全 文 :漏芦提取物对病毒性心肌炎心肌细胞的
抗氧化作用观察
宋 伟
(延边大学附属医院 ,吉林延吉 133000)
[摘要 ] 将心肌细胞分五组 , 病毒对照组及漏芦大 、中 、小剂量治疗组接种柯萨奇 B3病毒制作病毒性心肌炎
模型 , 分别加入正常或含 5、2.5、1 mg生药 /ml的漏芦提取物的生长液 , 正常对照组加等量正生长液。分别检测各
组丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果病毒对照组较正常对照组 MDA增高 , 而 SOD活性降
低;祁州漏芦治疗组明显降低被感染细胞内 MDA含量 , 升高 SOD活性 , 且呈剂量依赖性。认为漏芦提取物通过其
抗氧化作用保护心肌。
[关键词 ] 柯萨奇病毒 B;心肌炎;漏芦
[中图分类号 ] R542.2 [文献标识码 ] B [文章编号 ] 1002-266X(2008)48-0045-02
漏芦为菊科多年生草本植物 ,有清热解毒 、消痈
散结功效[ 1] 。 2006年 8 ~ 12月 ,我们观察了祁州漏
芦提取物对感染柯萨奇 B3病毒大鼠心肌细胞的抗
氧化作用 ,现探讨其治疗病毒性心肌炎的可行性。
1 材料与试剂
1.1 材料 出生 2 ~ 3 d的 SD大鼠乳鼠;柯萨奇
B3病毒亲心肌病毒株(白求恩医科大学细胞生物学
教研室);漏芦的水提取物(1ml提取物相当于 5 mg
生药);超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试
剂盒(北京亚东生物工程研究所);心肌细胞培养液
为含 20g/L小牛血清和青霉素 、链霉素各 100U/ml
的 RPMI-1640(华美公司)。
1.2 方法
1.2.1 心肌细胞培养 将 SD大鼠处死取出心脏 ,
将心室肌剪成直径 <1 mm的组织块 ,加入 50倍体
积的 0.5g/L胰蛋白酶 , 4℃冰箱内消化 24h,将消化
好的心肌细胞悬液分装于 12孔培养板(4×105 /孔),
32℃、5% CO2培养箱内培养 ,每 48 h换液 1次。
1.2.2 分组与用药 将心肌细胞分五组 ,病毒对照
组及漏芦大 、中 、小剂量治疗组加入 0.1 ml/孔 103
TCID50柯萨奇 B3病毒生长液 ,正常对照组加等量生
长液 ,培养箱中孵育 1 h后弃上清液 ,分别加入正常
或含 5、2.5、1 mg生药 /ml的漏芦提取物的生长液 ,
2 ml/孔 ,培养箱培养 7 h, 分别收集细胞离心 10
min,取上清液 ,用 722型分光光度计分别检测各组
MDA水平及 SOD活性 ,重复 3次 [ 2] 。
1.2.2 统计学方法 采用 SPSS11.0软件处理 。数
据以 x±s表示 ,两组间比较均采用 t检验。检验水
准 α=0.05。
2 结果
各组心肌细胞 MDA水平和 SOD活性比较见表
1。
表 1 各组心肌细胞 MDA水平和 SOD活性比较( x±s)
组别 MDA(mmol/g) SOD(mU/L)
漏芦大剂量组 0.22±0.01*# 16.32±2.01*#
漏芦中剂量组 0.25±0.01 13.22±2.36
漏芦小剂量组 0.27±0.01 11.94±2.10
病毒对照组 0.31±0.01 9.28±2.38
正常对照组 0.21±0.02* 21.36±2.64*
注:与病毒对照组比较 , *P﹤ 0.01;与漏芦小剂量组比较 ,
#P﹤ 0.01
3 讨论
病毒性心肌炎是由嗜心性病毒感染引起的 ,以
心肌非特异性间质性炎症为主要病变。心肌细胞受
病毒感染时 ,会产生大量自由基 、单线态氧和过氧化
氢 ,心肌细胞的脂类 ,特别是脂膜在氧自由基作用
下 ,磷脂中的不饱和脂肪酸易发生脂质过氧化反应 ,
破坏心肌细胞膜 ,使具有膜结构的内质网 、肌质网 、
溶酶体 、线粒体等亚细胞结构破坏 ,导致心肌功能下
降[ 1] 。同时 ,产生对细胞有毒性的物质如 MDA,亦
加重了心肌细胞的损伤 。本研究病毒对照组较正常
对照组 MDA增高 ,而 SOD活性降低 ,提示氧化作用
是心肌细胞损伤的重要原因 [ 2] 。
早在 《神农本草经》中就有漏芦可 “轻身益气 ,
耳聪目明 ,不老延年 ”的记载 ,现代资料表明 ,漏芦
水煎剂能抑制大鼠肝 、脑 、心 、肾过氧化脂质生成 ,有
效清除超氧阴离子自由基 ,对抗光卟啉的光氧化作
用。其抗自由基诱导的过氧化作用可减轻自由基对
生物膜的损伤 。本研究漏芦提取物降低了受病毒感
染的心肌细胞内 MDA含量 ,提高了 SOD活性 ,且随
剂量增加差异越显著。此可能与漏芦提取物能对抗
光卟啉的光氧化作用 ,有效清除单线态氧 , 增强
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SOD活性有关 。
总之 ,漏芦提取物对病毒性心肌炎的心肌细胞
具有维持脂膜稳定性 、维持细胞结构与功能的作用 ,
对心肌细胞具有保护作用 ,可为临床应用漏芦治疗
病毒性心肌炎提供一定的理论基础。
[参考文献 ]
[ 1] 高学敏.中药学 [ M].北京:人民卫生出版社 , 2000:549-552.
[ 2] 曹红子.玄延花.张成镐 ,等.草苁蓉提取物对感染柯萨奇 B3病
毒的大鼠心肌细胞抗氧化作用的影响 [ J] .延边大学医学学报 ,
2001, 24(3):182-185. (收稿日期:2008-09-23)
·经验交流·
超声乳化白内障吸除术联合人工晶状体植入术治疗急性
闭角型青光眼合并白内障 27例疗效观察
丁明红 ,王金平
(莒县人民医院 ,山东莒县 276500)
2004年 7月 ~ 2008年 5月 ,我们对 27例闭角型青光眼
合并白内障患者行单纯超声乳化白内障吸除联合后房型折
叠式人工晶体植入术 ,效果满意。现报告如下。
临床资料:本组 27例(27眼)闭角型青光眼患者 , 男 6
例 , 女 21例;年龄 55 ~ 78岁 , 平均 65.4岁;原发性急性闭角
性青光眼 20例 ,原发性慢性闭角性青光眼 3例;白内障膨胀
期继发性闭角性青光眼 4例;视力为指数 ~ 0.3。 均有不同
程度晶状体混浊 , 按 LocsⅡ分级法 , Ⅱ级核 11眼 , Ⅲ级核 10
眼 , Ⅳ级核 6眼。
方法:①术前准备:均予降眼压药物 ,包括缩瞳剂(1%毛
果芸香碱滴眼液)、β 受体阻滞剂(0.5%噻吗洛尔滴眼液)、
碳酸酐酶抑制剂(醋甲唑胺片 、布啉左胺滴眼液)和高渗剂
(20%甘露醇注射液), 将术前眼压控制在 35 mmHg以内。
术前 1 h用美多丽(托吡卡胺 /盐酸去氧肾上腺素)滴眼 , 1
次 /10 min, 共 4次。 术前 30 min静滴 20%甘露醇注射液
250ml。 ②手术方法:均予单纯超声乳化白内障吸除联合后
房型折叠式人工晶体植入术:0.4%盐酸奥布卡因滴眼液表
面麻醉 , 上方作一穹隆部为基底的结膜瓣 , 角膜缘后 2 mm
作巩膜隧道切口 , 分离至透明角膜内约 1 mm处穿刺入前
房 , 前房内注入玻璃酸钠 , 3点位透明角膜缘作辅助切口 , 行
直径 5 ~ 6mm连续环行撕囊 ,水分离及水分层充分 , 超声乳
化晶体核 , 清除残留皮质 ,囊袋内植入人工晶体 ,卡米可林缩
瞳 , 玻璃酸钠注吸针头轻压虹膜根部 , 360°钝性分离房角 , 吸
出前房内玻璃酸钠 , 水封闭巩膜隧道切口。球结膜下注射庆
大霉素 2万 U+地塞米松 2.5 mg, 术毕包扎单眼。 ③术后处
理:0.1%双氯芬酸钠滴眼液滴眼 4次 /d,妥布霉素地塞米松
滴眼液滴眼 6次 /d, 均连用 2 ~ 4周。 有膜性渗出者予球结
膜下注射庆大霉素 2万 U+地塞米松 2.5 mg, 1次 /d, 3 ~ 5
d。 0.5%托吡卡胺滴眼液散瞳 , 早晨 1次。观察术后视力 、
眼压 、周边前房深度(PAC)、房角开放及术后并发症情况。
随访时间为 3 ~ 12个月 , 平均 5.6个月。统计学处理采用
SPSS10.0软件 , 行 t检验和 χ2检验 ,检验水准 α=0.05。
结果:① 眼压:术前及术后 1个月分别为(28.78 ±
4.55)、(15.88±2.06)mmHg, t=17.925, P<0.05。 ②PAC:
术前 PAC<1/4 CT19眼 、 1/4 CT8眼 , 术后均≥ 1 CT, t=
10.35, P<0.05。 ③房角:术前房角关闭粘连范围﹤ 90°5
眼 、90°~ 180°14眼 、180°~ 270°8眼 , 术后房角全部开放 13
眼 ,﹤ 90°9 眼 、 90°~ 180°6 眼。 ④ 视 力:术后 22 眼
(81.48%)最佳矫正视力提高 2行以上 , 5眼(18.52%)最佳
矫正视力未提高。 ⑤并发症:术中均未发生后囊膜破裂 、玻
璃体脱出;术后 6眼出现轻度角膜水肿或后弹力层皱褶 , 经
3 ~ 5 d保守治疗角膜均恢复透明。
讨论:原发性闭角型青光眼患者多为老年人 , 常伴有不
同程度的白内障 , 在治疗时若将降眼压和增视手术一次完
成 ,可免除二次手术痛苦 。闭角型青光眼发生是因眼前段解
剖结构异常 ,使虹膜贴向小梁网 ,导致房水流出道关闭 , 眼压
升高 ,其房角关闭可由反复瞳孔阻滞引起 , 晶体是引起瞳孔
阻滞的最重要因素。本病患者眼前段空间较狭窄 , 常有浅前
房 ,房角狭窄且晶状体相对较厚 ,位置相对靠前 , 且随年龄增
长晶状体厚度增加 , 前房更浅 ,瞳孔阻滞进一步加重。晶体
前后径增加是原发性闭角型青光眼的潜在始动因素 , 解除晶
体因素影响可从发病机制上有效阻止闭角型青光眼发生。
白内障超声乳化吸除联合人工晶体植入术以不足 1.0
mm厚的人工晶体替代 5.5 mm厚的人眼晶状体 , 术后中央
及周边前房深度可明显加深 , 使瞳孔缘与晶体接触平面后
移 ,从而解除瞳孔阻滞状态。白内障摘除术除可通过解除瞳
孔阻滞降低眼压外 , Handa等认为 , 人工晶体植入术后可拉
紧晶体悬韧带 、牵拉小梁网孔 ,从而增加房水流出量。术中
切口密闭 ,可形成高灌注压对房角的冲击;使用玻璃酸钠进
行虹膜根部 360°钝性分离 , 使粘连的房角再度开放或粘连
减少。注吸手柄注吸头对虹膜行瞳孔缘中央方向抽吸 , 一方
面通过机械作用解除虹膜后粘连 , 另一方面房水中将有一些
炎性介质释放 ,如白细胞介素-1、前列腺素等 ,这些介质可促
进小梁网细胞外基质降解 , 因此可增加房水流出。另外超声
波震荡及术后炎症刺激可引起睫状体分泌功能下降 , 致房水
分泌减少。
本组 27例术后眼压明显降低 , 前房明显加深 , 房角不同
程度开放 ,部分小梁网功能恢复 ,且视力不同程度提高 , 近期
效果满意。综上所述 ,晶状体白内障超声乳化吸除联合人工
晶体植入术治疗合并白内障的闭角性青光眼安全 、有效 , 且
并发症少 ,术后视力恢复快。但本组观察时间短 ,例数少 ,手
术效果及降压机制需进一步探讨。 (收稿日期:2008-10-11)
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