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土木香趁鲜切制与传统切片方法的比较



全 文 :[收稿日期] 20130402(002)
[基金项目] 河北省中医药局项目(2010046)
[通讯作者] * 马玉斌,硕士,副主任药师,从事中药新药开发
研 究, Tel: 0313-8675577, E-mail: yubinma
@ 126. com
土木香趁鲜切制与传统切片方法的比较
马玉斌*
(张家口宣化钢铁公司职工医院药剂科,河北 张家口 075000)
[摘要] 目的:探讨鲜切土木香饮片的可行性,对土木香传统切片工艺进行改良。方法:以土木香内酯、异土木香内酯及
总黄酮含量为指标,通过正交试验考察含水量、干燥方式及切片厚度对土木香直接鲜切饮片工艺的影响,并与传统切片工艺
进行比较。采用紫外分光光度法测定总黄酮含量;HPLC测定土木香内酯和异土木香内酯含量,色谱条件为 SHIMADZU C18色
谱柱(4. 6 mm × 200 mm,5 μm) ,流动相乙腈-0. 1%磷酸溶液(50∶ 50) ,柱温 30 ℃,流速 1. 0 mL·min -1,检测波长 220 nm,进样
量 20 μL。结果:优选的鲜切饮片工艺为土木香药材在含水量为 35%时切片,饮片厚度 2. 5 ~ 3. 0 mm,阴干。鲜切饮片中土木
香内酯、异土木香内酯及总黄酮质量分数分别为(22. 41 ± 1. 38) ,(12. 87 ± 0. 73) ,(15. 04 ± 0. 64)mg·g -1,传统工艺切制饮片
中则依次为(22. 94 ± 1. 24) ,(13. 24 ± 0. 83) ,(14. 12 ± 0. 58)mg·g -1。结论:趁鲜切制土木香饮片产品质量稳定,具有推广
意义。
[关键词] 土木香;趁鲜切制;土木香内酯;异土木香内酯;总黄酮;高效液相色谱法
[中图分类号] R282. 4;R283. 3;R284. 1 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)21-0030-03
[doi] 10. 11653 /syfj2013210030
Comparison of Traditional Slicing Method and Fresh-Cut Method
for Inulae Radix
MA Yu-bin*
(Department of Pharmacy,Xuanhua Iron and Steel Company Workers Hospital,Zhangjiakou 075000,China)
[Abstract] Objective:To evaluate feasibility of fresh-cut process for Inulae Radix and improve traditional
slicing process of it. Method:The contents of alantolactone,isoalantolactone and total flavonoids were employed
as indicators,effects of water content,drying styles and slice thickness on fresh-cut process of Inulae Radix were
investigated by orthogonal test,then compared with conventional slicing process. The content of total flavonoids
was determined by UV; The contents of alantolactone and isoalantolactone were determined by HPLC,
chromatographic conditions were as follows:SHIMADZU C18 column (4. 6 mm ×200 mm,5 μm) ,mobile phase
of acetonitrile-0. 1% phosphoric acid (50∶ 50) ,column temperature 30 ℃,flow rate 1. 0 mL·min -1,detection
wavelength 220 nm, injection volume 20 μL. Result:Optimized fresh-cut process was:water content 35%,
drying styles of shade drying,slice thickness 2. 5-3. 0 mm. The contents of alantolactone,isoalantolactone and
total flavonoids from fresh-cut pieces were (22. 41 ± 1. 38) ,(12. 87 ± 0. 73) ,(15. 04 ± 0. 64)mg·g -1,but in
traditional slicing process were (22. 94 ± 1. 24) , (13. 24 ± 0. 83) , (14. 12 ± 0. 58)mg·g -1 . Conclusion:
Fresh-cut process of Inulae Radix was stable and meaningful.
[Key words] Inulae Radix;fresh-cut;alantolactone;isoalantolactone;total flavonoids;HPLC
土木香具有健脾和胃、行气止痛、安胎等功效,
常用于治疗脘腹胀痛、呕吐泻痢、岔气作痛、胎动不
安[1]。现代药理研究表明其主要活性成分为土木
香内酯和异土木香内酯,具有抗炎、抗菌、抑制肿瘤
细胞等作用[2-4];另有研究证实土木香富含黄酮类
·03·
第 19 卷第 21 期
2013 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 21
Nov.,2013
物质[5]。现行的土木香饮片加工工艺为晚秋采挖,
除去泥沙后干燥,切片前需用水软化,该饮片加工过
程费工费时,且可能会导致有效成分的流失,甚至使
药材发霉变质。山药、乌药、白芍等药材有在产地趁
鲜切片的习惯[6],且相关研究较多。本实验拟对土
木香在产地进行鲜切饮片,以总黄酮、土木香内酯和
异土木香内酯含量为评价指标,采用正交试验优选
土木香的鲜切饮片工艺,并对饮片质量进行评价,为
鲜切工艺的应用提供理论依据。
1 材料
1100 系列高效液相色谱仪(美国 Agilent 公
司) ,ZNY-686 型中药切片机(长沙中南制药机械
厂) ,JPCQ0628 型全数字超声波发生器(武汉嘉鹏
电子有限公司)。
土木香内酯、芦丁对照品(中国食品药品检定
研 究 院,批 号 分 别 为 110760-201008,100080-
200707) ,异土木香内酯对照品(南京泽朗医药科技
开发有限公司,纯度 > 98%,批号 200910) ,土木香
(购自河北安国大营村,经河北北方学院中医学院
赵恒成教授鉴定为菊科植物土木香 Inula helenium
L.的干燥根) ,乙腈、甲醇为色谱纯,水为哇哈哈纯
净水,其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 土木香内酯和异土木香内酯的含量测定[7]
2. 1. 1 色 谱 条 件 SHIMADZU C18 色 谱 柱
(4. 6 mm ×200 mm,5 μm) ,流动相乙腈-0. 1%磷酸
溶液(50∶ 50) ,柱温 30 ℃,流速 1. 0 mL·min -1,检测
波长 220 nm,进样量 20 μL,见图 1。
A.对照品;B.供试品;1. 异土木香内酯 2. 土木香内酯
图 1 土木香 HPLC
2. 1. 2 对照品溶液的制备 分别精密称取土木香
内酯和异土木香内酯对照品 4. 28,3. 96 mg,分别置
于 100 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,即得。
2. 1. 3 供试品溶液的制备 取过 3 号筛的土木香
粉末 1 g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,加甲醇
25 mL使溶解,称定质量,超声处理 30 min,冷却至
室温,称定质量,用甲醇补足减失的质量,经
0. 22 μm微孔滤膜滤过,弃去初滤液,取续滤液,
即得。
2. 2 总黄酮的含量测定[5]
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重
的芦丁对照品 6. 22 mg,置于 25 mL量瓶中,用 65%
乙醇溶液定容至刻度,即得。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 取过 3 号筛的土木香
粉末 1 g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,加 65%乙
醇溶液 25 mL,称定质量,超声处理 30 min,超声完
毕后放冷,用 65%乙醇补足质量,经 0. 45 μm 微孔
滤膜滤过,取续滤液,即得,备用。
2. 2. 3 样品测定 取供试品溶液 1 mL,分别加入
5% NaNO2 溶液和 10%Al(NO3)3 溶液各 1 mL,摇匀
6 min,加入 4%NaOH溶液 10 mL,摇匀,15 min后加
水定容至刻度,于 510 nm 处测定吸光度,计算总黄
酮含量。
2. 3 样品制备 霜降后采挖土木香,除去茎叶、须
根和泥土。
2. 3. 1 传统土木香饮片 土木香药材晾干,制成成
品药材,润湿软化,切片,饮片厚度 2 ~ 3 mm。
2. 3. 2 直接鲜切饮片 在预试验基础上,选取水分
含量、干燥方式及切片厚度为考察因素,以总黄酮、
土木香内酯和异土木香内酯含量为评价指标,每因
素设定 3 个水平,采用 L9(3
4)正交试验优化土木香
鲜切工艺,因素水平见表 1,试验安排及结果见表 2。
表 1 土木香产地鲜切工艺正交试验因素水平
水平 A含水量 /% B干燥方式 C切片厚度 /mm
1 25 阴干 1. 6 ~ 2. 0
2 35 晒干 2. 1 ~ 2. 5
3 45 40 ℃ 2. 6 ~ 3. 0
由正交试验结果可知,鲜切工艺各因素对土木
香内酯和异土木香内酯含量的影响顺序均为 C >
B > A,对总黄酮含量的影响顺序为 A > C > B,综合
考虑实际操作和生产成本,确定最终鲜切工艺为
A2B1C3,即土木香药材在含水量为 35%时切片,饮
片厚度 2. 5 ~ 3. 0 mm,阴干。
2. 4 验证试验 净选土木香药材共 3 份,每份 5
kg,按优选的鲜切工艺进行切片,结果土木香内酯、
·13·
马玉斌:土木香趁鲜切制与传统切片方法的比较
异土木香内酯及总黄酮质量分数(珋x ± s)分别为
(22. 41 ± 1. 38) ,(12. 87 ± 0. 73) ,(15. 04 ± 0. 64)
mg·g -1。净选土木香药材共 3 份,每份 5 kg,采用传
统工艺切制,结果土木香内酯、异土木香内酯及总黄
酮质量分数分别为(22. 94 ± 1. 24) ,(13. 24 ±
0. 83) ,(14. 12 ± 0. 58)mg·g -1。表明鲜切工艺中
总黄酮含量高于传统切片技术,而土木香内酯和异
土木香内酯含量较后者略低,经统计学分析无显著
性差异。
表 2 土木香鲜切工艺正交试验安排
No. A B C
异土木
香内酯
/mg·g - 1
土木香内酯
/mg·g - 1
总黄酮
/mg·g - 1
1 1 1 1 10. 42 19. 47 12. 06
2 1 2 2 10. 89 21. 52 13. 13
3 1 3 3 11. 78 23. 18 13. 58
4 2 1 2 12. 19 24. 85 14. 82
5 2 2 3 11. 46 22. 68 13. 89
6 2 3 1 10. 27 21. 57 12. 94
7 3 1 3 12. 05 24. 35 13. 89
8 3 2 1 11. 37 22. 17 13. 67
9 3 3 2 10. 22 20. 18 12. 46
K1i 11. 03 11. 55 10. 69
K2i 11. 31 11. 24 11. 10
K3i 11. 21 10. 76 11. 76
K1a 21. 39 22. 89 21. 07
K2a 23. 03 22. 12 22. 18
K3a 22. 23 21. 64 23. 40
K1f 12. 92 13. 59 12. 89
K2f 13. 88 13. 56 13. 47
K3f 13. 34 12. 99 13. 78
Ri 0. 28 0. 79 1. 07
Ra 1. 64 1. 24 2. 33
Rf 0. 96 0. 60 0. 89
注:i为异土木香内酯,a为土木香内酯,f为总黄酮。
3 讨论
以极性较小的土木香内酯、异土木香内酯和极
性较大的总黄酮含量为指标,对土木香饮片的 2 种
加工工艺进行比较,结果发现传统工艺与鲜切工艺
相比,非极性成分含量变化不大,而总黄酮含量有所
降低,可能是在传统工艺加工过程中,由于软化导致
部分黄酮类成分随水流失。另土木香内酯和异土木
香内酯具有一定挥发性,饮片长期放置可能会导致
其含量下降,贮存时需要加以注意。考察了含水量
对饮片鲜切工艺的影响,结果发现土木香药材含水
量约 35%时,切制的饮片外观平整、片型较好,而传
统方法切片时,药材的软化程度主要凭经验判断,选
择含水量作为饮片切制时的控制指标,比传统感觉
判断更为客观。
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[责任编辑 仝燕]
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第 19 卷第 21 期
2013 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 21
Nov.,2013