全 文 ： 第３３卷 第６期 吉首大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．３３ Ｎｏ．６
２０１２年１１月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｓｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｎｏｖ．２０１２
文章编号：１００７－２９８５（２０１２）０６－００８９－０６
响应面法优化田基黄总黄酮的吸附工艺
＊
杨佳宇，徐勇威，孙亚丽，张珍贞，李雪峰，欧阳玉祝
（吉首大学化学化工学院，湖南 吉首 ４１６０００）
摘 要：以田基黄为原料，选择乙醇质量分数、吸附温度和吸附时间为影响因子，总黄酮吸附率为响应值优化了大孔树
脂对田基黄总黄酮的吸附工艺条件，应用Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ设计建立数学模型，并进行响应面分析．结果表明，用１２％乙醇为溶
剂，２８℃温度下吸附３６ｍｉｎ，总黄酮的吸附率为８７．１４％．
关键词：响应曲面法；田基黄；总黄酮；吸附
中图分类号：ＴＱ２８ 文献标志码：Ａ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－２９８５．２０１２．０６．０２１
田基黄（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ）系藤黄科金丝桃属植物地耳草的干燥全草，具有清热利湿、散瘀止
痛、消肿解毒之功效［１－２］．研究表明［３］，田基黄中含有丰富的槲皮苷、异槲皮苷、槲皮素－７－鼠李糖苷、３，５，７，
３’，４’－五羟基黄酮－７－鼠李糖苷、异鼠李素、芦丁等黄酮化合物，广泛用于临床治疗肝炎、伤寒、副伤寒和感
冒．目前田基黄的研究主要集中在化学成分分析上．傅芃等［４］用色谱法对田基黄乙醇提取物中黄酮化合物
的分离分析进行研究；席仲洪等［５］对不同采收季节和不同部位的田基黄中黄酮化合物的含量进行测定；龚
受基等［６］用高效液相色谱法测定田基黄中槲皮素含量并优化大田基黄总黄酮的提取工艺．大孔树脂吸附
法是近年来发展起来的一种化学稳定性高、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生方便、
分离费用低的先进分离技术，广泛用于化工、医药、食品和环保领域［７－１２］．笔者以田基黄为原料，用曲面响
应法优化大孔树脂对总黄酮的吸附工艺，希望能为田基黄中黄酮化合物的吸附分离提供理论依据．
１ 实验部分
１．１实验仪器和药品
１．１．１实验仪器 ＵＶ－２４５０型紫外可见分光光度计（日本岛津公司）；ＫＱ－２５０Ｅ型超声波清洗器（昆山市
超声仪器有限公司）；ＳＨＢ－ＩＩＩ循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；ＤＦ－１０１Ｓ集热式恒温加热
磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司）；ＪＡ２００３Ｎ型电子天平（上海精密仪器厂）；８００型离心机（江苏金
坛大地自动化仪器厂）；ＨＹ－４调速多用振荡器（江苏大地自动化仪器厂／环保仪器厂金坛）．
１．１．２实验药品 田基黄是采自湖南省吉首地区的新鲜植株．植株采回后经洗净、晾干、切碎，于６０℃，
０．０８ＭＰａ真空干燥，用植物粉碎机粉碎，置于干燥器中备用；Ｄ１０１型大孔吸附树脂为天津光复精细化工
研究所生产；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠为国产分析纯试剂；芦丁对照品由中国药品生物制品
鉴定所提供．
１．２实验方法
１．２．１大孔树脂的预处理 Ｄ－１０１大孔吸附树脂按参考文献［１３］进行预处理．
１．２．２总黄酮的提取 取一定量的田基黄粉末，按１∶２５（ｇ／ｍＬ）料液比加６０％乙醇，６０℃下超声提取
＊ 收稿日期：２０１２－０９－０１
基金项目：吉首大学化学实验教学中心大学生创新性实验项目（２０１１ＺＸＪＪ０７）
作者简介：杨佳宇（１９９０－），女，江苏南通人，吉首大学化学化工学院学生，主要从事天然产物加工利用研究
通讯作者：欧阳玉祝（１９５６－），男，吉首大学化学化工学院教授，硕士生导师，主要从事天然产物的开发利用研究；Ｅ－
ｍａｉｌ：ｏｕｙａｎｇ１２２７＠１２６．ｃｏｍ．
１．５ｈ，抽滤、定容得提取液，贮存于冰箱冷藏室中备用．
１．２．３总黄酮的树脂吸附 取３０ｍＬ田基黄提取液于１００ｍＬ锥形瓶中，按一定固液比加入实验量的Ｄ－
１０１大孔树脂，在一定温度下吸附一定时间，抽滤，滤液定容于５０ｍＬ容量瓶中，用紫外可见光分光光度计
测吸附前后溶液的吸光度，结合标准曲线和回归方程计算总黄酮质量浓度，按下式计算吸附率：
Ｅ（％）＝
Ｃ０－Ｃｔ
Ｃ０
×１００．
其中：Ｅ为吸附率（％）；Ｃ０ 为开始吸附时溶液总黄酮浓度，Ｃｔ 为吸附时间为ｔ时总黄酮质量浓度（ｇ／Ｌ）．
１．３分析方法
１．３．１总黄酮标准曲线的绘制 用芦丁作标样，按参考文献［１４］配制标准溶液，测５１０ｎｍ处吸光度；以吸
光度为横坐标，质量浓度为纵坐标绘图，实验结果用计算机进行线性回归得回归方程Ｃ＝０．０９３ ９Ａ，相关
系数Ｒ＝０．９９９ ８，其中Ｃ为芦丁质量浓度（ｇ／Ｌ），Ａ 为吸光度．
１．３．２总黄酮的质量浓度测定 吸取１ｍＬ总黄酮样品溶液于２５ｍＬ容量瓶中，加５．０ｍＬ水和１．０ｍＬ
５％亚硝酸钠溶液，摇匀，放置６ｍｉｎ；再加入１０％硝酸铝溶液１．０ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ；再加入４％氢氧化
钠溶液１０．０ｍＬ，加水至刻度，摇匀，放置１５ｍｉｎ．以蒸馏水代替溶液做参比，用紫外可见分光光度计于
５１０ｎｍ处测定其吸光度．将吸光度代入回归方程计算样品中总黄酮的质量浓度．
２ 结果与讨论
２．１吸附工艺单因素实验
图１ 乙醇质量分数对吸附率的影响
２．１．１乙醇质量分数对总黄酮吸附率的影响 提取
黄酮所用乙醇的质量分数不同将导致吸附液乙醇质
量分数不同，黄酮化合物的吸附率也将不同．按照
１．２．３方法，按１∶５（ｇ／ｍＬ）固液比添加不同乙醇
质量分数提取的田基黄提取液，４０℃温度下吸附
９０ｍｉｎ，考察乙醇浓度对田基黄总黄酮吸附率的影
响，结果见图１．
图１表明，乙醇质量分数对田基黄总黄酮吸附
率的影响在１２％时出现最大值８５．５６％．乙醇质量
分数大于１２％后，黄酮吸附率下降．这是因为Ｄ１０１大孔树脂是一种非极性聚合物吸附树脂，具有多孔海
绵状结构，主要依靠树脂骨架与被吸附分子之间的范德华力，通过树脂巨大的比表面积进行物理吸附来提
取分离水溶性差的有机大分子．树脂内部孔表面带有弱极性基团，对水相扩散到树脂相阻力较大的疏水性
黄酮化合物吸附速度较快，吸附量较大．乙醇浓度过小，扩散速度慢，导致吸附速度降低，吸附率减小；乙醇
浓度过大，溶剂对黄酮化合物的亲和力大，不利于吸附．
图２ 固液比对吸附率的影响
２．１．２固液比对总黄酮吸附率的影响 固液比是树
脂用量与吸附液用量的比值．固液比不同，黄酮化合
物的量不同，吸附率也将不同．为了考察固液比对田
基黄中总黄酮吸附率的影响，按照１．２．３方法，在乙
醇质量分数１２％、４０℃温度、吸附９０ｍｉｎ条件下进
行吸附实验，结果如图２所示．
图２表明，Ｄ１０１树脂对田基黄总黄酮的吸附率
随固液比的增大而减小，固液比为１∶５（ｇ／ｍＬ）时，
吸附率最大为８３．１３％．这是因为固液比增大，在树
脂不变的情况下，提取液用量增加，尽管树脂都达到吸附平衡，但是因提取液中总黄酮量增加较大，影响吸
附平衡，导致吸附率相对减小．因此选择固液比为１∶５（ｇ／ｍＬ）进行静态吸附较宜．
２．１．３吸附温度对总黄酮吸附率的影响 吸附温度通过吸附热力学影响吸附平衡，因此吸附温度对总黄
０９ 吉首大学学报（自然科学版） 第３３卷
图３ 吸附温度对吸附率的影响
酮吸附率有较大的影响．为了考察吸附温度对田基
黄中总黄酮吸附率的影响，按照１．２．３方法，在固液
比１∶５（ｇ／ｍＬ）、乙醇质量分数１２％、吸附时间
９０ｍｉｎ条件下进行吸附实验，结果如图３所示．
图３表明，总黄酮的吸附率随温度升高呈现出
先增加后减小的趋势，３０℃时吸附率达到最大值
８４．７６％．这是因为该吸附是物理吸附，升高温度不
利于吸附进行，同时，温度过高还会导致黄酮化合物
氧化，所以在３０℃以上时吸附率减小；而在３０℃以
下时，分子内能较低，扩散速度慢，也不利于黄酮化合物的吸附．
图４ 吸附时间对吸附率的影响
２．１．４吸附时间对总黄酮吸附率的影响 吸附时间
长短影响到吸附平衡的建立，因此吸附时间对总黄
酮吸附率也有一定的影响．按照１．２．３方法，在固液
比１∶５（ｇ／ｍＬ）、乙醇浓度１２％、吸附温度４０℃的
条件下，考察吸附时间对田基黄中总黄酮吸附率的
影响，结果如图４所示．
图４表明，随着吸附时间增加，Ｄ１０１大孔树脂
对田基黄总黄酮的吸附率不断增大，５０ｍｉｎ时达到
最大值８５．８５％，随后基本恒定，说明吸附５０ｍｉｎ达
到平衡．
２．２响应面优化实验
２．２．１模型的建立及实验结果 结合单因素实验结果，利用Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ设计数学模型［１５－１６］，选择影响较
显著的乙醇质量分数（％）、吸附温度（℃）、吸附时间（ｍｉｎ）为影响因素，以总黄酮吸附率为响应值Ｒ１，采用
三因素三水平响应曲面法进行实验，利用Ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｔ ７．００软件进行数据处理和回归分析．Ｂｏｘ－Ｂｅ－
ｈｎｋｅｎ实验方案设计见表１．
表１ Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ实验方案设计
因素
编码水平
－１ ０ １
乙醇浓度Ａ／％ １０ １２．５ １５
吸附温度Ｂ／℃ ２０ ３０ ４０
吸附时间Ｃ／ｍｉｎ ３０ ４０ ６０
对田基黄中总黄酮提取工艺进行三因素三水平Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ优化实验设计，其数学模型通过最小二
乘法拟合二次多项式方程，表达式为
Ｒ１＝β０＋∑βｉＸｉ＋∑βｉｉＸ２ｉ ＋∑βｉｊＸｉＸｊ． （１）
其中：Ｒ１为预测响应值；β０为常数项；βｉ为线性系数；βｉｉ为二次项系数；βｉｊ为交互项系数；Ｘｉ，Ｘｊ（ｉ≠ｊ）为
自变量编码值．模型的实验设计及实验结果见表２．
表２ Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ方案设计及响应曲面法实验结果
实验编号 Ａ Ｂ Ｃ
吸附率／％
预测值 实际值
１ －０．２ １ １ ８４．７４ ８４．７４
２ －０．２ －１ １ ８５．９０ ８５．９５
３ １ ０ １ ８３．９２ ８４．００
４ －１ ０ １ ８４．７９ ８４．６６
５ －０．２ １ －１ ８５．７１ ８５．６６
１９第６期 杨佳宇，等：响应面法优化田基黄总黄酮的吸附工艺
续表
实验编号 Ａ Ｂ Ｃ
吸附率／％
预测值 实际值
６ －０．２ －１ －１ ８６．０５ ８６．０５
７ －１ －１ ０ ８５．１５ ８５．２２
８ １ ０ －１ ８４．７５ ８４．８７
９ １ －１ ０ ８４．５１ ８４．３９
１０ －０．２ ０ ０ ８７．１１ ８７．２０
１１ －０．２ ０ ０ ８７．１１ ８７．３１
１２ －０．２ ０ ０ ８７．１１ ８６．９４
１３ －１ ０ －１ ８５．１６ ８５．０９
１４ １ １ ０ ８３．７４ ８３．６６
１５ －１ １ ０ ８４．４０ ８４．５３
１６ －０．２ ０ ０ ８７．１１ ８７．００
１７ －０．２ ０ ０ ８７．１１ ８７．０８
２．２．２模型的显著性检验 对表２结果采用Ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｔ ７．００软件对方程（１）进行模拟回归分析，得到
吸附率（Ｒ１）对乙醇浓度（Ａ）、吸附温度（Ｂ）、吸附时间（Ｃ）的二次多项式回归方程为
Ｒ１＝８７．１１－０．３２Ａ－０．３８Ｂ－０．３０Ｃ－（５．３９２Ｅ－００３）ＡＢ－
０．１１ＡＣ－０．２１ＢＣ－１．８１Ａ２－０．８６Ｂ２－０．６５Ｃ２．
对该回归模型进行方差分析，结果见表３，并对模型系数进行显著性检验，结果见表４．
表３ 方差分析表
方差来源 平方和 自由度 均方 Ｆ 值 Ｐ 值 显著性
模型 ２３．０３ ９ ２．５６ ９７．９６ ＜０．０００ １ 显著
残差 ０．１８ ７ ０．０２６
失拟项 ０．０９３ ３ ０．０３１ １．３８ ０．３７０ ５ 不显著
纯误差项 ０．０９０ ４ ０．０２２
总和 ２３．２１ １６
相关系数（Ｒ２） Ｒ２＝０．９９２ １
调整后复相关系数（Ｒ２Ａｄｊ） Ｒ２ａｄｊ＝０．９８２ ０
表４ 回归模型系数显著性检验
因素 回归系数 自由度 标准误差 ９５％置信下限 ９５％置信上限 Ｆ 值 Ｐ 值 显著性
截距 ８７．１１ １ ０．０７５ ８６．９４ ８７．２９ ９７．９６ ＜０．０００１ 显著
Ａ －０．３２ １ ０．０５７ －０．４６ －０．４６ ３１．８６ ０．０００８ 显著
Ｂ －０．３８ １ ０．０５８ －０．５１ －０．５１ ４２．９３ ０．０００ ３ 显著
Ｃ －０．３０ １ ０．０５８ －０．４４ －０．４４ ２７．３０ ０．００１２ 显著
ＡＢ －５．３９２×１０－３ １ ０．０８０ －０．１９ －０．１９ ４．５４２×１０－３ ０．９４８２ 不显著
ＡＣ －０．１１ １ ０．０８０ －０．３０ －０．３０ ２．０６ ０．１９４８ 不显著
ＢＣ －０．２１ １ ０．０８１ －０．４０ －０．４０ ６．４４ ０．０３８８ 显著
Ａ２ －１．８１ １ ０．０８３ －２．００ －２．００ ４７５．８４ ＜０．０００１ 显著
Ｂ２ －０．８６ １ ０．０７９ －１．０４ －１．０４ １１７．９９ ＜０．０００１ 显著
Ｃ２ －０．６５ １ ０．０７９ －０．８４ －０．８４ ６８．２２ ＜０．０００１ 显著
由表３方差分析结果可知，实验所选模型Ｐ＜０．０００ １，模型极其显著；失拟项Ｐ＝０．３７０ ５＞０．０５，没
有显著性意义，说明数据中没有异常点，不需要引入更高次数的项．校正后的复相关系数Ｒ２ａｄｊ＝０．９８２ ０，表
明响应值（吸附率）变化的９８．２０％来自于所选变量．因此，该回归模型对实验拟合情况较好，应用此模型
可以分析和预测田基黄中总黄酮的提取工艺优化．
由表４模型系数显著性检验结果可知，模型的一次项Ａ，Ｂ，Ｃ均达到极显著水平（Ｐ＜０．０１），对Ｄ１０１
树脂吸附田基黄中总黄酮的线性效应显著；二次项Ａ２，Ｂ２，Ｃ２ 对Ｄ１０１树脂吸附田基黄中总黄酮的曲面效
应显著；交互项ＢＣ交互效应显著（Ｐ＜０．０５）．由此可知，在实验设计范围内，乙醇质量分数、吸附温度、吸
２９ 吉首大学学报（自然科学版） 第３３卷
附时间这３个因素对Ｄ１０１树脂吸附田基黄中总黄酮的线性效应和曲面效应都显著，且吸附温度和吸附时
间有一定的交互作用．剔除不显著项后的数学模型表达式为
Ｒ１＝８７．１１－０．３２Ａ－０．３８Ｂ－０．２１ＢＣ－１．８１Ａ２－０．８６Ｂ２－０．６５Ｃ２．
２．２．３响应曲面分析 根据回归模型作出相应的响应曲面图和等高线图（图５—７），考察拟合响应曲面的
形状，分析各因素对Ｄ１０１树脂吸附田基黄中总黄酮的吸附率影响．等高线的形状反应了交互效应的强弱，
椭圆形表示两因素交互影响显著，圆形则与之相反．图５中乙醇浓度与吸附温度之间的交互作用最小，图７
中吸附温度与吸附时间的交互作用最大．
图５ Ｒ１＝ｆ（Ａ；Ｂ；Ｃ＝４０ｍｉｎ）的等高线和响应面
图６ Ｒ１＝ｆ（Ａ；Ｃ；Ｂ＝３０℃）的等高线和响应面
图７ Ｒ１＝ｆ（Ｂ；Ｃ；Ａ＝１２．５％）的等高线和响应面
２．２．４田基黄中总黄酮的吸附工艺条件优化 利用Ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｔ ７．０．０软件结合回归模型，预测Ｄ１０１树
脂吸附田基黄总黄酮吸附率的最佳工艺条件为乙醇质量分数１２．２８％、吸附温度２８．０３℃、吸附时间
３６．１５ｍｉｎ、固液比１∶５，在此条件下，吸附率最高为８７．１９３ ３％．
２．２．５模型验证 为了检验响应曲面法所得结果的可靠性，同时考虑到实际操作的便利，将提取工艺参数
调整为乙醇质量分数１２％、吸附温度２８℃、吸附时间３６ｍｉｎ、固液比１∶５（ｇ／ｍＬ）．在此条件下进行验证
实验，平行实验５次取平均值，结果如表５所示．
３９第６期 杨佳宇，等：响应面法优化田基黄总黄酮的吸附工艺
表５ 最佳吸附条件组合实验
序号 １ ２ ３ ４ ５ 平均
吸附率／％ ８７．１９ ８６．９６ ８７．２７ ８７．０９ ８７．２０ ８７．１４２
表５结果表明在最佳吸附条件下，田基黄中总黄酮的平均吸附率为８７．１４２％，与预测值８７．１９３ ３％相
比，相对偏差为０．０５８ ９％，这说明基于响应曲面法所得的优化吸附条件准确可靠，进一步验证了数学回归
模型的合理性．
３ 结论
树脂吸附法分离天然产物中的活性成分，具有吸附容量大、吸附速度快、分离效果好、操作简单、不影
响分离产物活性等优点，有较高的应用价值．实验在单因素实验基础上，通过Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ设计，用响应曲
面法优化Ｄ１０１大孔树脂吸附田基黄中总黄酮的工艺条件，建立了吸附数学模型．实验结果表明：用１２％
乙醇作为溶剂、按固液比为１∶５（ｇ／ｍＬ）添加吸附树脂，２８℃下吸附３６ｍｉｎ，总黄酮的吸附率为８７．１４％．
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Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｏｔａｌ Ｆｌａｖｏｎｅｓ ｆｒｏｍ
Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ Ｊａｐｏｎｉｃｕｍｂｙ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ＹＡＮＧ Ｊｉａ－ｙｕ，ＸＵ Ｙｏｎｇ－ｗｅｉ，ＳＵＮ Ｙａ－ｌｉ，ＺＨＡＮＧ Ｚｈｅｎ－ｚｈｅｎ，ＬＩ Ｘｕｅ－ｆｅｎｇ，ＯＵＹＡＮＧ Ｙｕ－ｚｈｕ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｊｉｓｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｓｈｏｕ ４１６０００，Ｈｕｎａｎ Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｗｉｔｈ ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍａｓ ｍａｔｅｒｉａｌ，ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ ｒｅｓｉｎ ｏｎ ｔｈｅ ｔｏ－
ｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ａｓ ｉｎ－
ｆｌｕｅｎｃｉｎｇ ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ａｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｖａｌｕｅ．Ｔｈｅ ｍａｔｈｅｍａｔｉｃａｌ ｍｏｄｅｌ ｗａｓ
ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ ｄｅｓｉｇｎ ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｒｅｓｕｌｔ ｗａｓ
ａｎａｌｙｓｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｗａｓ ８７．１４％ ｗｉｔｈ １２％ｅｔｈａｎｏｌ ａｓ
ｓｏｌｖｅｎｔ ａｔ ２８℃ｆｏｒ ３６ｍｉｎ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ；ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ；ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ；ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ
（责任编辑 易必武）
４９ 吉首大学学报（自然科学版） 第３３卷