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播娘蒿生长点试管苗培养的研究



全 文 :科捞朦息
播娘篙生长点试管苗 1言养的研究
辽宁师范大学生命科学学院 刘 月 刘 帅 朱雪峰 李洪艳 姜长阳
【摘 要」为保护资源 、满足需要 , 以播娘篙生长点为材料 ,进行了生长芽培养 、 生长芽试管苗培养 、试管苗茎段扩繁培养以及试管苗
移栽与定植的研究 。 结果证明 : 1乃M黔z T o 3 m g 工一 , + I八八。 l m g L 一 , + 蔗糖 3 5 9工一 ,是生长芽培养的适宜基本培养基 ; 1乃M黔蔗糖 1 0 9
L 一 , + I八八( Zm g L 一 , + N 八八。 1 m g L 一 ,是生长芽试管苗培养和试管苗茎段扩增培养的适宜培养基。 试管苗移栽成活率为 9 7 7% ;定植成
活率为 9 8 8% ;定植成活的试管苗保持了野生播娘篙植物学性状 。
[关键词〕播娘篙 组织培养 试管苗
播娘篙 (D e s e u r a i n i a s o p h i a (L〕s e h u r . )是十字花科 , 播娘篙属一年生
生草本植物 ,生长于山坡 、草地和路旁等环境中 ,在我国的华北 、西北 、
华东 、 四川等地有分布 , 在辽宁大连地区的旅顺 、长海等地也有分布`’一飞
播娘篙的种子含芥子酸 、 毒毛花昔元 、 黄白糖芥昔 、卫矛单糖昔 、芥子
碱 、 亚油酸 、油酸等成分 ,种子含油量高达 4 . 05 % , 出油率可达 28 . 02 % ,
不仅可制作肥皂和油漆 , 而且人药具有泻肺平喘 、利水消肿 、行气祛痰
等功效 , 能治胸膜炎 、肝硬化腹水 、小便少 、 面部水肿 、 慢性气管炎 、 咳
嗽 、 气喘 、痰多等疾病 ,全草还可作为生物农药使用 ,幼苗可做野菜洲〕。
由于播娘篙具有药用 、食用等多种用途 , 因此长期以来 , 大连地区的人
们一直在大量的采收进行药用 , 或者作为饲料添加剂 ,从而导致本来就
很有限的野生播娘篙资源迅速枯竭 ,处于濒危状态 。 为保护播娘篙的
野生资源 、满足需要 ,研究者对其进行了生长点试管苗培养的研究 。 虽
然 目前已有播娘篙组织培养研究的报道 {5刊 , 但迄今未见播娘篙生长点
试管苗培养研究的报道 。
1
.材料与方法
1
.
1材料处理及灭菌
5月下旬将生长于旅顺菜大岭上坡上生长较旺盛的播娘篙植株上
部的生长点剪掉 , 4d 后 , 连续 2d 向植株上喷洒 6 m g . L一 ,的青霉素 , 喷完后
用塑料袋将植株完全罩住。 2d 后 ,将植株的地上部采 回实验室作为研
究的实验材料 。
材料的灭菌参见木模研究侧的灭菌方法 。
1
.
2培养条件
培养条件中除了恒定培养温度为 26 ℃ 、恒定光照强度为 2 5 0 h 、
固体培养基琼脂陈力强度为 2 3 0酬c m Z外 , 其它条件见东方寥的研究气
1
.
3试验方法
1
.
3
.
1生长芽的培养将无菌嫩茎剪成长约位4c m 、具有生长点的茎段
后 , 接种 到 以 L s 、 N 。 、 13/ M s 、 12/ M s 、 M s 和 B 56 种 附加 Z T住3 m g . L 一 , +
IA A o
.
l m g
.
L
一 , +蔗糖 3 5 g . L 一 ,的基本培养基 ,进行不同基本培养基对生长
芽培养的影响试验。 此试验重复了 2 次 , 每种处理接种 30 个具有生长
点的茎段 。
1
.
3
.
2试管苗培养将在 13/ M S + z 0T 3 m g . L 一 ,+I A A o . l m g . L 一 , +蔗糖 3 5 9 .
L
一 ,这种培养基上扩大数量培养的生长芽从基部切下 ,接种到以下 9种
培养基上进行生长芽试管苗培养试验 。 这 9种培养基如下 : M S +蔗糖
10 g
.
L
一 ,
+I A A住 6 m g
.
L
一 , + N A A位 3 m g . L 一 , ; M s + 蔗糖 1飞 . L一 , +I A A位 4 m g . L 一 , +
N A A位 Zm g . L 一 , ; M s + 蔗糖 1飞 . L一 ,+I A A住Zm g . L 一 ,+ N A A o . l m g . L 一 , ;l 2/ M s + 蔗
糖 1飞 . L一 , +I A A住 6 m g . L 一 , + N A A位 3 m g . L 一 ,;l 2/ M s + 蔗糖 10 g . L 一 , +I A A住 4 m g .
L
一 , + N A A住 Zm g . L 一 , ;l 2/ M s + 蔗糖 10 g . L 一 , +I A A位 Zm g . L一 ,+ N A A o . l m g . L 一 , ;l /
3M s + 蔗糖 10 g . L 一 , +I A A住6 m g . L一 ,+ N A A住3 m g . L一 , ;l 3/ M s + 蔗糖 10 g . L 一 , +
IA A位4 m g
.
L
一 , + N A A住 Zm g . L 一 , ; 1 3/ M s + 蔗 糖 1飞 . L 一 , + IA A住 Zm g . L 一 , +
N A A o
.
l m g
.
L
一 , 。 此试验重复了 2 次 , 每种培养基用于试验的材料为 50
个生长芽 。
1
.
3
.
3试管苗茎段扩增培养把在 l3/ M S+ 蔗糖 10 g . L 一 ,+I A A住 Zm g . L 一 ,+
N A OA
.
l m g
.
L
一 ,这种培养基上 , 由生长芽培养的试管苗根部剪掉 ,把上部
剪成长 1 . sc m 左右 、 具有 2一 3个叶片的茎段和 3 一4个叶片的顶梢 (以下
也统称为试管苗茎段 )后 ,再把每个试管苗茎段最下面的叶片剪掉 。 接
着 , 把试管苗 茎段继续 接种到 l3/ M s + 蔗糖 10 9 · L 一 , +I A A位 Zm g · L 一 , +
N A OA
.
l m g
.
L
一 ,这种培养基上 , 进行试管苗茎段的扩增培养 。 这种试管
苗茎段的扩增培养只进行了 1次试验 ,继代扩增培养了 6代 , 第一代到
第三代每代接种培养 10 个茎段 , 第四代接种培养了 20 个茎段 ,第五代
接种培养了 6 0 个茎段 ,第六代接种培养了 10 0 个茎段。
1
.
3井试管苗移栽与定植将第六次扩增培养了 2 8d 和 3 2d 的试管苗
转移到温室中 ,把培养瓶瓶塞除掉 , 放到温室光照充足的地方炼苗 3d
后 , 用枪状镊子将试管苗取出 ,再用 20 ℃清水洗去根部附着的培养基 ,
栽植到 口径 7c m 、底部有孔 、上半层为干净河沙的温室塑料袋中。 这种
移栽试验共进行了 2 次 , 每次移栽 4 0 株试管苗。 移栽后前 1 2d 要在上
面拉上遮阴网 ,并保持 85 %左右的湿度。
5月上旬 ,把在塑料袋中移栽成活的试管苗一次性定植到大连郊区
石门山的山坡下 , 定植了 5 0 株 。 定植后除了整地和浇 1次透水外 ,其
它环境条件均按照野生环境管理 。
2
.结果与分析
2
.
1不同基本培养基对生长芽生长培养的影响
培养到 6 0d 观察统计 , 2 次重复实验的结果 由表 1显示 : 在所试验的
6种基本培养基中 , 以 l/ 3M S为基本培养基的生长芽生长培养的效果最
好 ;在所统计的生长率 、生长芽高度和生长芽叶片数 3 项指标中 ,均为
最好 , 并且直接观察生长芽长势最好。 由此说明 , 13/ M S这一基本培养
基是生长芽生长培养的适宜基本培养基 ,也就是说 , l/ 3M S+z 0T 3 m g . L 一 ,+
IA OA
.
lm g
.
L
一 ,+蔗糖 3 5 g . L一 ,这种培养基是播娘篙生长芽培养的适宜基本
培养基。
表 1不同基本培养基对生长芽生长培养的影响
基本 生长芽 生长芽 生长芽平均 生长芽平均 生长芽
培养基 生长数 生长率% 高度 ( Cm ) 叶片个数 长势
L S O O O O
N

O O O O
1/3M S 52 8 6
.
7 3井 5 一 6 + +
1/ZM S 34 5 6
.
7 2 3 4

6 +
M S 27 4 5

O 1
.
5 3万 +
B
5
O O O O
注 : 一不生长 +; 长势一般 ; + + 长势较好。
2 2 不同培养基对生长芽试管苗培养的影响
接种培养 3 d5 时观察统计 ,结果由表 2表明 ,在 13/ M S +蔗糖 1飞 . L 一 ,+
IA OA
.
mZ g
.
L
一 ,+ N AOA
.
lm g
.
L
一 ,这种培养基上生长芽生根培养的效果最
好 , 其试管苗的形成率为% % , 每株试管苗的生根数最多 (为 8 . 1条 ) , 并
且培养的试管苗外观上长势旺盛 , 其平均高度为 sc m左右。 同时 ,第 2
次重复试验在这一培养基上所得到的结果也与第 1次试验几乎完全一
致 。 这证明 : l/ 3M S+ 蔗糖 1飞 . L 一 ,+I A A位 Zm g . L 一 ,+ N A A o . l m g . L一 ,这种培养
基是播娘篙生长芽试管苗培养的适宜培养基 。
表 2不同培养基对生长芽试管苗培养的影响
培养基 试管苗 试管苗 每株 试管苗
形成 形成 试管苗 长势
株数 率% 生根数
M S+ 蔗糖 10+ IA A O石 + N A A O3 O O O
M S+ 蔗糖 10+ IA A O井 + N A A OZ 9 18 1 . 3 +
M S+ 蔗糖 10+ IA A OZ + N A A O . 1 3 4 6 8 2 一 6 +
1 /ZM S+ 蔗糖 10+ I A A O石+ N A A O3 O O O
1 /ZM S+ 蔗糖 10+ IA A O井+ N A A OZ 2 6 5 2 2 3 +
1 /ZM S+ 蔗糖 10+ IA A OZ + N A A O . 1 3 8 7 6 5 一 6 +
1 /3M S+ 蔗糖 10+ I A A O石+ N A A O3 7 14 2 一 2 +
1 /3M S+ 蔗糖 10+ IA A O井+ N A A OZ 3 3 6 6 5 . 7 +
1 /3M S+ 蔗糖 10+ IA A OZ + N A A O . 1 4 8 9 6 8 . 1 + +
注 : 一不生长 +; 长势一般 ; + 长势较好 ; + + 长势旺盛 。 培养基单位 : 蔗糖 g . L一 , ;生长调节剂 m g · L一 ,。
2 3 试管苗茎段扩增培养
观察表明 , 以茎段为材料进行扩增培养 ,培养到 4d 时可见培养茎
段开始生根 , 之后 ,随着培养时间的延长不仅生根率 、生根数不断增加 ,
试管苗也迅速生长 。 培养到 3 2d 时 ,就可 以培养生长出外观上与以生
长芽为材料培养 3 5d 几近一致的试管苗 , 且培养 6代的平均形成率为
97 石% ,平均每一代的扩繁系数为 3 . 1。 培养过程的观察结果还表明 , 以
试管苗的茎段为材料进行扩繁培养 ,几乎没有无效苗 。 以上结果证明 :
13/ M S + 蔗糖 10 g . L 一 ,+I A A住 Zm g . L一 , + N A A o . l m g . L 一 ,这种培养基也是播娘
篙试管苗茎段扩增培养的适宜培养基 。
2井移栽与定植
移栽 3 d2 统计 , 2次移栽的结果几近一致 。 2 次共成活了 7 82 株 , 成
活率为 97 刀% 。 (下转第 40 页 )
基金项目 :本文系辽宁省 大学生创新创业训练项 目 ( 2 0 13 10 16 52 。 ) ;辽宁省普通高等教育本科教学改革研究项 目 ( 2 0 1 20 3 0 41 一 4 ) 。
作者简介 : 刘月 ( 1 9 9。一 ) , 女 , 满族 , 辽宁沈阳人 , 本科在读 , 从事植物组织培养研究 。 通讯作者 : 姜长阳 ( 19 5 3一 ) , 男 , 汉族 , 辽宁大连人 , 教授 , 从事植
物技术研究 。
一 37 一
课程考试相结合 , 以鉴定考试来代替课程考试 , 鉴定考试通过 ,课程考
试即为合格 , 学生即达到了某项专项技能维修师的要求 ,这样可有效避
免重复培训造成的资源浪费 。
2
.专项技能与专业课程相结合
将 O S T A 汽车维修专项认证融人到汽车运用与维修专业的课程体
系中 , 《汽车发动机构造与维修 》课程可安排 O盯A 发动机维修师的培训
课程内容 ; 《汽车底盘构造与维修 》课程可安排 O S T A底盘维修师 、变速
器维修师的培训课程内容 ; 《汽车电器设备与维修 》课程可安排 O盯A 电
子电气维修师的培训课程内容 ; 以此类推。 O S T A 汽车维修专项完全涵
盖了汽车运用与维修专业的所有专业核心课程 ,完全可以做到将 O S T A
汽车维修专项与汽车运用与维修专业核心课程结合起来 。
3
.就业岗位与专项技能相结合
由于 O S T A 培训课程内容相对于教科书内容而言 , 对专项岗位技能
更有针对性 , 学生在合格的学完一门课程之后 , 即能掌握一个工作岗位
的技能 ,如学完 《汽车发动机构造与维修 》课程 ,考试合格即达到 O S T A
发动机维修师的技能要求 ,有胜任发动机维修工作岗位的专项技能 。
学生学完全部专业课程之后 ,能胜任几个工作岗位 ,拓宽了学生的就业
面 , 同时通过鉴定获得相应的技能证书 , 也提升了学生就业时的竞争
力 。
4
.实践技能与鉴定证书相结合
目前国内汽车维修行业较为普遍的技能鉴定为汽车维修工技能鉴
定 , 其鉴定内容包括了职业道德 、机械基础知识 、液压 、 电气 、发动机维
修 、 底盘维修 、汽车电气维修 、车身维修等内容 ,考核过程分为理论考核
和实践考核两部分 , 理论知识考核内容基本上以死记硬背的知识点为
主 , 不利于检验考生灵活运用所学维修知识解决实际问题的能力 ;实践
动手考核 , 由于对其评判的主观性太强 , 基本流于形式 , 故目前社会上
对于汽车维修工的证书认可度不大 。
O S T A 汽车维修专项技能认证的鉴定将实际工作中遇到的实际案
例以试题的形式给出 , 给出实际案例的故障现象 ,让考生运用所学知识
分析故障 (案例 )现象的本质原因 ,重点考察学生利用所学知识灵活地
解决实际问题的能力 ,真正的做到了维修实践与鉴定考试相结合 。 同
时其考试内容以客观的选择题形式出现 , 考核过程中采用电脑无纸化
考试 , 考试时间电脑计时 , 考试完结后 ,试题立即打包发送至考试中心 ,
杜绝了考试过程中难以监督的难题 , 由于采用客观的选择题的形式 , 评
判结果是公正严谨的 ,得到了国内汽车维修企业的广泛认可 , 国家人力
资源和社会保障部职业技能鉴定中心也在全国各省市大力推广 。
三 、 结束语
目前高职院校的汽车运用与维修专业课程体系存在如下的问题 ,
一是以课程为中心的学科式专业课程体系 , 使学生很难在短期内掌握
汽车维修技能 ;二是表面上看似注重全才的培养 ,但由于高职学生在校
时间较短 ,很难做到对汽车维修所有专项都很精通 ,导致学生毕业后对
汽车维修无一项专长 , 与实际工作要求相差较远 ;三是强调技能的同
时 ,却在课程体系中忽视技能鉴定培训的内容 ,使学生在进行技能鉴定
时需要重复的培训 ,浪费了金钱和时间 。
建立基于 O盯A 专项技能认 i 的汽车运用与维修课程体系 , 将 0 5 -
T A专项技能认证的技能鉴定项 目揉合到汽车运用与维修专业的核心
课程中 , 可以使汽车运用与维修专业所需要掌握的知识 、技能全面的涵
盖在内 , 完全满足汽车运用与维修专业的人才培养 目标要求 ;将汽车发
动机 、底盘 、 电子电气系统等专业课程课时大幅增加 ,使学生在此三个
专项的知识与技能得到很大提高 , 完全符合 O盯A发动机维修师 、 底盘
维修师 、变速器维修师 、 电子电气系统维修师的要求 , 通过专业选修课
程更拓展了学生的专业技能 , 使学生在汽车维修方面的就业前景更为
宽广 ;学生在学到知识 ,掌握技能的同时 , 也获得了国家人力资源和社
会保障部职业技能鉴定中心 ( O盯 A )颁发的技能证书 , 真正地做到了
“ 技能+ 证书 ” ,得到社会的认可的同时 , 提升了学生的就业竞争力。
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保障部职业技能鉴定中心
(上接第 37 页 )
定植 2 d0 统计 ,成活了 4 94 株 ,成活率为 98 . 8% 。 对定植试管苗成活
的试管苗观察显示 , 成活的试管苗前期生长速度较慢 , 60d 后生长旺盛
而整体定植成活的试管苗当年均能开花结果 , 但开花结果的时间延迟
至 3 5d 左桩。 所有定 }颤丈活的试管苗均保持了野生播娘篙的植物学睦状 。
3
.讨论
在前人的植物组织培养试管苗繁殖研究中 , 几乎都是采用愈伤组
织分化培养和分化芽培养两条途径进行扩繁培养的 明` , 而本研究是采
用试管苗茎段扩繁培养的方式进行繁殖培养的 。 表面上看以这种方法
进行繁殖培养的速度较慢 (每个培养周期的繁殖系数仅为 3 . 1 ) ,实际上
由于这种繁殖方法几乎没有无效苗 ,并且繁殖的周期较短 (每个续期为
3 2 d )
, 所以 , 以 1株试管苗的茎段为材料 , 1年就能繁殖出 3 . 1 ” 丹株试管
苗 。 也就是说 , 1年至少能繁殖 25 万个后代 , 这种繁殖速度完全能达到
本研究的目的 。
在本研究中 , 以生长芽为材料进行试管苗的培养繁殖周期为 3 5d ,
而以试管苗的茎段为材料进行试管苗的培养 , 繁殖周期是 3 2d 。 在相同
的培养基上 ,后者和前者比缩短了 3d 。 产生这种现象的主要有两点原
因 : 一是所用茎段是在相同的培养基上培养生长的 ,材料本身对这种培
养基已经产生了适应性 ;二是茎段长得较为粗壮一些 ,也较生长芽具有
更强的适应性 。
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(上接第 38 页 ) 理论吻合 。
除此例外 ,在凤凰旅游英语操纵性翻译中 ,类似的译法还有 : “ 名为
`茶炯 ’ 的小山城 Ch a t o n g , a s m a l l t o w n i n t h e h i l l。 (将句子 `名为茶炯 ’译
为同位语 ` c h a t o n g , a s m a l l t o w n ’ ) ” 、 “过渡人不必出钱 n o t o l l 15 p a i d (将
主动语态译为被动语态 ) ” 、 “ 我有了 口粮 I ’ m p ia d fo r thi 。 (将主动句译为
被动句 ) ” 、 “ 本来应当 tI 15 hi hg it m e (将词语 `本来应当 ’ 升格为句子 ) ”等
操纵性翻译方法除了灵活 自如地使用了各种翻译方法和技巧外 ,从总
体上察之 ,所运用的翻译方法都是句法结构的改译法 。 因为在运用综
合改译法进行操纵性翻译时 ,译者在各种形式上对原文进行处理 , 因而
译文灵活多变的特征较突出 , 此译法可使译文在形式上出现一定的变
化 , 在表达语义时更加生动活泼 ,从而达到更灵活地对本土旅游英语进
行翻译和促进当地文化对外传播活动积极开展的 目的 ,译文符合教学
和操纵翻译 目的论要求 ,这种译法在教学中是值得提倡的 。
结语
本文以凤凰旅游英语翻译在短语 、词性和综合三个层面进行改译
操纵的方法为例 , 对建立立体 、开放 、先进的本土实用旅游知识与外语
教学进行融合渗透的英语专业非师范方向教学的立体化的综合教学模
式进行研究 , 依据综合性 、先进性 、可操作性和就近性原则 ,确立英语专
业非师范方向操纵翻译教学的特色综合地体现在一个课系上的创新理
念 , 对形成具有湘西地方民俗风情和经济特点的实用外语教学特色有
现实意义 。
参考文献
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