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菘蓝试管苗练苗及移栽技术研究



全 文 :北方园艺 2009(2):237 ~ 240 ·中 草药 ·
菘蓝试管苗练苗及移栽技术研究
张胜珍 , 客 绍英 , 孟文霞 , 杨 飞飞
(唐山师范学院 生命科学系,河北唐山 063000)
  摘 要:以菘蓝试管苗为试验材料 ,研究了练苗时间 、移栽基质 、营养液等一系列因子对菘蓝
试管苗移栽成活率及生长状况的影响。结果表明:菘蓝试管苗最佳练苗时间为 4 d。以蛭石∶珍
珠岩=1∶2为移栽基质时 ,试管苗成活率最高(达 97.5%),长势最佳。用大量元素为 Ca(NO 3)2
945 mg/L+KNO3607 mg/L+(NH4)2HPO4115 mg/L+MgSO4493 mg/L 的营养液配方浇灌菘
蓝移栽幼苗 ,可明显促进移栽苗的生长。
关键词:菘蓝;试管苗;练苗;移栽
中图分类号:S 567.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2009)02-0237-04
  菘蓝(Isatis indigotica Fort.)为十字花科菘蓝属植
物 ,干燥根入药称板蓝根 ,干燥叶入药称大青叶 ,具有清
热、解毒 、凉血 、止血之功效 ,是我国传统常用中草药之
一[ 1] 。由于菘蓝具有较高保健及经济价值 ,近年来我国
第一作者简介:张胜珍(1979-),女,河北新乐人,硕士, 讲师,主要
从事药用植物开发利用研究工作。 E-mail:zszhen6@yahoo.com.cn。
基金项目:河北省科技攻关项目(05276416);唐山市科技攻关项目
(03132001A)。
收稿日期:2008-10-10
对菘蓝需求量不断增长 ,菘蓝生产正朝着大规模商品化
方向发展。通过组培快繁技术可生产菘蓝试管苗[ 2-3] ,
同传统的繁殖方法相比 ,具有繁殖迅速 、节省时间 、劳
力 、不受季节限制等特点。但是试管苗出瓶移栽的成活
率及出圃苗的质量 ,直接会影响栽培规模 、成活率和植
株的生长 ,因此试管苗的练苗移栽技术成为限制组培快
繁技术应用的一个关键环节。该试验研究了栽培基质、
练苗时间等因子对菘蓝试管苗移栽后生长状况的影响 ,
旨在得出菘蓝试管苗移栽的最佳练苗时间 、移栽基质和
营养液配方 ,以缩短菘蓝的生长周期 ,提高其产品质量 ,
为菘蓝的规模化 、商业化生产奠定基础。
通插穗的生根能力 ,其中 ABT1总体效果最好 ,NAA次
之 ,但也明显优于对照;不同浓度的外源激素处理对插
穗的生根能力也有较大差异 ,其中以 200 mg/ L ABT1
处理总体效果最好 ,对生根数 、根长 、生根率 、根系效果
指数都有显著的促进作用 ,2 000 mg/L ABT1次之 ,200
mg/ L NAA最差枝条部位对三叶木通的生根能力也有
重要影响 ,试验结果表明 ,枝条基部做插穗的生根效果
最好 ,枝条中部次之 ,枝条上部最差。
参考文献
[ 1]  谢娇 ,李秀华 ,张传军,等.三叶木通野生资源的分布[ J] .陕西师范大
学学报(自然科学版), 2006 , 34(3):272-274.
[ 2]  李秀华,谢娇 ,张传军,等.陕西镇安三叶木通野生资源调查[ J] .陕西
师范大学学报(自然科学版),2006 ,34(3):258-260.
[ 3]  刘伦沛,钱增秀.三叶木通中主要营养成分含量的测定[ J] .黔东南民
族师范高等专科学校学报 ,2002(12):39-41.
[ 4]  张海洋,徐秀芳 ,陈建忠.紫景天扦插繁殖技术研究[ J] .北方园艺,
2008(2):172-174.
StudyOn Hardwood Cutting of Akebia trifoliate
YANG Qing-zhen , TENG Hong-mei
(Depar tment of Life Sciences , Yuncheng University , Yuncheng , Shanxi 044000 , China)
Abstract:The effects of cutting position , type of hormone , treatment concentration to hard wood cut ting of Akebia tri fo-
liate were studied.The experiment showed that:The Akebia tri foliate belonged to integrated rooting type;There were
two type of hormone , the best hormone w as ABT1;The hormone concentration could accelerate rooting , The best t reat-
ment w as to use 200 mg/L ABT1 for 3 h , The cutting position could effect on rooting of Akebia tri foliate , The bet ter
cutting position was base part.
Keywords:Akebia tri foliate;Hard wood cutting;Exogenous hormone
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·中 草药· 北方园艺 2009(2):237~ 240
1 材料与方法
1.1 材料
所用试材为菘蓝的试管苗 ,经过初代培养 、继代组
织培养 ,形成丛芽 ,选择继代培养中形成的大芽苗 ,转接
入1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/ L生根培养
基上诱导其生根。试管苗根长约 1.5 ~ 2.0 cm 时进行
移栽。
1.2 试验方法
1.2.1 练苗时间的筛选 菘蓝试管苗移入室温条件下
进行练苗。选取苗高 、叶数基本一致的菘蓝试管苗 ,分
成3组 ,每组44棵 ,分别练苗0、4 、8 d ,保持室内温度20 ~
25℃,相对湿度 50%~ 60%。练苗过程中 ,要给试管苗喷
蒸馏水。练苗结束后将3组试管苗从三角瓶中取出 ,洗净
根部培养基 ,均移栽于预先用0.1%百菌清消毒灭菌的基
质中灭菌的草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1的基质中。
每周统计试管苗的成活率 ,筛选出最佳练苗时间。
1.2.2 栽培基质的筛选 选取苗高 、叶数 、根数(≥4)等
基本一致的菘蓝试管苗 ,练苗4 d移栽于预先用0.1%百
菌清消毒灭菌的基质中。栽培基质分为 6种:①草炭∶
蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1;②草炭∶蛭石∶椰糠=1∶1∶
1;③蛭石∶珍珠岩∶椰糠=1∶1∶1;④蛭石∶珍珠岩=
1∶2;⑤草炭∶珍珠岩=2∶1;⑥草炭∶蛭石=2∶1。移
栽后每周喷施杀菌剂1次。每周统计试管苗的死亡率 ,
每2周测量记录各基质中菘蓝试管苗生长情况 ,筛选出
最佳基质。
1.2.3 营养液的施用 参照有关营养液配方[ 4] ,并结合
菘蓝生长习性[ 5] 设计 4种营养液。营养液 pH 值在
5.5 ~ 6.5。其中大量元素的配方分别为(mg/L)处理Ⅰ:
Ca(NO3)2945 +KNO3607 +(NH4)2HPO4115+MgSO4
49;处理 Ⅱ:Ca(NO3)2472 +KNO3 202+MgSO4246 +
KNO3100 +K2SO4174;处理 Ⅲ:Ca(NO3)2945 +KNO3
809 +(NH4)2 HPO4 153+MgSO4 493;处理 Ⅴ:KNO3
980+MgSO4370 +NH4NO31544 +K2HPO 4445 +CaCl2
332;处理 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中微量元素均采用通用微量元素配
方[ 4] ,处理Ⅴ微量元素配方为:FeSO4 27.85 +EDTA-
Na37.25 +HBO3 0.62+MnSO42.23+ZnSO40.86+Cu
SO40.0025+KI0.083+CaCl20.0025 +Na2MoO4 0.0025。
将移栽试管苗按营养液种类不同分为 5组 ,每组 30棵 ,
移栽基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1。从试管苗
移栽第 2周开始 ,用上述营养液对试管苗进行浇施 ,1周
浇1次 ,期间如遇干旱 ,补充清水。定期观察植株的生
长情况。
2 结果与分析
2.1 不同练苗时间对菘蓝试管苗移栽的影响
  由表1可知 ,菘蓝试管苗移栽后的前1周 ,各种处理
的菘蓝试管苗均保持着较低的死亡率。移栽 1周以后 ,
不同处理菘蓝试管苗的死亡率有了明显的不同:练苗4 d
的试管苗仍保持着较低的死亡率 ,而练苗 8 d的试管苗
死亡率急剧增加 ,到第2周时已达13.64%,练苗 0 d的
试管苗死亡率也有所增高 ,但幅度不大。从移栽后的第
2周开始 ,练苗0d的菘蓝试管苗死亡率急速增加 ,到第5
周时有 40.91%的植株死亡 ,练苗 8d的菘蓝试管苗死亡
率也有所增加 ,但增长速度减缓 ,到第 5周时有 25%的
植株死亡;而练苗 4 d的试管苗一直保持着较低的死亡
率 ,到第5周时仅有 9.09%的植株死亡。
  表 1  不同练苗时间下试管苗移栽死亡率
练苗时间 死亡率/ %第1周 第2周 第 3周 第 4周 第5周
0 d 0.00 2.27 20.45 36.36 40.91
4 d 0.00 0.00 2.27 4.55 9.09
8 d 2.27 13.64 20.45 22.73 25.00
  分析上述现象产生的原因可能为:试管苗练苗 8 d
时间过长 ,未移栽前其根部已感染细菌 ,从而引起移栽
后的试管苗根部迅速腐烂;试管苗在移栽后短时间内就
死亡;而练苗0 d的试管苗又由于没有过渡锻炼 ,不能适
应从组培时的人工环境向田间自然环境的转变 ,因而移
栽一段时间之后逐渐死亡。在试验中练苗4 d的菘蓝试
管苗一直保持着较低的死亡率 ,因此练苗 4 d较为适宜。
2.2 不同基质对菘蓝试管苗生长的影响
2.2.1 不同基质对菘蓝试管苗移栽的的影响 由表 2
可知 ,移栽后的前 1周 ,6种基质处理的试管苗死亡率都
较低。从第2周开始 ,2号基质处理的试管苗死亡率急
速增加 ,到第5周时死亡率达到 50%;3号 、5号和 6号
基质处理试管苗死亡率也有所增加 ,但均低于 2号基
质 ,到第5周。1号和 4号基质处理的试管苗在整个移
栽过程中一直保持较高的成活率 ,到 5周时 1号基质处
理试管苗死亡率仅为9.09%,4号基质处理死亡率最低 ,
仅为 2.5%,即 97%以上的幼苗都成活。菘蓝怕涝 ,根部
积水易发病害 ,适宜在排水良好的基质中栽培[ 6] 。6种
混合种基质中 ,第 4号基质中蛭石与珍珠岩比例为 1∶
2 ,蛭石有良好的保水性[ 7] ,可以克服珍珠岩保水性差的
缺点 ,而较高比例的珍珠岩又可弥补蛭石通透性差的不
足 ,因而 4号基质排水 、透气性都良好 ,符合菘蓝的生长
习性 ,试管苗移栽成活率高于其它基质处理。除第 4号
基质外 ,1号基质中试管苗成活率仅次于 4号基质处理。
对比 1号 、4号基质成分差别之处在于:1号基质中珍珠
岩比例降低 ,另外又增加草炭 ,由于草炭透气性较珍珠
岩差 ,造成1号基质通气性不如4号基质 ,因此试管苗成
活率较4号基质处理有所减少。对比1号基质与3号基
质成分差别之处在于:1号基质中的草炭在 3号基质中
换为椰糠 ,由于椰糠保水性极强 ,因此 3号基质通气性
较 1号基质有所下降 ,试管苗成活率较 4号基质也有所
降低。5号 、6号基质也均因为蛭石 、草炭比例过高而使
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北方园艺 2009(2):237 ~ 240 ·中 草药 ·
基质透气性降低。在试验所涉及的 6种基质中 , 2号基
质试管苗成活率最低 ,幼苗长势最差 ,2号基质组成成分
为蛭石 、草炭 、椰糠 ,三者均为保水性强而透气性差的基
质 ,试管苗生长在由三者混合而成的基质中 ,根部不能
获得充足的氧气 ,无氧呼吸的一些产物又使根部受到伤
害 ,致使试管苗成活率不断下降。
  表 2 不同基质处理下菘蓝移栽幼苗的死亡率
基质编号 移栽株数 死亡率/ %第1周 第2周 第 3周 第 4周 第5周
1号 44 0.00 0.00 2.27 4.55 9.09
2号 36 2.78 16.67 22.22 33.33 50.00
3号 40 0.00 2.50 7.50 12.50 17.50
4号 40 0.00 0.00 0.00 2.50 2.50
5号 30 0.00 3.33 6.67 10.00 23.33
6号 40 0.00 5.00 7.50 12.50 12.50
2.2.2 不同基质对菘蓝试管苗生长状况的影响 综合
图1 ~ 4可发现 ,不同基质处理对菘蓝试管苗生长发育
的影响不同。在整个试验过程中 ,1号和 4号基质处理
试管苗在叶片数 、叶片大小 、株高方面均优于其它处理 ,
4号基质处理优势尤为明显 ,而 2号处理的试管苗在叶
片数 、叶片长 、叶片宽 、株高方面几乎一直处于最低水
平。这表明 4号基质保水 、透气性好 ,最有利于菘蓝幼
苗的生长。
2.3 不同营养液对菘蓝移栽苗生长的影响
选取相同长势的移栽苗 ,从试管苗移栽第 2周开
始 ,浇灌不同的营养液 ,每周浇 1次 ,期间如遇试管苗干
旱 ,补充清水 ,8周后调查数据。由表 3可知 ,处理Ⅰ、Ⅱ、
Ⅲ、Ⅴ在株高 、叶片数 、叶片长 、宽等方面均优于清水对
照 ,说明营养液的施用对菘蓝的生长能起到一定的促进
作用。其中处理Ⅰ植株长势又优于其它 3种处理 ,由此
可见配方为 Ca(NO3)2 945 mg/L +KNO3 607 mg/ L+
(NH4)2HPO4115 mg/ L+MgSO4 493 mg/L 的营养液最
适合菘蓝的生长。
  表 3 不同营养液对菘蓝移栽苗生长的影响
营养液 株高/cm 平均叶片数/片 叶长/ cm 叶宽/cm
处理Ⅰ 16.6 29.95 15.65 4.47
处理Ⅱ 14.37 8.41 13.77 3.90
处理 Ⅲ 14.99 9.40 15.06 3.91
处理 Ⅴ 14.12 8.29 13.96 3.78
CK 12.21 7.30 11.98 3.38
3 讨论
3.1 练苗时间与试管苗移栽成活率的关系
试管苗的移栽是从具有恒温 、保湿 、营养丰富 、无病
菌侵害的人工生态环境转到易受病菌侵染的自然生态
环境中生长的过程 ,因此试管苗的移栽需要一个逐步适
应的过程。这一过程通常经过试管苗的过渡驯化(即练
苗)来实现。因此练苗时间的长短对试管苗的成活率有
明显影响[ 8] 。练苗时间过短 ,由于试管苗没有过渡锻
炼 ,不能适应环境的转变;而练苗时间太长 ,幼苗未从培
养基取出时就已经被病菌感染 ,大量杂菌的存在往往导
致试管苗根基部变褐并迅速腐烂 ,最终死亡。
图1 不同基质处理的苗高 图 2 不同基质处理的叶片数 图3 不同基质处理的叶片长度
3.2 基质性质与试管苗移栽成活率及生长量的关系
栽培基质是能为植物根系生长提供稳定 、良好的根
际环境的生长介质。对作物生长影响较大的基质理化
性质主要包括容重 、总孔隙度 、通气孔隙度 、持水孔隙度
及营养元素含量等。基质的容重 、总孔隙度可以反映基
质的疏松或紧实程度 ,通气孔隙度与持水孔隙度比能够
反映出基质中的水 、气之间的状况[ 9] 。该试验共涉及蛭
石 、珍珠岩 、草炭 、椰糠等 4种单一基质。4种单一基质
由于比重 、总孔隙度 、通气孔隙与持水孔隙比等不同 ,而
具有不同的保水性和透气性。其中珍珠岩容重低 、总孔
隙度 、通气孔隙度大[ 10] ,因此透气性较好而保水性较差 ,
容易造成干旱缺水;而蛭石 、草炭 、椰糠总孔隙度及通气
孔隙度均较小 ,因此保水性较好而通气性较差 ,尤其是
椰糠具有极强的保水性[ 11-12] ,容易使植株根系处于缺氧
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状态 ,根系积累还原物质 ,对根系产生毒害。因此 4种
单一基质单独使用均不能达到适宜的的基质理化性状
指标的适宜范围。为使基质的稳定性 、保水保肥性 、通
气性 、透水性达到协调状态 ,应按单一材料的理化性质
特点 ,扬长避短 ,优势互补进行混合。该试验 1 ~ 6号基
质均为混合基质 ,由于构成混合基质的单一基质种类不
同、配比不同 ,因此混合基质的孔隙度 、水气比等物理性
质均不同 ,在保水性 、透气性等方面有很大差别 ,因此对
菘蓝移栽成活率和生长量有着非常明显的影响。4号基
质由于配比适当 ,通气性好并有一定保水性 ,符合菘蓝
怕涝不耐积水的生长习性 ,是菘蓝试管苗进行移栽的最
佳基质。
图 4 不同基质处理的叶片宽度
3.3 营养液组成与移栽苗生长量的关系
试管苗移栽时 ,多使用无土基质 ,基质所含营养较
少或基本不含营养 ,植株生长所需的水分 、养分均需由
营养液通过基质供给 。因此以试管苗的营养特征为基
础 ,筛选适合的营养液对提高试管苗移栽的成活率 、促
进幼苗生长有非常重要的意义[ 13] 。该试验用 4种营养
液对菘蓝试管苗进行处理 ,发现在株高 、叶片数 、叶片
长 、宽等方面各处理有一定差异 ,其中以配方 Ⅰ营养液
效果最佳 ,配方Ⅲ营养液次之 ,分析原因可能是每种营养
液中各营养元素的比例不同 ,从而造成菘蓝试管苗生长
量的差异。配方Ⅰ营养液中各元素相互平衡 ,符合菘蓝
的生长规律 ,因此移栽幼苗生长最为健壮。
参考文献
[ 1]  张润珍,张玉文.板蓝根研究进展[ J] .中草药 ,2000 ,31(6):474-476.
[ 2]  陈微 ,梅文泉 ,赵丰萍,等.菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养[ J] .西
南农业大学学报, 2002, 24(2):105-107.
[ 3]  陈秋芳,黄群策,秦广雍.菘蓝叶片离体培养与试管无性系的建立
[ J] .河南农业科学, 2007, 12:98-100.
[ 4]  连兆煌.无土栽培原理与技术[ M] .北京:中国农业出版社, 1994:57-
59.
[ 5]  王文颇,朱小平 ,李彦生 ,等.菘蓝营养生长期干物质积累与氮 、磷、
钾吸收动态的研究[ J] .中国中药杂志 ,2005 ,30(15):1195-1197.
[ 6]  毕得利,刘洪武 ,衣海波.板蓝根及其栽培技术[ J] .北方园艺 , 2004
(4):49.
[ 7]  徐斌芬,章银柯 ,包志毅 ,等.园林苗木容器栽培中的基质选择研究
[ J] .现代化农业 ,2007(1):10-12.
[ 8]  陈惠娟,王永军 ,王俊峰 ,等.中华芦荟试管苗的练苗与移栽技术[ J] .
温室园艺 ,2004(6):52.
[ 9]  李斗争,张志国.设施栽培基质研究进展[ J] .北方园艺 , 2005(5):7-
9.
[ 10] 田吉林,奚振邦 ,陈春宏.设施蔬菜无土栽培复合基质的理化性质及
其应用效果[ J] .上海农业学报, 2003, 19(3):73-75.
[ 11] 崔秀敏,王秀峰.蔬菜育苗基质及其研究进展[ J] .天津农业科学,
2001 ,7(1):37-42.
[ 12] 张启翔,康红梅 ,唐菁,等.切花月季无土栽培技术的研究[ J] .北京林
业大学学报, 2003 , 25(3):22-27.
[ 13] 盛爱武,何泉 ,赵银芳,等.栽培介质 、营养液及化学药剂对红掌生长
开花的影响[ J] .亚带植物科学, 2005, 34(3):34-36.
Study on Domestication and Transplanting Technique of Tissue
Culture Plantlets of Isatis Indigotica Fort.
ZHANG Sheng-zhen , KE Shao-ying , MENG Wen-xia , YANG Fei-fei
(Department of Life Sciences , Tang shan Teachers College , Tang shan ,Hebei 063000 , China)
Abstract:The tissue culture plantlets of Isatis indigotica Fort.were used as experiment materials and the inf luences of
domestication time , t ransplanting medium and nutrition liquid combinations on the survival rate and growth of Isatis in-
digotica Fort.were studied.The results showed that the optimum domestication time was three days.The plantlets
transplanted to the subst rate with vermiculite and perlite(1∶2)gained the highest survival rate and the best condition of
growth.The grow th of plantlets of Isatis indigotica Fort.can be promoted obviously using prescription of nutrition liq-
uid whose vast elements were Ca(NO3)2945 mg/L +KNO3607 mg/ L+(NH4)2HPO4115 mg/L+MgSO4493 mg/L.
Keywords:Isat is indigotica Fort.;Tissue culture plantlets;Domestication;Transplanting
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