(AS)、淳化(CH)和扶风(FF)的山楂
叶螨种群对高效氯氟氰菊酯的抗性倍数在
17.67~36.44之间,达中抗水平;澄城(CC)和
扶风(FF)的山楂叶螨种群对高效氯氟氰菊酯具
低水平抗性,抗性倍数分别为 7.97 和 9.58。另
外,不同果园的山楂叶螨种群对毒死蜱的抗性倍
数介于 0.87~3.03之间。凤翔(FX)的山楂叶螨
种群对毒死蜱的抗性倍数为 3.03,处于敏感性下
降阶段,其余 7个地区果园的山楂叶螨种群对毒
死蜱的抗性处于敏感阶段,抗性倍数在 0.87~
2.13之间。
表 1 5 种杀虫剂对山楂叶螨的敏感基线
Table 1 Sensitivity baseline of Tetranychus viennensis to five insecticides
杀虫剂
Insecticide
毒力回归方程
Virulence regression equations
致死中浓度
LC50 (mg/L)
95%置信区间
95% confidence limit
相关系数
Coefficient
阿维菌素 Abamectin y=6.0670+0.4958x 0.0070 0.0001-0.0225 0.9556
哒螨灵 Pyridaben y=6.5782+0.7773x 0.0093 0-0.1043 0.9839
高效氯氟氰菊酯
Lambda-cyhalothrin
y=4.4903+0.5068x 10.1331 1.4514-79.0929 0.9980
噻虫嗪 Thiamethoxam y=3.4667+1.0719x 26.9428 12.3866-460.2544 0.9752
毒死蜱 Chlorpyrifos y=3.0368+0.9172x 138.1820 76.1613-697.6897 0.9721
5期 彭丽娟等: 陕西苹果园山楂叶螨抗药性监测 ·1177·
表 2 山楂叶螨田间种群对 5 种杀虫剂的抗性水平
Table 2 Resistance level of Tetranychus viennensis field populations to five insecticides
杀螨剂
Acaricide
采样点
Sampling location
斜率±标准误
Slope±SE
LC50
(mg/L)
95%置信区间
95% confidence
interal
相关系数
Correlation
coefficient
抗性倍数
Resistance
ratio
敏感品系 SQ 0.496±0.232 0.007 0.000-0.023 0.956 —
乾县 QX 1.308±0.316 0.028 0.017-0.081 0.996 3.94
礼泉 LQ 1.294±0.281 0.014 0.009-0.023 0.997 1.94
兴平 XP 1.063±0.320 0.053 0.025-0.685 0.999 7.63
澄城 CC 1.279±0.279 0.019 0.013-0.038 0.989 2.71
安塞 AS 0.864±0.243 0.022 0.013-0.073 0.966 3.09
淳化 CH 1.200±0.281 0.017 0.011-0.034 0.991 2.39
凤翔 FX 1.691±0.294 0.014 0.010-0.020 0.981 1.94
阿维菌素
Abamectin
扶风 FF 1.489±0.287 0.013 0.009-0.020 0.999 1.89
敏感品系 SQ 0.777±0.393 0.009 0.000-0.104 0.984 —
乾县 QX 1.306±0.288 0.147 0.098-0.262 0.973 16.33
礼泉 LQ 1.025±0.328 0.648 0.276-17.181 0.963 69.63
兴平 XP 1.005±0.270 0.238 0.140-0.785 0.968 25.58
澄城 CC 1.400±0.310 0.300 0.188-0.795 0.988 32.27
安塞 AS 0.984±0.264 0.261 0.152-0.932 0.981 28.05
淳化 CH 1.406±0.292 0.138 0.094-0.228 0.972 14.79
凤翔 FX 1.160±0.297 0.391 0.217-1.767 0.953 42.09
哒螨灵
Pyridaben
扶风 FF 2.402±0.360 0.124 0.098-0.162 0.992 13.29
敏感品系 SQ 1.072±0.337 26.942 12.387-460.254 0.975 —
乾县 QX 1.040±0.303 43.054 21.822-345.972 0.995 1.60
礼泉 LQ 1.341±0.328 33.549 19.670-118.111 0.993 1.25
兴平 XP 1.155±0.338 47.187 23.344-439.000 0.988 1.76
淳化 CC 1.100±0.284 27.586 16.216-94.068 0.982 1.02
安塞 AS 0.728±0.252 29.508 14.607-376.722 0.991 1.10
淳化 CH 0.766±0.258 32.266 16.032-396.120 0.972 1.20
凤翔 FX 1.209±0.269 17.243 11.442-33.583 0.999 0.64
噻虫嗪
Thiametham
扶风 FF 1.073±0.265 19.799 12.417-47.999 0.975 0.73
敏感品系 SQ 0.507±0.233 10.133 1.451-79.093 0.998 —
乾县 QX 0.793±0.264 224.632 119.005-1 409.643 0.984 22.17
礼泉 LQ 1.157±0.314 369.237 200.879-1 904.42 0.995 36.44
兴平 XP 1.210±0.322 473.660 245.100-2 934.597 0.972 46.74
澄城 CC 1.174±0.267 80.923 46.905-125.661 0.971 7.99
安塞 AS 0.986±0.272 353.481 191.348-1 855.777 0.953 34.88
淳化 CH 1.430±0.290 210.784 142.841-411.269 0.981 20.80
凤翔 FX 1.536±0.298 179.008 126.035-309.731 1.000 17.67
高效氯氟氰菊酯
Lambda cyhalothrin
扶风 FF 1.020±0.262 97.122 54.706-169.041 0.989 9.58
·1178· 应用昆虫学报 Chinese Journal of Applied Entomology 52卷
续表 2(Table 2 continued)
杀螨剂
Acaricide
采样点
Sampling location
斜率±标准误
Slope±SE
LC50
(mg/L)
95%置信区间
95% confidence
interal
相关系数
Correlation
coefficient
抗性倍数
Resistance
ratio
敏感品系 SQ 0.917±0.271 138.182 76.161-697.690 0.972 —
乾县 QX 1.162±0.282 163.650 96.052-555.958 0.980 1.18
礼泉 LQ 1.337±0.366 271.354 135.381-2 133.137 0.955 1.96
兴平 XP 1.202±0.322 206.071 109.824-1 138.875 0.990 1.49
澄城 CC 1.050±0.279 172.745 95.169-787.139 0.999 1.25
安塞 AS 1.033±0.254 120.442 73.606-335.860 0.986 0.87
淳化 CH 0.946±0.294 295.012 131.024-5 379.702 0.989 2.13
凤翔 FX 0.904±0.313 419.347 155.153-43 204.520 0.965 3.03
毒死蜱
Chlorpyrifos
扶风 FF 0.939±0.283 250.467 117.742-2 976.573 0.996 1.81
3 讨论
敏感基线的确定在山楂叶螨田间种群抗性
水平监测中具重要意义。在实际研究中,由于无
法获得山楂叶螨对农药的绝对敏感品系,一般都
使用室内相对敏感品系作为参照。本研究利用山
楂叶螨室内相对敏感品系进行分析表明,山楂
叶螨对阿维菌素的敏感性最高,对毒死蜱敏感性
最差。
本研究在建立敏感基线的基础上,分析了陕
西省 8个不同地区山楂叶螨种群对 5种不同类型
杀虫剂的抗性水平,结果表明,不同地区种群对
不同杀虫剂的抗性水平存在较大差异,这可能是
由于不同地区的用药差异造成的。冉春等(2008)
和 Niu等(2011)发现,采自不同地区的柑橘全
爪螨田间种群对不同药剂的抗性水平存在差异,
不同地区杀螨剂的使用情况不同是造成这种差
异的主要原因。另外,果园的农药种类及剂型、
药剂残留期、使用频率及剂量、防治时期、施药
方法及技术等在螨类抗药性的发展中也起着至
关重要的作用(Ran et al.,2009)。
赵卫东等(2001)发现山东寿光二斑叶螨种
群对哒螨灵产生了低水平抗性,山东烟台种群对
高效氯氟氰菊酯已经产生了中等水平抗性;Suh
等(2006)发现,韩国果园的二斑叶螨种群对哒
螨灵产生不同水平抗性,最高达高抗水平;刘庆
娟等(2012)研究表明,采自山东的二斑叶螨种
群对哒螨灵产生了高水平的抗性。本研究发现,
陕西省 8 个不同地区的山楂叶螨种群对哒螨灵
和高效氯氟氰菊酯的抗性水平均较高,因此,建
议在本研究采样地区进行山楂叶螨防治时,应采
取停用或减少使用哒螨灵和高效氯氟氰菊酯的
措施,以减轻这 2种药剂的选择压力,逐渐恢复
山楂叶螨对这两种药剂的敏感性。
本研究结果显示,兴平(XP)的山楂叶螨
种群对阿维菌素已产生低水平抗性。赵卫东等
(2001)研究发现,采自山东蔬菜大棚的两个二
斑叶螨种群均没有对阿维菌素产生抗性;王少丽
等(2009)分析发现,北京地区蔬菜上的朱砂叶
螨种群对阿维菌素没有产生抗性;马慧等(2009)
用 9 种杀螨剂对山东地区的朱砂叶螨不同发育
阶段进行毒力测定时,发现阿维菌素的杀螨活性
最高。陈秋双等(2012)用药膜法对朱砂叶螨种
群进行抗药性监测时,发现所监测的 6个不同地
理种群对阿维菌素还没有产生抗性;师超等
(2012)测定了 6种杀螨剂对重庆市北碚区田间
的朱砂叶螨种群的敏感性,结果显示,阿维菌素
对朱砂叶螨表现出较高的毒力。有报道显示,有
些地区的二斑叶螨对阿维菌素的敏感性降低或
者对阿维菌素产生了抗药性(刘庆娟等,2012;
宫亚军等,2013)。因此,在陕西省进行山楂叶
螨的防治时,应注意阿维菌素与其他作用方式的
5期 彭丽娟等: 陕西苹果园山楂叶螨抗药性监测 ·1179·
药剂交替使用,以降低选择压力,延缓其抗药性。
噻虫嗪是 1998 年推出市场的一种具有独特结构
和优良杀虫活性的新型新烟碱类化合物
(Maienfisch et al.,2001),它表现出触杀、胃
毒和内吸活性,可以通过植物根、茎和叶吸收传
导达到较好的杀虫活性。本研究的山楂叶螨种群
对噻虫嗪未产生抗性。
总之,在果园山楂叶螨的防治过程中,定期
对山楂叶螨的田间种群进行抗药性监测,根据山
楂叶螨对不同农药的敏感性或者抗性水平,合理
使用各类农药,延缓其对阿维菌素和毒死蜱等果
园常用农药的抗性;同时应结合山楂叶螨的种群
动态合理使用各药剂,减少农药使用量和施药次
数,从而对该螨进行有效的综合防治。
参考文献 (References)
Cai NH, Qin YC, Hu DX, 1992. Evaluations of the damage of two
spider mite species to apple tree. Acta Phytophylacica Sinica,
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