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白茎绢蒿挥发油的化学成分及抑菌作用的研究



全 文 :白茎绢蒿挥发油的化学成分及抑菌作用的研究
滑 艳 1 ,  汪汉卿 2
(1.广东省惠州市中心人民医院检验中心 ,广东 惠州 516001;2.中国科学院兰州化学物理研究所 OSSO国家
重点实验室 ,甘肃 兰州 730000)
收稿日期:2006-07-12
作者简介:滑 艳(1965~ ),女 ,理学博士 ,副主任检验师 ,目前从事临床检验。电话:13542793939。
关键词:白茎绢蒿;挥发油;化学成分;抑菌作用
中图分类号:R284.1     文献标识码:B     文章编号:1001-1528(2007)05-0754-03
  白茎绢蒿Seriphidiumterrae-albae(Krasch)Poljak为菊科
(Compositae)绢蒿属(SeriphidiumPoljak)植物的全草 , 主要分
布于新疆北部 , 生长于沙漠及沙漠边缘沙砾质戈壁地区 , 蒙
古及苏联(中亚)也有分布 [ 1] 。对该植物化学成分的研究未
见有报道 , 因此为了探索白茎绢蒿是否具有潜在的药用价
值 , 并寻找天然的活性成分 ,我们首次对该植物进行了化学
成分的研究 , 并对其从乙醇提取物中初步分离得到的 9个化
合物进行了报道 [ 2] 。我们在对白茎绢蒿化学成分研究的同
时 , 利用气相色谱 /质谱法对其挥发油成分也首次进行了分
析鉴定。本试验对从白茎绢蒿挥发油中鉴定出的 56种化合
物首次进行报道 , 并同时报道该挥发油对 5种常见菌的抑制
情况。
1 仪器与材料
HP6890/5973GC-MS仪 , HP-5MS(30 m×0.25 mm×
0.25 μm)(美国 HP公司)。白茎绢蒿是于 2001年 8月采自
新疆阜康 , 由中国科学院新疆生态和地理研究所张立运教授
鉴定为绢蒿属植物白茎绢蒿Seriphidiumterrae-albae(Krasch)
Poljak。
2 挥发油的提取方法与结果
2.1 挥发油的提取 将干燥的白茎绢蒿全草粉碎后取 20 g
进行水蒸汽蒸馏 ,收集馏出液用等量的乙醚萃取 6次 , 合并
乙醚萃取液 ,回收乙醚后得到淡黄色有特殊气味的油状物若
干。
2.2 气相色谱条件 柱温 60 ~ 80℃, 5℃/min, 气化室温度
300℃,载气为氮气 , 柱前压 59.8 kPa, 分流比 15∶1, 柱流量
1.2 mL/min, 进样量 0.4 μL。质谱条件:电离方式 EI, 电子
能量 70eV,离子原温度 230℃, 扫描范围 33 ~ 550质量单位 ,
扫描速度 0.5s/dec。
2.3 结果 从白茎绢蒿挥发油中分出 76种成分(图略),用
面积归化法计算出相对含量 , 相应质谱图经计算机检索 , 共
鉴定出 56种化合物 , 占总挥发油的 73.6 。已鉴定出的各
组分的名称 、含量见表 1。
3 白茎绢蒿挥发油的抗菌实验
挥发油是中草药中一类常见的重要成分 , 早在古代医疗
实践中就注意到挥发油的一些药用价值如祛痰 、止咳 、平喘 、
驱风 、健胃 、解热 、镇痛及抗菌消炎等。挥发油具有多种药理
活性 ,如抗过敏 、酶抑制 、抗炎 、抗突变 、抗癌 、抗菌 、抗病毒 、
驱虫 、抗氧化及对中枢神经系统的镇静作用等 [ 3] 。在本实验
中 ,我们对白茎绢蒿挥发油进行了 5种常见菌的抑制实验。
表 1  白茎绢蒿挥发油的化学成分
Table1 ChemicalconstituentinessentialoilinSeriphidiumterrae-albae(Krasch)Poljak
峰号(No.) 化合物名称(Compounds) 相对含量(relativecontent)/
1 3-甲基丁酸 3-metheybutanoicacid 0.27
2 1, 3-二甲基苯 1, 2-dimethylbenzene 0.90
3 己酸 hexanoicacid 0.34
4 桉树脑 eucalyptole 0.10
5 苯甲酸 benzoicacid 0.30
6
5-(1-甲乙基)-二杯 [ 3, 1, 0]己二酮
5-(1-methyl)-bicyclo[ 3, 1, 0] hexan-2-one 0.17
7 苎酮 thujone 17.07
8 苎烯 limonene 0.50
9 莰烯 camphene 0.77
10 反-2, 3-环氧癸烷 trans-2, 3-epoxydecane 0.17
11
1, 3, 3-三甲基-2-氧杂二环 [ 2, 2, 2] -辛-6-醇
1, 3, 3-trimethyl-2-oxabicyclo[ 2, 2, 2] -octan-6-ol 0.19
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续表 1 
12 3-(1-甲基乙基)-苯酚 3-(methylethyl)-phenol 0.57
13 α-匝萜品烯 α-terpinene 0.31
14
顺-1, 3, 3-三甲基-2-氧杂二环 [ 2, 2, 2] -辛-5-醇
cis-1, 3, 3-trimethyl-2-oxabicyclo[ 2, 2, 2] -octan-5-ol 0.17
15 4-(1-甲基乙基)-苯甲醇 4-(1-methylethyl)-benzenemethanol 0.92
16 2-甲基-5-(1-甲基乙基)-苯酚 2-methyl-5-(1-methylthyl)-phenol 1.03
17 龙脑 borneol 1.25
18 樟脑 camphor 3.22
19
1-甲基-4-(1-甲基亚乙基)-环己烷
1-methy1-4-(methylehylidene)-cyclohexene
20 4-(1-甲基乙基)-1, 4-环己二烯 4-methylethyl-4-cyclohexadiene 0.29
21 5-十八碳烯 5-octadecene 0.49
22 正十四烷 tetradecane 0.49
23 香草醛 vanilin 8.73
24 2, 4-双(1, 1-2-甲基乙基)苯酚 2, 4-bis(1, 1-dimethylethyl)-phenol 0.45
25
5, 6, 7, 7a-四氢-4, 4, 7a-3-甲基-2(4H)-苯并呋喃酮
5, 6, 7, 7a-tetrahydro-4, 4, 7a-trimethyl-2(4H)-benzofuranone 0.54
26 1-十九碳烯 1-nonadecene 0.89
27 正十六烷 hexadcane 0.54
28
1, 2, 3, 3a, 4, 5, 6, 7-八氢-1, 4-二甲基-7-(1-甲基乙基)-甘菊兰
1, 2, 3, 3a, 4, 5, 6, 7-octahydro-1, 4-dimethyl-7-(1-methylethenyl)-azulene 0.60
29 2, 4-二叔丁基-6-硝基苯酚 2, 4-di-t-butyl-6-nitrp-phenol 0.70
30 十四烷酸 tetradecanoicacid 1.19
31 正十八烷 octadecane 1.10
32 1-十八碳烯 1-octadecene 0.35
33 马兜铃烯aristolene 6.50
34 香芹酮 carvone 0.81
35 薄荷酮 menthone 0.53
36 1, 3-二-正丙基金赐烷 1, 3-di-n-propyladamantane 0.20
37 α-蒎烯 α-pinene 0.28
38 正十六烷酸n-hexadecanoicacid 0.89
39 正三十二烷 datriacontane 0.37
40 十八烷二酸 octadecanediacid 2.31
41 (Z, Z)-9, 12-十八碳二烯酸(Z, Z)-9, 12-octadecadienoicacid 0.15
42
3-(4-甲氧苯基)-2-乙基己基酯-丙烯酸
3-(4-methoxyphenyl)-2-ethylhexylesterpropenoicacid 0.53
43 1-二十二碳烯 1-docosene 0.93
44 17-三十五碳烯 17-pentatriacontene 0.68
45 α-山道年 α-santonin 0.31
46 4-硝基-N-苯基-苯铵 4-nitro-N-phenyl-benzenamine 0.60
47 1-二十一烷基-甲酸 1-heneicosylformate 0.42
48 三十烷 triacontane 0.60
49 1, 21-二十五双烯 1, 21-docosadine 0.42
50 1-二十烷醇 1-eicosanol 0.85
51 正二十五烷pentacosane 0.18
52 二-n-辛-邻苯二甲酸盐din-n-octyl-phthalate 0.60
53 正二十烷 eicosane 0.70
54 正二十七烷heptacosane 0.53
55 正二十八烷 octacosane 0.35
56 γ-谷甾醇 gamma-sitostyerol 0.34
3.1 供试菌种 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),
大肠杆菌(Escherichiacoli),绿脓杆菌(Pseudomonaseaerugi-
nose),肺炎链球菌(Streptococckuspneumoniae), 白色念珠菌
(Candidaalbicans)。
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3.2 菌悬液的制备 取受试菌种溶于 2mL蒸馏水中 , 制成
菌悬液 , 振荡 15 s, 用血细胞计数板将其浓度调至 1×104 ~ 2
×105 cfu/mL。
3.3 培养基 细菌使用的是沙氏液体培养基 , 真菌使用的
是改良沙氏培养基。
3.4 实验药物的制备 把白茎绢蒿挥发油溶解在 95 的
乙醇溶液中 , 配成体积比为 10 的药物母液。 将液体培养
基进行高压灭菌(121℃, 15 min),当冷却至约 60℃时 , 用培
养基将药物母液进行倍比稀释 , 制成从 1 μL/mL到 30 μL/
mL的一系列药物浓度梯度培养基。
3.5 实验方法及结果判断 在每一支试管中 , 将配好的药
物稀释液 , 由高浓度至低浓度各加入 1 mL, 并以液体培养基
不加药物作为空白对照。将菌悬液 10 μL均匀接种于培养
基中 , 细菌在 37℃孵育 24 h, 真菌在 37℃孵育 72 h。在不搅
动的情况下肉眼观察判断 , 溶液清晰透明视为细菌完全不生
长 , 以完全不生长管的最低药物浓度为最低抑菌浓度
(MIC)。
3.6 结果
白茎绢蒿挥发油对 5种细菌生长的影响情况见表 2。
表 2  白茎绢蒿挥发油的抑菌效果
受试菌株 MIC/μL/mL
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus) 2.5
大肠杆菌(Escherichiacoli) 5.0
肺炎链球菌(Streptococckuspneumoniae) 5.0
绿脓杆菌(Pseudomonaseaeruginose) 10.0
白色念珠菌(Candidaalbicans) 20.0
  实验结果证明 , 白茎绢蒿挥发油对 5种受试菌均有不
同程度的抑制作用 ,抑制强度依次为金黄色葡萄球菌 >大肠
杆菌 ,肺炎链球菌 >绿脓杆菌 >白色念珠菌。
4 讨论
对白茎绢蒿挥发油所鉴定出的 56种成分进行归类分
析 ,发现白茎绢蒿挥发油中共分离出萜类化合物 13种 , 约占
总挥发油的 23.2 , 芳香族化合物 9种 , 约占 16, 1 , 醇 、
醛 、酮类化合物 5种 , 约占 8.9 ,长链脂肪烃 、酸等 28种 ,约
占 50.0 。白茎绢蒿挥发油中的许多成分都具有药理活
性 ,如桉树脑(0.10 )具有抗炎 、抗菌 、平喘和镇痛作用 [ 4] ;
α-蒎烯(0.32 )具有镇咳 、祛痰及抗真菌作用 [ 4] ;而龙脑
(1.25 )具有发汗 、兴奋 、镇疼的作用 , 樟脑(3.22 )具有
局部刺激 、强心 、杀虫的作用 [ 4]及增强治疗溃疡效果的作
用 [ 5] 。我们通过从白茎绢蒿挥发油的抗菌实验可看出 , 白茎
绢蒿挥发油对 5种受试菌均有不同程度的抑制作用 ,因此 ,
白茎绢蒿具有重要的药用价值。
参考文献:
[ 1]  中国科学院植物编辑委员会 ,中国植物志 [ M] .第七十五卷.
北京:科学出版 社 , 1979.275-276.
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产物研究与开发 , 2003, 15(3):219-221.
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essentialoilsandtheirconstituents[ M].Ata-ur-Rahman(Ed.)
StudNaturalProduct, 2000, 21:571.
[ 4]  江纪武 ,肖庆祥.植物药有效成分手册 [ M] .北京:轻工业出
版社 , 1989:428.
[ 5]  吕义长 ,王玉兰 ,白玉芳.黄花杜鹃挥发油化学成分的研究
[ J] .化学学报 , 1980, 30(2):140-146.
愈风颗粒对 MCAO大鼠模型脑神经细胞 Caspase-3、Fas影响的实验研究
常学辉 1 ,  张良芝 2
(1.河南中医学院第二临床医学院脑病科 ,河南 郑州 450002;2.河南中医学院基础医学院中诊学科 ,河南 郑
州 450008)
收稿日期:2006-02-15
作者简介:常学辉(1975~ ),男 ,医学博士 ,副教授,研究方向:脑血管病的防治。电话:(0)-13383865938。
关键词:细胞凋亡;愈风颗粒;Caspase-3 Fas
中图分类号:R285.6     文献标识码:B     文章编号:1001-1528(2007)05-0756-02
1 材料与方法
1.1 实验动物 老年 Wister大鼠 40只 , 清洁级 , ♀♂各半 ,
体重(300±20)g。
1.2 药物与试剂 愈风颗粒 , 以蒸馏水稀释为 50 的水溶
液(每 1mL溶液含生药 0.5 g);尼莫地平片 ,以蒸馏水稀释
为 1 的水溶液(每 1 mL溶液含生药 1 mg);生理盐水。大
鼠 Caspase-3免疫组化染色试剂盒 , Fas免疫组化染色试剂
盒 ,均由武汉博士德生物工程有限公司生产。
1.3 分组与处理 大鼠按体重随机分为 4组:正常对照组
(简称正常组)、造模对照组(简称模型组)、尼莫地平组(简
称西药组)、愈风颗粒组(简称中药组),每组 10只。造模前
30 min,中药组以 5 g/kg体重给愈风颗粒水溶液灌胃;西药
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