全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2014 年
收稿日期：2013－06－25
基金项目：黄山学院自然科学基金项目(2012xkjq002)；国家级大学生创新计划项目（201210375041）
作者简介：朱艳华（1994-），女，安徽亳州人，研究方向为天然产物活性和微生物，（电话）18705592617（电子信箱）hswfl@aliyun.com；
通讯作者，毕淑峰（1975-），男，副教授，（电话）15005599526（电子信箱）bsfhs@yahoo.cn。
一年蓬（Erigeron annus）为菊科（Asterales）飞蓬
属（Erigeron）植物，为外来入侵种，广泛分布于全国
各地。 一年蓬性平、味淡，具有清热解毒、助消化的
作用，主治消化不良、传染性肝炎、急性肠胃炎、淋
巴结炎、疟疾、血尿，其根捣烂可敷牙龈肿［1，2］。 一年
蓬挥发油的化学成分及其抑菌作用已有文献报道［3－6］，
但其抗氧化活性研究鲜见报道 。 本研究以其对
DPPH·、金属离子螯合作用、亚硝酸钠清除作用为指
标评价一年蓬叶挥发油的体外抗氧化活性，为一年
蓬资源的开发利用及其药理研究提供科学依据。
1 材料与方法
1 材料
一年蓬叶采自黄山学院校园， 真空干燥后粉
碎、过 50 目筛、装瓶、备用；UV754N 型紫外可见分
光光度计购自上海精密科学仪器有限公司；挥发油
提取器；1，1－二苯基苦基苯肼 ［DPPH，梯希爱 （上
海 ）化成工业发展有限公司 ］；无水乙醚 、EDTA、
2，6－二叔丁基－4－甲基苯酚（BHT）、过硫酸钾等均
为国产分析纯。
1．2 方法
1．2．1 挥发油的提取 称取 20．0 g样品置于挥发油
提取器烧瓶中，加 300 mL 去离子水，用挥发油提取
器按水蒸气蒸馏法提取 6 h， 得到具有浓郁香味的
淡黄色透明油状物，共提取 8 次，用丙酮稀释成体
积分数 20％，备用。
1．2．2 挥发油对 DPPH·清除作用的测定 ［7，8］ 取
20～100 μL 20％挥发油置于 5 只试管， 样品体积少
于 100 μL 的试管， 以丙酮补至 100 μL。 分别加 4
mL 24 mg ／ L 的 DPPH 乙醇（95％）溶液混合 ，避光
2 h，在波长 517 nm 处测吸光度（Ai），以不加样品的
DPPH 乙醇液为空白对照，测定吸光度（A0）。 以 0.1
一年蓬叶挥发油的体外抗氧化活性研究
朱艳华，任 东，丁秀萍，苗华彪，李孝宇，毕淑峰
（黄山学院生命与环境科学学院，安徽 黄山 245041）
摘要：采用水蒸气蒸馏法提取一年蓬（Erigeron annus）叶的挥发油，以 DPPH 自由基（DPPH·）、亚硝酸钠
清除作用和金属离子螯合作用为指标评价挥发油的体外抗氧化活性。 结果表明，一年蓬叶 20％挥发油对
DPPH·、亚硝酸钠的清除作用和金属离子螯合作用的效果明显，其 IC50分别为 71．99、148．46、75．22 μL。一
年蓬叶挥发油具有良好的体外抗氧化活性，且样品量与抗氧化活性存在量效关系。
关键词：一年蓬（Erigeron annus）叶；挥发油；抗氧化活性
中图分类号：R962 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2014）06－1382-02
Antioxidant Activities in Vitro of Volatile Oil from Leaves of Erigeron annus
ZHU Yan－hua，REN Dong，DING Xiu－ping，MIAO Hua－biao，LI Xiao－yu，BI Shu－feng
（College of Life and Environment Science， Huangshan University， Huangshan 245041， Anhui， China）
Abstract： The volatile oil from leaves of Eigeron annus was extracted by steam distillation and its antioxidant activities were
evaluated by scavenging capacity against DPPH·and sodium nitrite， and metal chelating ability． The results showed that 20％
volatile oil had significant scavenging capacity against DPPH· and sodium nitrite. Metal chelating ability with IC50 value was
71．99， 148．46 and 75．22 μL， respectively． The volatile oil from leaves of Eigeron annus had significant antioxidant activity in
vitro and showed dose－effect relationship between the number of sample and antioxidant activity．
Key words： leaves of Eigeron annus； volatile oil； antioxidant activity
第 53卷第 6期
2014年 3月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 53 No.6
Mar．，2014
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.06.058
第 6 期
mg ／mL 维生素 C 替代挥发油为阳性对照 。 清除
率＝（1－Ai ／A0）×100％。
1．2．3 挥发油对金属离子螯合作用的测定 ［9］ 取不
同体积（20～100 μL）20％挥发油，用丙酮将体积补至
100 μL，形成不同浓度梯度样品。 加入 2．8 mL 蒸馏
水 、50 μL 2 mmol ／ L 的 FeCl2·4H2O 和 50 μL 5
mmol ／ L 的 Ferrozine，10 min 后在 562 nm 处测吸光
度 （At）， 以 100 μL 丙酮代替挥发油样品为空白对
照，测其吸光度（A0）。 以 0.5 mg ／mL EDTA 代替 2%
挥发油为阳性对照。 螯合率＝（1－At ／A0）×100％。
1．2．4 挥发油对亚硝酸钠清除作用的测定 ［10］ 将
0．5 mol ／ L 的柠檬酸钠－盐酸缓冲液（pH 3．0） 5．0 mL
置于 10 mL 容量瓶中， 加入 1 mL 0．1 g ／ L 的 NaNO2
溶液和 20～100 μL 挥发油， 用蒸馏水定容至刻度，
37 ℃下反应 1 h。取 1 mL反应液，加入 4 g ／ L对氨基
苯磺酸溶液 2 mL 和 2 g ／ L N－1－萘乙二胺盐酸盐 1
mL，摇匀放置 15 min，在 540 nm 处测吸光度（Ax）；
同时做对照试验测其吸光度（A0）。 以 1 mg ／mL BHT
代替 20%挥发油为阳性对照 。 清除率＝［（A0－Ax） ／
A0］×100％。
2 结果与分析
2．1 挥发油对 DPPH·的清除作用
由图 1 可知，一年蓬叶 20％挥发油对 DPPH·有
较好的清除作用，优于 0．1 mg ／ mL 维生素 C，体积为
100 μL时，清除率为 59．09％。 挥发油体积与清除率
呈正相关， 清除率随着样品体积的增加而逐步增
大，但增幅随着样品体积的增大而减小；挥发油样
品体积（X）与清除率（Y）间的回归方程为 Y＝0．455 1 x＋
17．236 1，R2＝0．931 9。 20％挥发油和 0．1 mg ／ mL 维生
素 C的 IC50 （清除率为 50％时样品的体积） 分别为
71．99、166．32 μL，维生素 C 的体积是挥发油体积的
2．31 倍， 挥发油对 DPPH·的清除能力明显优于 0．1
mg ／ mL维生素 C。
2．2 挥发油对金属离子的螯合作用
由图 2 可知，一年蓬叶 20％挥发油对金属离子
具有一定螯合作用， 但螯合能力低于 0．5 mg ／ mL
EDTA。 样品体积 20～40 μL 时，20％挥发油和 0．5
mg ／ mL EDTA 对金属离子的螯合效果相近， 样品体
积 40～100μL时，EDTA的螯合效果优于挥发油。 挥
发油样品量与金属离子的螯合率存在量效关系，挥
发油样品体积（X）与清除率（Y）间的回归方程为 Y
＝ 0．508 1X＋11．778 2，R2＝0．985 7。 20％挥发油、0．5
mg ／ mL EDTA的 IC50分别为 75．22、51．75 μL。
2．3 挥发油对亚硝酸钠的清除作用
由图 3 可知，一年蓬叶 20％挥发油对亚硝酸钠
具有一定清除作用 ， 其清除效果优于 1 mg ／ mL
BHT，随着样品体积的增加，两者清除率的差别逐步
增加。挥发油体积（X）与清除率（Y）存在良好的线性
相关，回归方程为 Y＝0．280 2X＋8．400 9，R2＝0．970 2。
20％挥发油 、1 mg ／ mL BHT 的 IC50 分别为 148．46、
195．61 μL。
3 小结与讨论
20％一年蓬叶挥发油具有良好的体外抗氧化活
性，对 DPPH·清除作用、亚硝酸钠的清除作用和金
属离子螯合作用的 IC50 分别为 71．99、148．46、75．22
μL， 对 DPPH·和亚硝酸钠的清除作用分别优于 0．1
mg ／ mL 维生素 C 和 1 mg ／ mL BHT 的阳性对照，对
金属离子螯合作用弱于 0．5 mg ／ mL EDTA。 天然产
物的抗氧化活性是其在医药、保健品、抗氧化剂应
用的基础，一年蓬叶在医药、食品、保健品等行业具
图 1 挥发油对 DPPH·清除作用
80
60
40
20
0
清
除
率
//%
20 40 60 80 100
体积//μL
20%挥发油
0.1 mg/mL 维生素 C
图 2 挥发油对金属离子螯合作用
100
80
60
40
20
0
螯
合
率
//%
20 40 60 80 100
体积//μL
20%挥发油
0.5 mg/mL EDTA
图 3 挥发油对亚硝酸钠清除作用
40
30
20
10
0
清
除
率
//%
20 40 60 80 100
体积//μL
20%挥发油
1 mg/mL BHT
朱艳华等：一年蓬叶挥发油的体外抗氧化活性研究 1383
湖 北 农 业 科 学 2014 年
有应用前景。 一年蓬作为一种外来入侵种，繁殖力
强、分布广，其资源丰富，将其开发利用是有效的防
治途径和方法。 以综合开发利用为防治模式比单
纯、机械地铲除和使用除草剂去除更加环保、经济。
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（责任编辑 程碧军）
第 53 卷第 6 期
2014年 3 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 53 No.6
Mar．，2014
收稿日期：2013－09－13
基金项目：吉林省科学技术厅科技发展计划项目（20010224－1）
作者简介：刘艳秋（1979－），女，吉林吉林人，在读博士研究生，研究方向为森林植物有效成分转化与利用，（电话）18604498239（电子信箱）
lyq800122＠163．com；通讯作者，孟庆繁，教授，主要从事森林保护研究。
酸樱桃果实中原花青素提取工艺的研究
刘艳秋1，2，孟庆繁 1，高文韬 1
（1．北华大学林学院，吉林 吉林 132013；2．东北林业大学林学院，哈尔滨 150040）
摘要：研究了酸樱桃（Prunus cerasus）果实中原花青素的提取方法和提取的工艺条件，考察了提取溶剂、
提取温度、提取时间、料液比等因素对原花青素提取率的影响。 结果表明，酸樱桃果实中原花青素的最佳
提取工艺条件为 70％乙醇、提取温度 60 ℃、提取时间 3.0 h、料液比 1∶4、浸泡时间 8 h；并对提取液进行了
纯化，经过用乙酸乙酯萃取，浓缩离心后用 3∶1 石油醚萃取后再用 2∶1 乙酸乙酯萃取，得到初步原花青素
产品，得率为 0．38％。
关键词：酸樱桃（Prunus cerasus）；原花青素
中图分类号：S662．5 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2014）06－1384-04
Technology of Extracting Procyanidins from Prunus cerasus
LIU Yan－qiu1，2，MENG Qing－fan1，GAO Wen－tao1
（1．Forest College of Beihua University， Jilin 132013， Jilin， China；2．The University of Northeast Forestry， Harbin 150040， China）
Abstract： The technology of extracting procyanidins from Prunus cerasus was studied through analyzing effects of technical
parameters such as solvent， extraction temperature and time，and ratio of material to solvent． The results showed that the opti-
mal conditions of extracting procyanidins from Prunus cerasus were at 60 ℃ for 3.0 h and 70％ ethanol in a ratio of 1∶4 after
soaked 8 h． The solution were extracted by 3∶1 petroleum echer and 2∶1 ethyl acetate sequentially after concentrated and sep-
arated centrifugally． The procyanidins obtained were 0．38 percent of fresh fruits of Prunus cerasus．
Key words： Prunus cerasus；procyanidins；extraction technology
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!