全 文 ：　 　２０１３，Ｖｏｌ．３０Ｎｏ．８化学与生物工程
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
５０
收稿日期：２０１３－０５－２９
作者简介：张余杰（１９８４－），男，河南柘城人，硕士研究生，主要从事植物源农药研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｕｊｉｅ８４０７０４＠１２６．ｃｏｍ；通讯作者：
秦小萍，副教授，Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｘｐ９９＠１６３．ｃｏｍ。
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１３．０８．０１３
肿柄菊粗提物对线虫毒杀活性的研究
张余杰１，刘志华２，张　亚３，秦小萍１，何金玲１
（１．云南农业大学植物保护学院，云南 昆明６５０２０１；２．河南省濮阳县农业局，河南 濮阳４５７１００；
３．湖南农业大学生物安全科技学院，湖南 长沙４１０１２８）
摘　要：为评价肿柄菊粗提物毒杀线虫的潜力，利用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷浸泡粉碎的肿柄菊枝叶混合物，经
旋转蒸发获得粗提物，通过浸渍法检测了不同粗提物的毒杀线虫活性。结果表明：当浓度为１０ｍｇ·ｍＬ－１时，石油醚、
乙酸乙酯和二氯甲烷粗提物２４～７２ｈ内对线虫的毒杀效果较弱；当浓度为２０ｍｇ·ｍＬ－１时，二氯甲烷粗提物毒杀线虫
活性最好，处理７２ｈ的线虫校正死亡率可达５０．６％，乙酸乙酯粗提物和石油醚粗提物毒杀线虫活性均较弱；当浓度为４０
ｍｇ·ｍＬ－１时，毒杀线虫活性大小依次是乙酸乙酯粗提物＞石油醚粗提物＞二氯甲烷粗提物，其中乙酸乙酯粗提物处理
７２ｈ的线虫校正死亡率达７３．６％。表明，对肿柄菊粗提物进行合理的处理、分离、纯化，有望开发出高效低毒、绿色环保
的新型杀线虫农药。
关键词：肿柄菊；粗提物；线虫；毒杀活性
中图分类号：Ｓ　４８２　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１６７２－５４２５（２０１３）０８－００５０－０４
　　肿柄菊（Ｔｉｔｈｏｎｉａ　ｄｉｖｅｒｓｉｆｏｌｉａ　Ａ．Ｇｒａｙ），属于菊
科肿柄菊属植物，又称金光菊、树菊，多年生半灌木状
草木植物，根系发达，茎粗壮，繁殖力强，能在各类土壤
中生长［１］。原产地为墨西哥及中美洲地区，现大量分
布于热带和亚热带，在东南亚、南非、太平洋的一些国
家和地区成为入侵田间、路边的杂草，逐渐扩散形成单
一优势种群［２］。目前，肿柄菊在我国广东、广西、福建、
云南等省有逃逸种群分布，尤其是环境适宜的云南省，
已经给该地区的农业生产带来一定危害，同时对生物
多样性造成了威胁，是一种具有较大潜在危害性的外
来植物［３］。
秀丽隐杆线虫（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ）是近些年
来广泛应用于毒理学研究的经典模式动物［４，５］。秀丽
隐杆线虫繁殖速度快，在土壤和水中都能生存，十分有
利于短期药效试验。
菊科植物化学成分的复杂性和多样性均居植物界
之首，潜在着大量的杀菌、杀虫活性成分，具有极高的
研究价值和广阔的开发利用前景［６］。但国内外对肿柄
菊的研究并不多，主要集中在除草和杀虫活性研究、药
物开发、有机肥料的利用等方面。郝妮娜等［７］研究表
明肿柄菊提取物对７种病原菌具有抑制作用。杨海艳
等［８］报道了肿柄菊对蜈蚣蕨孢子萌发和假根生长的影
响。王丽等［９］研究表明肿柄菊水提液对水田稗和玉米
种子萌发具有显著的抑制作用。Ｊａｍａ等［１０］报道肿柄
菊作为绿肥不仅可以丰富作物营养物质来源，而且可
以降低土壤中某些物质对磷元素的吸附并增加土壤微
生物的量。Ｂａｓａｍｂａ等［１１］研究表明肿柄菊可以显著
提高贫瘠土壤的交换性钙、镁、钾等营养成分。Ｈｅｒ－
ｒｅｒａ等［１２］从肿柄菊中分离出４种倍半萜烯内酯类化
合物。Ｍａｃｉａｓ等［１３］对肿柄菊的研究为开发新作用靶
点的除草剂和杀虫剂提供了新思路。Ａｄｅｄｉｒｅ等［１４］研
究表明肿柄菊叶干粉乙醇提取物对四纹豆象有明显的
杀卵、抗成虫羽化和杀虫作用，具有开发为昆虫杀虫剂
的潜力。周鸿等［１５］报道了肿柄菊３种成分：圆叶肿柄
菊素Ａ、圆叶肿柄菊素Ｃ和３，５－二氧－咖啡酰奎尼酸，
其中咖啡酰奎尼酸有一定的抗菌活性［１６］。Ｂｏｒｄｏｌｏｉ
等［１７］研究表明肿柄菊含有的青蒿酸、青蒿素等可开发
为天然的植物生长调节物质，亦可以作为天然除草剂
合成的模型物。
目前，有关肿柄菊提取物对线虫的毒杀活性及其
成分还缺乏研究，其毒杀线虫的机制更是鲜有报道。
作者在此考察肿柄菊的不同有机溶剂粗提物的毒杀线
张余杰等：肿柄菊粗提物对线虫毒杀活性的研究／２０１３年第８期 　５１　
虫活性（简称杀线活性），拟为研制高效低毒、绿色环保
的新型杀线虫农药奠定基础。
１　实验
１．１　材料
肿柄菊（Ｔｉｔｈｏｎｉａ　ｄｉｖｅｒｓｉｆｏｌｉａ）采集于云南昆明
跑马山区域。
秀丽隐杆线虫（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ）由云南
农业大学植物保护学院农药系提供。用贝曼氏漏斗法
分离出一定数量的线虫，采用离心机清洗纯化（１５００ｒ
·ｍｉｎ－１，５ｍｉｎ）３次，加入适量蒸馏水，配制成每毫升
含秀丽隐杆线虫约７条的悬液（混合虫龄），封口膜密
封，备用。
１．２　试剂与仪器
石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷和甲醇均为化学纯，
丙酮为分析纯，实验用水为蒸馏水。
ＢＣＤ－２１５ＹＤ型冰箱，青岛海尔股份有限公司；
ＳＨＢ－Ⅲ型真空泵、ＨＨ－Ｓ型水浴锅，郑州长城科工贸
有限公司；ＨＳ．Ｚ６８．１０型蒸馏水器，北京中兴伟业仪
器有限公司；ＳＷ－ＣＪ－１ＦＤ型洁净工作台，苏州安泰空
气技术有限公司；ＳＺＭ 系列体视显微镜，宁波舜宇仪
器有限公司；Ｒ２０５Ｂ型旋转蒸发器，上海申生科技有
限公司；ＦＡ２００４型上皿电子天平，上海精科天平；
８２００Ｈ型超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公
司；ＦＺ１０２型微型植物粉碎机，天津泰斯特仪器有限公
司；ＲＸＺ型智能人工气候箱，宁波东南仪器有限公司；
Ｆｉｎｎｐｉｐｅｔｔｅ　ｃｏｌｏｕｒ型单道移液器（２０～２００μＬ），芬兰
雷勃集团；ＴｏｐＰｅｔｔｅ型单道移液器（１００～１０００μＬ），
大龙兴创实验仪器有限公司；ＹＸＱ．ＳＧ４６．２８０型手提
式压力蒸汽灭菌器，上海华线医用核子仪器有限公司。
１．３　方法
１．３．１　粗提物的制备
１．３．１．１　石油醚／乙酸乙酯粗提物的制备
将采集的肿柄菊枝叶在自然条件下晾１～２ｄ，然
后置于４５℃恒温干燥箱中烘干至恒重，用微型粉碎机
粉碎后过４０目筛。称取一定量粉末放入三角瓶中，加
入石油醚／乙酸乙酯浸泡２４ｈ，然后置于超声波清洗
器中振荡３０ｍｉｎ。最后用滤纸过滤，所得滤液用旋转
蒸发器减压浓缩蒸干，即得到石油醚／乙酸乙酯粗提
物，密封置于冰箱中冷藏，备用。
１．３．１．２　二氯甲烷粗提物的制备
将采集的肿柄菊枝叶在自然条件下晾１～２ｄ，然
后置于４５℃恒温干燥箱中烘干至恒重，收集干枝叶
６００ｇ，分装于３个三角瓶中，然后加入适量二氯甲烷
浸泡２４ｈ。所得浸泡液用滤纸过滤，滤液用旋转蒸发
器减压浓缩蒸干。将所得黄色提取物重新溶解在甲醇
－水（７∶３）中，室温下过夜，弃沉淀，所得上清液再次
用石油醚（沸点４０～６０℃）萃取，蒸干，即得到二氯甲
烷粗提物，密封置于冰箱中冷藏，备用。
１．３．２　毒杀线虫实验
采用药液浸渍法［１８］。用分析天平准确称取一定
量的粗提物，先加入一定量的丙酮（体积分数不超过
５％）溶解，再加入适量蒸馏水，分别配制成１０ｍｇ·
ｍＬ－１、２０ｍｇ·ｍＬ－１、４０ｍｇ·ｍＬ－１共３个质量浓度
的药液，封口膜封好，备用。取直径６ｃｍ小玻璃培养
皿若干，分别加入摇匀的线虫悬液７ｍＬ，再加入３ｍＬ
不同质量浓度的药液，每个处理做４组平行实验。以
丙酮溶液（丙酮＋蒸馏水）作为对照，丙酮的浓度与药
液中的丙酮浓度相同。最后将培养皿置于５ ℃、
ＲＨ６０％黑暗的培养箱中培养，分别于２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ
用体视显微镜观察３次，用针刺法确定线虫死亡与否，
记录每次线虫死亡的条数。
１．４　统计分析
各处理组的死亡率、校正死亡率按下式计算：
死亡率＝
死亡线虫数
供试线虫数×１００％
校正死亡率＝
处理组线虫死亡率－对照组线虫死亡率
１－对照组线虫死亡率 ×１００％
按文献方法［１９］将杀线活性分为五级：
“－”：表示校正死亡率≤１０％，无杀线活性；
“＋”：表示校正死亡率为１０％～３０％，杀线活性
弱；
“＋ ＋”：表示校正死亡率为３０％～５０％，杀线活
性中等；
“＋ ＋ ＋”：表示校正死亡率为５０％～８０％，杀线
活性较强；
“＋ ＋ ＋ ＋”：表示校正死亡率＞８０％，杀线活性
强。
２　结果与讨论
２．１　肿柄菊不同粗提物的杀线活性（表１）
由表１可知，乙酸乙酯和石油醚粗提物的杀线活
性随其浓度的增大逐渐提高，但二氯甲烷粗提物例外，
其杀线活性在中等浓度时较高。浓度为１０ｍｇ·
ｍＬ－１时，３种粗提物均无杀线活性；浓度为２０ｍｇ·
ｍＬ－１时，杀线活性大小依次为二氯甲烷粗提物＞石油
醚粗提物＞乙酸乙酯粗提物，二氯甲烷粗提物处理７２ｈ
后，线虫校正死亡率达到５０．６％，而石油醚和乙酸乙酯
粗提物处理７２ｈ后的线虫校正死亡率分别为４２．９％、
　 张余杰等：肿柄菊粗提物对线虫毒杀活性的研究／２０１３年第８期５２　
表１ 肿柄菊不同粗提物的杀线活性
Ｔａｂ．１ Ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｎ　Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　Ｔｉｔｈｏｎｉａ　ｄｉｖｅｒｓｉｆｏｌｉａ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ
粗提物 浓度／ｍｇ·ｍＬ－１
２４ｈ
校正死亡率／％　　活性强度
４８ｈ
校正死亡率／％　　活性强度
７２ｈ
校正死亡率／％　　　活性强度
１０　 ０．０ － ０．０ － ０．０ －
乙酸乙酯 ２０　 ０．０ － １０．９ ＋ ３３．３ ＋ ＋
４０　 １９．３ ＋ ５８．３ ＋ ＋ ＋ ７３．６ ＋ ＋ ＋
１０　 ７．３ － ６．７ － ８．７ －
二氯甲烷 ２０　 ９．８ － ３２．１ ＋ ＋ ５０．６ ＋ ＋ ＋
４０　 ２．８ － １２．２ ＋ ２９．８ ＋
１０　 ０．０ － ０．０ － ２．３ －
石油醚 ２０　 ９．２ － ２３．１ ＋ ４２．９ ＋ ＋
４０　 １２．５ ＋ ５３．２ ＋ ＋ ＋ ７０．８ ＋ ＋ ＋
３３．３％；浓度为４０ｍｇ·ｍＬ－１时，乙酸乙酯和石油醚
粗提物处理４８ｈ后的杀线虫效果已较好，处理７２ｈ
后线虫校正死亡率分别达到７３．６％、７０．８％，而二氯
甲烷粗提物杀线活性较弱。总体而言，乙酸乙酯和石
油醚粗提物的杀线活性较好。
２．２　讨论
目前，化学药剂仍是防治线虫的主要手段，比较常
用的杀线虫剂为溴甲烷、克百威、噻唑磷等，存在持效
长、污染严重等问题，与现代社会环保节约的发展理念
相悖。随着人类环保意识的加强，化学药剂将会逐渐
停止使用，研究、开发新型高效杀线虫剂是线虫防治发
展的趋势。２０世纪８０年代，许多国家开始了植物源
杀线虫剂的研究，其中美国、英国和印度对此方面研究
较多，确定了很多植物活性成分的杀线活性，取得了较
大的进展［２０，２１］。截止２００９年，已经报道具有杀线活
性的植物约有１００多种、４０多科，其中具有杀线活性
的天然化合物也达到１０多类１００多个［２２，２３］。
对肿柄菊３种不同有机溶剂粗提物的杀线活性分
析表明，乙酸乙酯和石油醚粗提物杀线虫效果较好，在
生物防治线虫方面具有广阔的开发前景。本研究结果
与龙鼎新等［２４］开发的化学药剂对松材线虫的活性结
果相比，存在一定差距，主要原因可能是：（１）本研究所
使用的粗提物中有效杀线虫活性成分的含量不高，分
离纯化后其杀线虫效果可能会大大提高；（２）秀丽隐杆
线虫和松材线虫虽然同属于线形动物门线虫纲，但在
生理特性、生活习性等方面存在一些差异，一定程度上
影响了实验结果；（３）实验过程中人为因素的影响。但
本研究结果与禁用的剧毒农药甲胺磷相比，杀线虫效
果差异较小。翁群芳等［２５］的研究也表明肿柄菊粗提
物对松材线虫的毒杀效果较好。
本研究只是对肿柄菊地上部分的粗提物进行了杀
线活性研究，没有进行盆栽试验，未能深入研究有效杀
线虫活性成分在枝叶中含量的高低，也未对粗提物中
有效成分进行分离和鉴定，这些将是下一步研究的重
点和方向。
３　结论
肿柄菊不同溶剂的粗提物具有较好的毒杀线虫活
性，当浓度为１０ｍｇ·ｍＬ－１时，石油醚、乙酸乙酯和二
氯甲烷粗提物２４～７２ｈ内对线虫的毒杀效果较弱；当
浓度为２０ｍｇ·ｍＬ－１时，二氯甲烷粗提物毒杀线虫活
性最好，处理７２ｈ的线虫校正死亡率可达５０．６％，乙
酸乙酯粗提物和石油醚粗提物毒杀线虫活性均较弱；
当浓度为４０ｍｇ·ｍＬ－１时，毒杀线虫活性大小依次是
乙酸乙酯粗提物＞石油醚粗提物＞二氯甲烷粗提物，
其中乙酸乙酯粗提物处理７２ｈ的线虫校正死亡率达
７３．６％。未来应结合多种技术手段，将不同溶剂粗提
物中的活性物质进行分离、纯化，有望开发出高效低
毒、绿色环保的新型杀线虫农药。
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ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＴｉｔｈｏｎｉａＤｉｖｅｒｓｉｆｏｌｉａＣｒｕｄｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｓ
ＺＨＡＮＧ　Ｙｕ－ｊｉｅ１，ＬＩＵ　Ｚｈｉ－ｈｕａ２，ＺＨＡＮＧ　Ｙａ３，ＱＩＮ　Ｘｉａｏ－ｐｉｎｇ１，ＨＥ　Ｊｉｎ－ｌｉｎｇ１
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｙｕｎｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２０１，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｐｕｙａｎｇ　Ｃｏｕｎｔｒｙ′ｓ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｂｕｒｅａｕ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｐｕｙａｎｇ４５７１００，Ｃｈｉｎａ；
３．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｓａｆｅｔｙ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｈｕｎａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｎ　Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
Ｔｉｔｈｏｎｉａ　ｄｉｖｅｒｓｉｆｏｌｉａ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ，ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ａｎｄ　ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｓｏａｋｉｎｇ
ｔｈｅ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｏｆ　ｃｒｕｓｈｅｄ　ｂｒａｎｃｈｅｓ　ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｏｎ　Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｉｍｐｒｅｇｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ
ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ：ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ａｎｄ　ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｈａｄ　ｌｏｗ　ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｎ
Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　１０ｍｇ·ｍＬ－１　ｗｉｔｈｉｎ　２４～７２ｈ；ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　２０
ｍｇ·ｍＬ－１，ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ　ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗｉｔｈ　ａ　ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ　ｌｅｔｈａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ
５０．６％ａｔ　７２ｈ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ａｎｄ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｈａｄ　ｌｏｗ　ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｗｈｅｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａ－
ｔｉｏｎ　ｗａｓ　４０ｍｇ·ｍＬ－１，ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｏｌｏｗｅｄ　ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒ　ｏｆ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ＞ｐｅｔｒｏｌｅ－
ｕｍ　ｅｔｈｅｒ＞ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ，ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｇｏｔ　ａ　ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ　ｌｅｔｈａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　７３．６％ａｔ　７２ｈ．Ｔｈｅｒｅ－
ｆｏｒｅ，ｔｈｅ　ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｃａｎ　ｄｅｖｅｌｏｐ　ｉｎｔｏ　ｈｉｇｈ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｏｎ　Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅ
ｇａｎｓａｆｔｅｒ　ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｔｉｔｈｏｎｉａ　ｄｉｖｅｒｓｉｆｏｌｉａ；ｃｒｕｄｅ　ｅｘｔｒａｃｔ；Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ　ｅｌｅｇａｎｓ；ｐｏｉｓｏｎｏｕｓ　ａｃｔｉｖｉｔｙ