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火棘果中原花青素含量测定方法的建立
周秋枝,黄 蕾,沈丹华,张 滨,粟登权,曾 丹,鄢又玉*
( 武汉工业学院生物与制药工程学院,湖北武汉 430023)
摘 要:采用香草醛-盐酸法对火棘提取物中原花青素含量进行测定,考察了标准物、光照条件、反应时间、反应温度、
盐酸浓度、香草醛浓度等因素对原花青素与香草醛显色反应的影响。结果表明,香草醛-盐酸法测定火棘提取物中原
花青素含量的适宜条件为: 1mL提取液,6mL 4%香草醛甲醇溶液以及 3mL 浓盐酸,混匀后不避光条件下 30℃水浴保
温 10min后,以儿茶素为标准品,波长 500nm处测定吸光度值。该测定方法具有良好的重复性、稳定性、重现性,回收
率较高。
关键词:火棘,原花青素,香草醛盐酸法,含量测定
Determination of proanthocyanidins content
in Pyracantha fortuneana fruit
ZHOU Qiu-zhi,HUANG Lei,SHEN Dan-hua,ZHANG Bin,SU Deng-quan,ZENG Dan,YAN You-yu*
( College of Biological and Pharmaceutical Engineering,Wuhan Polytechnic University,Wuhan 430023,China)
Abstract: Vanillin-HCl assay was adopted to determine the content of proanthocyanidins in Pyracantha fortuneana
extract.Several parameters,such as standard,light,reaction time,reaction temperature,HCl concentration and
vanillin concentration that affecting the color reaction of proanthocyanidin were investigated.The results showed the
appropriate reaction conditions were as the following,1mL of pyracantha extract,6mL of 4g /100mL vanillin solution
and 3mL of concentrated HCl in methanol respectively,after blending the reaction was carried out at 30℃ for 10min
and then measured the absorbance at 500nm.Assessment of the method by statistics showed the method has
good repeatability,stability,reproducibility and high recovery rate.
Key words: Pyracantha fortuneana; proanthocyanidins; Vanillin-HCl; assaying
中图分类号:TS207.3 文献标识码:A 文 章 编 号:1002-0306(2013)07-0314-05
收稿日期:2012-09-27 * 通讯联系人
作者简介:周秋枝( 1989- ) ,女,本科,研究方向: 化学制药。
火棘(Pyracantha fortuneana)属于蔷薇科苹果亚
科(Maloideane) ,是一种药食两用多用途常绿野生灌
木,在我国有 7 个种属,主要分布于东南、西南和西
北部,分布广泛,资源丰富,其乙醇提取物含丰富的
原花青素,具有清除自由基[1]、抗氧化[2]、抗病毒[3]、
抗细菌[4-5]和抑制肿瘤[6]等多种功效,广泛应用于食
品、药品及化妆品等领域,市场前景广阔。原花青素
是一类多酚类混合物,化学成分复杂,其含量测定目
前国际上并无统一的方法。铁盐催化比色法[7]在国
外最早是由 Swain 和 Hillis[8]提出,其反应特征性显
著,操作简便,但重现性较差;正丁醇—盐酸法[9]选择
性高,但受多酚结构的影响较大,与儿茶素单体不反
应;HPLC法[10]测得的结果相对准确,但其所需单体
的获得操作复杂,不易得到;HPLC-MS 法[11]只能测
得原花青素的相对含量,不能作为定量分析的方法;
香草醛-盐酸法[12]对缩合单宁的选择性虽然不是很
好,但其对原花青素的反应灵敏度高,重现性好。鲍
俊竹[13]、姚开等[14-15]采用香草醛-盐酸法、香草醛-硫
酸法和正丁醇-盐酸法 3 种方法测定葡萄籽提取物
中原花青素含量,对其结果进行比较,表明香草醛-
盐酸法具有较高的准确度和精密度,优于其它方法。
因此香草醛盐酸法较适用于低浓度原花青素样品测
定。目前香草醛法主要用于葡萄籽、蔷薇、莲子皮等
原花青素的含量测定,其操作方式较多,差别较
大[16-22]。国内外关于火棘中原花青素的研究甚少,对
火棘中原花青素含量测定方法的研究更未见报道,
因此有必要优化建立专属火棘中原花青素含量测定
的方法。本课题在前人研究的基础上[16-22],选用香草
醛-盐酸法对火棘果中原花青素的含量进行测定,考
察了标准物、光照条件、反应时间、反应温度、盐酸浓
度、香草醛浓度等因素对原花青素与香草醛显色反
应的影响,最终确定了适合火棘提取液中原花青素
含量测定的方法,该方法简便可行,具有良好的重现
性及稳定性,可为火棘资源的进一步深度开发提供
参考。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
火棘提取物 实验室自制;实验用水 均为去
离子水;无水乙醇、甲醇、盐酸、香草醛 均为分析
纯;(+)-儿茶素标准品、原花青素标准品 购自上
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.07.085
315
海金穗生物科技有限公司。
万分之一电子天平 德国赛多利斯公司;隔膜
真空泵 GM-1.0A 天津市沸腾实验设备有限公司;
集热式磁力加热搅拌器 DF-101B 金坛市医疗仪器
厂;5424R 小型台式高速冷冻离心机(Centrifuge
5424R) 德国 eppendorf;UV-5800PC 扫描型紫外可
见分光光度计 上海元析仪器有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 火棘提取物制备 干燥去籽后的火棘果皮肉粉粉
碎,过 20 目筛→体积分数 60%的乙醇浸提两次→抽滤→离
心→上清液。取 5mL 上清液至 25mL 容量瓶,用甲醇
定容至刻度,配制成质量浓度一定的火棘提取物溶
液,备用。
1.2.2 标准品的选择及最大吸收波长的确定 分别
吸取质量浓度 1.0mg /mL原花青素标准品,儿茶素标
准品溶液各 1mL,至 10mL试管中,加入 4g /100mL香
草醛甲醇溶液(现配现用,以下操作相同)6mL,浓盐
酸 3mL,摇匀,水浴 30℃条件下避光反应 30min 后,
空白对照以甲醇代替,其它步骤相同。在波长
400~700nm范围内进行全波段扫描。确定最大吸收
波长。
1.2.3 标准曲线的绘制 分别吸取 1.0mg /mL 儿茶
素标准溶液各 0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、
0.4mL至 10mL试管中,用甲醇稀释至 1mL,配制成质
量浓度分别为 0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、
0.4mg /mL的浓度梯度系列,摇匀,再向其中加入 6mL
4g /100mL香草醛甲醇溶液和 3mL 浓盐酸,混匀,在
30℃水浴避光反应 30min 后,用甲醇代替标准品作
空白对照,于 λ500nm处测定吸光度,以质量浓度对吸光
度进行回归分析,得标准曲线方程。
1.2.4 火棘提取物与香草醛 /盐酸反应的影响因素
1.2.4.1 光照及反应时间对吸光度的影响 取一定
浓度的火棘提取物溶液 1mL,至 10mL 试管中,加入
4g /100mL香草醛甲醇溶液 6mL,浓盐酸 3mL,摇匀,
水浴 30℃条件下反应 30min后,以甲醇为空白对照,
于 λ500nm处测定吸光度。考察避光与不避光条件下,
溶液放置 5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、
60min时火棘提取物与香草醛反应后溶液吸光度的
变化。
1.2.4.2 温度对吸光度的影响 取一定浓度的火棘
提取物溶液 1mL,至 10mL试管中,参照 1.2.2 反应体
系,以甲醇为空白对照,其它步骤相同。考察温度各
为 20、30、40、50℃时对火棘提取物与香草醛反应的
吸光度的影响。
1.2.4.3 盐酸体积分数对吸光度的影响 取一定浓
度的火棘提取物溶液 1mL,至 10mL 试管中,参照
1.2.2 反应体系,以甲醇为空白对照,其它步骤相同。
考察盐酸体积分数各为 20%、40%、60%、80%、
100%时火棘提取物与香草醛反应的吸光度的变化
情况。
1.2.4.4 香草醛质量浓度对吸光度的影响 取一定
浓度的火棘提取物溶液 1mL,至 10mL 试管中,参照
1.2.2 反应体系,以甲醇为空白对照,其它步骤相同。
考察香草醛质量浓度各为 0.5、1、2、3、4、5、6g /100mL
时对火棘提取物与香草醛反应的吸光度的影响。
1.2.5 测定方法评价
1.2.5.1 火棘提取物溶液标准曲线关系的建立 分
别制备质量浓度为 2.4、3、4、6、8、10、12、15mg /mL 火
棘提取物溶液,各取 0.1mL 至 10mL 试管中,加入甲
醇稀释至 1mL,然后分别加入 6mL 4g /100mL香草醛
甲醇溶液和 3mL浓盐酸,混匀,在 30℃水浴中不避光
反应 10min 后,用甲醇代替标准品作空白对照,在
A500处测定吸光度,以质量浓度对吸光度进行回归分
析,得样品曲线方程,以确定火棘果提取物溶液的浓
度线性范围。
1.2.5.2 方法的重复性考察 取质量浓度为
2.4mg /mL和 15mg /mL的火棘提取物溶液各 1mL,至
10mL试管中,分别加入 6mL 4g /100mL 香草醛甲醇
溶液及 3mL浓盐酸,按照最佳实验条件显色反应后
测定 A500,共测定 5 次。此测定在相同条件下由同一
分析人员独立完成。
1.2.5.3 方法的稳定性考察 取质量浓度为
2.4mg /mL和 15mg /mL的火棘提取物溶液各 1mL,至
10mL试管中,分别加入 6mL 4g /100mL 香草醛甲醇
溶液及 3mL浓盐酸,按照最佳实验条件,每隔 10min
在 A500下测定一次反应液的吸光度,连续测定 5 次。
测定结果之间的精密度称为稳定性。
1.2.5.4 方法的重现性考察 取质量浓度为 2.4mg /mL
和 15mg /mL的火棘提取物溶液各 1mL,至 10mL 试
管中,分别加入 6mL 4g /100mL 香草醛甲醇溶液及
3mL浓盐酸,按照最佳实验条件显色后测定 A500,共
测定 5 次。此测定在不同实验室,由不同分析人员
完成,测定结果之间的精密度称为重现性。
1.2.5.5 测定方法的回收率实验 取质量浓度为
6mg /mL的火棘提取物溶液 0.9mL,至 10mL 试管中,
向其中加入 0.1mL甲醇,摇匀,再加入 6mL 4g /100mL
香草醛甲醇溶液及 3mL 浓盐酸,按照最佳实验条件
显色后测定 A500,确定此火棘提取物溶液中原花青素
的含量。再取质量浓度为 6mg /mL 的火棘提取物溶
液 0.9mL,至 10mL 比色管中,加入 0.25mg /mL 的儿
茶素标准品溶液 0.1mL,按照同样方法测定混合后溶
液中的原花青素含量,重复测定 5 次,计算该法的回
收率。
回收率(%)= (原花青素测得量-原花青素原
有量)/加入原花青素的量 × 100
2 结果与讨论
2.1 标准品的选择及最大吸收波长的确定
按照 1.2.2 实验设计,结果见图 1。由图 1 可知,
以儿茶素及原花青素为标准品显色反应后溶液的最
大吸收波长均为 500nm,但是在同样条件下以儿茶素
为标准品,显色反应后溶液的吸光度值高很多,因此
灵敏度相对以原花青素为标样时更高一些,故在测
定低浓度原花青素样品时,选择儿茶素作为标准品
较为合适,测定最大吸收波长为 500nm。
2.2 标准曲线的绘制
按照 1.2.3 实验设计,可知儿茶素标准溶液的吸
316
图 1 儿茶素及原花青素标样紫外扫描图
Fig.1 UV wavelength scanning diagram of catechin
and procyanidins standard substance
光度 Y与儿茶素标准溶液质量浓度 X之间的回归方
程为:Y =2.0936X + 0.0461,R2 = 0.9963,吸光度在质
量浓度 0.05~0.40mg /mL范围内线性关系较好,其中
X为儿茶素标准溶液质量浓度(mg /mL) ,Y 为吸光
度。其标准曲线见图 2。
图 2 香草醛-盐酸法测定原花青素标准曲线图
Fig.2 Standard curve of proanthocyanidin by vanillin-HCl assay
2.3 火棘提取物与香草醛盐酸反应的影响因素
2.3.1 光照及反应时间的影响 按照 1.2.4.1 方案设
计,实验结果见图 3。通过实验可知,在避光与不避
光条件下火棘提取物与香草醛-盐酸反应的吸光度
并没有显著的差别,两种情况下随着时间的逐步延
长,吸光度值逐渐减小,考虑实验操作的实用性,故
可在不避光、显色反应 10min 时测定火棘提取物与
香草醛反应的吸光度。
图 3 光照及反应时间对原花青素测定结果的影响
Fig.3 Effect of light and reaction time
on the determination results of proanthocyanidins
2.3.2 温度的影响 在 2.3.1 确定的条件下,考察温
度对显色反应的影响,结果见图 4。分析可知,火棘
提取物与香草醛显色反应后溶液的吸光度随着温度
的改变发生了明显的变化,最初吸光度随温度升高
先逐步增大,在 30℃时达到最大值,之后随着温度进
一步升高吸光度值快速减小,由此可以确定最适宜
的显色温度为 30℃。
图 4 温度对原花青素测定结果的影响
Fig.4 Effect of temperature on the
determination results of proanthocyanidins
2.3.3 盐酸体积分数 在确定的条件下,考察盐酸
加入量对显色反应的影响,结果见图 5。分析可知,
火棘提取物与香草醛显色反应后溶液的吸光度随着
盐酸体积分数的增加先快速增加,后增加趋势渐缓,
在体积分数 100%时吸光度达到最大。因此在保证
实验结果不受影响、空白对照颜色不发生变化的情
况下,选择盐酸体积分数为 100%较合适,即直接以
浓盐酸参与显色反应。
图 5 盐酸体积分数对原花青素测定结果的影响
Fig.5 Effect of HCl on the
determination results of proanthocyanidins
2.3.4 香草醛质量浓度 在确定的条件下,考察香
草醛质量浓度对显色反应的影响,结果见图 6。分析
可知,随着香草醛质量浓度的增大,反应的吸光度逐
渐增大。当质量浓度超过 4g /100mL 时,虽然吸光度
依然缓慢增大,但增加幅度极缓,并且,当质量浓度
高于 4g /100mL时,空白溶液变为黄绿色,这可能是
因为香草醛浓度过高发生自身缩合引起,所以选用
香草醛质量浓度为 4g /100mL比较合适。
2.4 测定方法评价
2.4.1 火棘提取物溶液曲线关系考察 按照 1.2.5.1
实验设计可知,火棘提取物溶液的吸光度 Y 与溶液
质量浓度 X 之间的回归方程为:Y = 0.0496X +
0.0892,R2 = 0.9965,吸光度在质量浓度 2.4~15mg /mL
内线性关系良好,这为之后方法评价提取物浓度范
围选择提供了理论依据,其中 X 为浓度(mg /mL) ,
Y为吸光度。火棘原花青素提取物溶液标准曲线
317
表 1 重复性实验
Table 1 Repeatability tests of the determination results
质量浓度(mg/mL)吸光度 A1吸光度 A2吸光度 A3吸光度 A4吸光度 A5 平均值 A 标准偏差 SD 相对标准偏差 RSD(%)
2.4 0.192 0.190 0.191 0.186 0.191 0.190 0.0023 1.234
15 0.840 0.839 0.855 0.835 0.856 0.845 0.0098 1.156
表 2 稳定性实验
Table 2 Stability tests of the determination results
质量浓度(mg /mL)吸光度 A1吸光度 A2吸光度 A3吸光度 A4吸光度 A5 平均值 A 标准偏差 SD 相对标准偏差 RSD(%)
2.4 0.170 0.167 0.164 0.160 0.157 0.164 0.0052 3.19
15 0.837 0.817 0.803 0.779 0.755 0.798 0.0321 4.02
表 3 重现性实验
Table 3 Reproducibility tests of the determination results
质量浓度(mg /mL)吸光度 A1吸光度 A2吸光度 A3吸光度 A4吸光度 A5 平均值 A 标准偏差 SD 相对标准偏差 RSD(%)
2.4 0.150 0.151 0.152 0.151 0.150 0.151 0.0008 0.55
15 0.827 0.828 0.829 0.830 0.827 0.828 0.0013 0.16
表 4 原花青素回收率实验
Table 4 Recovery tests of proanthocyanidins
火棘提取物
吸光度 A
原花青素
原有量(mg)
儿茶素加入量
(mg)
原花青素
测得量(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
相对标准偏差
RSD(%)
0.382 0.1604
0.025
0.025
0.025
0.025
0.025
0.1862
0.1867
0.1853
0.1848
0.1858
103.3
105.2
99.5
97.6
101.4
101.4 2.98
见图 7。
图 6 香草醛质量浓度对原花青素测定结果的影响
Fig.6 Effect of vanillin concentration
on the determination results of proanthocyanidins
图 7 火棘原花青素提取物溶液标准曲线
Fig.7 Calibration curves of proanthocyanidins
in pyracantha fortuneana extract solution
2.4.2 方法的重复性考察 按照 1.2.5.2 实验设计,
记录相关数据,求出相对标准偏差 RSD(%) ,实验结
果见表 1。
由表 1 可知,此测定方法的标准偏差各为 0.0023
和 0.0098,相对标准偏差各为 1.234%和 1.156%,呈
现出良好的重复性。
2.4.3 方法的稳定性考察 按照 1.2.5.3 实验设计,
记录相关数据,求出相对标准偏差 RSD(%) ,实验结
果见表 2。
由表 2 可知,此测定方法的标准偏差各为 0.0052
和 0.0321,相对标准偏差各为 3.19%和 4.02%,因此
在溶液显色反应后 50min 以内,此测定方法有良好
的稳定性。
2.4.4 方法的重现性考察 按照 1.2.5.4 实验设计,
记录相关数据,求出相对标准偏差 RSD(%) ,实验结
果见表 3。
由表 3 可知,此测定方法的标准偏差各为 0.0008
和 0.0013,相对标准偏差各为 0.55%和 0.16%,因此
测定方法具有极好的重现性和稳定性。
2.4.5 方法的加标回收率测定 按照 1.2.5.5 实验设
计,记录相关数据,求出相对标准偏差 RSD(%) ,实
验结果见表 4。
由表 4 可知,此实验方法测定原花青素的回收
率为 101.4%,相对标准偏差为 2.98%。说明此实验
具有较高的回收率,精密度良好。
3 结论
本实验采用香草醛-盐酸法测定了火棘提取物
318
中原花青素的含量,分别考察了标准物、光照条件、
反应时间、反应温度、盐酸浓度、香草醛浓度等因素
对原花青素与香草醛显色反应的影响。结果表明,
香草醛-盐酸法测定火棘提取物中原花青素含量的
适宜条件为:1mL 提取液,6mL 4%香草醛甲醇溶液
以及 3mL浓盐酸,混匀后不避光条件下 30℃水浴保
温 10min后,以儿茶素为标准品,波长 500nm 处测定
吸光度值。该测定方法具有良好的重复性、稳定性、
重现性,回收率较高。
参考文献
[1]侯建军,刘希林,魏文科,等 .火棘消食健脾功效的动物实
验[J].湖北农业科学,2003( 4) : 84-86.
[2]李伟,张应团 .火棘多酚类物质的体外抗氧化作用[J].食
品工业科技,2008,29( 9) : 121-123.
[3]彭慧琴,蔡卫民,项哨 .茶多酚体外抗流感病毒 A3 的作用
[J].茶叶科学,2003,23( 1) : 79-81.
[4]戚向阳,陈福生,陈维军 .苹果多酚抑菌作用的研究[J].食
品科学,2003,24( 5) : 33-36.
[5]李宇,古小婷,付鸣佳 .火棘浸提液的抑菌活性研究[J].安
徽农业科学,2009,37( 6) : 2559-2560.
[6]杨滢滢,王雪青,庞广昌 .原花青素抗肿瘤作用机制研究
进展[J].食品科学,2008,29( 10) : 694-697.
[7]MADIGAN D,MCMURROUGH I,SMYTH M.Determination
of proanthocyanidins and catechins in beer and Barley by high-
performance liquid chromatography with dual - electrode
electrochemical detection[J].Analyst,1994,119( 5) : 863-868.
[8]SWAIN T,HILLIS W. The phenolic constituents of Prunus
domestica.I.- The quantitative analysis of phenolic constituents
[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture,1959,10
( 1) : 63-68.
[9]DESHPANDE S,CHERYAN M.Evaluation of vanillin assay
for tannin analysis of dry beans[J]. Journal of Food Science,
1985,50( 4) : 905-910.
[10]YANAGIDA A,KANDA T,SHOJI T,et al. Fractionation of
apple procyanidins by size-exclusion chromatography[J].Journal
of Chromatography A,1999,855( 1) : 181-190.
[11]PORTER L,HRSTICH L,CHAN B.The conversion of
procyanidins and prodelphinidins to cyaniding and delphinidin
[J]. Phytochemistry,1985,25( 1) : 223-230.
[12] TIBOR F,JORGE M R. Catechin and procyanidin
composition of seeds from grape cultivars grown in Ontario[J].
Journal of Agricultural and Food Chemistry,1997,45( 4) : 1156 -
1160.
[13]鲍俊竹,陈月坤,徐桂华 .测定葡萄籽提取物中原花青素
含量的方法[J].农业科学研究,2005,26( 1) : 43-45.
[14]姚开,何强,吕远平 .葡萄籽提取物中原花青素含量不同
测定方法比较[J].化学研究与应用,2002,14( 2) : 230-232.
[15]姚开,何强,吕远平,等 .葡萄籽提取物中原花青素含量
的测定[J].食品与发酵工业,2002,28( 3) : 17-19.
[16]郑俊霞,肖付才,李华 .香草醛-HPLC结合法测定葡萄籽
超微粉中的原花青素[J].食品科技,2009,34( 11) : 304-308.
[17]李绮丽,吴卫国,彭方刚,等 .莲子皮原花青素测定方法
的研究[J].现代食品科技,2012,28( 2) : 241-245.
[18]孙一萌,崔崧,王承义 .针叶林下土壤中单宁含量测定方
法的研究[J].中国林副特产,2012( 2) : 20-22.
[19]孟玉彩,赵文,李慧玲,等 .蔷薇红景天中原花青素含量
的测定方法[J].食品研究与开发,2009,30( 4) : 133-136.
[20]李春阳,许时婴,王璋 .低浓度香草醛-盐酸法测定葡萄
籽、梗中原花青素含量的研究[J].食品工业科技,2004,25
( 6) : 128-130.
[21]张寒俊,汪海波,习羽 .改进香草醛法测定葡萄提取物中
的原花青素[J].中国酿造,2010( 8) : 147-149.
[22]董爱文,朱深海,王国庆 .野生粉碎爬山虎种子等部位的
原花青素提取纯化工艺及含量测定[J].食品工业科技,2012,
33( 5) :
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
230-234.
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参考文献
[1]王镜岩 .生物化学( 第三版) [M].北京: 高等教育出版
社,2002.
[2]孙长灏 .营养与食品卫生学( 第六版) [M].北京:人民卫生
出版社,2009.
[3]XIE Lijuan,YE Xingqian,LIU Donghong,et al.Quantification
of glucose,fructose and sucrose in bayberry juice by NIR and PLS
[J].Food Chemistry,2009,114: 1135-1140.
[4]杨大进,吴国华,薛颖,等 .GB /T 5009.8-2008 中华人民共
和国国家标准 食品中蔗糖的测[S].北京: 中国标准出版
社,2008.
[5]杨大进,常迪,赵馨,等 .GB /T 5009.7-2008 中华人民共和
国国家标准 食品中还原糖的测定[S].北京: 中国标准出版
社,2008.
[6]张其安,王娟,戴建晓,等 .高效液相色谱-荧光检测法测
定蜂蜜中的果糖、葡萄糖和麦芽糖[J].食品科学,2011,32
( 14) : 249-252.
[7]施燕支,郭雪清,余启荣,等 .HPLC 示差折光分析法测定
口香糖中的木糖醇等多种糖醇的含量[J].首都师范大学学
报: 自然科学版,2005,26( 1) : 61-62.
[8]GB /T22221-2008 中华人民共和国国际标准 食品中果
糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 高效液相色谱法[S].
北京: 中国标准出版社,2008.
[9]GB /T22222-2008 中华人民共和国国际标准 食品中木糖
醇、山梨醇、麦芽糖醇的测定 高效液相色谱法[S].北京: 中国
标准出版社,2008.
[10]刘玉峰,唐华澄,李东 .离子色谱法在糖和糖醇分析检测
中的应用研究[J].北京工商大学学报,2010,28( 4) : 61-64.
[11]罗进,夏敏,叶能胜,等 .HPLC-ELSD 同时测定食品中 5
种糖含量[J].食品科学,2010,31( 8) : 226-229.