全 文 ：恤困璐翻
山杏种皮黑色素理化性质研究 `
姚增玉 , 赵 忠 , 李科友 , 史清华 , 马希 汉 , 朱海 兰
(西北农林科技大学林学院 ,陕西杨凌 , 7 1 2 1 0 0)
摘 要 山杏种皮黑色素具 有黑色素典型 的性质 。 稳定性研 究表 明 : 温度 影响该 黑色素的氧化还 原状 态 , 但 对
溶液的颜色 无 显 著影 响 ; p H < 6 时 , 冷 冻使 黑 色素沉 淀 ; 光 照使溶 液褪 色 ; 随 p H 升高 , 溶 液颜 色 略 有加 深 ;
N a Z S ( ) 3
、
C a , +
、
C u , + 和 Z n , + 有 一定 的增色护色作用 , A 13+ 、 M g , ” 、 N a + 、 氨基酸 、 糖 和淀粉对该 黑色 素无 显著影
响 ;有机酸使 溶液略有褪色 。 本研 究尝试 以吸 光度的对数对波长 的回 归直 线料率 作为 衡 ! 黑色 素稳 定性的指
标 , 该指标 能够很好地反映 出山杏种皮黑色素结构的改变 。
关挂词 山杏 , 种皮 , 黑色素 , 提取 , 理化性质
黑色素 ( m el a in n) 是一类普遍存在于生物界结构
复杂多样的酚类或叫噪类生物大分子色素的总称 〔 ’」 。
黑色素一般为黑色或 棕色 , 由于组成结构 不同 , 也存
在少数红色 、 黄色 、 紫色 、 蓝色和绿色的黑色素川 。 它
们是一类强抗氧化剂 、 自由基清除剂和金属离子鳌合
剂 ,具有广谱的生物活性 , 如抗 蛇毒 3[] 、 抗癌川 、 抑制
H I V 川 、 免疫 促进困 和治疗 帕金森症川等 。 本 试验
首次从山杏 ( P r u n u : a r m e n 艺a c a v a r . a n s u )种皮 中提
取获得了黑色素 , 旨在研究山杏种皮黑色素作为天然
食用色素的稳定性 , 为进一步开发利用奠定基础 。
材料与方 法
1
.
1 材 料
去壳杏仁 , 购 自陕西省麟游县 , 带回实验室用热
烫法剥取种皮 ,种皮用 自来水 冲洗于净 , 摊放在室 内
自然干燥后揉碎 ,室温下保存备用 。
F o li n
一
C io e a l t e u 试剂 , 购 自 S i g m a 公 司 ( U S A ) ;
其他试剂均为分析纯 。
1
.
2 山杏种皮黑色素的制备
称取 5 . 0 9 山杏种皮 ,放入 1 50 m L 锥形瓶 中 , 加
人 10 0 m L 去离子水煮沸 15 m in 后过滤 。 向滤渣 中
加入 0 . 5 m o l / L N a O H 溶液 7 5 m L ,在 N : 的保护下
60 ℃水浴中提取 2 次 , 每次 12 h 。 提出液用棉布粗
虑 、 离心 , H C I 酸化后得到的黑色素沉淀用 7 m ol / L
H C I溶液 10 0 ℃水解 Z h ,离心 , 再依次用 乙醇 、 乙酸
乙 醋 、 丙 酮 洗 涤 , 所 得 黑 色 素 颗 粒 用 0 . 5 m ol / L
N a O H 水溶液超声辅助 溶解 , 离心 , 酸化 使之沉 淀 ,
第一作者 : 博士研究生 (赵忠为通讯作者 ) 。
. 国家林业局 “ 9 4 8 ” 项 目 ( 2 0 0 4一 4一 5 2 ) , 本研究在 国家林业局黄
土高原林木培育重点开放实验室完成
收稿 日期 : 2 0 0 7一 0 1一 2 5 , 改回 日期 2 0 0 7 一 0 5一 2 3
如此反复沉淀 4 次 ,得到的凝胶状黑色素放人一 5 ℃
的冰箱 中使之冻结 , 然后室温下解冻 , 得到的颗粒状
山杏种皮黑色素 ,用蒸馏洗涤至离心上清液 lC 一 定性
检测为阴性 ,最后真空干燥 。
用于分析的山杏种皮黑色素溶液参照 S va a 等人
的方法配制困 。 用少 量质量分数 0 . 2% N H 4 0 H 将
黑色素在 N : 的保护下超声辅助溶解 , 用旋转蒸发仪
减压抽去氨气 , 直至 p H 值达 7 . 5 。 最后用去离子水
定容配制成所需浓度的溶液 。
1
.
3 总多酚含 t 的测定
总多酚含 量的测 定采 用 F o 一i-n e i o e a l t e u 法 [ ,」 。
其值用没食子酸 当量 ( G a l l i C A e id E q u i v a l e n t s ) 表示
( G A E m g / g )
。
1
.
4 黑色素的理化学性质
1
.
4
.
1 黑 色素的 紫外 一可见光吸收光语
黑色素溶液浓度为 27 m g / L 。 试验中所有紫外 -
可见光光谱和吸光度均用 m in i一 1 2 4 0 紫外 一可见光
分光光度仪 ( 日本岛津公 司 )测定 。
1
.
4
.
2 溶解性
溶解性 的测定 参照 W a n g 等人 的方法 [ ’ 。 J , 并略
有改动 。 0 . 1 9 山杏种皮黑色素加入 10 m 1) 蒸馏水 、
H C I
、
N a Z C O
3 、 N a O H
、
N H
; O H 溶液 , 甲醇 、 乙醇 、 丙
酮 、 乙酸乙酷 、 三氯 甲烷 、 乙醚 、 石油醚 、 苯 、 正己烷 、 乙
酸等有机溶剂 , 室温 下搅 拌 l h , 过滤 , 测 定滤液 在
2 0 0 n m 的吸光度 。
1
.
4
.
3 温度对山 杏种皮黑 色素稳定性的影响
2 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶液分别在 2 5 、 6 0 、 8 0
和 10 0 ℃ 水 浴中处理 2 . s h 后立 即在冰浴 中冷 却 ,
然后对其进行扫描 ,并测定总多酚的含量 。
1
.
4
.
4 冷冻对山杏种皮黑 色素德定性的影响
将 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶 液用 N a( ) H 或
2 0 7 年第 3 3 卷第 9 期 (总第 23 7 期 ) 1
3 7
DOI : 10. 13995 /j . cnki . 11 -1802 /ts . 2007. 09. 017
. 152的0.6 30
侧呆哪
H l c调至不同的 pH 值 (4 一 9 ),放人一 5 ℃冰箱冷冻
Z h
, 在室温下解冻后放人 60 ℃水浴中保温 30 m in ,
然后 1 5 0 0 0 9 离心 3 0 m i n 。 测定上清液 2 0 0 n m 处
的吸光度 。 对照以 4 ℃ 冷藏代替冷冻 , 其他处理方法
相同 。
1
.
4
.
5 p H 对山杏种皮黑色素德定性的 影响
将 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶液用 N a O H 或
H cl 调至不同的 p H 值 (4 ~ 1 2 ) ,然后对其进行扫描 。
1
.
4
.
6 光照对山杏种皮黑色素德定性的 影响
将 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶液于室内自然光
照或里于距 20 W 紫外 灯管 (紫 晶特种光源 有限公
司 , 中国天津 ) 30 。m 处进行 照射 , 每隔一段时间对
其进行扫描 .
1
.
4
.
7 氧化荆 对山杏种皮黑 色素德定性的影响
参照 H ar ik 等人的方法 D `〕并略有改动 。 10 m L
6 6 m g / L 山杏种皮 黑色素溶 液分别 与 1 m L H 2 0 2
( 3 0 % )
、
N a C IO ( 3
.
5写 活性 C I) 、 K M n O ` ( 1 0 0 m g /
)L 和 K : C几 0 , ( 1 0 0 m g / L )溶液混合 , 观察混合溶液
颜色的变化 。
1
.
4
.
8 还原别对山杏种皮黑色素德定性的影响
10 m L 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶液与 l m L
2 0 0 m g / L N a
:
5 0
: 混合后每隔一定时间对其进行扫
描 。
1
.
4
.
9 金属 离子对山杏种皮黑色素德定性的影响
10 m L 2 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶液分别与 1
m L 1 5 m g / L C u SO
. 、
M g C I
: 、
C a C I
: 、
N a
:
5 0
` 、
F e C 1
3 、
A IC I
: 和 Z n C I: 混合 , Z h 后对其进行扫描 。
1
.
4
.
10 粉 、氮基故 、 有机故和淀粉对山杏种皮黑 色
素德 定性的 影响
1 0 m L 2 2 m g / L 山杏种皮黑色素溶液分别与 1
m L 0
.
5 9 / L 糖 (葡萄糖和蔗糖 ) 、氨基酸 ( L 一赖氨酸 ) 、
有机酸 (柠橄酸和酒石酸 ) 和可溶性淀粉混合 , Z h 后
对其进行扫描 。
1
.
5 统计分析
每一个处理独立重复 3 次 。 所有实验数据均使
用 S A S v 8 . 1 ( U S A ) 进行分析 。 显著水平设 P <
0
.
0 5
。
度的对数对波长回归所得直线斜率为一 。 . 0 03 9 。 据
报道 ,该回归直线斜率与黑色素 的氧化程度有关 ,新
鲜配制的合成 D O P A 黑色素和 T , be r m e l a n o s P o r u m
黑色素的斜率分别为一 0 . 0 01 8 和一 。 . 0 01 3 ,其碱溶
液在室温下放置 48 h 后 ,由于氧化 , 斜率分别变为一
0
.
0 0 3 3 和一 0 . 0 0 2 2[ 川 。 本研究 中 , 所有 的处理都
未改变紫外一可见光吸收光谱的形状 , 回归 R Z 值均在
0
.
98 5 以上 , 因此文中首次尝试将这一斜率作为衡量
黑色素稳定性的指标 ,用于以下试验的分析 。
别刃 习以】 日X加 仅耳】
波长 1 n m
7仅】 仪幻
图 1 山杏种皮黑色素的紫外一可见光谱
2
.
2 溶解性
山杏种皮黑 色素与前人 .s[ ’ 。〕报道的其他植物黑
色素以及人工合成多 巴黑色素一样 , 不溶于水和 乙
醇 、 丙酮 、 乙酸乙醋 、 氯仿 、 苯 、 正 己烷等常见的有机溶
剂 ,溶于碱溶液 。
2
.
3 温度对山杏种皮黑色紊的影晌
以 2 5 ~ 1 0 0 ℃对 山杏种皮黑色素溶液处理 2 . 5
h 后 ,溶液的颜色无明显变化 , 仍为棕色 , 2 0 n m 处
的吸光度也没有显著变化 (表 1 ) , 但经过 1 0 ℃热处
理 以后总多酚含量降低 , 回归直线斜率增大 , 因此 , 温
度影响该黑色素的氧化程度 , 但其溶液的颜色对温度
比较稳定 。
裹 1 山杏种皮一色班的热祖定性
沮度 /℃ 斜率 吸光度 ( A : o ) 总多酚含 t ( G A E ) /吨 . 9一 ,
10 0
C K
一 0 . 0 0 4 1 0 .
一 0 . 0 0 4 0 7 .
一 0 . 0 0 4 0 3 .
一 0 . 0 0 3 90 6
一 0 . 0 0 4 1 0 .
1
.
0 7 8
1
.
0 8 8
l
。
08 9
1
.
0 6 8
l
。
0 70
2 6 2
.
2 0
.
2 6 1
.
7 2
.
2 6 2
.
1 9
.
22 1
.
2 1 `
2 6 0
.
7 7
.
二曰0勺`盛匕8
2 结果与分析
2
.
1 续外 一可见光漪
山杏 种皮 黑 色素的紫外一可见 光谱 ( 2 0 0 ~ 80
n m )是 1 条随波长增加吸光度呈指数式减小的曲线 ,
在整个扫描范 围内没有明显的吸收峰 ( 图 1 ) 。 吸光
住 : 标有同一字母者为邓肯氏检脸无显着差异 。
2
.
4 冷冻对山杏种皮黑色众的影晌
冷冻对 山杏种皮 黑色素 的影响因溶液的 p H 而
异 , p H < 6 时 ,解冻后黑色素发生沉淀 ,而且 p H 越低
沉淀越多 , p H ) 6 时 , 并不发生沉淀 , 吸光度也与对
照无显著差异 (见表 2 ) 。
38 }2 0 7 V
O I
.
3 3 N O
.
9 ( TO Ot ! 2 3 7 )
衰 2离心上清液 20Om n处的吸光度
冷冻 ’ ) p HCK
0
.
8 87
0
.
89 6
0
.
9 0 4
0
.
4 65
, s
0
.
7 8 7
. 5
0
.
8 9 9
0
。
9 1 8
0
.
9 2 2
0
.
9 3 2
冷冻
0
.
9 1 6
0
.
9 2 3
0
。
9 3 1
注 : l) , , t 检验与对照有显著差异 ; S , 发生沉淀 。
2
.
5 p H 对 山杏种皮黑色众的影响
随着 p H 的增大 ,山杏种皮黑色素溶液颜色略有
加深 ,吸光度和回归直线斜率都随着 p H 值的增大而
增大 (见图 2 ) 。
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.`幻 3 0
刊 ) .峨刃 3 3
以】.《兀日 6
刁 . 03 。 畏
刊】.砚洲妈 2
卿. 珍目
2
.
7 权化剂对山杏种皮黑色寮的影晌
与 以往报道的天然黑色素 的性质相 同12[ 一川 , 山
杏种皮黑色素可被强氧化剂 K M n O ; 、 K Z C r Z O , 、 N a -
C IO 和 H Z O : 漂 白 。 当加人 K M n O ; 后 , 首先形成沉
淀 , 而后溶液褪色 。
2
.
8 还原剂对山杏种皮黑色素的影晌
与对照相比 ,加人 N a : 5 0 : 后混合液的吸光度增
大 ,但随着时间的延续吸光度逐渐降低 (见图 5 ) , 48
h 后接近于对照 , 而回归直线斜率变化趋势正好与吸
光度相反 , 首先减小 , 以后逐 渐增大 。 因此 , N a Z 5 0 3
在短期内有增色护色作用 。
1`
.
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P H值
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刊】.吸如吟 0
图 2 p H 对吸光度 (实线 )和斜率 (虚线 )的影响
误差线为标准差 , 下同 。
2
.
6 光照对 山杏种皮黑色寮 的影晌
由图 3 和图 4 可以看 出 ,紫外光和 自然光都能使
山杏种皮黑色素溶液发生褪色 。 经过紫外光 6 h 或
自然光 s d 的照射 ,溶液的吸光度和回归直线斜率显
著下降 ( P < 0 . 0 1 ) 。
24 36
时间爪
J 闷 ) .峨X岭 I
仍
… …对照吸光度 ;— 加人 N a Z S ( ) , 后吸光度 ;一 · 一对照科率 ;一一加人 N a Z S伍 后斜率
图 5 还原剂对吸光度斜率的影 响
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图 3 紫外光对吸光度 (实线 )和斜率 (虚线 )的影响
1
.
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·一对照斜率厂一光照后喇率 : 一 一对照吸光度厂- 峨潇垢服光度。
图 4 自然光对吸光度和斜率的影 响
图 6 金属离子对吸光度 (灰色柱 )和
斜率 (白色柱 )的影响
2
.
, 金属离子对山杏种皮黑色众的影晌
如 图 6所示 , 当加人 C a Z + 、 C u Z + 和 Z n , + 后 溶液
的吸光度和回归直线的斜率均显著增大 , 因此 C a Z十 、
C u
Z十和 Z n +2 对山杏种皮黑色素具有增色护色作用 ,
加人 lA ,十和 M g , + 后吸光度和回归直线斜 率也 略有
增大 ,但不显著 ,加人 N +a 对吸光度和回归直线斜率
均无显著影响 . 黑色素是一种络合剂 , 这些现象可能
与络合有关 。 加人 F e CI : 后产生沉淀 , 加人 F eS O ; /
K
3
F e( C N )
` 后反应形成蓝色 , 预示着酚结构的存在 。
2
.
10 氮甚酸 、有机酸 、 精和淀粉对 山杏种皮黑色众
的影晌一 las
为了避免加人的有机物对吸收光谱的直接影响 ,
只采用 4 0 0一 8 0 0 n m 的吸光度来计算回归直线的斜
率 ,用 4 0 n m 处 的吸光度进行分析 , 实验结果如 图
7
。 氮基酸 、糖和淀粉对山杏种皮黑色素没有显著影
响 。 有机酸使吸光度和回归直线斜率均显著降低 ,这
与 p H 对 山杏种皮黑 色素的影 响相 似 , 因此 可能是
H 十影响的结果 ,而非有机酸根离子的效应 。
司」. 4洲) 3 7
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试剂
尹 护 尹
图 7 氮墓酸 、有机酸 、 糖和淀粉对吸光度
(灰色柱 )和斜率的影响
3 结论与讨论
黑色素结构仍然是未知的 , 因此无法从结构上给
出一个严格的定义 。 鉴定黑色素的一般标准包括通
常不溶于水和常见的有机溶剂 ,可被氧化剂 漂白 , 多
酚定性反应呈阳性和具有 稳定 的 自由基 。 山杏种皮
黑色素具有黑色素典型的性质 : 不溶于水和常见的有
机溶剂 , 溶 于碱溶液 , p H 值 < 3 时发生 沉淀 , 可被
K M n O
. 、
K
Z
C r
Z
O
7 、
N a C IO 和 H Z O : 氧化漂 白 , 多 酚
定性反应呈阳性 。 笔者还研究证实 , 山杏种皮黑色素
同样具有稳定的 自由基 , 该部分内容将在笔者别的文
章中报道 。
温度影响山杏种皮黑色素的氧化程度 ,但其溶液
的颜色对温度 比较稳定 。 冷冻对 山杏种皮黑色素的
影响因溶液的 p H 而异 , p H < 6 时 ,解冻后 , 黑色素发
生沉淀 , p H妻 6 时 ,冻结没有显著影响 。 紫外光和 自
然光都使山杏种皮黑色素褪色 。 山杏种皮黑 色素溶
液色泽在较宽的 p H 范围内较为稳定 ,但随 p H 的增
大颜色略有加深 。 N a Z S O : 在短 期 内有 增色护 色作
用 . C a , + 、 C u , + 和 Z n Z+ 具有 增 色护 色作 用 , A I , + 、
M g
,十 、 N +a
、氮基酸 、 糖和淀粉对 山杏种皮黑色素无
显著影响 。 加人有机酸后 ,溶液略有褪色 。
有关黑色素稳定性的研究报告非常有限 , 山杏种
皮黑色素在对紫外光 、 可见光 、 还原剂 以及有机酸等
的稳定性方面 与桂花种子黑色素 l0[ 〕并不一致 , 反 映
了它们在结构和类型上的差异 。
在以往的报道中 ,将吸光度的对数对波长的回归
直线的斜率当作黑色素的特征性参数用于表征黑色
素山 · ’ 5〕 。 H a kr i 等人研究发现 , 这一斜率 随黑色素
的氧化程度不 同而发生变化 l[ ’ 〕 。 本研究 中 , 所有 的
处理都未改变紫外 一 可见光 吸收光谱的形状 , 回归
R
Z 值均在 0 . 9 85 以上 , 因此我们首次尝试将这一斜
率作为衡量黑色素稳定性的指标 ,结果表明 , 这一斜
率不仅因黑色 素氧化还 原状态 而异 , 还 受溶液 p H
值 、 金属离子 、光照 、 温 度和其它一些 因素的影 响 ,可
以反映黑色素内部结构 的变化 , 而且与吸光度相 比 ,
有时还具有一定的优点 , 比如在本研究 中经过 1 0 ℃
的热处理 ,黑色素总多酚含量降低 ,氧化程度增大 , 这
一变化并不能被吸光度反映出来 ,但回归直线斜率的
变化预示着黑色素 已经发生了结构上的变化 。
总的来说 , 山杏种皮黑色素有望成为一种新型的
天然色素 ,但是由于其在一些方面不甚稳定 , 加工 、 运
输 、储藏过程中应蔽光 ,尽量避免高温和冷冻 ,避免使
用金属容器并控制好 p H 值范围等 。
今 考 文 献
B u t le r M J
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D a y A W
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F
u n g a l m e la n in s : a r e v ie w 〔J ] .
C
a n a d ia n J o
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r o b io lo g y
,
1 9 9 8
,
4 4 ( 1 2 ) : 1 1 15 ~
1 1 36
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,
B
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M
e la n in s a n d th e i r im p o r t a n e e in
p a th o g e n ie f u n g i〔J ] . C u r r e n t T o p ie s i n M e d i e a l M y e o lo -
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1 9 8 8
,
2 : 3 3 8~ 3 8 7
H
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V
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t r a e t e d f r o m hT
e a : ￡n e n s i : L in n . 〔J〕. L if e cS i e n e e s , 20 0 4 ,
7 4 ( 1 6 ) : 2 0 3 7~ 2 0 4 7
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( V EG F ) p r o d u e t io n 〔J〕 . P h y t o m e d ie i n e , 2 0 0 6 , 1 3 ( 5 ) :
3 2 4~ 3 3 3
K e r e s t e s J J R
,
K
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,
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t iv e f r a e t i o n o f v e g e t a b le m e la n i n
,
p r o e e s s fo r i t s p r o d u e
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t io n a n d i t s u s e 〔P〕. U S A , 6 5 7 6 2 6 8 . 2 0 0 3
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li k e p ig m e n t d e r iv de f
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n -o s t im u la t i n g a e t iv i t y 〔J ] . OF o d R e s e a r c h I n t e r n a t io n a l ,
2 0 0 1
,
3 4 ( 4 ) : 3 3 7~ 3 4 3
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k i n s o 汀 5 d is e a s e u s in g m e la n in 〔P〕. U S A , 5 2 1 0 0 7 6 . 1 9 9 3
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s e e d s [ J〕. LW T 一 F o o d cS ie n c e a n d eT e h on l o g y , 2 0 0 6 ,
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a n o s P o ur m V it t
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[J〕. F o o d C h e m i s t r y , 1 9 9 7 , 5 8 , ( 1~
2 ) : 69~ 73
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n i n [ J〕. P i g m e n t C e l l R e s e a cr h , 2 0 0 5 . 1 8 ( 2 ) : 1 3 0 ~ 1 3 5
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t o t a l e x t ar e at b l e p h e n o li e e o m p o u n d s f r o m d i f f e r e n t fo o d
s a m p le s b y e o m P a r i s o n o f e h r o m a t o g r a P h ie a n d s p e e t or
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p h o t o m e t r i。 m e t h o d s [ J〕 . A n a lyt i e a C h im ie a A e t 。 ,
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s e o p y [ J〕. B i o l o g y a n d F e r -
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o l o g y L e t t e r s
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P h y s i e o e h e m i e a l P r o P e r t l e s o f M e l a n i n fr o m P r u n u s a r 刀皿仑n 忍a C a V a t 。 a n s “
Y a o Z e n g y u
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Z h a o Z h o n g
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L i K e y o u
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S h i Q i n g h u
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,
Z h u H a i l
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,
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o r th w e s t A乙 F u n iv e r s i t y , Y a n g l in g , S h a a n x i 7 2 2 1 0 0 , C h i n a )
A B ST R A C T T h
e m e l a n i n f r o m P r u n u s a mr
e n i a c a v a r
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a n s u e x h ib i t e d t y p i e a l p h y s i e o e h e m i e a l p r o p e r t i e s o f
m e la n i n
.
T h e s t a b i l i t y e x p e r im e n t s h o w e d t h a t
:
T e m p e r a t u r e a f f e e t e d t h e t o t a l p h e n o li e e o n t e n t b u t d id n o t
e h a n g e t h e e o lo r o f t h e m e l a n i n s o l u t io n
.
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e n f r o z e n a t P H < 6
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t h e p i g m e n t P r e e i p i t a t e d ; u l t r a v i o l e t a n d
n a t u r a l l i g h t h a d d i s e o lo r a t io n e f f e e t ; w i t h P H i n e r e a s e d
,
i t b e e a m e m o r e d a r k ; C a
Z+ , C u
Z+ a n d Z n
Z+ h a d t h e
f u n e t i o n o f e o l o r i n e r e a s e o r e o l o r p r e s e r v a t i o n
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M g Z+
,
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3+ , N a +
,
g l u e o s e
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, s u g a r a n d s t a r e h
d id n o t a f f e e t t h e m e l a n i n
,
w h i l e p H
, o r g a n i e a e id a n d r e d u c e r a f f e e t e d i t s l i g h t ly
.
M o r e o v e r
,
t h e s l o p e o f t h e
10 9 a b s o r b a n e e v e r s u s w a v e l e n g t h w a s e m p l o y e d a s a p a r a m e t e r t o e v a l u a t e m e l a n i n s t a b i l i t y a n d t h e c h a n g e
o f t h e s l o p e e o u l d r e f l e e t t h e a l t e r a t i o n i n s t r u e t u r e o f t h e m e l a n i n
·
K e y w o r d s m
e l a n i n
, p h y s i e o e h e m i e a l p r o p e r t i e s
,
P r “ n “ s a附 e n i a e a v a r . a n s “ , t e s t a , s t a b i l i t y
(上接第 36 页 )
I m m o b i l i z a t i o n o f C y e l o d e x t r i n G l y e o s y l T r a n s fe r a s e i n S od i
u m A l g i n a t e
G u o Y a n
,
W a n g W
e iw e i
,
G u o L iw e i
,
X i a o L im i n g
( C o l le g e o f L if e cS i
e n e e ,
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o r th w e s t U n iv e r s i t y
,
X犷a n 7 1 0 0 6 9 , C h i n a )
A B S T R A C T T h e o p t im u m c o n d i t i o n s f o r im m o b i l i z i n g C G T a s e w i t h s o d i u m a lg i n a t e a n d t h e p r o p e r t i e s o f
t h e im m o b i l i z e d e n z y m e w e r e s t u d i e d b y t h e s i n g l e f a e t o r a n d o r t h o g o n a l d e s i g n
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e
h i g h r e e o v e r y r a t e o f t h e im m o b i l i z e d e n z y m e e o u l d b e o b t a i n e d u n d e r t h e e o n d i t i o n s o f 7 % s o d i u m a lg i n a t e
,
3% C a C I
: , t h e r a t i o o f s o d i u m a l g i n a t e a n d e n z y m e l
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2
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5 h im m o b il iz a t i o n t im e
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T h e o p t im u m p H a n d
t e m p e r a t u r e o f t h e im m o b i li z e d e n z y m e w e r e a s t h e s a m e a s f r e e e n z y m e
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I t a l s o s h o w e d a w id e r r a n g e o f r e
-
a e t i o n p H v a l u e a n d t e m p e r a t u r e v a l u e t h a n f r e e e n z y m e
.
T h e im m o b i l i z e d e n z y m e s h o w e d a h ig h o p e r a t i o n a l
s t a b i l i t y b y r e t a i n i n g a lm o s t 7 5 %
o f t h e in i t i a l a e t i v i t y a t s e v e n t h r o u n d
.
K ey w o川 5 s o d i u m a lg i n a t e , im m o b i l i z a t i o n , C G T a s e
2印 7 年摘 3 . 摘 , 期 (总招 23 7期 ) }
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