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辣木油对家兔皮肤创伤的保护作用



全 文 :天然产物研究与开发 NatProdResDev2011, 23:159-162
文章编号:1001-6880(2011)01-0159-04
 
 
 收稿日期:2009-07-10   接受日期:2010-07-06
 基金项目:“十一五 ”国家科技支撑计划项目(2006BAD18B04);林
业公益性行业科研专项项目(200704007)
*通讯作者 Tel:86-871-3860033;E-mail:qiongfend@hotmail.com
辣木油对家兔皮肤创伤的保护作用
段琼芬 1* ,李 钦 3 ,林 青 2 ,段小花 2 ,杨 莲 2 ,张重权 1 ,马李一 1 ,王有琼1
1中国林业科学研究院资源昆虫研究所 , 昆明 650224;2云南中医学院药理学教研室 , 昆明 650200;
3云南省中医中药研究院 , 昆明 650223
摘 要:观察辣木油对家兔皮肤创伤愈合的影响。取健康大耳白兔 18只 , 随机分为空白对照组 、京万红组和辣
木油组 , 将背部左右侧各切取直径 2.35 cm大小的皮肤 ,深及皮下筋膜 , 造成创伤模型 ,每天涂药 1次 , 测定创面
面积 , 计算愈合率和愈合时间;于术后的第 3 d、7 d、 10 d, 切取涂药部位和空白未涂药部位皮肤全层 , 制片 , 作
HE染色后镜下观察创面组织形态学的改变并进行皮肤病变程度的分级。结果显示辣木油可加速创面愈合 ,缩
短愈合时 , 减轻组织的病理变化。提示了辣木油能够促进家兔皮肤创伤的愈合。
关键词:辣木油;家兔;皮肤;创面;愈合
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
ProtectionEfectofMoringaOilonSkinInjuryofRabbit
DUANQiong-fen1* , LIQin3 , LINQing2 , DUANXiao-hua2 , YANGLian2 ,
ZNANGZhong-quan1 , MALi-yi1 , WANGYou-qiong1
1InstituteofResourceInsects, ChineseAcademyofForestry, Kunming650224 , China;
2YunnanCollegeofTraditionalChineseMedicine, Kunming650200 , China;
3YunnanInstituteofChineseMedicine, Kunming650223, China
Abstract:ToinvestigatetheprotectionefectofexternaluseofMoringaoilonskininjuryofrabbit, 18 rabbitswereran-
domlydividedinto3 groupsasnegativecontrol, Jinwanhongoiltreatment, andMoringaoiltreatment.Apieceofskin
deeptosubcutaneousfasciawithadiameterof2.35 cmwascutonbothsideofthebackoftherabbitstoconstructthe
woundmodel, thenthewoundweretreatedwiththeoileveryday, andthewoundareawasmeasuredtodeterminethe
healingratandthehealingtime;thewholedermaofthewoundskinwascutafter3d, 7d, and10d, dyedbyHEandob-
servedwithmicroscopetodeterminethecorrespondingpathogenicdegree.TheresultsshowedthatexternaluseofMorin-
gaoilcanacceleratewoundhealing, shortenhealingtime, andaleviatingpathogenicchangeswhichremindthatMoringa
oilcanpromoterabbitskinwoundsrestorationandhealing.
Keywords:Moringaoil;rabbit;skin;wound;healing
  辣木油是从辣木科(Moringaceae)辣木属(Mor-
ingaAdans.)辣木(MoringaoleiferaLam.)[ 1]种子中
提取出来的珍贵植物油 ,具有扩张血管 、抗真菌 、抗
发炎等多种功效 [ 2-5] ,广泛应用在食品 、化妆品和医
药等方面。实际应用中发现的 ,用辣木油外擦可以
治疗人体皮肤损伤 ,缩短创面的愈合时间 ,减轻伤口
感染 ,消肿止痛 ,但未检索到相关的研究报道 。因
此 ,本试验选用与临床创伤修复和愈合过程基本一
致的家兔背部皮肤全层缺损伤模型[ 6] ,就辣木油对
促进家兔皮肤创伤愈合的作用进行了研究。
1 材料与方法
1.1 动物
新西兰大耳白兔 18只 ,雌雄各半 ,体重 2.0 ~
2.5 kg,购自四川省医学科学院实验动物研究所 ,动
物质量合格证编号:SCXK(川)2004-18。
1.2 药品与试剂
辣木油试样的制备:取云南元江产辣木籽
(seedsofMoringaoleiferaLam)2500 g,经挑选除杂
后用小锤破壳取仁 ,用自制小型液压机压榨得油与
油饼 ,将油饼重复压榨 2次后收存 。合并粗油 ,过滤
除去残渣 ,得深棕色清亮的粗制辣木油将粗制辣木
油经脱色处理得供试油样 ,油样质量为 500 g,浅黄
DOI :10.16333/j.1001-6880.2011.01.009
色 ,凝固点 16 ℃,密度(24 ℃)0.9223 mg/mL;京万
红膏:天津达仁堂达二药业有限公司生产 , 批号
211516;碘伏:昆明天亘消毒制品有限公司生产 ,批
号 20070119。
1.3 试验方法
1.3.1 分组
将 18只大耳白兔随机分成 3组 ,分别是空白对照
组 、京万红组和辣木油组 ,每组 6只 ,单笼常规饲养。
1.3.2 造模
参考文献方法 [ 7] ,用 8%硫化钠将家兔背部脱
毛 ,暴露出约 12 cm×10 cm的皮肤 , 2 d后用 10 %
水合氯醛麻醉并用碘酒 、酒精消毒 ,避开肩胛骨和髂
骨 ,在距脊柱 2cm的左右两侧 ,由前到后分别做左
1、左 2、右 1、右 2共 4个直径约为 2.35 cm的圆形
创面 ,切除创面全层皮肤至浅筋膜组织。
1.3.3 给药
空白组按 0.3 g/wound给予医用凡士林;京万
红组按 0.3 g/wound给予京万红软膏;辣木油组按
0.3g/wound给予辣木油。自手术日起 , 按以上剂
量将药物均匀涂于创面 ,用消毒凡士林油纱布覆盖
并用无菌干纱布包扎 ,以后每天换药 1次 ,直至创面
愈合。
1.3.4 创面愈合情况观察
参考文献方法 [ 8] ,肉眼观察创面的愈合情况 ,
观察指标为:渗出物量的多少 、创缘皮肤收缩 、结痂
和皮肤颜色的变化。
1.3.5 创面愈合率及愈合时间的测定
在术后的第 3、6、10、13d,采用描计称重法测量
面积 ,即用透明薄膜覆盖创面 ,沿创面边缘作标记 ,
画出所需面积范围并剪下 ,用分度值为 0.1 mg的分
析天平称质量并以质量代替面积 ,按创面愈合率 =
(原始创面面积 -未愈合创面面积 )/原始创面面
积 ,计算创面愈合率。以 95%的创面愈合率为愈合
时间的标准 ,记录每个创面的愈合时间。
1.3.6 创伤组织病变程度分级检验
参考文献方法 [ 9]进行分级。组织切片方法:于
术后的第 3、7、10 d,切取创面组织 ,经 10%中性福
尔马林固定 ,脱水 、包埋制成石蜡切片 ,切片厚度为
20 μm,作 HE染色 。镜下病变程度分级:显微镜下
观察切片的病理学改变情况 ,将病变程度分为 4级 ,
记为:– 、 +、++、 +++,其中 “– ”为表皮再生 >
75%,其余创面被新生的肉芽组织所修复 ,少量炎细
胞浸润 ,可见较多胶原纤维;“ +”为表皮再生 50%
~ 75%,可见大量肉芽组织 ,但肉芽组织尚未将创面
填平 ,较多炎细胞浸润 ,无坏死 ,可见少量胶原纤维;
“ ++”为表皮再生 25% ~ 49%,可见较多肉芽组
织 ,大量炎细胞浸润 ,少量出血 ,无坏死 ,偶见少量胶
原纤维;“ +++”为表皮再生 <25%,伴大量出血 、
坏死 ,甚至化脓 ,未见肉芽组织及胶原纤维。
1.4 数据处理
采用 SPSS13.0统计软件对试验数据进行单因
素方差分析以及 Dunnet-t两两比较 ,对等级数据进
行 Ridit检验 , P<0.05时为差异显著;P<0.01时
为差异非常显著。
2 结果与分析
2.1 家兔皮肤创面的愈合情况
肉眼观察到各组动物在术后的第 1 d和第 2 d,
所有动物的创面基本上都有渗出液 ,伤口未开始愈
合。术后第 3d,空白组 6只动物中有 2只的渗出液
基本消失 ,并开始结痂 ,其余创缘皮肤收缩不明显 , 2
只伤口开始出现少许红晕;京万红组全部创面的渗
出液基本消失 ,创缘皮肤开始收缩 ,并开始结痂 ,其
中 5只伤口开始出现少许红晕;辣木油组 6只动物
中有 5只的渗出液基本消失 ,创缘皮肤开始收缩 ,并
开始结痂 ,有 4只伤口开始出现少许红晕。术后第
7d,空白组仍有 3只创面湿润 ,有渗出物 ,伤口收缩
不明显 ,未见明显的新生上皮;京万红组与辣木油组
的创面干燥 、无感染 ,创缘皮肤收缩明显 。术后第
14d,空白组创面修复欠佳 ,仍有 4只未愈合 ,京万
红组创面基本愈合 ,辣木油组有 2只未愈合 。
试验结果显示 ,辣木油能有效促进家兔皮肤创
面的愈合 ,防止伤口感染 ,功效与京万红相似 。
2.2 创面愈合率和创面愈合时间
在 1.3.2节所述的 4个创面中 ,其中 “左 1”创
面被用来测量面积 ,剩下的 “左 2”等 3个创面则用
于后面试验所需的病理取材(所有组均按此顺序操
作)。当给药剂量为 0.3 g/wound时 ,测得各组试验
动物的创面愈合率测的平均值 、创面愈合时间的总
平均值见表 1。
  表 1结果显示 ,辣木油组家兔的创面愈合率在
术后第 3 d时 ,与空白对照组相比差异非常显著(P
<0.01),表明辣木油对家兔皮肤创伤有非常明显
的修复作用 ,能够促进创面的愈合 ,且见效比京万红
快 ,但第 3 d后的影响不再有统计学意义 ,说明当用
辣木油来治疗家兔皮肤的机械创伤时 ,应在伤后前
3d内抓紧治疗 。而京万红的药效则比辣木油的缓
慢一些 ,一直到了第 10 d时才有很明显的效果(P<
160 天然产物研究与开发                      Vol.23
表 1 辣木油对家兔皮肤创面愈合率和愈合时间的影响(x±s, n=6)
Table1 Efectsofmoringaoilonskinwoundhealingrateandhealingtimeofrabbit(x±s, n=6)
组别 Group 创面愈合率 Woundhealingrate/%
创面愈合时间
Woundhealing(time/d)
3d 6d 10d 13d
空白对照组 controlgroup 11.5±6.0 16.70±12.67 41.03±14.31 75.18±11.55 16.50±2.07
京万红组 jingwanghonggroup 17.0±9.36 24.60±13.73 57.75±7.52** 91.13±4.74* 13.67±1.21*
辣木油组moringaoilgroup 2.0±13.34** 26.14±8.21 48.02±10.27 79.79±14.10 14.83±1.47*
  注:与空白组比较 , *P<0.05, **P<0.01。*P<0.05, ** P<0.01vscontrolgroup
0.01),但与辣木油不同的是 ,从第 10d后一直到第
13 d,它对创面的愈合率仍然有影响 ,仍然能明显地
促进创口的愈合 ,总的效果显得更好些。此外 ,若将
表 1中各组动物总创面愈合时间的平均值进行成对
比较的话 ,则可知道辣木油组和京万红组与空白对
照组相比具有明显的差异(P=0.031;P=0.013),
说明两者均对家兔皮肤机械损伤的创面愈合具有明
显的促进作用 ,而辣木油组和京万红组之间的差异
则无统计学意义(P=0.135),说明辣木油的药效与
京万红相近 。
2.3 创伤组织病变程度分级检验
镜下观察到施行手术以后 ,各组动物的伤口均
有局部上皮缺损 ,形成深达真皮层的溃疡 ,伴大量出
血 、坏死 ,甚至化脓 ,未见肉芽组织明显增生 ,其中以
空白组炎症最重 , 化脓最为明显 (空白组 control
group、京万红组 jingwanghonggroup、辣木油组 morin-
gaoilgroup:图 1a~c)。术后第 7 d,空白组上皮细
胞增生不明显 ,出血较前明显减少 , 仍可见大量坏
死 、脓肿及炎细胞浸润 ,可见少量肉芽组织 ,未见胶
原纤维(空白组 controlgroup图 1 d);京万红组上
皮细胞增生明显 ,创面未见明显出血 、坏死 ,炎细胞
浸润较前减少 ,可见较多肉芽组织及少量胶原纤维
(京万红组 jingwanghonggroup图 1e);辣木油组上
皮细胞增生明显 ,创面仍有较多量的出血及少量坏
死 ,炎细胞浸润比空白组少比京万红组多 ,可见较多
肉芽组织 ,偶见少量胶原纤维(辣木油组 moringaoil
group图 1f)。术后第 10 d,空白组上皮细胞增生明
显 ,创面出血 ,坏死 、脓肿较前减少 ,仍有大量炎细胞
浸润 ,可见少量肉芽组织和胶原纤维(空白组 control
group图 1 g);京万红组创面修复明显 ,少量炎细胞
浸润 ,从伤口底部及边缘长出的肉芽组织已填平伤
口 , 胶原纤维形成较多 (京万红组 jingwanghong
group图 1h);辣木油组炎细胞浸润比空白组少比
京万红组多 ,从伤口底部及边缘长出的肉芽组织已
填平大部分伤口 , 胶原纤维形成较多 (辣木油组
moringaoilgroup图 1i)。
图 1 家免皮肤创面组织切片
Fig.1 Sliceofaskininjuriestissueofrabbit
  将 6份病理试样按照 1.4.6节皮肤组织病变程
度的分级方法来分级 ,得出了不同时间内不同级别
的组织病变分级数据记录于表 2中 ,分析各组病变
程度在各个阶段的统计学差异性 ,从病理学的角度
来观察创面愈合过程中的病理变化趋势。
  由表 2可见 ,随着时间的推移 ,所有组别的动物
都有减轻创伤病理变化的趋势 ,京万红组及辣木油
组在第 7天减轻病理变化的趋势与空白组比较均有
显著性的区别(P<0.05),说明辣木油与京万红一
样 ,都具有抑制创伤组织病理变化的功效 ,而且在所
有的试验时间范围内 ,两者的药效都没有显著性的
区别(P>0.05),提示了辣木油可以用来治疗皮肤
创伤 。
161Vol.23       段琼芬等:辣木油对家兔皮肤创伤的保护作用  
表 2 家兔皮肤创伤组织病变程度的分级(n=6)
Table2 Gradeforpathologyofskininjuriestissueofrabbit(n=6)
组别
Group
3d 7d 10d
分 级 Grade
– + ++ +++ – + ++ +++ – + ++ +++
空白对照组controlgroup 0 0 1 5 0 0 4 2 0 2 4 0
京万红组 jingwanghonggroup 0 0 2 4 0 4 2 0* 3 2 1 0
辣木油组moringaoilgroup 0 0 2 4 0 2 4 0* 2 2 2 0
  注:与空白组比较:*P<0.05, *P<0.05。Note:*P<0.05, *P<0.05vscontrolgroup
3 讨论
  创伤修复期表皮的生长 、伤口的收缩对创面的
愈合起着非常重要的作用 ,伤口收缩既能减少感染
的机会 ,又能使机体用少量的组织就能修复伤口 ,同
时 ,肉芽组织在创伤修复过程中起抗感染及保护创
面 、清除凝血块及坏死组织 、填补伤口等作用 ,因此 ,
有无健康肉芽组织生长是伤口愈合的关键 ,另一方
面 ,胶原纤维的增生也是影响创面愈合的重要因
素 [ 10] 。
本试验观察到辣木油能促进伤口边缘组织的收
缩及创面坏死组织和异物的清除 ,促进创面炎性渗
出物吸收 ,提高创面愈合率 ,加速创面愈合 。同时镜
下观察还发现 ,在辣木油涂药部位皮肤组织内 ,炎性
细胞减少 、上皮细胞增生明显 、肉芽组织与胶原纤维
的生长均明显优于空白组未涂药部位 ,统计学处理
结果亦显示出二者间有显著性的差异 ,其上皮细胞
增生 、肉芽组织数量增多与胶原纤维数量增加呈正
相关性 ,这说明辣木油的药效作用与上皮细胞 、肉芽
组织和胶原纤维的参与密切相关。
实验中 ,辣木油在第 3 d时对促进创面愈合具
有很好的作用 ,能明显降低创伤所致的皮肤炎性反
应 ,对皮肤具有保护作用 ,但延时给药不能明显缩小
创面的炎性面积 ,说明创伤在早期就可能已经形成
了某种致炎物质 ,并产生了损伤 ,延时给药对已形成
的损伤无治疗作用 ,可能对已形成的致损伤物质无
明显的拮抗作用 ,故给药未能明显降低炎性面积 ,提
示了辣木油用于皮肤损伤的治疗时应及早给药 。
结论:辣木油外用能促进家兔皮肤创面的愈合 ,
对家兔皮肤机械损伤有明显的保护作用 ,其机制可
能与促进伤口边缘组织的收缩 、创面坏死组织和异
物的清除 ,加速肉芽组织的生长 ,胶原纤维的增生形
成瘢痕 ,保护伤口 ,防止感染等有关。
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