全 文 ：世界科学技术—中医药现代化★中药研究
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕
收稿日期：2011-05-26
修回日期：2011-08-03
＊ 中药标准物质研制和开发的技术平台建设（2009ZX09308-001-6）：细辛脂素等 18种对照品备选原料的制备，负责人：刘勇。
＊＊ 通讯作者：马群，副教授，主要研究方向：中药化学和质量控制研究，E-mail:maqun99@163.com。
摘 要：目的：建立禹州漏芦药材中 α-三联噻吩和 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩含量测定方法。
方法：采用 Agilent Extent C18（4.6mm i.d.，5μm)柱；流动相：甲醇-0.1%的醋酸水溶液（80 ∶20）；流速：
0.8mL·min-1；检测波长：352nm；柱温 30℃。结果：α-三联噻吩和 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩的线性
范围分别为在 0.171～0.855μg（r=0.9999）和 0.207～1.035μg（r=0.9999）；加样回收率分别为 98.2%
（RSD=1.27%）和 101.1%（RSD=1.48%）。结论：该方法为该药材质量标准的制定提供参考依据。
关键词：禹州漏芦 α-三联噻吩 5-(丁烯-3炔-1)-2,2’联噻吩 高效液相色谱
doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2011.04.021
禹州漏芦为菊科蓝刺头属植物蓝刺头（Echinops
latifolius Tausch.）及同属植物华东蓝刺头（Echinops
grijisii Hance）的干燥根。味苦、性寒、归胃经，具有清
热解毒、排脓止血、消痈下乳的功效，用于治疗诸疮
痈肿、乳痈肿痛、乳汁不通、瘰疬疮毒等症 [1]。现代药
理研究表明，禹州漏芦提取物有明显的保肝及抗炎
作用[2~3]。该属植物中含有大量的噻吩类化合物，具有
依赖长波紫外光（Ultraviolet A radiation）的抗病毒、抗
真菌、杀虫及抗癌作用[4~6]。本课题组对该药材进行了
系统研究，从中分离出 α-三联噻吩和 5-（丁烯-3
炔-1）-2，2’联噻吩等成分，α-三联噻吩和 5-（丁烯-
3炔-1）-2，2’联噻吩在禹州漏芦中含量丰富且具有
良好的活性。本项研究建立了禹州漏芦药材以 α-三
联噻吩和 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩为指标的含
量测定方法，旨在为禹州漏芦的开发研究及其药材
质量标准的制定提供参考。
一、材 料
1. 仪器与试药
岛津 20A高效液相色谱仪（包括四元低压泵，柱
温箱，PDA检测器）；α-三联噻吩和 5-(丁烯-3炔-1)
-2，2’联噻吩由本试验室自制（经 HPLC 法测定含量
均大于 98.5%)；甲醇为 Fisher色谱纯，其他试剂均为
分析纯，水为二蒸水。
2. 药材来源
实验所用药材经北京中医药大学王文全教授鉴
禹州漏芦药材中 α-三联噻吩和
5-(丁烯-3炔-1)-2，2’联噻吩的含量分析研究＊
□刘永刚 董 玲 刘 勇 何瑞杰
戴 玮 程 媛 王春国 马 群＊＊
（北京中医药大学中药学院 北京 100102）
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定为蓝刺头（Echinops latifolius Tausch.）的地下部分。
药材产地分别为河南省辉县，内蒙古四子王旗和山
西省太白县。
二、方法与结果
1. 色谱条件
色谱柱为 Agilent SB-C18 色谱柱；甲醇-0.1%的
醋酸水溶液（80 ∶20）为流动相；检测波长 352nm；柱
温：30℃；流速：0.8mL·min-1；理论板数按 α-三联噻吩
和 5-(丁烯-3 炔-1)-2，2’联噻吩峰计算应不低于
2000。
2. 对照品溶液的制备
精密称取经干燥的 α-三联噻吩和 5-（丁烯-
3 炔-1）-2，2’联噻吩对照品适量，加甲醇制成每
1mL 含 0.057mg 和 0.069mg 的溶液，即得。色谱图
见图 1。
3. 供试品溶液的制备
禹州漏芦粉末（过四号筛）约 0.25g，精密称定，置具塞锥形
瓶中，精密加入甲醇 10mL，密塞，称定重量，超声处理 30min，再
称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
色谱图见图 2。
4. 线性范围的考察
精密称取 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩和 α-三联噻吩对
照品适量，分别加甲醇制成每 1mL含 0.069mg 和 0.057mg 的溶
液。分别取 3、6、9、12、15μL注入液相色谱仪测定。分别以进样
量为横坐标，以峰面积值为纵坐标作图，各得一条近似通过原点
的直线，5-（丁烯-3 炔-1） 联噻吩回归方程为 Y=16797206X-
16670.6，r =0.9999，α -三联噻吩回归方程为 Y =11577621X -
17603.2，r=0.9999。结果表明 5-(丁烯-3炔-1)-2,2’联噻吩进样
量在 0.207～1.035μg 之间、α-三联噻吩进样量在 0.171～0.855μg
之间，进样量与峰面积值呈良好的线性关系。线性曲线见图 3。
5. 精密度试验
精密吸取 α-三联噻吩和 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩对
照品溶液 10μL，重复进样 6次，每次 10μL，计算相对标准偏差，
5-（丁烯-3 炔-1）-2,2’联噻吩和 α-三联噻吩的 RSD 分别为
0.216%和 0.417%。结果表明仪器精密度良好。
6. 重复性试验
取河南省辉县漏芦 6份，每份 0.25g，精密称定，按上述方法
制备供试品溶液，测定禹州漏芦中 α-三联噻吩的含量。药材中
α-三联噻吩和 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩的平均含量分别
为 0.253%和 0.365%，RSD分别为 2.797%和 2.807%。
7. 稳定性试验
分别取放置 0、2、4、6、8h的供试品溶液，测定漏芦中 5-（丁
烯-3 炔-1）-2，2’联噻吩和 α-三联噻吩的含量，以考察其稳定
性。结果 RSD值分别为 0.174%和 1.074%，表明供试品溶液在 8h
内基本稳定。
8. 加样回收率试验
精密称取河南省辉县产地禹州漏芦 6份，每份约 0.125g，分别
精密加入对照品适量，按照样品含量测定项下的方法进行处理并
测定，结果见表 1和表 2。
图 2 禹州漏芦药材 HPLC色谱图
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9. 含量测定
取不同产地（河南省辉县，内蒙古四子王旗和山
西省太白县）禹州漏芦药材各 2 份，精密称定，按上
述方法制备供试品溶液，分别吸取 10μL，注入液相色
谱仪，测定峰面积并计算 α-三联噻吩的含量分别为
0.261%、0.277%、0.178%；5-（丁烯-3 炔-1）-2，2’联
噻吩的含量分别为 0.399%、0.469%、0.659%。
三、讨 论
在国内文献报道中，关于三联噻吩含量的测定方
法报道较少，采用的方法大多为荧光分光光度法[8~10]。
2010 年药典中用 HPLC 法测定了禹州漏芦中 α-三
联噻吩的含量 [1]。本实验建立了禹州漏芦中 α-三联
噻和 5-（丁烯-3 炔-1）-2，2’联噻吩的含量测定方
法，该方法方便、快捷、可靠。本含量测定方法对制定
禹州漏芦药材质量标准具有参考价值。本课题测定
了不同产地药材中 α-三联噻和 5-（丁烯-3 炔-1）-
2，2’联噻吩的含量，结果表明，不同产地禹州漏芦中
α-三联噻和 5-（丁烯-3 炔-1）-2，2’联噻吩含量存
在一定差异，内蒙古四子王旗产地的禹州漏芦中 α-
三联噻含量最高，山西省太白县产地含量较低；而 5-
（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩含量山西省太白县含量
最高，河南省辉县最低。
2010 版《中国药典》中，禹州漏芦的质量标准只
测定了 α-三联噻的含量，而课题组对禹州漏芦的系
统分离中发现，禹州漏芦中富含噻吩类化合物，并且
α-三联噻在噻吩类化合物中含量低于 5-（丁烯-3
炔-1）-2，2’联噻吩，故本课题尝试用 α-三联噻和 5-
（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩双指标来评价禹州漏芦
的质量，该方法是对禹州漏芦药材质量控制的有益
补充和新的尝试。
参考文献
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图 3 5-（丁烯-3炔-1）-2，2’联噻吩
和 α-三联噻吩线性曲线图
表 1 5-(丁烯-3炔-1)-2，2联噻吩加样回收率测定结果
序号
5-(丁烯-3
炔-1)-2，2
联噻吩
含量
（mg）
5-(丁烯-3
炔-1)-2，2
联噻吩含量
（加入量）
（mg）
测得量
（mg）
加样
回收率
（%）
平均值
（%）
RSD
（%）
1 0.4563 0.45 0.9176 102.52
2 0.4563 0.45 0.9052 99.76
3 0.4563 0.45 0.9182 102.64 101.12 1.48
4 0.4563 0.45 0.9106 100.96
5 0.4563 0.45 0.9018 99.00
6 0.4563 0.45 0.9146 101.84
表2 α-三联噻吩加样回收率测定结果
序号
α-三联
噻吩
（mg）
α-三联
噻吩
（加入量）
（mg）
测得量
（mg）
加样
回收率
（%）
平均值
（%）
RSD
（%）
1 0.3163 0.32 0.6323 98.77
2 0.3163 0.32 0.6324 98.78
3 0.3163 0.32 0.6319 98.63 98.21 1.27
4 0.3163 0.32 0.6287 97.63
5 0.3163 0.32 0.6347 99.50
6 0.3163 0.32 0.6234 95.97
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（责任编辑：李沙沙，责任译审：王 晶）
Determination of α-Terthienyl and 5-(3-buten-1-ynyl)-2,2′-bithiophene
in Echinops Latifolius Tausch. by HPLC
Liu Yonggang, Dong Ling, Liu Yong, He Ruijie, Dai Wei, Chen Yuan, Wang Chunguo, Ma Qun
(Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100102, China)
Abstract: This study aimed to develop an HPLC method for the determination of α-terthienyl and 5-(3-buten-1-
ynyl)-2,2′-bithiophene in roots of Echinops latifolius Tausch. Separation was performed on an Agilent Extend C18
column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) using methanol-water containing 0.1% acetic acid (80 ∶ 20) as the mobile phase.
The flow rate was 0.8 mL·min-1. The detection wavelength was 352 nm. And the temperature of column was 30℃.
Results showed that in HPLC method, the calibration curve for α-terthienyl and 5-(3-buten-1-ynyl)-2,2′-bithio-
phene were linear in ranges of 0.171-0.855 μg (r=0.9999) and 0.207-1.035 μg (r=0.9999). The average recovery
for α-terthienyl and 5-(3-buten-1-ynyl)-2,2′-bithiophene were 98.2% and 101.1%. And the RSD were 1.27%
and 1.48% (n=6), respectively. It is concluded that the method is convenient, precise and reliable for the determi -
nation of α-terthienyl and 5-(3-buten-1-ynyl)-2,2′-bithiophene in Echinops latifolius Tausch.
Key words: Echinops latifolius Tausch., α-terthienyl, 5-(3-buten-1-ynyl)-2,2′-bithiophene, HPLC
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