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藏药材毛莲蒿的组织培养和再生植株



全 文 :藏药材毛莲蒿的组织培养和再生植株
泽仁旺姆1 尼珍1 杜云建2
(1.西藏自治区高原生物研究所;
2.西藏坎巴嘎布卫生用品有限公司,西藏 拉萨 850000)
摘 要:利用毛莲蒿植物的茎段为材料,研究了其消毒时间。诱导丛芽、生根培养基,结果表明:藏药材
毛莲蒿的组织培养过程中可在1号培养基直接诱导腋芽;在2号和3号培养基中诱导丛芽最佳,芽的平
均增殖系数为5.7-6.0;在7号培养基中,生根时间及整齐度为最佳,生根率可达到98%。
关键词:藏药材 毛莲蒿 再生植物
  毛莲蒿藏语“坎巴嘎布”(Artemisiavestita Wal.
ex DC)为菊科、蒿属,半灌木或灌木状;根茎粗大,木
质,植物有挥发性香气,主要产丁青、洛扎、拉萨、南木
林、日喀则等海拔2600~4300米的山坡、山麓、草地、
灌丛、砾质滩地中,毛莲蒿具有极高的药用价值,《宇妥
本草》中记载坎巴嘎布具有消肿、治肉瘤、肠病的功效;
《药名荟萃》中记载坎巴嘎布具有止血、消四肢肿胀功
效;《蓝琉璃》中记载坎巴嘎布有利肾病和补品的作用;
坎巴嘎布在藏医药里也是作为止血、消肿、清热的药
物,用于治疗各种疾病引起的出血、四肢肿胀、外伤等
疾病,随着藏医药研究的进一步发展,毛莲蒿的系列产
品将不断涌现,对毛莲蒿的人工栽培及组织培养尚未
见报道。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试材料为西藏坎巴嘎布卫生用品有限公司提供
的毛莲蒿植株。以 MS为基本培养基,附加蔗糖
30g/L,琼脂7g/L,pH5.8,不同浓度IBA、NAA、6-
BA等激素。所有培养基均在120℃条件下高压灭菌
15min。培养室温度(22±1)℃,空气相对湿度60%
左右,光照时间12h/d,光照强度1500~2000lx。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的选择与处理
选用毛莲蒿优良单株,切取带2~3个腋芽的茎段
为外植体进行培养。首先用肥皂水进行清洗,再用流
水反复冲洗,在放入75%的酒精中消毒30秒,用无菌
水冲洗3次,再用0.1%升汞消毒5~12分钟,用无菌
水冲洗3~5次备用.
1.2.2 培养基的配制
通过附加不同浓度的6-BA与IAA的组合配制
分化培养基,分别为1号培养基、2号培养基、3号培养
基和4号培养;继代培养基为 MSo;生根培养基为添
加不同浓度的IBA、NAA的培养基分别为5号培养
基、6号培养基、7号培养基、8号培养基和9号培
养基。
1.2.3 培养方法与条件
接种:将备用带腋芽的茎段用无菌纸吸取水分,用
小刀切除茎段下端长0.5左右后,将剩余茎段分别接
入到配好的1号培养基,接种瓶内每瓶接种1个茎段,
诱导腋芽的萌发。
丛生芽诱导及增殖:将无根小苗切下接种在
1~4号培养基中,诱导形成丛生芽,20天为一个增殖
周期,以保持高速度递增,增殖系数为5.1以上;继代
培养:将萌发的腋芽切下,接种在继代培养基种保持温
度22+2℃,12~14小时/天光照下,培养5天左右腋
芽开始生长,10天左右形成带叶的无根小苗;
生根培养:将长2~2.5cm的芽切下接种在添加
IBA、NAA的生根培养基上,培养12~18天可生根,
生根率达80%以上,32~38天形成完整植株。
1.2.4 炼苗移栽
炼苗:长出1~3cm长的根时即可进行炼苗。先
将生根苗连同容器一起置于移栽设施中,放置1周,然
后打开瓶口再放置2~3天。移栽:选取根系生长良好
的试管苗,放入清水中把根部的琼脂清洗干净,移栽到
田园土中,注意保水湿度因在70%以上,移栽初期要
注意遮荫、适当通风,移栽1个月后统计,移栽苗的成
活率达90%以上。
2 结果与分析
2.1 外植体的选择与处理
选用毛莲蒿优良单株,切取带2~3个腋芽的茎段
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动植物研究                  《西藏科技》2014年11期(总第260期)
为外植体进行培养。首先用肥皂水进行清洗,再用流
水反复冲洗,在放入75%的酒精中消毒30秒,用无菌
水冲洗3次,再用0.1%升汞消毒8分钟,用无菌水冲
洗5次消毒效果最好,污染率只有5%。
2.2 不同激素配比对毛莲蒿丛生芽诱导的影响
随着6-BA和IAA浓度逐步升高在一定范围对
毛莲蒿分化芽有明显增加作用,但6-BA 和IAA激
素浓度合计达到1.5.mg/L时,叶片微卷曲,生长不正
常。在2号和3号培养基中生长综合表现最佳,芽的
平均增殖系数为5.7~6.0。
表1 不同激素配比对毛莲蒿丛生芽诱导的影响
培养基 接种数 增殖系数 生长表现
1  20  5.1 正常,苗健壮
2  20  5.7 正常,苗健壮
3  20  6.0 正常,苗健壮
4  20  5.2 叶片微卷曲,
2.3 生根培养
在五种生根培养基中生根率均在80%以上,生根
整齐度也较好,但在7号培养基中,生根时间及整齐度
为最佳,生根率可达到98%。
表2 不同激素配比的生根培养基对毛莲蒿
生根的影响
培养基编号 生根时间(天) 生长表现及生根率
5  18
生根较整齐,苗健壮。
生根率为85%
6  18
生根不整齐,苗健壮。
生根率为83%
7  12
生根整齐,苗健壮。
生根率为98%
8  12
生根较整齐,生根率
为85%
9  15
生根较整齐,生根率
为80%
3 讨论与结论
试验证明,藏药材毛莲蒿的组织培养过程中可在
1号培养基直接诱导腋芽;在2号和3号培养基中诱
导丛芽最佳,芽的平均增殖系数为5.7~6.0;在7号
培养基中,生根时间及整齐度为最佳,生根率可达到
98%;做好移栽苗的管理其成活率可达90%以上。
参考文献
〔1〕 观赏植物组织培养技术,谭文澄.
〔2〕 中国观赏园艺研究进展2004,张启翔.
〔3〕 西藏植物志,吴征镒.
编校 
檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱
洛桑次仁
(上接67页)立交通道运行,不对其它方向交通造成影
响;右转车辆在外侧车道直接转向,过程无延误。
整个交叉路口执行禁止左转的规则。在此规则
下,使左转车辆绕街坊行驶变左转为右转,将此路口上
的交通矛盾转移到另一个路口。
图2 基于分离式立交的仿真环境
3.4 VISSIM生成的相关数据
在两种状态的仿真过程中,我们分别获取了两种
情况下的行程时间、排队长度,由此分析两种交通情况
下的延误时间和通行效率。
对得到的数据进行分析后,我们绘制了相关的图形。
图3 数据图形
4 数据分析及总结
通过相关数据绘制的图形可以直观的看出:
由于分离式立交对交通的空间隔离作用,南北走
向与东西走向的车辆基本不再相互干扰,使得行程时
间有一定缩短,最重要的是完全消除了延误,使得路口
交通变得畅通。
同时,结合我们实地调查时的切身体会,因为行人
和非机动车辆对交通的影响是实际存在而未被反映在
仿真场景中的,当考虑到各方面因素的影响时,架设分
离式立交对交通场景的简化会使得该交叉路口交通状
况得到切实的改善。
参考文献
〔1〕 刘博航,张通,安桂江.交通仿真实验教程
[M].北京:人民交通出版社,2012:52-77.
〔2〕 徐家钰,程家驹.道路工程[M].第二版.上
海:同济大学出版社,2004.
〔3〕 孙兴波.城市道路立交选型方案评价研究[D].
长沙理工大学,2012.
〔4〕 张腾冲.城市道路平面交叉形式适用性的探讨
[J].青海交通科技,2009(1):65-71.
编校 白玛普尺
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《西藏科技》2014年11期(总第260期)                  动植物研究